种子生活力测定的原理

实验四种子生活力测定一、实验目的和要求了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。

种子生活力：种子潜在的发芽能力。

二、测定原理四唑：2,3,5－三苯基氯(溴)化四唑（C19H15N4Cl(Br)）的简称为，为白色粉末，水溶液无色。

染色原理：种胚活细胞中的脱氢酶产生氢，与浸入种胚内的四唑发生作用，产生红色稳定而不扩散的三苯基甲（TPF）。

判断标准：凡种胚染成红色者表示有生活力，不染色的种子为无生活力的种子；不染色的部位为坏死的部位，根据坏死组织出现的部位及其分布可以判断种子的生活力。

三、材料及器具材料：刺槐器具及药品：烧杯、解剖刀、解剖针、镊子、培养皿、量筒、滤纸、手持放大镜、玻璃棒、取样匙、1%四唑等四、方法及步骤1. 测定样品的提取从净度测定后的纯净种子中随机提取50粒种子（四分法）。

3次重复。

同时准备部分种子作为后备。

2. 种子预处理（浸种，同发芽测定）3. 溶液配制溶液A：9.078g KH2PO4溶于1000mL水；溶液B：11.876g Na2HPO4·2H2O溶于1000mL水；缓冲液配制：溶液A：溶液B以2:3比例混合;1%的四唑溶液配制：称取四唑1g溶于100mL的缓冲溶液，现配现用。

4. 取种胚、染色处理剥除外种皮和内种皮，取出种胚后放入盛有清水的玻璃皿；记录空粒、腐烂粒及病虫害感染种粒。

如取胚时由于人为因素而破坏种胚，可从后备种子中补取；种胚剥取结束后一起放入四唑溶液，使溶液淹没种仁，上浮者要压沉。

置黑暗处，保持30～35℃染色2～3h。

5. 结果鉴定经过染色的种子分组放在潮湿的滤纸上，借助于手持放大镜或实体显微镜逐粒观察。

有生活力：种胚和胚乳完全着色；无生活力：种胚和胚乳完全不着色；根据种胚或胚乳上未着色的斑块的位置和大小判断种子有无生活力（种胚不染色的最大面积不超过1/4子叶末端）。

6. 种子生活力计算生活力的百分率根据3个重复组计算，不带小数，重复组间最大容许误差与发芽测定的规定相同，最后以3组生活力百分率的平均值为该种子批的生活力。

实验六种子生活力的快速测定一、实验目的1.加深对种子作用的理解；2.掌握种子生活力的测定方法。

二、实验原理在播种、交换和调运种子之前，都要及时了解种子的发芽率，以确定是否作为播种材料或引种种源。

因此，快速而又准确地测定种子生活力，对于及时调种和播种后确保全苗、壮苗具有极其重要的意义。

种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。

有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产生的氢（H）有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产种子生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深；死亡种子没有呼吸作用，不会将TTC还原成红色；种胚生活力衰退或部分丧失生活力，染成较浅或局部被染色；三、实验材料及用品材料：绿豆种子实验器皿：恒温箱、小烧杯、镊子、刀片实验试剂：0.5%TTC溶液（避光保存）四、实验步骤1. 浸种：将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种，以增强种胚的呼吸作用。

2. 显色：a、种子处理：随即选取吸胀的种子 40 粒，小心剥去种皮，勿伤及种胚。

b、实验组处理：将处理好的20粒种子置于小烧杯中，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保1h。

c、对照组处理：另取20粒种子，于沸水浴中煮5min后，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保温1h。

3. 统计：染色结束，马上鉴定；倒出TTC溶液，用清水将种子冲洗1-2次，观察种胚乳染色情况。

有生活力种子：种胚全部或大部分被染成红色；无生活力种子：不被染色。

生活力的种子数计算种子生活力的比率= ————————X 100%实验组测定种子数五、实验现象与结果保温1h后种子染色情况：被染色的数目未被染色的数目未煮沸的种子14 6煮沸的种子 0 20表一种子染色情况记录表图1 未煮沸的种子染色情况图2 煮沸的种子染色情况生活力的种子数未煮沸的种子生活力的比率= ————————X 100% = 14/20 X 100% = 70%实验组测定种子数生活力的种子数煮沸的种子生活力的比率= ———————X 100% =0/20 X 100% = 0实验组测定种子数六、分析和讨论1.在实验中，去种皮时要小心防止伤及种胚，因为胚是种子中的活细胞，若损失可能使实验无法进行反应，造成实验的误差。

实验3 种子生活力的测定目的要求用化学试剂测定种子生活力，可以在短时间内评定种子质量。

特别是对于有些树种种子的休眠期长，难于进行发芽测定，采用此法测定种子的生活力就具有明显的优越性。

通过实验要求了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。

一、 氯化三苯基四氮唑（TTC ）法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。

当TTC 溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH 或NADPH ）还原时，可产生红色的三苯基甲 （TTF ），胚便染成红色。

当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。

TTC 还原反应如下：TTC（无色） TTF（红色）【仪器与用具】培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH 试纸。

【试剂】TTC 溶液的配制：取1g TTC 溶于１L 蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC 溶液。

药液p Ｈ应在6.5～7.5，以pH 试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。

【方法】1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h ，使种子充分吸胀。

2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。

3.把切好的种子分别放在培养皿中，加TTC 溶液，以浸没种子为度。

4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。

表32-1 染色法测定种子生活力记载表+Cl+CN N NN +2HCN N NNHHCl【注意事项】1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。

第五章种子生活力与活力测定本章讲2节§1、种子生活力测定原理及方法§2、种子活力测定原理及方法第一节种子生活力测定的原理与方法在种子贸易中，时常需要在短时间内掌握种子批的生活力状况，如果种子处于休眠状态难以通过发芽测定得到结果，种子生活力测定可以满足这一要求。

一、种子生活力概念：种子生活力(seed viability)指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力；种子生活力和发芽具有不同的含义：一些休眠种子在发芽试验中不能发芽，但它是有生活力的，破除休眠后，能长成正常幼苗。

而生活力反映的是种子发芽率和休眠种子百分率的总和。

所以，种子生活力测定，反映的是种子批的最大发芽潜力。

二、种子生活力测定的意义1、测定休眠种子的生活力新收获的或在低温贮藏处于休眠状态的种子，正常发芽条件下，其发芽力很低，这种情况下，仅用发芽试验测定其发芽率，就不可能测出种子的最高发芽率。

必须进行生活力测定，了解种子的发芽潜力，合理利用种子。

（怎样利用？）播种之前对发芽率低而生活力高的种子，应进行适当处理后播种。

种子检验时，发芽试验末期有新鲜不发芽的种子或硬实种子，就应接着进行生活力测定；或破除休眠后做发芽试验。

2、快速预测种子的发芽力:休眠种子可借助于各种预处理打破休眠，进行发芽试验，但时间较长；而种子贸易中，因时间紧迫，不可能采用标准发芽试验来测定发芽力，因为发芽试验所需的时间较长。

如小麦8d，水稻14d，菠菜21d。

而多数林木种子则需要更长的时间（如月季15～25℃发芽，70d计算发芽率）。

这时，可用生物化学法测定种子生活力作为参考；而林木种子可用生活力来代替发芽力。

种子生活力测定方法有四唑染色法、靛蓝染色法、红墨水染色法、软X射线造影法等。

本节将重点介绍四唑染色法，并简要介绍其他方法。

三、四唑测定法（GB）(一)四唑测定法概述1、发展简史四唑测定法于1942年由德国kon(莱康)教授发明，二战期间传人美国。

华南农业大学实验报告专业班次11农学1班组别201130010110 题目种子生活力的快速测定（TTC法）姓名梁志雄日期2012-11-21一、实验原理有活力种胚中的脱氢酶可以将TTC还原成不溶性的红色TTF，如果种胚死亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力二、实验材料与实验器材水稻种子、恒温箱、小白瓷碗、镊子、小烧杯三、实验步骤1、实验之前将种子放在微波炉里稍微加热，将水稻种子用温水（30~35℃）浸泡2~6h，使种子充分吸涨2、随机抽取30粒水稻种子，小心剥去种皮，千万不要伤害种胚，然后把处理好的种子置于小白瓷碗中，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为度，与恒温箱中（30~35℃）中保温0.5-1h。

3、染色结束后要立即进行鉴定，因放置太久会褪色。

倒出TTC溶液，再用清水将种子清洗1~2次，观察种胚染色的情况。

凡种胚全部或大部分被染成红色即为具有生活力的种子，种胚不被染色的为死种子。

四、数据记录记录本实验测得染色种子25粒，无色种子5粒，其中染色的25粒种子中有19粒种子染色是比较深的，说明其生长活性物质多，生命力强。

根据以下公式种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总数×100%可以知道种子活力=25/30*100%=83.3%六、实验总结有生活力的种子能够进行呼吸代谢，在呼吸过程中的代谢物质跟TTC反应生成红色TTF，且代谢物质越多，颜色越深，代谢强度越大。

从本实验结果来看，种子生命力总体上时比较强的，且其中的19粒染色较深的那些则更高。

另外TTC法还可以运用于花粉活力的测定。

种子生活力的快速测定实验报告以下是种子生活力的快速测定实验报告：一、实验目的：1、了解种子的萌发过程；2、掌握种子活力的快速测定方法。

二、实验原理：种子的萌发是指种子在适宜的环境下，经过一定的时间后，胚根和胚芽开始向外生长并形成幼苗。

种子活力是指种子在一定时间内能够完成萌发的能力。

通过测定种子的吸水力、萌发率等指标来评估种子的活力。

常用的种子活力测定方法包括浸泡法、吸水力测定法、电导率测定法等。

三、实验材料：1、不同品种的玉米种子；2、清水；3、容器；4、计时器；5、电子天平；6、试管；7、吸水纸巾；8、显微镜。

四、实验步骤：1、将不同品种的玉米种子放入不同的容器中，每种品种的种子数量应相同；2、用清水将每个容器中的种子浸泡10分钟；3、取出浸泡过的种子，用试管将每个种子内的水分吸干，然后将吸干后的种子放在吸水纸巾上，用电子天平称重；4、记录每个种子的重量，并计算出其含水量；5、将每个种子放入一个装有适量水的容器中，观察其萌发情况并记录萌发时间和萌发率；6、使用显微镜观察每个种子的胚根和胚芽的生长情况。

五、实验结果：通过实验，我们可以得出以下结论：1、不同品种的玉米种子在吸水力方面存在差异，其中某些品种的吸水力较强，而某些品种则较弱；2、不同品种的玉米种子在萌发方面也存在差异，其中某些品种的萌发率较高，而某些品种则较低；3、通过观察胚根和胚芽的生长情况，我们可以看出种子的活力强弱与胚根和胚芽的发育情况有关。

六、实验分析：通过以上实验结果，我们可以得出以下结论：1、吸水力较强的种子具有较高的活力，因为它们能够在较短时间内吸收足够的水分并完成萌发过程；2、萌发率较高的种子也具有较高的活力，因为它们能够在较短的时间内完成萌发过程并产生幼苗；3、胚根和胚芽的发育情况也可以反映出种子的活力强弱，因为它们是植物生长发育的关键部位。

第五章种子生活力与活力测定本章讲2节§1、种子生活力测定原理及方法§2、种子活力测定原理及方法第一节种子生活力测定的原理与方法在种子贸易中，时常需要在短时间内掌握种子批的生活力状况，如果种子处于休眠状态难以通过发芽测定得到结果，种子生活力测定可以满足这一要求。

一、种子生活力概念：种子生活力(seed viability)指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力；种子生活力和发芽具有不同的含义：一些休眠种子在发芽试验中不能发芽，但它是有生活力的，破除休眠后，能长成正常幼苗。

而生活力反映的是种子发芽率和休眠种子百分率的总和。

所以，种子生活力测定，反映的是种子批的最大发芽潜力。

二、种子生活力测定的意义1、测定休眠种子的生活力新收获的或在低温贮藏处于休眠状态的种子，正常发芽条件下，其发芽力很低，这种情况下，仅用发芽试验测定其发芽率，就不可能测出种子的最高发芽率。

必须进行生活力测定，了解种子的发芽潜力，合理利用种子。

（怎样利用？）播种之前对发芽率低而生活力高的种子，应进行适当处理后播种。

种子检验时，发芽试验末期有新鲜不发芽的种子或硬实种子，就应接着进行生活力测定；或破除休眠后做发芽试验。

2、快速预测种子的发芽力:休眠种子可借助于各种预处理打破休眠，进行发芽试验，但时间较长；而种子贸易中，因时间紧迫，不可能采用标准发芽试验来测定发芽力，因为发芽试验所需的时间较长。

如小麦8d，水稻14d，菠菜21d。

而多数林木种子则需要更长的时间（如月季15～25℃发芽，70d计算发芽率）。

这时，可用生物化学法测定种子生活力作为参考；而林木种子可用生活力来代替发芽力。

种子生活力测定方法有四唑染色法、靛蓝染色法、红墨水染色法、软X射线造影法等。

本节将重点介绍四唑染色法，并简要介绍其他方法。

三、四唑测定法（GB）(一)四唑测定法概述1、发展简史四唑测定法于1942年由德国kon(莱康)教授发明，二战期间传人美国。

(精品)种子生活力测定的原理种子生活力测定是种子品质检测的重要方法之一。

其原理是利用种子的代谢活动作为生活力的指标，通过测定种子的呼吸率、发芽率、抽胚率等参数来评价种子的生活力。

下面将详细介绍种子生活力测定的原理。

一、种子呼吸率的测定原理呼吸作为种子的代谢过程之一，可反映种子的生物化学活性。

种子呼吸率是指在单位时间内种子的氧气消耗量或二氧化碳产生量，即呼吸强度。

呼吸率的大小直接关系到种子的能量来源和消耗。

种子在用氧进行呼吸作用时，主要的代谢物质是葡萄糖和氨基酸，产生 ATP 等能量分子和二氧化碳、水等代谢产物。

利用呼吸量，可以评价种子存活度和质量。

测定种子呼吸率的方法有很多种，如使用光谱法、显微镜熔点计、低温燃烧法、气体检测法等。

其中，气体检测法是应用最广泛的一种方法。

方法是将种子装在呼吸率仪中，通过不断加入氧气和排出二氧化碳实现测定。

常用的仪器有 WSTE-1、WTmod1-1 等。

种子发芽率是种子生活力测定中最基本的参数之一。

它是指单位时间内种子的发芽数，反映种子生长发育的潜力和种子质量的优劣。

种子发芽过程主要涉及种子萌发、根和胚芽的形成和生长等，需要有充足的水分、适温、氧气和光照等条件。

种子发芽率受多种因素影响，如种子保存条件、处理方式、种子来源、品种特性等。

测定种子发芽率，常用的方法有常规温室法、纸巾培养法、挂网法等。

其中，常规温室法是最常用的一种方法。

其原理是将一定数量的种子放置在经过灭菌处理的仿土或营养物质充足的培养土壤中，在一定的温度和湿度条件下观察种子发芽情况，测定发芽率。

一般情况下，种子发芽率可以在 7-14 天内达到稳定。

种子抽胚率是指在不同水分和温度条件下，种子实现一定程度的萌发至抽胚的百分比。

它是种子品质的重要指标之一，同样受到多种因素影响，如种类、存储条件、处理方式等。

抽胚率的测定，常用的方法是室内拟真鉴别法和高温处理法。

室内拟真鉴别法是将种子放置在一定温度和湿度条件下，观察其抽胚情况；高温处理法是将种子暴露在高温环境中，观察其能否抽胚。

TTC测定（Tetrazolium Chloride测定法）是一种用于测定种子生活力的方法。

它通过将TTC溶液加入种子样品，测定种子内的脱氧酶活性，从而评估种子的生活力。

TTC测定的原理是：种子中含有脱氧酶，当种子受到刺激时，脱氧酶会将TTC转化为红色染料，用红色染料的含量来反映种子的生活力。

TTC测定的方法如下：
1.准备TTC溶液：将TTC粉末加入溶剂，按照所需浓度调整溶液。

2.准备种子样品：选择合适的种子数量，放入容器中。

3.加入TTC溶液：将TTC溶液加入种子样品中，搅拌均匀。

4.观察染色情况：在适当的时间内观察种子的染色情况，测定红色染料的含量。

TTC测定的效果是：通过TTC测定，可以准确评估种子的生活力，为种子的选择和保存提供依据。

此外，TTC测定还可以用于比较不同品种、不同保存条件下种子的生活力差异。

实验十一植物种子生活力快速测定一、实验目的掌握植物种子生活力检测的基本原理及快速鉴定植物种子生活力的方法。

二、实验原理种子活力是决定种子在发芽和出苗期间的活性强度和种子特性的综合表现（指田间条件下的出苗能力及与此有关的其他特征和指标），种子生活力是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力（通常指一批种子中具有生命力种子数占种子总数的百分率）。

种子贮藏过程中必须维持种子是有活力的，因此定期进行生活力和活力的检测是非常重要的。

测定种子生活力方法常用发芽率测定法，该法是指在最适宜的条件下，在规定天数内发芽的种子占供试种子的百分数。

它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。

但是常规方法（直接发芽）测定种子发芽率所需的时间较长，对于处于深休眠状态的种子，几乎难于应用。

特别是有时为了应急需要，没有足够的时间来测定种子发芽率，所以有必要根据种子的生理特性建立起一套快速测定种子生活力的方法。

红墨水染色法凡是生活的活细胞的原生质膜都具有选择吸收能力，它对某些染料不让透过，因此用这类染料(如红墨水、酸性靛蓝等)不能使种胚染色。

而死种子的胚细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，于是染料进入死细胞，将胚完全染色。

因此，可根据种胚或子叶对染料的着色情况判断种子的发芽率。

三、实验材料小麦种子、大麦种子、籼稻种子、玉米种子、粳稻种子、蚕豆种子、大豆种子。

四、设备与试剂恒温箱，培养皿，烧杯，镊子，刀片，紫外荧光灯，滤纸（无荧光），琼脂，沸水。

5％红墨水：市售红墨水5 mL加95 mL自来水。

五、实验步骤1．红墨水染色法将待测种子在30～35℃温水中浸种（小麦、大麦、籼稻种子6～8h；玉米种子5 h 左右；粳稻种子2 h），以增加种胚的呼吸速率，使显色迅速；取吸胀的种子200 粒，沿种子胚的中心线纵切为二半，将其中的一半置于红墨水培养皿中5～10 min；用红墨水染色后，倒去废液，用水冲洗多次，至冲洗液无色为止，并检查种子死活。