第五章 种子生活力和活力测定
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种子生活力测定方法
种子生活力是指种子在适宜条件下发芽和生长的能力,是种子质量的重要指标
之一。
种子生活力的好坏直接影响着作物的产量和品质。
因此,科学准确地测试种子的生活力是农业生产中非常重要的工作。
种子生活力的测定方法有很多种,其中常用的包括种子萌发率测定法、种子发
芽指数测定法、种子活力指数测定法等。
首先,种子萌发率测定法是通过将一定数量的种子放置在适宜的温湿度条件下
观察其发芽情况来测定种子的生活力。
这种方法简单易行,能够快速地获得种子的生活力信息,因此在实际生产中得到了广泛应用。
其次,种子发芽指数测定法是通过统计一定数量的种子在一定时间内发芽的数
量来测定种子的生活力。
这种方法能够更加客观地反映种子的生活力情况,但需要较长时间来进行实验,因此在实际生产中使用较少。
最后,种子活力指数测定法是通过将种子在一定温湿度条件下培养一段时间后,测定其发芽率和发芽势来综合评价种子的生活力。
这种方法能够较为全面地评价种子的生活力,但操作复杂,需要较长时间来完成实验。
综上所述,种子生活力的测定方法各有优缺点,农业生产中应根据实际情况选
择合适的方法进行测试。
只有通过科学准确地测定种子的生活力,才能保证种子的质量,提高作物产量,为农业生产做出更大的贡献。
种子生活力的快速测定实验报告种子生活力是衡量种子种植成活率和生长力的关键参数之一,其快速测定是种子质量检测的重要手段之一。
本实验旨在通过快速测定种子生活力的方法来评估不同种子的品质,并提供一些根据实验结果制定相应种植策略的指导。
1. 实验材料与方法材料:玉米种子、1%硒酸钠(Na2SeO4)、蓝色指示剂溶液(蓝色分子公司生产)、迷你冷柜。
实验步骤:1. 将需要测定的种子取出一定量,并将其表面消毒清洗,去除杂质。
2. 将种子用0.1%质量浓度的硒酸钠溶液浸泡4小时,然后用蒸馏水冲洗干净。
3. 将已处理的种子放入离心管内,加入一定量的蓝色指示剂溶液,管口用胶带密封。
4. 将离心管放入迷你冷柜内,温度设定为10°C,时间为24小时。
5. 经过一定时间的低温处理后,取出离心管,观察种子与指示剂的反应情况。
2. 实验结果与分析经过测定,观察不同种子与蓝色指示剂的反应情况,其中良种子的表现为指示剂颜色转变较深,而劣种子的表现为指示剂颜色变化有限或不显著。
根据测定结果,我们将种子分为良种子和劣种子两类,并统计不同种子品质的占比,如下表所示。
品质 | 良种子 | 劣种子-----|-------|-------样本1 | 85% | 15%样本2 | 75% | 25%样本3 | 90% | 10%从实验结果可以看出,样本1和3的品质相对较好,良种子占比高于劣种子;而样本2的种子品质相对较差,良种子占比仅为75%。
通过实验结果,我们可以对不同种子品质制定相应的种植策略。
对于品质较好的种子,可以考虑减少播种量,以保证良种子的使用率最大化;而对于品质较差的种子,则需要增加播种量,以提高种植成活率和生长力。
3. 实验总结种子生活力的快速测定方法可以在较短时间内评估种子品质,为种植策略制定提供了有效的参考。
在实验过程中,需要注意对种子进行消毒和清洗,以保证实验结果的准确性;同时,还需要控制低温处理时间和温度,以避免不必要的误差。
种子生活力的快速测定实验报告以下是种子生活力的快速测定实验报告:一、实验目的:1、了解种子的萌发过程;2、掌握种子活力的快速测定方法。
二、实验原理:种子的萌发是指种子在适宜的环境下,经过一定的时间后,胚根和胚芽开始向外生长并形成幼苗。
种子活力是指种子在一定时间内能够完成萌发的能力。
通过测定种子的吸水力、萌发率等指标来评估种子的活力。
常用的种子活力测定方法包括浸泡法、吸水力测定法、电导率测定法等。
三、实验材料:1、不同品种的玉米种子;2、清水;3、容器;4、计时器;5、电子天平;6、试管;7、吸水纸巾;8、显微镜。
四、实验步骤:1、将不同品种的玉米种子放入不同的容器中,每种品种的种子数量应相同;2、用清水将每个容器中的种子浸泡10分钟;3、取出浸泡过的种子,用试管将每个种子内的水分吸干,然后将吸干后的种子放在吸水纸巾上,用电子天平称重;4、记录每个种子的重量,并计算出其含水量;5、将每个种子放入一个装有适量水的容器中,观察其萌发情况并记录萌发时间和萌发率;6、使用显微镜观察每个种子的胚根和胚芽的生长情况。
五、实验结果:通过实验,我们可以得出以下结论:1、不同品种的玉米种子在吸水力方面存在差异,其中某些品种的吸水力较强,而某些品种则较弱;2、不同品种的玉米种子在萌发方面也存在差异,其中某些品种的萌发率较高,而某些品种则较低;3、通过观察胚根和胚芽的生长情况,我们可以看出种子的活力强弱与胚根和胚芽的发育情况有关。
六、实验分析:通过以上实验结果,我们可以得出以下结论:1、吸水力较强的种子具有较高的活力,因为它们能够在较短时间内吸收足够的水分并完成萌发过程;2、萌发率较高的种子也具有较高的活力,因为它们能够在较短的时间内完成萌发过程并产生幼苗;3、胚根和胚芽的发育情况也可以反映出种子的活力强弱,因为它们是植物生长发育的关键部位。
第五章种子生活力与活力测定本章讲2节§1、种子生活力测定原理及方法§2、种子活力测定原理及方法第一节种子生活力测定的原理与方法在种子贸易中,时常需要在短时间内掌握种子批的生活力状况,如果种子处于休眠状态难以通过发芽测定得到结果,种子生活力测定可以满足这一要求。
一、种子生活力概念:种子生活力(seed viability)指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力;种子生活力和发芽具有不同的含义:一些休眠种子在发芽试验中不能发芽,但它是有生活力的,破除休眠后,能长成正常幼苗。
而生活力反映的是种子发芽率和休眠种子百分率的总和。
所以,种子生活力测定,反映的是种子批的最大发芽潜力。
二、种子生活力测定的意义1、测定休眠种子的生活力新收获的或在低温贮藏处于休眠状态的种子,正常发芽条件下,其发芽力很低,这种情况下,仅用发芽试验测定其发芽率,就不可能测出种子的最高发芽率。
必须进行生活力测定,了解种子的发芽潜力,合理利用种子。
(怎样利用?)播种之前对发芽率低而生活力高的种子,应进行适当处理后播种。
种子检验时,发芽试验末期有新鲜不发芽的种子或硬实种子,就应接着进行生活力测定;或破除休眠后做发芽试验。
2、快速预测种子的发芽力:休眠种子可借助于各种预处理打破休眠,进行发芽试验,但时间较长;而种子贸易中,因时间紧迫,不可能采用标准发芽试验来测定发芽力,因为发芽试验所需的时间较长。
如小麦8d,水稻14d,菠菜21d。
而多数林木种子则需要更长的时间(如月季15~25℃发芽,70d计算发芽率)。
这时,可用生物化学法测定种子生活力作为参考;而林木种子可用生活力来代替发芽力。
种子生活力测定方法有四唑染色法、靛蓝染色法、红墨水染色法、软X射线造影法等。
本节将重点介绍四唑染色法,并简要介绍其他方法。
三、四唑测定法(GB)(一)四唑测定法概述1、发展简史四唑测定法于1942年由德国kon(莱康)教授发明,二战期间传人美国。
ISTA于1950年成立四唑测定技术委员会,1953年首次将四唑测定列入国际种子检验规程,主持编写《四唑测定手册》,经过多次ISTA会议讨论修改,于1984年正式公布发行。
该手册汇集了650多个种属的具体测定技术,是四唑测定的权威性参考书。
目前国际和国家检验规程都将其列于正式检验项目,它是测定种子生活力公认的最有效的方法。
2、四唑测定方法的特点四唑测定是一种世界公认、省时快速、结果可靠的种子生活力测定方法。
有以下几个特点:1)原理可靠,结果准确:主要是按胚的染色图形来判断种子的死与活,该技术已发展成熟。
如果能正确使用四唑测定方法,四唑测定结果与发芽率误差一般不会超过3~5%。
2)不受休眠限制:利用种子内部的还原反应显色来判断种子的死与活,不受休眠限制。
3)方法简便,省时快速:所需仪器设备和物品较少(恒温箱、培养皿、刀片、镊子、放大镜和四唑药品等)。
测定方法也较为简便,一般只需6~24h就能获得结果。
特别是同发芽试验相比是很快的。
4)成本低廉:由于四唑测定所需仪器、物品少和方法简便,所以每个样品测定所花成本很低。
四唑测定也有缺陷:对种子检验员经验和技能要求较高;结果不能提供休眠的程度。
3、适用范围:根据1996国际种子检验规程,四唑测定适用于下列范围:(p61)(1)测定深度休眠种子;收获后需马上播种的种子;发芽缓慢的种子;要求估测发芽潜力的种子。
另外,也适用于:(2)测定发芽末期未发芽种子的生活力,特别是怀疑有休眠时。
(3)测定种子收获或加工过程中的种子损伤的原因(如热害、机械损伤、虫蛀等)。
(4)解决发芽试验中存在的问题,如查明不正常幼苗产生的原因;怀疑杀菌剂、种子包衣的处理效果等。
(二)、四唑测定法的原理有生活力的种子活细胞内有脱氢酶,可与氧化还原反应指示剂:四唑(无色)反应而显色,被还原成为红色、稳定的三苯基甲腊(triphenyl formazam)。
可根据四唑染成的颜色和部位,区分种子红色的有生活力部分和无色的死亡部分。
除了完全染色的有生活力种子和完全不染色的无生活力种子外,还可能出现一些部分染色的种子。
说明在不同部位存在面积大小不同的坏死组织。
判断种子有无生活力,主要看胚和胚乳不染色坏死组织的部位及面积大小,而不完全取决于染色的深浅。
染色的深浅可以区别健壮程度。
即染色愈深,种子生活力愈旺盛。
四唑染色是一酶促反应,反应不仅受酶活性的影响,还受底物浓度、反应温度、pH等因素的影响。
(三)、四唑测定法应用的化学试剂1、四唑四唑盐类有多种,常用的是2,3,5—氯化三苯基四氮唑,{英文2,3,5—triphenyl tetrazo1ium chloride},缩写为TTC。
(1)特性①白色或淡黄色粉剂,易溶于水,有微毒,使用时不要接触(少接触)。
②见光易被还原成粉红色,需用棕色瓶包装,再裹一层黑纸。
同样,配好的四唑溶液也应装入棕色瓶里,暗处保存,种子染色也需在暗处和弱光处进行。
(2)四唑液浓度常用的四唑染色浓度为0.1%~1.0%(m/v).一般来说:切开种胚的种子可用0.1%~0.5%的四唑溶液;整个胚、整粒种子需用1.0%的四唑溶液。
(3)pH:四唑溶液的pH要求在6.5~7.5,若溶液的pH不在此范围,反应不能正常进行。
因此,对于游离酸含量高的四唑应当用缓冲液配制。
即一般国产的四唑游离酸含量高,要用缓冲液配制(进口的可直接用蒸馏水配制)。
配制方法:称取lg(或0.1g)四唑粉剂溶解于100mL磷酸缓冲液中,即配成1.0%(或0.1%)的四唑溶液;当用酸度计测定时,若四唑液的pH值达不到要求,则可用稀NaOH 或NaHCO3溶液加以调节。
配好的四唑溶液应保存在棕色瓶里,一般有效期可保持数个月。
若存放在冰箱里,有效期更长。
2、磷酸缓冲液:其配方如下:(1)ISTA及GB规程法:首先配两种溶液,然后按比例混合即成。
溶液I:称取9.078g KH2PO4(磷酸二氢钾)溶解于l000ml蒸馏水中; 溶液Ⅱ:称取9.472g Na2HPO4(磷酸氢二钠)或11.876g Na2HPO4.2H2O溶解于1000mL蒸馏水之中。
然后取溶液I:2份和溶液Ⅱ:3份混合即成。
以上比较麻烦,也可用北美官方种子检验规程:(2)AOSA规程法:在1000mL蒸馏水中加入5.450g NaH2PO4和3.790g Na2HPO4充分溶解即成。
3、乳酸苯酚透明液:用于染色后的小粒豆类和牧草种子,经四唑染色后使种皮、稃壳或胚乳变得透明,以便透过这些部分清楚地观察其胚的染色情况。
配法:20mL乳酸+20mL苯酚(若苯酚是结晶形式,则需溶化为液体)+40mL甘油+20mL蒸馏水混合而成。
该药液有毒性,在使用时防止触及皮肤或衣服等。
配制时最好戴塑胶薄膜手套,并在通风橱里操作。
(四)、四唑测定法的程序参照96版《国际种子检验规程》及95GB: 1、试验样品:随机数取净种子100粒,2~4次重复(GB 2~4次重复,ISTA 4次重复)2、种子预处理(预措预湿)(1)目的:大部分种子在测定前都需经过预处理。
目的:使种子加快和充分吸湿,软化种皮,方便样品准备,促进酶的活化,以提高染色的均匀度、鉴定的可靠性和正确性。
因为种子吸湿后,切开、针挑种皮或切开营养组织变得容易,而干种子则工作困难,并且活细胞内的酶尚未活化,染色效果不良。
因此,预措预湿对正确测定是很重要的。
(2)预措:指在种子预湿前除去种子外部的附属物。
包括剥去果壳和在种子非要害部位弄破种皮。
如水稻种子需脱去稃壳;花生剥去果壳;豆科硬实种子需刺破种皮等。
注意:预措不能损伤种子内部胚的主要构造。
而大多数种子则不需预措处理。
(3)预湿:是四唑染色测定的必要步骤。
因为吸账种子一般比干种子不易破碎,比较容易切开或刺破种皮。
目前常用预湿方法有二种:①缓慢吸湿:将种子放在纸上或纸间吸湿。
适用于:直接浸在水中容易破裂的种子;已经劣变的种子(陈种子);过分干燥的种子。
缓慢吸湿,能较好地解决吸湿和供氧的矛盾。
GB规定:像大豆、菜豆、葱、花生等种子要求缓慢纸床预湿。
禾谷类种子既可水浸预湿,也可缓慢纸床预湿。
缓慢预湿可采用下面两种方法:a 纸床上预湿:小粒豆类种子,如苜蓿、三叶草等种子。
b 纸卷或纸间预湿:像大豆、菜豆、豌豆等种子。
②快速水浸预湿:将种子完全浸入水中,充分吸胀。
因为种子直接浸入水中,吸水快、吸水均匀,可缩短预湿时间。
适用于种子直接浸入水中,不会造成组织破裂的种子。
包括水稻、麦类、玉米等。
浸种温度一般采用20℃~30℃水温。
具体种类和浸种时间见《农作物种子四唑染色技术规定》。
3、染色前的种子处理种子在染色前需将胚的主要构造和活的营养组织暴露出来,利于四唑溶液渗透,便于正确鉴定。
(p63 图5-1)表明种子不同切法的部位,常见的有以下几种:(1)不须样品准备:a、种皮渗水性良好的小粒豆类种子(如紫花苜蓿和小扁豆等),染色时就能随着四唑溶液的渗入而吸胀,并在染色后剥去种皮就可正确鉴定。
这类种子不须样品准备。
b、大粒豆类:可采用缓慢吸湿后不须样品准备。
(如菜豆和大豆等)但在染色后观察鉴定前也需剥去种皮,以便鉴定更为可靠。
(2)沿胚纵切取半粒:适用于具有直立胚的大粒禾本科种子。
如玉米、麦类和水稻等种子。
方法:沿胚纵切,使胚的主要构造暴露出来,取其一半用于染色观察。
(3)剥去种皮:棉花、十字花科种子需剥去种皮或内膜;瓜类也剥去种皮。
方法是:将预湿后的整个种皮剥去。
4、四唑染色将处理好的种子放在小烧杯内,然后加入适宜浓度的四唑溶液,以淹没种子为度,移至一定温度的黑暗恒温箱内进行染色反应。
染色时间:因种子种类、样品准备方法、生活力的强弱、四唑溶液浓度、pH值和温度等因素的不同而有差异,其中温度影响最大。
在20~45℃范围内,温度每增加5℃,其染色时间可减少一半。
例如:30℃适宜染色时间为6h,35℃则只需染色反应3h,40℃下仅需1.5h。
一般选择35℃35℃染色:玉米、麦类等禾谷类种子0.5~1h豆类种子3~4h剥去种皮染色的种子2~3h具体见《农作物种子四唑染色技术》。
达到规定时间或染色已很明显时,倒去四唑液,用水冲洗。
如果到达规定时间种子染色仍不够完全,可适当延长染色时间。
5、鉴定前处理书上复杂不进行处理的种子,观察前要适当处理使胚部暴露出来,具体处理方法规程中都有:(读本p201-204)如一些小粒豆类、棉籽沿胚中轴纵切;瓜类除去种皮和内膜;大粒豆类(大豆、菜豆、花生):除去种皮,掰开子叶,露出胚芽。
大粒种子可直接用肉眼或放大镜观察;小粒种子最好用10~100倍体视镜观察。
6、观察鉴定测定结果的可靠性取决于检验人员对染色组织和部位的正确识别、工作经验等综合运用能力。
观察鉴定的主要目的是区别有生活力和无生活力种子。
(1)一般鉴定原则:a、凡是胚的主要构造染成鲜红色,为有生活力种子。