国内外真菌毒素检测方法研究现状及进展

玉米中的黄曲霉毒素及检测方法研究玉米是世界上主要的粮食作物之一，被广泛用于食物加工和饲料生产。

玉米中常常存在着一种有害的真菌毒素——黄曲霉毒素，对人畜健康构成潜在威胁。

对玉米中的黄曲霉毒素及其检测方法的研究成为了当前食品安全领域的热点之一。

一、黄曲霉毒素的来源及危害黄曲霉毒素是由黄曲霉属真菌产生的一类毒素，主要存在于玉米及其制品中。

当玉米长期存放在潮湿的环境中，就容易受到黄曲霉真菌的污染，产生黄曲霉毒素。

这些毒素对人和动物的健康都会带来危害，包括肝脏损伤、免疫毒性和致癌性等。

特别是对于婴幼儿和孕妇来说，摄入过量的黄曲霉毒素会对身体健康造成更大的影响。

二、玉米中黄曲霉毒素的检测方法1. 生物学检测方法生物学检测方法是通过利用黄曲霉毒素对细胞、组织或动物的毒性作用进行检测的一种方法。

目前常用的生物学检测方法包括小鼠生物法、鸡胚法等。

这些方法对黄曲霉毒素的检测比较敏感，但是需要使用动物进行实验，存在动物使用受到伦理规范的限制，而且操作复杂且耗时耗力。

2. 化学分析法化学分析法是目前最常用的黄曲霉毒素检测方法，主要包括高效液相色谱法（HPLC）和液质联用技术（LC-MS）。

这些方法可以对玉米中的黄曲霉毒素进行快速、灵敏的检测，但是仪器昂贵，维护成本高，需要专业的操作人员进行操作。

3. 免疫学检测法免疫学检测法是通过检测黄曲霉毒素与特异性抗体的结合来进行检测的一种方法。

包括酶联免疫吸附法（ELISA）和免疫荧光法（IFA）等。

这些方法具有操作简便、快速、灵敏度高的优点，是目前较为常用的检测方法。

三、玉米中黄曲霉毒素检测方法的研究进展随着科学技术的不断进步，玉米中黄曲霉毒素检测方法也在不断完善和更新。

近年来，研究人员在检测方法的选择、检测灵敏度和准确性等方面进行了大量的工作，取得了一系列的研究成果。

1. 检测方法的选择研究人员对各种不同的检测方法进行了比较，发现免疫学检测法具有操作简便、快速、灵敏度高的优点，逐渐成为了玉米中黄曲霉毒素检测的主流方法。

黄曲霉毒素的研究进展黄曲霉毒素(Aflatoxins,简称AFT) , 是20 世纪60年代初发现的一种真菌的有毒代谢产物, 由曲霉属中的黄曲霉和寄生曲霉所产生, 迄今为止, 已经发现B1、B2、B2a、G1、G2、M1、M2、Q1、Q2a 等17 种, 其结构特征为都含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮。

黄曲霉作为贮藏菌广泛分布于自然界中, 寄生曲霉在我国比较罕见, 它是以寄生方式存在于热带和亚热带地区甘蔗或葡萄上的一种害虫——水蜡虫体内。

在自然界, 黄霉的生长要求不高,在有氧条件下, 花生和玉米是最好的繁殖场所,这可能与其富含微量元素锌及能够刺激黄曲霉繁殖的生长因子有关; 在25～30 ℃下, 容易产生AFT。

AFT 是迄今发现毒性最强的一类生物毒素,已经在食油料作物的种子、干果、调味品、发酵产品和饲料内, 甚至在一些酒类等多种农产品及制品中发现。

AFT 是种肝脏毒素, 同时致癌。

1993 年,AFT 被世界卫生组织(WHO) 的癌症研究机构划定一类致癌物, 是一种毒性极强的剧毒素物质.1 黄曲霉毒素B1 和M1 的研究进展1.1 黄曲霉毒素B1黄曲霉毒素B1(AFTB1) 是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物, 即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮( 香豆素) , 前者为基本毒性结构, 后者与致癌有关[2]。

国内最早研究真菌毒素免疫检测方法是中国医学科学院肿瘤研究所的孙宗棠, 他于1983 年建立了AFTB1 单克隆抗体放射免疫测定方法李永镛和殷芬、俞顺章等(1992)合作建立了AFTB1 单克隆抗体的酶联免疫检测方法。

中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所和江苏微生物所也先后建立了AFTB1 多克隆抗体的酶联免疫测定方法。

路戈、王德斌和计融等(1994)合作建立了规范的AFTB1 单克隆抗体酶联免疫检测方法, 该法已列为国家标准(GB/T5009.22—1996)。

在1985 年以前, 另有几种荧光色谱法列为国家标准(GB/T5009.23—1996;GB/T5009.24—1996), 其中薄层色谱法由卫生研究所和青商品检验局于1973年建(GB/T5009.22—1996)。

不同纳米材料的侧流免疫层析技术在真菌毒素检测中的应用1引言侧流免疫层析检测技术(LFIA)也称横向流动免疫检测技术，是出现于20世纪60年代初期的一种独特的免疫分析方式，以条状纤维层析材料为固相，借助毛细管的吸附作用使样品在层析材料上移动，其中样品中的待测物与层析材料上一定区域的抗体结合，通过酶促显色反应或直接使用着色标记物短时间获得直观的测试结果。

1990年，Begg、等最先将其用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定，随后该技术逐渐在环境监控、食品安全临床诊断等领域得到广泛应用，同时该技术也用于动物用药、农药残留霉菌毒素等污染物以及核酸、蛋白等生物大分子的检测领域。

真菌毒素(Mycotoxins)是由真菌产生的次级代谢产物，主要包括黄曲霉毒素(Aflatoxins，AFs) ,脱氧雪腐镰刀菌烯醇( Deoxynivalenol，DON ) ,储曲霉毒素A ( OchratoxinA ，OTA )、玉米赤霉烯酮( Zearalenone ，ZEN )、伏马毒素(Fumonisins ， FBs)等，对人和动物的毒性主要有致癌、致畸、致突变、肝细胞毒性、中毒性肾损害、免疫抑制和生殖紊乱等。

这些真菌毒素会污染农作物，植物及其副产品等，进而给人类和家畜健康带来威肋、。

世界各国对农产品、食品和饲料中的真菌毒素的含量做出了严格规定。

目前，最常见的真菌毒素测定方法有仪器分析法和免疫分析法等。

常用仪器分析法主要有高效液相色谱法(HPLC)和色谱领谱法。

仪器分析法作为常规真菌毒素检测方法，因其灵敏度高，结果准确可靠而受到检测机构的青睐，其缺点是:需要对样品进行较为繁琐的预处理;需要具有专业实验技能的人员操作;仪器昂贵精密，且所用仪器的检测费用和维修费用昂贵，无法满足批量样品的快速筛查检测。

随着特异性抗体技术的发展，免疫相关方法得以迅速发展，逐渐成为毒素检测的新趋势。

侧流层析免疫检测技术具有简便、快速、灵敏、经济等优点，特别适合于大批量样本的检测。

2014年第2期摘要：食用油是生活中必不可少的食品，而油料作物和食用油中含有的真菌毒素会对人体造成损害，主要表现为细胞癌变、毒性遗传，突变畸形等，还会引起一系列肝肾中毒、生殖系统表现异常以及抑制免疫系统等反应。

从真菌毒素在油料及食用油中的来源、危害、现状、检测及防治方法进行综合论述。

关键词：食用油；真菌毒素；危害；防治中图分类号：S133 文献标志码：A doi：10.3969/jissn.1671-9646（X）.2014.02.045（Institute of Agro-food Science and Technology，Shandong Academy of Agriculture Science，Ji'nan，Shandong 250100，China）Food oil is one kind food which is essential to daily life. Mycotoxins contained in oil crops and food oils is harmful to our human body，which represents to carcinogenicity，genotoxicity，teratogenicity，and also causing nephrotoxicity，liver toxicity，reproductive abnormalities and immunosuppressive reactions. This article describes from the mycotoxins in oilseeds and food oil，the hazards，the status quo，the detection method and the control methods to comprehensive exposition.food oil；mycotoxins；hazards；control methods收稿日期：2013-11-20作者简介：马治良（1988—），男，硕士，研究方向为粮油加工。

江苏农业学报(ＪｉａｎｇｓｕＪ.ｏｆＡｇｒ.Ｓｃｉ.)ꎬ２０２１ꎬ３７(３):７８９￣７９９ｈｔｔｐ://ｊｓｎｙｘｂ.ｊａａｓ.ａｃ.ｃｎ孙统政ꎬ王㊀娜ꎬ田㊀俊ꎬ等.黄曲霉毒素Ｂ１检测与脱毒方法最新研究进展[Ｊ].江苏农业学报ꎬ２０２１ꎬ３７(３):７８９￣７９９.ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１０００￣４４４０.２０２１.０３.０３１黄曲霉毒素Ｂ１检测与脱毒方法最新研究进展孙统政ꎬ㊀王㊀娜ꎬ㊀田㊀俊ꎬ㊀杨坤龙(江苏师范大学生命科学学院ꎬ江苏徐州２２１１１６)收稿日期:２０２０￣０８￣２８基金项目:国家自然科学基金项目(３１９０００３６)ꎻ江苏省自然科学基金项目(ＢＫ２０１９０９９４)ꎻ江苏省高等学校自然科学研究面上项目(１９ＫＪＢ１８００１６)ꎻ江苏师范大学自然科学研究基金项目(１８ＸＬＲＸ０２９)作者简介:孙统政(１９９９－)ꎬ男ꎬ江苏徐州人ꎬ本科生ꎬ主要从事病原真菌黄曲霉菌的形态发生㊁次级代谢产物合成和致病调控分子机制研究ꎮ(Ｅ￣ｍａｉｌ)１７５６６４８２５９＠ｑｑ.ｃｏｍꎮ王娜为共同第一作者ꎮ通讯作者:杨坤龙ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｙｋｌ＿ｌｏｎｇ＠ｙｅａｈ.ｎｅｔ㊀㊀摘要:㊀食品和谷物中的黄曲霉毒素污染在全球范围内造成了严重的经济和健康问题ꎮ黄曲霉毒素Ｂ１(ＡＦＢ１)具有极强的致突变性和毒性ꎬ并且对人类和牲畜均具有强致癌性ꎮ有关毒素的脱毒技术一直是国内外的一个研究热点ꎬ其中物理法㊁化学法和生物法脱毒是主要的脱毒方法ꎮ本文结合最新的研究成果ꎬ详细介绍了黄曲霉毒素Ｂ１的毒性及主要的检测方法ꎬ对黄曲霉毒素物理㊁化学㊁生物脱毒方法进行了概述ꎮ关键词:㊀黄曲霉毒素Ｂ１ꎻ检测方法ꎻ脱毒方法中图分类号:㊀ＴＳ２０１.３㊀㊀㊀文献标识码:㊀Ａ㊀㊀㊀文章编号:㊀１０００￣４４４０(２０２１)０３￣０７８９￣１１ＲｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｄｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓＳＵＮＴｏｎｇ￣ｚｈｅｎｇꎬ㊀ＷＡＮＧＮａꎬ㊀ＴＩＡＮＪｕｎꎬ㊀ＹＡＮＧＫｕｎ￣ｌｏｎｇ(ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＪｉａｎｇｓｕＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＸｕｚｈｏｕ２２１１１６ꎬＣｈｉｎａ)㊀㊀Ａｂｓｔｒａｃｔ:㊀Ａｆｌａｔｏｘｉｎｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎｉｎｆｏｏｄｓａｎｄｇｒａｉｎｓｐｏｓｅｓｓｅｒｉｏｕｓｅｃｏｎｏｍｉｃａｎｄｈｅａｌｔｈｐｒｏｂｌｅｍｓｗｏｒｌｄｗｉｄｅ.Ａｆｌａ￣ｔｏｘｉｎＢ１(ＡＦＢ１)ｉｓｅｘｔｒｅｍｅｌｙｍｕｔａｇｅｎｉｃａｎｄｔｏｘｉｃꎬａｎｄｉｓｈｉｇｈｌｙｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｉｃｔｏｈｕｍａｎｓａｎｄｌｉｖｅｓｔｏｃｋ.Ｔｈｅｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｆｏｒｔｏｘｉｎｓｈａｓａｌｗａｙｓｂｅｅｎａｒｅｓｅａｒｃｈｈｏｔｓｐｏｔａｔｈｏｍｅａｎｄａｂｒｏａｄ.Ａｍｏｎｇｔｈｅｍꎬｐｈｙｓｉｃａｌꎬｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｂｉｏｌｏｇｉ￣ｃａｌｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎａｒｅｍａｉｎｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓ.ＢａｓｅｄｏｎｔｈｅｌａｔｅｓｔｒｅｓｅａｒｃｈｒｅｓｕｌｔｓꎬｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄｔｈｅｔｏｘｉｃｉｔｙａｎｄｍａｉｎｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｉｎｄｅｔａｉｌａｎｄｓｕｍｍａｒｉｚｅｄｐｈｙｓｉｃａｌꎬｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈ￣ｏｄｓｆｏｒａｆｌａｔｏｘｉｎ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:㊀ａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ꎻｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄꎻｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ㊀㊀黄曲霉菌(Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｌａｕｖｓ)是一种世界范围常见的许多重要农作物以及动物的共同致病菌ꎮ黄曲霉菌产生的次级代谢产物黄曲霉毒素Ｂ１(ＡＦＢ１)是目前发现毒性和致癌性最强的天然化合物之一[１]ꎮ黄曲霉菌能够感染许多重要的农作物ꎬ例如ꎬ花生㊁玉米㊁棉花等ꎬ均可对收获前后的农作物进行污染ꎬ给世界各地的农业生产造成巨大的经济损失ꎮ根据联合国粮农组织统计ꎬ每年约有２５％的谷物被真菌毒素污染ꎬ其中最主要的就是黄曲霉毒素ꎬ给农业造成了巨大经济损失[２]ꎮ中国同样是黄曲霉毒素污染的重灾区ꎬ多个省份储存的玉米和花生中都检测到了黄曲霉毒素的污染[３￣４]ꎬ此外ꎬ在多个抽样的酱油以及水产饲料等加工产品中都检出ＡＦＢ１[５￣６]ꎮ由于黄曲霉毒素Ｂ１具有较稳定的理化性质ꎬ很难被降解ꎬ一旦污染的饲料被禽畜食用ꎬＡＦＢ１将在动物体内经羟基化代谢形成和ＡＦＢ１毒性和致癌性基本相似的衍生物ＡＦＭ１ꎬ一部分的ＡＦＢ１的衍生物会随尿液和乳汁排出ꎬ而很大一部分会出现在奶制品和肉制品中ꎮ黄曲霉毒素具有较强的毒性㊁诱变性及致癌９８７性[７]ꎮＡＦＢ１是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物ꎬ含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮[８]ꎬ见图１ꎮＡＦＢ１结构中存在３个毒性位点:①呋喃环上的８㊁９位双键ꎬ是毒素与蛋白质和核酸形成复合物的作用位点ꎬ为基因突变以及致癌致畸的主要功能基团ꎻ②内酯环部分的１０㊁１１㊁１５号位点ꎬ易受到水解作用ꎬ因此是较活跃的毒素降解位点ꎻ③环戊烯酮环上的１㊁２㊁３㊁１４号位ꎬ该位点易被取代基团取代ꎬ从而也决定了黄曲霉毒素的毒性ꎮ黄曲霉毒素的污染给农牧业生产带来重大的经济损失ꎬ并严重危害人类健康和食品安全ꎬ目前世界卫生组织已将其认定为１Ａ类致癌物ꎬ２０１７年中国农业农村部也将农产品中黄曲霉毒素的控制技术作为农业主推技术之一ꎮ因此ꎬ研究ＡＦＢ１的脱毒技术变得尤为重要ꎮ图１㊀黄曲霉毒素Ｂ１的化学结构Ｆｉｇ.１㊀ＣｈｅｍｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１１㊀黄曲霉毒素Ｂ１毒性概述１.１㊀ＡＦＢ１对人类和动物的毒性作用ＡＦＢ１对人类和几种动物有剧毒ꎬ并具有３个主要特征:亲有机性㊁遗传毒性和致癌性ꎮ它主要对有机体的肝脏亲和并产生损害ꎬ例如肝出血和肝细胞坏死[９]ꎮ遗传毒性主要是诱导ＡＦＢ１￣ＤＮＡ加合物的形成和代谢形成ＡＢＦ１环氧化物(ＡＢＦＯ)引起ｐ５３基因的热点突变ꎮ虽然部分ＡＦＢＯ会在谷氨酰胺转移酶作用下生成ＡＦＢ１谷胱氨肽结合物或生成ＡＦＢ１二氢二醇进一步在醛还原酶作用下生成ＡＦＢ１二羟醇经肾脏排泄出机体ꎬ但是剩下的大部分ＡＦＢ１仍然会损害机体ꎬ例如诱导ＤＮＡ损伤进而引起肝细胞癌变[７]ꎮ临床调查发现ꎬＡＦＢ１是乙型肝炎病毒感染患者患肝癌的主要原因ꎮ它是一种遗传毒性肝癌ꎬＡＦＢ１通过诱导形成ＤＮＡ加合物引起癌症ꎬ从而导致靶细胞发生遗传变化ꎬ诱导ＤＮＡ链断裂和ＤＮＡ碱基损伤ꎮ氧化损伤最终会导致癌症ꎮＡＦＢ１主要通过肝脏代谢ꎬ从食物中摄取的ＡＦＢ１主要通过细胞色素Ｐ４５０酶代谢为最终致癌物ＡＦＢ１￣８￣９￣环氧化合物(ＡＦＢＯ)ꎮ当ＡＦＢＯ与ＤＮＡ反应时ꎬ它通过与鸟嘌呤碱基相互作用而抑制ｐ５３(外显子２４９的热点编码区)中的基因突变ꎬ这可能会导致肝细胞癌变ꎮＡＦＢ１通过Ｐ４５０系统代谢为许多羟基化产物ꎬ包括ＡＦＭ１㊁ＡＦＱ１㊁ＡＦＰ１㊁ＡＦＢ２ａ[７]ꎮ黄曲霉毒素被摄入人体后ꎬ主要的中毒表现为急性中毒和慢性中毒ꎬ急性中毒发作通常由于高浓度的黄曲霉毒素摄入ꎮＡＦＢ１在人体中的转化途径如图２所示ꎮ１.２㊀ＡＦＢ１对儿童生长发育的影响生长障碍或发育迟缓是一个重大的公共卫生问题ꎬ影响到全世界数以百万计的儿童ꎬ特别是在发展中国家ꎮ一项对１２５名肯尼亚孕妇的调查结果表明ꎬ有５３％的孕妇血液中黄曲霉毒素生物标志物为阳性ꎬ而脐带血中标志物阳性率为３７％ꎬ研究还发现黄曲霉毒素阳性的孕妇生产的新生儿体质量明显降低ꎬ另外ꎬ研究期间发生的２个死胎仅来自ＡＦＢ１阳性孕妇[１０]ꎮＧｏｎｇ等[１１]发现研究地区的４７９名儿童中有９９％的儿童为ＡＦＢ１￣白蛋白阳性ꎬ断奶后儿童阳性水平更高ꎬ此外ꎬ发育不良的儿童的ＡＦＢ１￣白蛋白水平与身高和体质量之间呈显著负相关ꎬ断奶的儿童中ＡＦＢ１￣白蛋白水平高于仍在接受母乳的孩子(断奶后饮食主要以玉米为主)ꎬＡＦＢ１￣白蛋白水平较高的儿童身高平均下降了１ ７ｃｍꎮ这些研究结果表明ꎬ胎儿和新生儿暴露于ＡＦＢ１会对身体生长有显著影响ꎬ尤其在断奶后阶段ꎮ１.３㊀免疫抑制动物中的研究结果显示ＡＦＢ１具有诱导免疫抑制的作用ꎮ例如ꎬ在暴露于ＡＦＢ１的动物模型中发现ꎬＢ细胞和Ｔ细胞的活性降低了ꎬＴ细胞对ＡＦＢ１毒性更敏感[１２]ꎮ在黄曲霉菌引起的曲霉病中ꎬ鸡的吞噬细胞受到严重破坏ꎬ从循环中清除异物的能力下降ꎬ这可能会降低加工抗原成分的能力[１３]ꎮ同样在暴露于ＡＦＢ１的猪体内ꎬＡＦＢ１会降低淋巴细胞对有丝分裂原的反应ꎬ抑制大噬菌体迁移并延迟皮肤过敏反应[１３]ꎮ尽管从动物研究中获得了许多有关ＡＦＢ１影响免疫作用的数据ꎬ但是关于长期食用被０９７江苏农业学报㊀２０２１年第３７卷第３期图２㊀黄曲霉毒素Ｂ１的生物转移途径Ｆｉｇ.２㊀ＢｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｐａｔｈｗａｙｓｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ＡＦＢ１污染的食物对人体免疫系统影响的数据很少ꎮ冈比亚儿童唾液中ｓＩｇＡ水平降低ꎬ可能是由于饮食中黄曲霉毒素的暴露水平较高[１４]ꎮ在对６４位加纳人的研究中ꎬ发现ＡＦＢ１暴露可能导致淋巴细胞亚群的主要成分Ｔ细胞和Ｂ细胞减少ꎬ与低水平的ＡＦＢ１白蛋白加合物相比ꎬ高水平的ＡＦＢ１白蛋白加合物能显著降低ＣＤ８＋细胞毒性Ｔ细胞中穿孔素和颗粒酶ａ水平[１５]ꎮ在ＡＦＢ１水平高的受试者中ꎬ这些免疫参数的改变可能导致细胞免疫功能受损ꎬ从而降低宿主对感染的抵抗力ꎮ２㊀黄曲霉毒素Ｂ１检测方法高效液相色谱法㊁薄层色谱法和液相色谱质谱法是过去几十年测定ＡＦＢ１含量的常规分析方法[１６]ꎬ这些分析方法具有很高的灵敏度和良好的重复性ꎬ但样品处理繁琐ꎬ需要昂贵的仪器和专业人员ꎬ很大程度上限制了其在ＡＦＢ１快速检测和现场筛选中的应用[１７]ꎮ近年来以适配体和新型纳米材料为基础的检测传感器因具备灵敏度高㊁检出限低㊁成本低和操作简单等优势ꎬ在ＡＦＢ１等毒素检测中得到了广泛应用ꎮ此外ꎬ目前也开发出通过引入基于适配子的不同技术ꎬ例如电化学[１８]㊁表面等离子体共振[１９]和比色法[２０]来检测ＡＦＢ１ꎮ２.１㊀双真菌毒素比色生物传感器比色生物传感器基于浓度信息转换为颜色变化的比色ꎬ可用肉眼进行分辨而达到检测目的ꎬ具有低成本㊁便携性㊁易操作性等优点ꎬ已广泛应用于霉菌毒素检测ꎮ目前比色测定多集中应用在单一霉菌毒素的检测[２１]ꎬ关于同时检测多种霉菌毒素的报道较少ꎮＺｈｕ等[２２]开发了一种同时检测双霉菌毒素的生物传感器ꎬ首次实现了针对ＡＦＢ１和赭曲霉毒素(ＯＴＡ)２种霉菌毒素的双重目标检测ꎮ该双霉菌毒素检测的工作原理为:将Ｆｅ３Ｏ４/ＧＯ和ＴＰ￣ＧＯ(ＴＰ为百里酚酞ꎬＧＯ为氧化石墨烯)分别与不同的ＡＦＢ１的半互补链结合ꎬ然后加入ＡＦＢ１适体并组装形成ＡＦＢ１检测复合体(图３Ａ)ꎻ同样ꎬＦｅ３Ｏ４＠Ａｕ和ＡｕＮＰｓ(金纳米颗粒)也与ＯＴＡ的半互补链和适体结合形成ＯＴＡ检测复合体(图３Ｂ)ꎻ当ＡＦＢ１和ＯＴＡ存在时ꎬ因适体和靶标之间的亲和力强于半互补链ꎬ两个检测复合体都将解离ꎬ磁超螺旋离心分离后ꎬ提取上清液进行反应ꎬ并根据相应溶液在不同ｐＨ值下的颜色变化确定ＡＦＢ１和ＯＴＡ的量(图３Ｃ)ꎮ由于反应条件的不同ꎬ两种传感方法互不干扰ꎬ甚至可以提供更高的检测效率ꎮ双真菌毒素比色生物传感器具有良好的检测性能ꎬ线性范围为ＡＦＢ１５~２５０ｎｇ/ｍｌ和ＯＴＡ０.５~８０ ０ｎｇ/ｍｌꎬ具有良好的重现性和选择性ꎬ在微生物和环境领域具有广阔的应用前景ꎮ２.２㊀刺激响应型水凝胶生物传感器由于适配体具有稳定性好㊁便携性㊁易于存储和高特异性等特点ꎬＤＮＡ/适体交联的ＤＮＡ聚合物杂１９７孙统政等:黄曲霉毒素Ｂ１检测与脱毒方法最新研究进展Ａ:ＴＰ￣ＤＮＡ１￣ＧＯ￣ＡＦＢ１适体￣ＤＮＡ２￣Ｆｅ３Ｏ４/ＧＯ的组装ꎻＢ:ＡｕＮＰｓ￣ＯＴＡ适体￣Ｆｅ３Ｏ４＠Ａｕ￣ＣＯＴＡ适体纳米颗粒组装ꎮ图片参考自文献[２２]ꎮ图３㊀基于比色生物传感器的黄曲霉素Ｂ１(ＡＦＢ１)和赭曲霉毒素(ＯＴＡ)检测的工作原理Ｆｉｇ.３㊀ＷｏｒｋｉｎｇｐｒｉｎｃｉｐｌｅｆｏｒａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１(ＡＦＢ１)ａｎｄｏｃｈｒａｔｏｘｉｎ(ＯＴＡ)ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｂａｓｅｄｏｎｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃｂｉｏｓｅｎｓｏｒ化刺激响应水凝胶引起了广泛的关注[２３]ꎮＴａｎｇ等[２４]在一项研究中ꎬ设计了一种简单的ＡＦＢ１检测方法ꎬ结合了基于适体的靶标刺激反应水凝胶系统的多功能性以及使用电子天平作为读数的便利性ꎬ以线性透明质酸接枝的单链ＤＮＡ复合物作为主链ꎬＡＦＢ１适体和聚乙烯亚胺作为交联剂ꎬ构建了ＡＦＢ１靶标响应性双交联水凝胶ꎮ铂纳米颗粒(ＰｔＮＰｓ)首先被嵌入水凝胶中ꎬＡＦＢ１的存在可以提高亲和力与适体结合ꎬ并导致适体从水凝胶中释放ꎮ通过添加ＤＮＡ外切酶Ｉ(ＥｘｏＩ)可特异性识别并切割ＡＦＢ１中的适体￣适体复合物ꎬ导致ＡＦＢ１释放ꎻＡＦＢ１再次与水凝胶反应ꎬ导致水凝胶适体再次释放ꎬ从而实现目标循环ꎮ通过这种方式ꎬ水凝胶将崩溃ꎬ并使大量的ＰｔＮＰ释放ꎮ释放的ＰｔＮＰ与排水装置中的Ｈ２Ｏ２反应ꎬ在内部和外部之间产生压力差ꎬ从而排出水ꎬ并且水的质量可以通过简单的电子天平准确称量ꎮ该方法已用于花生样品中ＡＦＢ１的检测[２４]ꎬ在新鲜花生样品中未检测到ＡＦＢ１ꎬ但在发霉的花生样品中检测到约３３ １６μｇ/ｋｇＡＦＢ１ꎬＡＦＢ１的回收率在９１ ５％至９８ １％之间ꎬ结果与ＡＦＢ１酶联免疫分２９７江苏农业学报㊀２０２１年第３７卷第３期析试剂盒的检测结果[９２ ８％至９７ ７％(ＬＯＤ:１μｇ/ｋｇ)]基本一致ꎬ证明了使用该传感器检测食品样品中ＡＦＢ１的可行性ꎮ２.３㊀新型荧光适配体传感器近年来ꎬ金纳米星(ＡｕＮＳｓ)因具有特殊的多支化纳米结构ꎬ且有一个易于修饰和固定材料的中心核ꎬ应用范围广泛ꎮＺｈｅｎｇ等[１８]成功地开发了一种新型的适体传感器ꎬ用于基于量子点和ＡｕＮＳｓ的荧光定量猝灭剂纳米和智能手机光谱读取器的多农药实时定量ꎮＷｅｉ等[２５]以ＡｕＮＳｓ作为荧光猝灭材料ꎬ制造了用于ＡＦＢ１检测的简单新颖的ＦＲＥＴ系统ꎮ由于适体的荧光标记会影响适体与其靶标的结合亲和力[２５￣２６]ꎬ因此ꎬ将合成羧基荧光素(ＦＡＭ)标记的具有发夹结构的互补ＤＮＡ设计为信号探针ꎮＡｕＮ￣Ｓｓ不仅固定了大量的信号探针ꎬ而且由于其特殊的结构和出色的光学性能ꎬ还可以用作淬灭材料ꎮＦＡＭ标记的发夹结构(ＨＰ)与ＡＦＢ１杂交适体形成双链ＤＮＡꎬ发夹结构被打开ꎮ当通过Ｂｉｏ￣ＳＡ特异性结合在ＡｕＮＳｓ的表面修饰双链ＤＮＡ时ꎬＦＡＭ离ＡｕＮＳｓ很远ꎬ导致淬灭效率低和荧光强度强ꎮ当ＡＦＢ１存在时ꎬＡＦＢ１优先结合适体ꎬ导致双链ＤＮＡ的崩解ꎮＦＡＭ标记的ＨＰ恢复发夹结构ꎬ使ＦＡＭ接近ＡｕＮＳｓꎬ并降低荧光强度(图４)ꎮ新型荧光适配体传感器对玉米样品中ＡＦＢ１的最低检出限为２１ ３ｐｇ/ｍｌꎬ证明新型荧光适配体传感器的ＡＦＢ１检测试验获得满意结果ꎬ并且在存在其他高浓度毒素的情况下也表现出良好的选择性ꎮ图片参考自文献[２５]ꎮ图４㊀基于金纳米星/羧荧光素标记发夹/适体的ＡＦＢ１荧光检测示意图Ｆｉｇ.４㊀ＳｃｈｅｍａｔｉｃｄｉａｇｒａｍｆｏｒｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＡＦＢ１ｂａｓｅｄｏｎＡｕＮＳｓ/ｃａｒｂｏｘｙｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ￣ｌａｂｅｌｅｄｈａｉｒｐｉｎ/ａｐｔａｍｅｒ３㊀黄曲霉毒素Ｂ１脱毒方法由于食品中黄曲霉毒素的污染对人类健康构成威胁ꎬ并造成严重的经济损失ꎬ因此开发高效㊁安全的ＡＦＢ１脱毒方法具有重要意义ꎮ目前对真菌毒素的脱毒主要有２种策略:(１)防止霉菌污染和生长ꎻ(２)污染产品脱毒ꎮ常用的脱毒方法包括物理方法㊁化学方法和生物方法ꎮ３.１㊀物理方法３.１.１㊀加热脱毒㊀从食品中去除ＡＦＢ１的物理方法最常见的是加热ꎮ众所周知ꎬ黄曲霉毒素在高温下稳定ꎬ因此需要苛刻的加热才能有效地去除黄曲霉毒素ꎮ最近的研究结果表明ꎬ在１５０~２００ħ的温度下可以去除大量的ＡＦＢ１(平均降低７９％)ꎬ同时在高湿度下最为有效[２７￣２８]ꎮ该方法的问题是在加热和烘烤完成之后难以确保产品的完整性ꎬ从而会限制可以使用的最高温度ꎬ可能仅导致部分的ＡＦＢ１分解ꎮ然而ꎬ该技术可以容易地以低成本实施ꎬ并且可以在２ｈ或更短时间内实施ꎬ从而具有物流优势ꎮ３.１.２㊀γ射线脱毒㊀另一种最常用的物理净化方法是γ射线脱毒ꎬ可用于花生㊁谷物和动物饲料等多种食品基质ꎮ该技术为用γ射线源(例如６０Ｃｏ)辐照食品ꎬ直到获得一定量的电离辐射为止ꎬ电离辐射的范围为６~６０ｋＧｙꎮＡＦＢ１含量平均降低６５％[２９]ꎮ使用强辐射存３９７孙统政等:黄曲霉毒素Ｂ１检测与脱毒方法最新研究进展在安全问题ꎬ可能使实施这项技术变得困难ꎮ３.１.３㊀吸附剂脱毒㊀在食品中添加吸附剂也可有效去除ＡＦＢ１污染ꎮ此方法与降解方法不同ꎬ它不破坏㊁不减少食品中ＡＦＢ１的量ꎮ吸附剂与ＡＦＢ１结合可防止摄入后ＡＦＢ１被肠道吸收ꎬ从而防止ＡＦＢ１的肝毒性作用ꎮ(１)叶绿素对ＡＦＢ１的吸附ꎮＳｉｍｏｎｉｃｈ等[３０]报道了在向受ＡＦＢ１污染的饲料中添加叶绿素后ꎬ大鼠的ＡＦＢ１￣ＤＮＡ加合物减少了４２％ꎬＡＦＢ１￣白蛋白减少了６５％ꎬ肿瘤发生率降低了７７％ꎮ一项使用人类志愿者的研究中也发现ꎬ叶绿素可将尿中ＡＦＭ１水平降低２８％ꎬ尿中ＡＦＢ１水平降低４１％[３１]ꎮ这些数据表明ꎬ在高风险地区的饮食中添加吸附剂可能有助于减轻ＡＦＢ１的毒性作用ꎮ(２)氧化磁性石墨烯(ＭＧＯ)和磁性石墨烯(Ｍｒ￣ＧＯ)的纳米材料对ＡＦＢ１的吸附ꎮ磁性复合材料的孔径分布均匀ꎬ孔连通性好ꎬ表面积大ꎬ是吸附有机污染物的优秀吸附剂ꎮＪｉ等[３２]研究结果显示ꎬＭＧＯ和ＭｒＧＯ都能够在４０ｍｉｎ内移除ＡＦＢ１ꎬ对于受污染的油样ꎬＭＧＯ将ＡＦＢ１从１６ １μｇ/Ｌ降低至２ ２μｇ/Ｌꎬ去除率为８６ ３３％ꎬ当吸附剂量为２０ｍｇ/ｍｌ时最大去除率达到９６ ４％ꎮ磁性复合吸附剂在ＡＦＢ１脱毒中的应用ꎬ可能为食用油工业开发新型复合吸附剂开辟一条新道路ꎮ(３)黏土对ＡＦＢ１的吸附ꎮ与叶绿素相似ꎬ黏土可在消化道中结合ＡＦＢ１并防止肠道吸收ＡＦＢ１ꎮ钙蒙脱土(ＮｏｖａＳｉｌ)是目前被证明有效的吸附剂黏土ꎬ它可以显著减少ＡＦＢ１生物标志物的毒性作用[３３]ꎮＡｆｒｉｙｉｅ￣Ｇｙａｗｕ等进行了一项长期研究ꎬ发现在２８周内给大鼠喂食ＮｏｖａＳｉｌ含量高达２ ０％的饮食后ꎬ未观察到ＮｏｖａＳｉｌ具有明显的毒性[３４]ꎮ此外ꎬ临床试验也证实ꎬＮｏｖａＳｉｌ不仅能够明显降低参与者的尿ＡＦＭ１和血清ＡＦＢ１含量ꎬ而且具有较小的副作用[３５]ꎮ这些结果表明ꎬ在饮食中添加ＮｏｖａＳｉｌ是降低ＡＦＢ１毒性的安全有效方法ꎮ３.２　化学方法３.２.１㊀山梨酸钾㊁水合铝硅酸钠钙㊁Ｌ￣蛋氨酸组合法㊀山梨酸钾(Ｓｏｒ)是一种有效的食品防腐剂ꎬ用于控制各种加工食品中霉菌的生长[３６]ꎮ蛋氨酸(ＬＭ)是一种必需氨基酸ꎬ作为谷胱甘肽前体ꎬ可消除活性氧和ＤＮＡ甲基化反应[３７]ꎮ目前研究发现蛋氨酸有助于抗体的产生并改善血清中ＩｇＧ水平[３８]ꎮ因此ꎬ在ＡＦＢ１污染的饮食中添加蛋氨酸可降低ＡＦＢ１对动物的危害[３９]ꎮ水合硅铝酸钠钙(Ｈｓｃ)是一种化学吸附性物质ꎬ可以与ＡＦＢ１形成稳定而牢固的复合物ꎬ以减少动物在消化和利用饲料过程中ＡＦＢ１造成的不良影响ꎬ并且复合物还可以减弱ＡＦＢ１对身体器官的毒性[４０]ꎮＲｅｄａ等[４１]发现在饲料中添加山梨酸钾(Ｓｏｒ)㊁水合铝硅酸钠钙(Ｈｓｃ)和Ｌ￣蛋氨酸(ＬＭ)的混合物能够有效提高兔抗ＡＦＢ１毒性的能力ꎮ３.２.２㊀ＣｌＯ２熏蒸法㊀二氧化氯(ＣｌＯ２)是一种具有广泛且稳定的杀生物活性的强氧化剂和消毒剂ꎬ被用作水㊁水果和蔬菜的消毒剂ꎬ已经被联合国粮食及农业组织(ＦＡＯ)分类为的食品添加剂ꎮＣｌＯ２能够作用于ＡＦＢ１毒性和致癌活性的关键活性位点 ＡＦＢ１呋喃环的Ｃ８￣Ｃ９双键ꎮＣｌＯ２将ＡＦＢ１分解为４种物质:Ｃ１７Ｈ１３Ｏ８㊁Ｃ１６Ｈ１５Ｏ１０㊁Ｃ１７Ｈ１５Ｏ１０和Ｃ１６Ｈ１１Ｏ７ꎮ如图５所示ꎬ这４个降解产物的Ｃ８￣Ｃ９双键已被ＣｌＯ２破坏ꎬ从而使经过修饰的ＡＦＢ１降解产物的毒性大大降低甚至消失[４２]ꎮＹｕ等研究发现ꎬＣｌＯ２气体可以抑制黄曲霉菌菌丝生长㊁孢子萌发和产生ＡＦＢ１ꎮ随着ＣｌＯ２浓度的增加ꎬＡＦＢ１的降解率也随之提高ꎬ而且ＡＦＢ１的降解明显加快[４２]ꎮ之前的研究者发现氯和次氯酸钠的氯化消毒剂能有效降解食品中的ＡＦＢ１[４３]ꎬ但是氯处理产生的化学残留物限制了其应用ꎬ并且作为液体消毒剂ꎬ次氯酸钠不适用于干物质(如谷物)脱毒ꎮ３.２.３㊀壳聚糖包被α￣松油醇法㊀壳聚糖广泛用于包被生物材料ꎬ将某些化合物封装在壳聚糖纳米基质中可以增强其在保护食品中免受微生物污染的功效和稳定性ꎬ从而延长其货架寿命[４４]ꎮα￣松油醇是一种单萜醇ꎬ已在食品工业中广泛用作调味剂和熏蒸剂ꎬ用来保护食品免受微生物和昆虫的污染ꎮ此外它还具有广泛的药理特性ꎬ例如抗癌㊁抗炎和抗氧化[４５]ꎮ将α￣松油醇包被在壳聚糖中制成一种壳聚糖纳米乳液(α￣ＴＣｓＮｅ)ꎬ可用作新型抗真菌防腐剂增强α￣松油醇的杀菌作用从而抑制ＡＦＢ１的形成ꎮα￣ＴＣｓＮｅ的活性增强可能是由于α￣松油醇的抗微生物活性与壳聚糖之间的协同作用所致ꎮ此外ꎬ纳米封装后的小粒径大表面积很容易穿透处理过的细胞ꎬ并干扰真菌细胞利用必需化合物ꎬ从而致其死亡[４６]ꎮ该方法经济㊁方便㊁无毒㊁可控㊁无溶剂ꎬ这种方法对操作条件要求低ꎬ适用于亲水性和亲脂性化合物ꎬ用于配制稳定的纳米乳液[４７]ꎮ４９７江苏农业学报㊀２０２１年第３７卷第３期图片参考自文献[４２]ꎮ图５㊀ＡＦＢ１的４种降解产物结构Ｆｉｇ.５㊀ＳｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｆｏｕｒｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆＡＦＢ１３.３㊀生物方法３.３.１㊀植物提取物降解㊀植物精油(ＥＯｓ)具有显著的抗菌功效ꎬ因此作为健康危害性合成防腐剂的替代品具有巨大潜力ꎬ但其尚未被食品工业广泛使用ꎮ研究发现鸭嘴花和柠檬桉的提取物均有超过９５％的ＡＦＢ１降解率[４８]ꎮＹａｄａｖ等[４９￣５０]发现０ ３μｌ/ｍｌ壳聚糖包被的黑孜然精油可完全抑制黄曲霉菌生长和ＡＦＢ１产生ꎬ壳聚糖包被的肉豆蔻精油在１ ２５μｌ/ｍｌ时便可以完全抑制ＡＦＢ１产生ꎬ都具有很强的自由基清除活性ꎮＰｒａｋａｓｈ等对马郁兰㊁芫荽㊁草果药㊁没药和香水树５种植物提取精油的抑菌㊁杀菌和对粮食的菌染防护率进行了研究ꎬ结果见表１[５１]ꎮ表１㊀植物精油对黄曲霉产毒菌株的最低抑菌浓度㊁最低杀真菌浓度和对粮食的菌染防护率Ｔａｂｌｅ１㊀Ｍｉｎｉｍｕｍｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎꎬｍｉｎｉｍｕｍｆｕｎｇｉｃｉｄａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｐｌａｎｔｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌａｇａｉｎｓｔｔｏｘｉｎ￣ｐｒｏｄｕ￣ｃｉｎｇｓｔｒａｉｎｓｏｆＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｌａｖｕｓａｎｄｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｇｒａｉｎｓａｇａｉｎｓｔｂａｃｔｅｒｉａｌｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ精油样品最小抑菌体积分数(μｌ/ｍｌ)最小杀菌体积分数(μｌ/ｍｌ)菌染防护率(％)香水树２.０５.０７７.３８芫荽３.０未知６５.４８草果药２.５６.０７２.０２马郁兰２.５－６７.８６没药３.０７.０５５.３６３.３.２㊀益生菌抑制㊀利用微生物ꎬ特别是具有益生菌性质的微生物用于ＡＦＢ１脱毒ꎬ是一种绿色高效㊁环保㊁廉价和安全的策略ꎮ不同类型的益生菌脱毒方式不同ꎬ有的将ＡＦＢ１改造成其他无毒或低毒的次级产物或异构体ꎬ以达到消除食品和饲料中ＡＦＢ１的目的ꎮ最新的益生菌脱毒研究成果如表２所示ꎮＹａｎｇ等[５２]近期研究发现ꎬ利用米曲霉菌或者不产黄曲霉毒素的黄曲霉菌突变体可以抑制黄曲霉菌的生长和毒素的合成ꎮＸｉｎｇ等早期也运用黑曲霉菌来拮抗黄曲霉菌ꎬ从花生中分离到２０株黑曲霉菌ꎬ２０个黄曲霉毒素生物合成基因中有１９个被黑曲霉菌下调[５３]ꎮ因此ꎬ利用不产毒的黄曲霉菌或者安全的曲霉工业用菌可以有效地对产毒黄曲霉菌进行生物防治ꎬ可减少产毒黄曲霉菌对许多农产品的侵染及合成毒素ꎬ达到提前防控并减少经济损失的作用[５４]ꎮ３.３.３㊀基因水平调控㊀基因水平调控是指在基因转录或翻译水平上ꎬ利用一些综合性方法处理黄曲霉菌ꎬ使黄曲霉菌的某些产毒基因被抑制甚至阻断或下调黄曲霉菌生命活动的必须基因ꎬ从而限制ＡＦＢ１合成所必需的蛋白质㊁酶和化学物质的形成ꎬ甚至杀死黄曲霉菌ꎮ黄曲霉毒素合成基因簇如图６所示ꎮＤｈａｎａｍｊａｙｕｌｕ等[５５]使用苯并咪唑及其衍生物下调黄曲霉菌的ＡＦＢ１合成基因中的调控基因ａｆｌＲ５９７孙统政等:黄曲霉毒素Ｂ１检测与脱毒方法最新研究进展和结构基因ａｆｌＢ表达ꎬ有效抑制ＡＦＢ１的生物合成ꎬ仅１０μｇ/ｍｌ的质量浓度抑制效率便达到了９８％ꎬ但是并不影响黄曲霉菌的正常生长ꎮＣａｓｑｕｅｔｅ等[５６]利用ｐＨ㊁水分活度和温度对２个调节基因(ａｆｌＲ和ａｆｌＳ)和１个结构基因(ａｆｌＰ)表达的进行了研究ꎬ结果表明在ｐＨ５ ５㊁水分活度０ ９５和２０~２５ħ时基因具有最高表达水平和ＡＦＢ１积累量ꎮＸｉｎｇ等[５３]利用黑曲霉菌拮抗黄曲霉菌ꎬ发现ａｆｌＳ的表达显著下调ꎬ导致ａｆｌＳ/ＡｆｌＲ比值降低ꎬ表明黑曲霉菌可通过降低ａｆｌＳ的丰度而直接抑制ＡＦＢ１的生物合成ꎮ近期ꎬＣｈｅｎ等[５７]从Ｂａｃｉｌｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ中分离出的短肽Ｌ￣Ａｓｐ￣Ｌ￣Ａｓｎ(ＤＮ)可以有效抑制黄曲霉菌的生长ꎮ表２㊀益生菌对黄曲霉毒素的生物脱毒Ｔａｂｌｅ２㊀Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓｔｏａｆｌａｔｏｘｉｎ益生菌㊀㊀㊀㊀㊀排毒机理最小杀菌体积分数(μｌ/ｍｌ)生物脱毒率(％)参考文献枯草芽孢杆菌ＵＴＢＳＰ１降解未知９０.２ʃ５.２[５８]嗜酸链球菌ＣＷ１１７降解５９１.２[５９]植物乳杆菌ＭＯＮ０３结合５０５４.３ʃ７.３㊁８２.３ʃ８.３㊁３９.８ʃ０.４[６０]植物乳杆菌Ｃ８８结合２５７.６ꎻ５９.４[６１]克氏乳杆菌ＫＦＬＭ３８２％吸附１８２.０[６２]啤酒酵母ＫＦＧＹ７１８％生物转化７４.０糖醋杆菌ＫＦＧＭ１６５.０嗜酸乳杆菌结合５０.０[６３]短乳杆菌２８.０鼠李糖乳杆菌２０１２结合１８３.５[６４]植物唇形ＬＯＣＫ０８６２结合１００６５.０[６５]短杆菌ＬＯＣＫ１０９３６０.０鼠李糖鼠李ＬＯＣＫ１０８７５９.０罗伊氏杆菌ＬＯＣＫ１０９６５９.０干酪杆菌ＬＯＣＫ０９１１４９.０链霉菌亚种ＡｓｏｅｎｓｉｓＫ２３４降解１８８.３[６６]黄褐链霉菌Ｋ１４４ｒｉｍｏｓｕｓ９５.６金丝链霉菌Ｋ１４５７９.９地衣芽孢杆菌ＣＦＲ１降解９４.７ʃ１.１[６７]图６㊀黄曲霉毒素合成基因簇Ｆｉｇ.６㊀Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｇｅｎｅｃｌｕｓｔｅｒｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎ４㊀结语黄曲霉毒素Ｂ１是目前发现毒性和致癌性最强的天然污染物之一ꎬ对人类和动物健康安全存在潜在威胁ꎮ因此对黄曲霉菌和黄曲霉毒素的研究也成为近几十年来国内外同行研究的热点ꎮ本文主要综６９７江苏农业学报㊀２０２１年第３７卷第３期述了ＡＦＢ１的毒性ꎬ以及近年来ＡＦＢ１检测和脱毒方法ꎮ由于ＡＦＢ１的低剂量㊁高毒特性ꎬ开发出更灵敏㊁更快速㊁更经济的检测手段是新的趋势和挑战ꎮ尽管目前已有多种ＡＦＢ１脱毒方法ꎬ但是每种方法都有各自的优点和缺陷ꎬ很难做到既能保障脱毒食品的风味品质ꎬ又能确保食品安全ꎮ对于黄曲霉毒素的防范应早发现ꎬＡＦＢ１一旦进入后期的食品加工链ꎬ即使脱毒技术再成熟也会带来健康威胁ꎮ因此对黄曲霉毒素的早期检测以及消除其在农作物收获前后的污染对黄曲霉毒素的预防具有重要意义ꎮ参考文献:[１]㊀刘㊀畅ꎬ刘㊀阳ꎬ邢福国.黄曲霉毒素生物学脱毒方法研究进展[Ｊ].食品科技ꎬ２０１０ꎬ３５(５):２９０￣２９３.[２]㊀ＡＭＡＩＫＥＳꎬＫＥＬＬＥＲＮＰ.Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｌａｖｕｓ[Ｊ].ＡｎｎｕＲｅｖＰｈｙ￣ｔｏｐａｔｈｏｌꎬ２０１１ꎬ４９:１０７￣１３３.[３]㊀ＤＩＮＧＮꎬＸＩＮＧＦꎬＬＩＵＸꎬｅｔａｌ.Ｖａｒｉａｔｉｏｎｉｎｆｕｎｇａｌｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ(ｍｙｃｏｂｉｏｍｅ)ａｎｄａｆｌａｔｏｘｉｎｉｎｓｔｏｒｅｄｉｎ￣ｓｈｅｌｌｐｅａｎｕｔｓａｔｆｏｕｒｄｉｆ￣ｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓｏｆＣｈｉｎａ[Ｊ].ＦｒｏｎｔＭｉｃｒｏｂｉｏｌꎬ２０１５ꎬ６:１０５５. [４]㊀ＺＨＡＮＧＳꎬＷＡＮＧＨꎬＹＡＮＧＭꎬｅｔａｌ.ＶｅｒｓｉｃｏｌｏｒｉｎＡｉｓａｐｏｔｅｎ￣ｔｉａｌｉｎｄｉｃａｔｏｒｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｇｒａｎａｒｙ￣ｓｔｏｒｅｄｃｏｒｎ[Ｊ].ＦｏｏｄＡｄｄｉｔｉｖｅｓ＆Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ:ＰａｒｔＡꎬ２０１８ꎬ３５(５):９７２￣９８４.[５]㊀张自强ꎬ柏㊀凡ꎬ张克英ꎬ等.我国饲料中黄曲霉毒素Ｂ１污染的分布规律研究[Ｊ].中国畜牧杂志ꎬ２００９ꎬ４５(１２):２７￣３０. [６]㊀李㊀江ꎬ李晓明ꎬ綦㊀艳ꎬ等.酶联免疫法检测酱油中的黄曲霉毒素Ｂ１[Ｊ].食品安全质量检测学报ꎬ２０１６ꎬ７(１２):４７３５￣４７３９.[７]㊀ＡＢＲＡＲＭꎬＡＮＪＵＭＦＭꎬＢＵＴＴＭＳꎬｅｔａｌ.Ａｆｌａｔｏｘｉｎｓ:ｂｉｏｓｙｎ￣ｔｈｅｓｉｓꎬｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅꎬｔｏｘｉｃｉｔｙꎬａｎｄｒｅｍｅｄｉｅｓ[Ｊ].ＣｒｉｔＲｅｖＦｏｏｄＳｃｉＮｕｔｒꎬ２０１３ꎬ５３(８):８６２￣８７４.[８]㊀宋承钢ꎬ王彦多ꎬ杨㊀健ꎬ等.黄曲霉毒素脱毒研究进展[Ｊ].食品安全质量检测报ꎬ２０２０ꎬ１１(１２):３９４５￣３９５７. [９]㊀ＭＡＧＮＵＳＳＥＮＡꎬＰＡＲＳＩＭＡ.Ａｆｌａｔｏｘｉｎｓꎬｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏ￣ｍａａｎｄｐｕｂｌｉｃｈｅａｌｔｈ[Ｊ].ＷｏｒｌｄＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ.２０１３ꎬ１９(１０):１５０８￣１５１２.[１０]ＷＡＬＫＥＲＡꎬＨＡＬＬＩＮＧＥＲＰ.Ｓｃｈｏｏｌｌｅａｄｅｒｓｈｉｐｆｏｒｌｅａｒｎｉｎｇａｎｄｃｈａｎｇｅ:Ｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆａｎａｓｉａｎａｇｅｎｄａ[Ｍ]//ＪＯＨＮＳＯＮＧꎬＤＥＭＰ￣ＳＴＥＲＮ.ＬｅａｄｅｒｓｈｉｐｉｎＤｉｖｅｒｓｅＬｅａｒｎｉｎｇＣｏｎｔｅｘｔｓ.Ｃｈａｍ:Ｓｐｒｉｎｇ￣ｅｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇꎬ２０１６:１４５￣１７１.[１１]ＧＯＮＧＹꎬＨＯＵＮＳＡＡꎬＥＧＡＬＳꎬｅｔａｌ.Ｐｏｓｔｗｅａｎｉｎｇｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏａｆｌａｔｏｘｉｎｒｅｓｕｌｔｓｉｎｉｍｐａｉｒｅｄｃｈｉｌｄｇｒｏｗｔｈ:ａｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌｓｔｕｄｙｉｎＢｅｎｉｎꎬＷｅｓｔＡｆｒｉｃａ[Ｊ].ＥｎｖｉｒｏｎＨｅａｌｔｈＰｅｒｓｐｅｃｔꎬ２００４ꎬ１１２(１３):１３３４￣１３３８.[１２]ＷＡＮＧＦꎬＺＵＯＺꎬＣＨＥＮＫꎬｅｔａｌ.ＳｅｌｅｎｉｕｍｒｅｓｃｕｅｓａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１￣ｉｎｈｉｂｉｔｅｄＴｃｅｌｌｓｕｂｓｅｔｓａｎｄｃｙｔｏｋｉｎｅｌｅｖｅｌｓｉｎｃｅｃａｌｔｏｎｓｉｌｏｆｃｈｉｃｋｅｎｓ[Ｊ].ＢｉｏｌＴｒａｃｅＥｌｅｍＲｅｓꎬ２０１９ꎬ１８８(２):４６１￣４６７. [１３]ＰＥＮＧＸꎬＺＨＡＮＧＫꎬＢＡＩＳꎬｅｔａｌ.Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｌｅｓｉｏｎｓꎬｃｅｌｌｃｙ￣ｃｌｅａｒｒｅｓｔꎬａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄＴｃｅｌｌｓｕｂｓｅｔｓｃｈａｎｇｅｓｏｆｓｐｌｅｅｎｉｎｃｈｉｃｋ￣ｅｎｆｅｄａｆｌａｔｏｘｉｎ￣ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄｃｏｒｎ[Ｊ].ＩｎｔＪＥｎｖｉｒｏｎＲｅｓＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈꎬ２０１４ꎬ１１(８):８５６７￣８５８０.[１４]ＴＵＲＮＥＲＰＣꎬＭＯＯＲＥＳＥꎬＨＡＬＬＡＪꎬｅｔａｌ.ＭｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｉｍｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏｄｉｅｔａｒｙａｆｌａｔｏｘｉｎｉｎＧａｍｂｉａｎｃｈｉｌｄｒｅｎ[Ｊ].ＥｎｖｉｒｏｎＨｅａｌｔｈＰｅｒｓｐｅｃｔꎬ２００３ꎬ１１１(２):２１７￣２２０. [１５]ＳＵＱＹ.ＴｈｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｉｎｈｕｍａｎ:Ａｎｕｐｄａｔｅ[Ｍ]//ＸＩＤＬ.ＡｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｏｃｃｕｒ￣ｒｅｎｃｅꎬｄｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓ.Ｒｉｊｅｋａ:ＩｎｔｅｃｈＯｐｅｎꎬ２０２０:８９２２１.[１６]ＬＩＺＢꎬＸＵＥＮꎬＭＡＨＹꎬｅｔａｌ.Ａｎｕｌｔｒａｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄｓｗｉｔｃｈ￣ｏｎｐｌａｔｆｏｒｍｆｏｒａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｉｎｐｅａｎｕｔｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓ￣ｃｅｎｃｅｑｕｅｎｃｈｉｎｇｏｆｇｒａｐｈｅｎｅｏｘｉｄｅ￣ｇｏｌｄｎａｎｏｃｏｍｐｏｓｉｔｅｓ[Ｊ].Ｔａ￣ｌａｎｔａꎬ２０１８ꎬ１８１:３４６￣３５１.[１７]ＡＢＮＯＵＳＡＫꎬＤＡＮＥＳＨＮＭꎬＡＬＩＢＯＬＡＮＤＩＭꎬｅｔａｌ.Ａｎｅｗａｍｐｌｉｆｉｅｄπ￣ｓｈａｐｅｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌａｐｔａｓｅｎｓｏｒｆｏｒｕｌｔｒａｓｅｎｓｉｔｉｖｅｄｅ￣ｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１[Ｊ].ＢｉｏｓｅｎｓＢｉｏｅｌｅｃｔｒｏｎꎬ２０１７ꎬ９４:３７４￣３７９.[１８]ＺＨＥＮＧＷＬꎬＴＥＮＧＪꎬＣＨＥＮＧＬꎬｅｔａｌ.Ｈｅｔｅｒｏ￣ｅｎｚｙｍｅ￣ｂａｓｅｄｔｗｏ￣ｒｏｕｎｄｓｉｇｎａｌａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｔｒａｔｅｇｙｆｏｒｔｒａｃｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｆｌａ￣ｔｏｘｉｎＢ１ｕｓｉｎｇａｎｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌａｐｔａｓｅｎｓｏｒ[Ｊ].ＢｉｏｓｅｎｓＢｉｏｅｌｅｃ￣ｔｒｏｎꎬ２０１６ꎬ８０:５７４￣５８１.[１９]ＹＡＮＧＭＸꎬＬＩＵＧＫꎬＣＨＥＮＨＭꎬｅｔａｌ.ＡｕｎｉｖｅｒｓａｌＳＥＲＳａｐｔａｓｅｎｓｏｒｂａｓｅｄｏｎＤＴＮＢｌａｂｅｌｅｄＧＮＴｓ/Ａｇｃｏｒｅ￣ｓｈｅｌｌｎａｎｏｔｒｉａｎ￣ｇｌｅａｎｄＣＳ￣Ｆｅ３Ｏ４ｍａｇｎｅｔｉｃ￣ｂｅａｄｔｒａｃｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＡｆｌａｔｏｘｉｎＢ１[Ｊ].ＡｎａｌＣｈｉｍＡｃｔａꎬ２０１７ꎬ９８６:１２２￣１３０.[２０]ＣＨＥＮＪꎬＷＥＮＪꎬＺＨＵＡＮＧＬ.Ａｎｅｎｚｙｍｅ￣ｆｒｅｅｃａｔａｌｙｔｉｃＤＮＡｃｉｒ￣ｃｕｉｔｆｏｒａｍｐｌｉｆｉｅｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｕｓｉｎｇｇｏｌｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓａｓｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ[Ｊ].Ｎａｎｏｓｃａｌｅꎬ２０１６ꎬ８(１８):９７９１￣９７９７.[２１]ＷＡＮＧＣꎬＱＩＡＮＪꎬＷＡＮＧＫꎬｅｔａｌ.ＣｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃａｐｔａｓｅｎｓｉｎｇｏｆｏｃｈｒａｔｏｘｉｎＡｕｓｉｎｇＡｕ＠Ｆｅ３Ｏ４ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓａｓｓｉｇｎａｌｉｎｄｉｃａｔｏｒａｎｄｍａｇｎｅｔｉｃｓｅｐａｒａｔｏｒ[Ｊ].ＢｉｏｓｅｎｓｏｒｓａｎｄＢｉｏｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓꎬ２０１６ꎬ７７:１１８３￣１１９１.[２２]ＺＨＵＷꎬＬＩＬＢꎬＺＨＯＵＺꎬｅｔａｌ.Ａｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃｂｉｏｓｅｎｓｏｒｆｏｒｓｉｍ￣ｕｌｔａｎｅｏｕｓｏｃｈｒａｔｏｘｉｎＡａｎｄａｆｌａｔｏｘｉｎｓＢ１ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｉｎａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌｐｒｏｄｕｃｔｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０２０ꎬ３１９:１２６５４４.[２３]ＶＥＲＭＯＮＤＥＮＴꎬＣＥＮＳＩＲꎬＨＥＮＮＩＮＫＷＥ.Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓｆｏｒｐｒｏ￣ｔｅｉｎｄｅｌｉｖｅｒｙ[Ｊ].ＣｈｅｍＲｅｖꎬ２０１２ꎬ１１２(５):２８５３￣２８８８. [２４]ＴＡＮＧＬꎬＨＵＡＮＧＹꎬＬＩＮＣꎬｅｔａｌ.ＨｉｇｈｌｙｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄｓｅｌｅｃｔｉｖｅａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｂａｓｅｄｏｎＥｘｏｎｕｃｌｅａｓｅＩ￣ｃａｔａｌｙｚｅｄｔａｒｇｅｔｒｅ￣ｃｙｃｌｉｎｇａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｔａｒｇｅｔｅｄｒｅｓｐｏｎｓｅａｐｔａｍｅｒ￣ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｄｈｙ￣ｄｒｏｇｅｌｕｓｉｎｇｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｂａｌａｎｃｅｓａｓａｒｅａｄｏｕｔ[Ｊ].Ｔａｌａｎｔａꎬ２０２０ꎬ２１４:１２０８６２.[２５]ＷＥＩＭꎬＺＨＡＯＦꎬＸＩＥＹ.Ａｎｏｖｅｌｇｏｌｄｎａｎｏｓｔａｒｓ￣ｂａｓｅｄｆｌｕｏｒｅｓ￣ｃｅｎｔａｐｔａｓｅｎｓｏｒｆｏｒａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ[Ｊ].Ｔａｌａｎｔａꎬ２０２０ꎬ２０９:１２０５９９.[２６]ＬＶＬꎬＬＩＤꎬＬＩＵＲꎬｅｔａｌ.Ｌａｂｅｌ￣ｆｒｅｅａｐｔａｓｅｎｓｏｒｆｏｒｏｃｈｒａｔｏｘｉｎＡｄｅｔｅｃｔｉｏｎｕｓｉｎｇＳＹＢＲＧｏｌｄａｓａｐｒｏｂｅ[Ｊ].ＳｅｎｓＡｃｔｕａｔｏｒｓＢＣｈｅｍꎬ２０１７ꎬ２４６:６４７￣６５２.７９７孙统政等:黄曲霉毒素Ｂ１检测与脱毒方法最新研究进展[２７]ＡＲＺＡＮＤＥＨＳꎬＪＩＮＡＰＳ.Ｅｆｆｅｃｔｏｆｉｎｉｔｉａｌａｆｌａｔｏｘｉｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎꎬｈｅａｔｉｎｇｔｉｍｅａｎｄｒｏａｓｔｉｎｇｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｎａｆｌａｔｏｘｉｎｒｅｄｕｃｔｉｏｎｉｎｃｏｎ￣ｔａｍｉｎａｔｅｄｐｅａｎｕｔｓａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｏｐｔｉｍｉｓａｔｉｏｎｕｓｉｎｇｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｏｄｅｌｌｉｎｇ[Ｊ].ＩｎｔＪＦｏｏｄＳｃｉＴｅｃｈｎｏｌꎬ２０１１ꎬ４６:４８５￣４９１. [２８]ＺＨＥＮＧＨꎬＷＥＩＳꎬＸＵＹꎬｅｔａｌ.ＲｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｉｎｐｅａｎｕｔｍｅａｌｂｙｅｘｔｒｕｓｉｏｎｃｏｏｋｉｎｇ[Ｊ].ＬＷＴ￣ＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ２０１５ꎬ６４(２):５１５￣５１９.[２９]ＭＯＨＡＭＥＤＮＦꎬＥＬ￣ＤＩＮＥＲＳＳꎬＫＯＴＢＭＡＭꎬｅｔａｌ.Ａｓｓｅｓｓ￣ｉｎｇｔｈｅｐｏｓｓｉｂｌｅｅｆｆｅｃｔｏｆｇａｍｍａｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｒｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆａｆｌａ￣ｔｏｘｉｎＢ１ꎬａｎｄｏｎｔｈｅｍｏｉｓｔｕｒｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｓｏｍｅｃｅｒｅａｌｇｒａｉｎｓ[Ｊ].ＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬ２０１５(７):３３￣３９. [３０]ＳＩＭＯＮＩＣＨＭＴꎬＥＧＮＥＲＰＡꎬＲＯＥＢＵＣＫＢＤꎬｅｔａｌ.ＮａｔｕｒａｌｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｉｎｈｉｂｉｔｓａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１￣ｉｎｄｕｃｅｄｍｕｌｔｉ￣ｏｒｇａｎｃａｒｃｉｎｏｇｅｎ￣ｅｓｉｓｉｎｔｈｅｒａｔ[Ｊ].Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓꎬ２００７ꎬ２８(６):１２９４￣１３０２. [３１]ＲＵＳＨＩＮＧＢＲꎬＳＥＬＩＭＭＩ.ＡｆｌａｔｏｘｉｎＢ１:Ａｒｅｖｉｅｗｏｎｍｅｔａｂｏ￣ｌｉｓｍꎬｔｏｘｉｃｉｔｙꎬｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｉｎｆｏｏｄꎬｏｃｃｕｐａｔｉｏｎａｌｅｘｐｏｓｕｒｅꎬａｎｄｄｅ￣ｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓ[Ｊ].ＦｏｏｄａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙꎬ２０１９ꎬ１２４:８１￣１００.[３２]ＪＩＪꎬＸＩＥＷ.ＤｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｂｙｍａｇｎｅｔｉｃｇｒａｐｈｅｎｅｃｏｍｐｏｓｉｔｅａｄｓｏｒｂｅｎｔｓｆｒｏｍｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄｏｉｌｓ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨａｚ￣ａｒｄｏｕｓＭａｔｅｒｉａｌｓꎬ２０２０ꎬ３８１:１２０９１５.[３３]ＰＨＩＬＬＩＰＳＴＤꎬＡＦＲＩＹＩＥ￣ＧＹＡＷＵＥꎬＷＩＬＬＩＡＭＳＪꎬｅｔａｌ.Ｒｅ￣ｄｕｃｉｎｇｈｕｍａｎｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏａｆｌａｔｏｘｉｎｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｕｓｅｏｆｃｌａｙ:Ａｒｅ￣ｖｉｅｗ[Ｊ].ＦｏｏｄＡｄｄｉｔｉｖｅｓ＆Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ:ＰａｒｔＡꎬ２００８ꎬ２５(２):１３４￣１４５.[３４]ＡＦＲＩＹＩＥ￣ＧＹＡＷＵＥꎬＭＡＣＫＩＥＪꎬＤＡＳＨＢꎬｅｔａｌ.Ｃｈｒｏｎｉｃｔｏｘｉ￣ｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｄｉｅｔａｒｙＮｏｖａＳｉｌＣｌａｙｉｎＳｐｒａｇｕｅ￣Ｄａｗｌｅｙｒａｔｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＡｄｄｉｔｉｖｅｓ＆Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓꎬ２００５ꎬ２２(３):２５９￣２６９. [３５]ＷＡＮＧＰꎬＡＦＲＩＹＩＥ￣ＧＹＡＷＵＥꎬＴＡＮＧＹꎬｅｔａｌ.ＮｏｖａＳｉｌｃｌａｙｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｉｎＧｈａｎａｉａｎｓａｔｈｉｇｈｒｉｓｋｆｏｒａｆｌａｔｏｘｉｃｏｓｉｓ:ＩＩ.Ｒｅｄｕｃ￣ｔｉｏｎｉｎｂｉｏｍａｒｋｅｒｓｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎｅｘｐｏｓｕｒｅｉｎｂｌｏｏｄａｎｄｕｒｉｎｅ[Ｊ].ＦｏｏｄＡｄｄｉｔｉｖｅｓ＆Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ:ＰａｒｔＡꎬ２００８ꎬ２５(５):６２２￣６３４. [３６]ＦＥＲＲＡＮＤＣꎬＭＡＲＣＦꎬＦＲＩＴＳＣＨＰꎬｅｔａｌ.Ｇｅｎｏｔｏｘｉｃｉｔｙｓｔｕｄｙｏｆｒｅａｃｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆｓｏｒｂｉｃａｃｉｄ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０００ꎬ４８(８):３６０５￣３６１０.[３７]ＡＬＡＧＡＷＡＮＹＭꎬＡＢＤＥＭꎬＡＲＩＦＭꎬｅｔａｌ.Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌａｎｄｃｏｍｂｉｎｅｄｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎꎬｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅꎬａｎｄｐｒｏｂｉｏｔｉｃｌｅｖｅｌｓｏｎｌａｙｉｎｇｈｅｎｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅａｎｄｎｉｔｒｏｇｅｎｐｏｌｌｕｔｉｏｎｉｎｔｈｅｍａｎｕｒｅ[Ｊ].ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｏｌｌｕｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈꎬ２０１６ꎬ２３(２２):２２９０６￣２２９１３.[３８]ＳＷＡＩＮＢＫꎬＪＯＨＲＩＴＳ.Ｅｆｆｅｃｔｏｆｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅꎬｃｈｏ￣ｌｉｎｅａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓｏｎｔｈｅｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅａｎｄｉｍｍｕｎｅｒｅ￣ｓｐｏｎｓｅｏｆｂｒｏｉｌｅｒｓ[Ｊ].ＢｒｉｔｉｓｈＰｏｕｌｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅꎬ２０００ꎬ４１(１):８３￣８８.[３９]ＥＬＮＥＳＲＳＳꎬＥＬＷＡＮＨＡＭꎬＸＵＱＱꎬｅｔａｌ.Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｉｎｏｖｏｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆｓｕｌｆｕｒ‐ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇａｍｉｎｏａｃｉｄｓｏｎｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ７０ꎬｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｎｅｈｏｒｍｏｎｅꎬａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｉｎｄｉｃｅｓꎬａｎｄｌｉｐｉｄｐｒｏｆｉｌｅｏｆｎｅｗｌｙｈａｔｃｈｅｄｂｒｏｉｌｅｒｃｈｉｃｋｓｅｘｐｏｓｅｄｔｏｈｅａｔｓｔｒｅｓｓｄｕｒｉｎｇｉｎｃｕ￣ｂａｔｉｏｎ[Ｊ].ＰｏｕｌｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅꎬ２０１９ꎬ９８(５):２２９０￣２２９８. [４０]ＳＣＨＥＩＤＥＬＥＲＳＥ.ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｖａｒｉｏｕｓｔｙｐｅｓｏｆａｌｕｍｉｎｏｓｉｌｉｃａｔｅｓａｎｄａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｏｎａｆｌａｔｏｘｉｎｔｏｘｉｃｉｔｙꎬｃｈｉｃｋｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅꎬａｎｄｍｉｎｅｒａｌｓｔａｔｕｓ[Ｊ].ＰｏｕｌｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅꎬ１９９３ꎬ７２(２):２８２￣２８８.[４１]ＲＥＤＡＦＭꎬＩＳＭＡＩＬＩＥꎬＥＬＭＥＫＫＡＷＹＭＭꎬｅｔａｌ.Ｄｉｅｔａｒｙｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｐｏｔａｓｓｉｕｍｓｏｒｂａｔｅꎬｈｙｄｒａｔｅｄｓｏｄｉｕｍｃａｌｃｉｕｍａｌ￣ｍｕｎｉｏｓｉｌｉｃａｔｅａｎｄｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅｅｎｈａｎｃｅｓｇｒｏｗｔｈꎬａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓｔａｔｕｓａｎｄｉｍｍｕｎｉｔｙｉｎｇｒｏｗｉｎｇｒａｂｂｉｔｓｅｘｐｏｓｅｄｔｏａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｉｎｔｈｅｄｉｅｔ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎꎬ２０１９ꎬ１０４(１):１９６￣２０３.[４２]ＹＵＹꎬＳＨＩＪꎬＸＩＥＢꎬｅｔａｌ.ＤｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｉｎｃｏｒｎｂｙｃｈｌｏｒｉｎｅｄｉｏｘｉｄｅｇａｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０２０ꎬ３２８:１２７１２１. [４３]ＳＨＩＨＵꎬＳＴＲＯＳＨＩＮＥＲＬꎬＩＬＥＬＥＪＩＫ.Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｒｅｌ￣ａｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓｏｆｆｏｕｒｆｏｏｄａｄｄｉｔｉｖｅｓｉｎｄｅｇｒａｄｉｎｇａｆｌａｔｏｘｉｎｉｎｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓｗｅｔｇｒａｉｎｓａｎｄｃｏｎｄｅｎｓｅｄｄｉｓｔｉｌｌｅｒｓｓｏｌｕｂｌｅｓ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎꎬ２０１７ꎬ８０(１):９０￣９５.[４４]ＫＵＭＡＲＣＡꎬＳＩＮＧＨＡꎬＫＵＭＡＲＳＶꎬｅｔａｌ.Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｃｈｉ￣ｔｏｓａｎｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄα￣Ｔｅｒｐｉｎｅｏｌａｇａｉｎｓｔｆｕｎｇａｌꎬａｆｌａｔｏｘ￣ｉｎＢ１(ＡＦＢ１)ａｎｄｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｓｍｅｄｉａｔｅｄｄｅｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎｏｆｓｔｏｒｅｄｍａｉｚｅａｎｄｐｏｓｓｉｂｌｅｍｏｄｅｏｆａｃｔｉｏｎ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０２０ꎬ３１１:１２６０１０.[４５]ＫＨＡＬＥＥＬＣꎬＴＡＢＡＮＣＡＮꎬＢＵＣＨＢＡＵＥＲＧ.α￣Ｔｅｒｐｉｎｅｏｌꎬａｎａｔｕｒａｌｍｏｎｏｔｅｒｐｅｎｅ:Ａｒｅｖｉｅｗｏｆｉｔｓｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ[Ｊ].ＯｐｅｎＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０１８ꎬ１６(１):３４９￣３６１.[４６]ＭＡＲＴÍＮＥＺ￣ＡＢＡＤＡꎬＳÁＮＣＨＥＺＧꎬＯＣＩＯＭＪꎬｅｔａｌ.ＣＨＡＰ￣ＴＥＲ１１ｐｏｌｙｍｅｒｉｃｍａｔｅｒｉａｌｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｎａｔｕｒａｌｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｉｔｈａｎ￣ｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｎｄｖｉｒｕｃｉｄｅｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ[Ｍ]//ＡＬＥＸＡＮＤＲＡＭＢꎬＭＡＲíＡＣꎬＭＡＲＴＡＦＧ.Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃｍａｔｅｒｉａｌｓｗｉｔｈａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ:Ｆｒｏｍｓｙｎｔｈｅｓｉｓｔｏａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ.Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ:ＴｈｅＲｏｙａｌＳｏ￣ｃｉｅｔｙｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０１４:３１０￣３２６.[４７]ＨＡＳＨＥＭＩＮＥＪＡＤＮꎬＫＨＯＤＡＩＹＡＮＦꎬＳＡＦＡＲＩＭ.Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇｔｈｅａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｃｌｏｖｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄｂｙｃｈｉｔｏｓａｎｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０１９ꎬ２７５:１１３￣１２２. [４８]ＶＩＪＡＹＡＮＡＮＤＲＡＪＳꎬＢＲＩＮＤＡＲꎬＫＡＮＮＡＮＫꎬｅｔａｌ.Ｄｅｔｏｘｉｆｉ￣ｃａｔｉｏｎｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｂｙａｎａｑｕｅｏｕｓｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍｌｅａｖｅｓｏｆＡｄｈａｔｏ￣ｄａｖａｓｉｃａＮｅｅｓ[Ｊ].ＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈꎬ２０１４ꎬ１６９(４):２９４￣３００.[４９]ＹＡＤＡＶＡꎬＫＵＪＵＲＡꎬＫＵＭＡＲＡꎬｅｔａｌ.ＥｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎｏｆＢｕｎｉ￣ｕｍｐｅｒｓｉｃｕｍｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｕｓｉｎｇｃｈｉｔｏｓａｎｎａｎｏｐｏｌｙｍｅｒ:Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎꎬｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎꎬａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｓｓｅｓｓｍｅｎｔꎬａｎｄｔｈｅｒｍａｌｓｔａｂｉｌｉｔｙ[Ｊ].ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓꎬ２０２０ꎬ１４２:１７２￣１８０.[５０]ＹＡＤＡＶＡꎬＫＵＪＵＲＡꎬＫＵＭＡＲＡꎬｅｔａｌ.Ａｓｓｅｓｓｉｎｇｔｈｅｐｒｅｓｅｒｖａ￣ｔｉｖｅｅｆｆｉｃａｃｙｏｆｎａｎｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄｍａｃｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌａｇａｉｎｓｔｆｏｏｄｂｏｒｎｅｍｏｌｄｓꎬａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎꎬａｎｄｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｇｅｎｅｒａ￣ｔｉｏｎ[Ｊ].ＬＷＴ￣ＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ２０１９ꎬ１０８:４２９￣４３６.[５１]ＰＲＡＫＡＳＨＢꎬＳＩＮＧＨＰꎬＫＥＤＩＡＡꎬｅｔａｌ.Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｓｏｍｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓａｓｆｏｏｄｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓｂａｓｅｄｏｎａｎｔｉｆｕｎｇａｌꎬａｎｔｉａｆｌａｔｏｘ￣ｉｎꎬａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄｉｎｖｉｖｏｅｆｆｉｃａｃｙｉｎｆｏｏｄｓｙｓｔｅｍ[Ｊ].ＦｏｏｄＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌꎬ２０１２ꎬ４９(１):２０１￣２０８.[５２]ＹＡＮＧＫＬꎬＧＥＮＧＱＲꎬＳＯＮＧＦＱꎬｅｔａｌ.Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅｓｅ￣８９７江苏农业学报㊀２０２１年第３７卷第３期。

产志贺毒素大肠埃希氏菌活菌检测方法的应用现状及展望王梓晨;牛洪梅;刘阳泰;王翔;董庆利
【期刊名称】《工业微生物》
【年(卷),期】2024(54)2
【摘要】产志贺毒素大肠埃希氏菌作为一种重要的食源性致病菌,会对人体健康造成严重威胁。

对其进行快速、准确的鉴定检测是预防和控制相关疾病的有效手段。

基于此,文章对目前可用于检测活体产志贺毒素大肠埃希氏菌的方法进行综述,主要包括传统的细胞培养方法、免疫学检测方法和分子生物学方法等,并对这些方法的应用和发展前景展开了深入探讨。

随着分子生物学和生物工程技术的发展,不同检测方法联合使用可以克服单一方法的缺陷,从而取得更高效、准确的检测结果。

【总页数】9页(P92-100)
【作者】王梓晨;牛洪梅;刘阳泰;王翔;董庆利
【作者单位】上海理工大学健康科学与工程学院
【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.网状分枝扩增技术快速检测大肠埃希菌O157:H7及其他产志贺样毒素大肠埃希菌
2.肠产志贺样毒素且具侵袭力的大肠埃希氏菌和肠侵袭性大肠埃希氏菌的侵袭基因比较
3.牛肉样品中产志贺毒素大肠埃希氏菌和肠致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定
4.食品卫生学——网状分枝扩增技术快速检测大肠埃希菌O157：H7及其他产志贺样毒素大肠埃希菌
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《基于光谱及成像技术的小麦黄曲霉真菌毒素快速无损检测研究》一、引言随着粮食生产技术的不断发展，食品安全问题备受关注。

其中，粮食贮藏过程中的黄曲霉毒素污染问题尤为突出。

黄曲霉毒素是一种由黄曲霉等真菌产生的有毒代谢产物，对人类和动物的健康构成严重威胁。

因此，快速、无损的检测小麦中黄曲霉真菌毒素的技术研究具有重要意义。

本文将介绍一种基于光谱及成像技术的小麦黄曲霉真菌毒素快速无损检测方法，并探讨其相关应用和效果。

二、光谱及成像技术概述光谱技术是通过测量物质在不同波长下的辐射吸收、发射或散射等特性，来获取物质的成分、结构及状态信息的一种方法。

成像技术则是在光谱技术的基础上，通过捕捉物质表面的图像信息，实现对物质的三维可视化。

在小麦黄曲霉真菌毒素的检测中，光谱及成像技术可以快速获取样品的光谱特征和图像特征，为后续的检测分析提供依据。

三、基于光谱及成像技术的黄曲霉真菌毒素检测方法1. 样品准备：选取受黄曲霉污染的小麦样品，进行清洗、干燥和粉碎等处理，以便进行后续的检测分析。

2. 光谱数据采集：利用光谱仪对样品进行光谱扫描，获取样品的光谱数据。

3. 图像数据采集：利用成像设备对样品进行图像拍摄，获取样品的图像数据。

4. 特征提取：对光谱数据和图像数据进行处理和分析，提取出与黄曲霉真菌毒素含量相关的特征参数。

5. 模型建立：利用提取的特征参数建立预测模型，通过训练和优化模型，实现对小麦中黄曲霉真菌毒素的快速无损检测。

四、实验结果与分析1. 光谱特征分析：通过对受黄曲霉污染的小麦样品进行光谱扫描，发现不同浓度的黄曲霉真菌毒素在特定波长下的吸收峰存在差异。

这些差异可以作为区分不同浓度黄曲霉真菌毒素的依据。

2. 图像特征分析：通过对受黄曲霉污染的小麦样品进行图像拍摄，发现黄曲霉在小麦表面的分布情况和颜色等特征与未受污染的样品存在明显差异。

这些差异可以作为辅助判断小麦是否受黄曲霉污染的依据。

3. 模型预测性能：利用建立的预测模型对小麦样品进行黄曲霉真菌毒素含量的预测，发现模型的预测性能良好，能够快速准确地检测出小麦中的黄曲霉真菌毒素含量。

真菌毒素测试仪应用及校准方法的研究作者：周华文王光跃王晓红来源：《中国质量与标准导报》2022年第01期摘要：真菌毒素是指丝状真菌在粮食和饲料中生长产生的有毒次级代谢产物，极易污染各类农产品，对人体和动物危害极大;真菌毒素测试仪是一种快检仪器，可以对粮食存放产生的真菌毒素含量进行快速有效的测量，对食品、饲料安全检测初筛发挥着重要的作用;真菌毒素测试仪的量值准确性直接关系到粮食初筛的科学与否。

论文简单分析了真菌毒素测量的重要性和现阶段真菌毒素测试仪的校准状况;通过分析真菌毒素测试仪的各项技术指标，找出关键量值的评价方法，确定了真菌毒素测试仪的校准方法。

关键词：真菌毒素校准方法粮食安全Mycotoxin Tester Application and Research on Calibration MethodZhou Huawen1 ， Wang Guangyue1，Wang Xiaohong2（1. Binzhou Inspection and Testing Center; 2. Shandong Yuntang Intelligent Technology Co.，LTD）Abstract： Mycotoxins are toxic secondary metabolites produced by filamentous fungi growing in grain and feed. It is very easy to pollute all kinds of agricultural products，great harm to human body and animals. Mycotoxin tester is a fast detection instrument， which can quickly and effectively measure the content of mycotoxin produced by grain storage，and plays an important role in the preliminary screening of food and feed safety detection. The accuracy of mycotoxin tester is directly related to the qualification of primary screening of food and feed.This paper briefly analyzes the importance of mycotoxin measurement and the calibration of mycotoxin tester at present. By analyzing the technical indexes of mycotoxin tester， the evaluation method of key quantity value is found out，and the calibration method of mycotoxin tester is determined.Key words： mycotoxins， calibration method， food safety0 引言当前国家粮食供给处在紧平衡状态，疫情下粮食出口国停止出口，当下仓储粮的安全事关粮食安全的关键。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒性和检测方法研究进展摘要】脱氧雪腐镰刀菌烯醉（ＤＯＮ）是一种霉菌毒素，也是谷物中的主要污染物之一，对农产品生产、人类健康、国际贸易交流和社会经济发展均有重要影响。

适宜的检测方法是确定毒素含量是否符合相关限量标准、制定谷物饲料和食品中毒素污染控制措施的关健。

本文就脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毒性特征，常用检测方法及最新研究进展进行综述。

本文综述了脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毒性及该毒素的分析方法，比较各自的优、缺点。

【关键词】脱氧雪腐镰刀菌烯醇，毒性，检测ｌ前言脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ｄｅｏｘｙｎｉｖａｌｅｎｏｌ，ＤＯＮ）又称呕吐毒素（ｖｏｍｉｔｏｘｉｎ），主要是由镰刀菌的某些种产生的化学结构和生物活性相似的有毒代谢产物———单端抱霉烯族化合物中的一种。

ＤＯＮ的主要产生菌是禾谷镰刀菌，据报道也有其它一些镰刀菌可产生［１］。

ＤＯＮ于１９７２年由日本的Ｍｏｒｏｏｋａ等首次分离，同年Ｙｏｓｈｉｚａｗａ等阐明了这种新的真菌毒素的结构，并将其命名为４－ｄｅｏｘｙｎｉｖａｌｅｎｏｌ（ＤＯＮ）。

ＤＯＮ的化学名为３α，７α，１５－三羟基－１２，１３一环氧单端孢酶－９－烯－８酮，是一种Ｂ型单端孢酶烯族化合物，为一种倍半烯衍生物。

ＤＯＮ分子量为２９６．３，分子式为Ｃ１５Ｈ２０Ｏ６，结晶为无色针状，熔点为１５１一１５３℃。

ＤＯＮ易溶于水和极性溶剂，但不溶于正己烷和乙醚。

乙酸乙酯和乙睛是长期储存最适合的溶剂。

ＤＯＮ耐热、耐压，弱酸中不分解，加碱及高压处理可以破坏其部分毒力。

２ＤＯＮ的毒理ＤＯＮ广泛存在于全球，主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物，也污染粮食制品，人和动物在误食被该毒素污染的粮谷类后可以产生广泛的毒性效应。

另外，它还常与其它的霉菌毒素如黄曲霉毒素共同污染农作物，进入人体后可以相互影响。

ＤＯＮ在体内可能有一定的蓄积，但无特殊的靶器官，具有很强的细胞毒性。

人畜摄人了被ＤＯＮ污染的食物后，会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳和反应迟钝等急性中毒症状，严重时损害造血系统造成死亡。

肉制品中真菌毒素污染现状与控制研究进展 张楠;杨勇;孙霞;杨敏;李怡菲;李仁杰;贠懿纯;李诚;冯朝辉 【摘 要】简要介绍了肉制品中常见真菌毒素(黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、展青霉素、桔霉素)的来源及其危害,重点介绍了肉制品中常见真菌毒素的污染现状及其控制方法,并展望了肉制品中真菌毒素未来的研究方向.

【期刊名称】《食品与发酵工业》 【年(卷),期】2016(042)010 【总页数】7页(P243-249) 【关键词】肉制品;真菌毒素;污染;控制 【作 者】张楠;杨勇;孙霞;杨敏;李怡菲;李仁杰;贠懿纯;李诚;冯朝辉 【作者单位】四川农业大学食品学院,四川雅安,625014;四川农业大学食品学院,四川雅安,625014;四川农业大学食品学院,四川雅安,625014;四川农业大学食品学院,四川雅安,625014;四川农业大学食品学院,四川雅安,625014;四川农业大学食品学院,四川雅安,625014;四川农业大学食品学院,四川雅安,625014;四川农业大学食品学院,四川雅安,625014;四川农业大学食品学院,四川雅安,625014

【正文语种】中 文 真菌毒素是真菌在生长繁殖过程中产生的次生有毒代谢产物，对公众健康构成较大风险的真菌毒素主要有黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、赭曲霉毒素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、展青霉素、玉米赤霉烯酮[1]。常见的真菌毒素大部分来源于曲霉菌属(Aspergillus)、镰刀菌属(Fusarium)、青霉菌属(Penicillium)等，且大多数具有毒性、致畸性、致癌性和致突变性。由于动物饲料和肉制品中真菌毒素的产生受多种因素影响，若不加以控制，真菌毒素将通过被其污染的饲料和食品进入食物链而转移到人体中[2-3]，且真菌毒素之间存在毒性的协作和附加作用，少量的真菌毒素就会对机体造成严重的损伤[4]。PLEADIN等[5]研究发现，在410个肉制品中检测出发酵香肠和火腿中赭曲霉毒素A的含量比推荐的最大限量(1 μg/kg)高出5～10(5.1～9.95 μg/kg)倍。因此，检测并控制肉制品中真菌毒素的含量，对于保障食品安全与人类健康有着重要的意义。 肉制品中较为常见的真菌毒素包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、展青霉素、桔霉素等，其中黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A是存在于肉制品中毒性较强的2种真菌毒素，也是国内外学者研究最多的2种真菌毒素。肉制品中真菌毒素的来源主要分为4个方面：1是动物食用了被真菌毒素污染的动物饲料而残留在血液、组织和肉中；2是为了调味以及起到抗氧化等作用，在肉制品中添加了受真菌毒素污染的香辛料，导致最终产品中出现真菌毒素；3是发酵剂未经过严格筛选，存在产毒霉菌而污染肉制品；4是在肉制品的加工、贮藏、运输和销售过程中，环境中的产毒真菌污染产品而产生真菌毒素。然而，我国尚未针对肉及肉制品中真菌毒素的含量制定限量标准，只能参考发达国家的标准来判断肉及肉制品中真菌毒素危害程度和风险程度。欧盟规定食品中黄曲霉毒素B1残留量<2 μg/kg，黄曲霉毒素总量<4 μg/kg；日本规定所有食品中不得检出黄曲霉毒素；绝大多数国家规定食品中赭曲霉毒素残留量<5μg/kg。 黄曲霉毒素(Aflatoxin，AFT)与赭曲霉毒素(Ochratoxin)是肉制品中最常见的2种真菌毒素。AFT是主要由黄曲霉(A.flavus)和寄生曲霉(A.parasiticus)产生的次级代谢产物[6]，是一类二呋喃香豆素衍生物，被公认为目前致癌力最强的天然物质，具有致畸、致细胞突变和抑制免疫机能的作用。肝脏为AFT的主要靶器官，BINTVIHOK[7]等用含3 ppm的黄曲霉毒素B1(AFB1)饲料喂养家禽7天，在第8天和第11天家禽相继死亡，且检测到肝脏中AFB1的残留量比肌肉中的高10倍以上。赭曲霉毒素(Ochratoxin)主要是由曲霉属中的赭曲霉(A.ochraceus)和青霉属中的纯绿青霉(P.verrucosum)产生[8]，其中赭曲霉毒素A(OTA)对农产品危害最大，仅次于AFT[9]，其化学结构为苯甲酸异香豆素。OTA是一种靠食物传播的污染物，除了能抑制人体免疫力、有致畸、致癌作用外，与AFT还存在毒性的加性效应，MALLY等[10]认为OTA在地方性肾病中也扮演了重要角色。动物食用了含OTA的饲料后，在其内脏、组织及血液中会残留有大量的OTA(反刍动物除外), 且已经有许多研究报道从肉制品中检测出OTA[11-13]。 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol，DON) 和玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEN)主要是由玉米赤霉菌(G.zeae)、禾谷镰刀菌(F.graminearum)、黄色镰刀菌(F.culmorum)等多种镰刀菌产生[14]。DON(又称呕吐毒素)是世界大部分农作物中都有检出的单端孢霉烯毒素，不仅对免疫功能有影响，与食管癌的发生也有一定关系。ZEN(又称F-2毒素)具有雌激素作用，对许多哺乳类动物有肝脏毒性、血液毒性、免疫毒性、遗传毒性、致畸性和致癌性[15]。自然界中还存在其约15种衍生物，最常见的是α-玉米赤霉烯醇和β-玉米赤霉烯醇。ZEN一般通过污染的粮食作物进入食物链，可通过被其污染的肉、奶和蛋等动物性食品积蓄在人体内[16]。 展青霉素(Patulin，PTL)又名棒曲霉毒素，主要是由青霉属(Penicillium)、曲霉属(Aspergillus)以及丝衣霉属(Byssochlamys)的一些真菌产生[17]，有“三致”作用且具有广泛的生理及细胞毒性[18]。PTL危害范围很广，除主要污染苹果、梨、番茄、胡萝卜等水果和蔬菜以外，在干腌火腿[19]中也有检出。 桔霉素(Citrinin，CIT)主要由青霉属(Penicillium)、曲霉属(Aspergillus)和红曲霉属(Monascus)产生[20]，是具有肾毒性、致畸性、致癌性和致突变性的次级代谢产物。青霉和曲霉主要污染动物饲料、谷物、水果、肉类等，因此CIT广泛存在于这些食物及其制品中，并且动物饲料中CIT常常与OTA同时出现[21]。 此外，在200余种真菌毒素中，T-2毒素、HT-毒素、环匹阿尼酸、蛇形毒素、麦角碱、杂色曲霉素等为动物饲料中常见的毒素[4]，它们不仅对动物的健康构成威胁，还对人类的食品安全造成潜在的隐患。 就国内而言，肉及肉制品中真菌毒素的研究还非常少，现有的研究主要是针对成品中某一种真菌毒素的检测方法和含量进行研究。李磊等[22]从40份腊肉制品中检出9份含OTA，平均含量为0.276 8 μg/kg；25份腊猪肉中有8份检出了OTA，含量在0～1.07 μg/kg之间；10份鸭肉中有1份检出，其浓度为0.94 μg/kg；5份鸡肉均未检出OTA。邹程焓[23]对30个肉制品样品分别用HPLC和GC进行分析，DON含量均在检测线以下，表明受污染情况低，状况良好。王芳[24]测得2种香肠样品中CIT含量分别8.2 μg/kg和13.6 μg/kg。陈俊霖[25]采用HPLC-FLC检测到肉干制品中CIT为0.68 mg/kg。由于原料肉种类及其产地的差异、肉制品种类的差异、真菌毒素种类的差异、抽样方法和抽样范围的差异，导致了不同肉制品中测得的真菌毒素含量差异较大。此外，由于抽查的样本数量偏小，国内研究较少，无法真实而全面地反映国内肉制品中真菌毒素的污染情况，且无法判断成品中真菌毒素的来源。 就国外而言，现有关于肉制品中真菌毒素的研究主要集中于含量的检测。不同于国内的是，国外的研究抽查的样本数量更大，范围更广，更重视对同一样品中的多种真菌毒素进行分析。ASEFA等[26]对挪威干腌肉制品的霉菌污染物研究结果表明，从161个样品中得到的264个菌株属于20种不同微生物，包含4种真菌，其中分离得到的青霉菌可能是消费者的过敏原。BOGS等[27]从腌肉和肉品成熟车间中分离得到62株青霉菌中有11株菌对特定PCR反应呈阳性，且均能产OTA。SONJAK等[28]对干腌肉制品、肉制品加工工厂的空气和使用的盐中青霉菌的研究结果表明，OTA可通过盐中的青霉菌产OTA而污染干腌肉制品。MARKOV等[29]随机抽查的90个克罗地亚香肠样品中，有68.88%的样品真菌毒素检出为阳性，OTA、CIT、AFB1检出率分别为64.44%、4.44%和10%。其中OTA和AFB1检出的最大浓度分别为7.83 μg/kg和3.0 μg/kg。IQBAL等[30]对115个鸡肉样品和80个鸡蛋样品中真菌毒素进行了检测，其中AFT、OTA、ZEN的检出率分别为35%和28%、41%和35%、52%和32%，最高浓度分别为8.01、4.70、5.10 μg/kg。PLEADIN等[31]研究结果表明，原料肉中OTA含量最大值为3.18 μg/kg，180天发酵后破损的样品中OTA的最大值为17.0 μg/kg，这也表明了肉制品中真菌毒素来源于原料肉和发酵过程中的污染。ABD-ELGHANY等[32]采用免疫亲和荧光分析法对50个埃及肉制品中AFT和OTA进行了检测，其平均值分别为1.1 μg/kg和5.23 μg/kg。若以发达国家较为严格的限量标准来判断，肉及肉制品中真菌毒素的危害已不容忽视。 肉及肉制品中的真菌毒素来自于饲料、辅料、发酵剂和生产环境4个主要方面。因此，从饲料着手严格按照国家标准控制饲料中真菌毒素含量，降低遗留效应从而保证原料肉的安全；从辅料着手严格控制辅料和添加剂中真菌毒素含量防止二次污染；从发酵剂着手严格筛选优良纯种发酵剂保证成品安全；以及从加工着手严格按照良好作业规范(GMP)和标准作业程序(SOP)进行生产这4个方面，可大大降低肉及肉制品中真菌毒素的含量。 3.1 控制饲料中真菌毒素含量保证原料肉安全 霉菌在动物饲料中分布不均，霉变、破损等现象大多十分明显，因此可通过挑选霉粒和搓洗的方法除去饲料表面大量的霉菌和毒素，也可通过碾压和研磨饲料的方法除去部分真菌毒素[33]，从而大大降低动物饲料中真菌毒素的含量保证原料肉安全。虽然这些方法脱毒效果显著，但是在耗费大量人力的同时还存在不彻底性，因此该方法必须和其他方法相结合才能有效控制肉制品中真菌毒素的含量。 高温处理法可通过蒸煮、烘烤等方式将温度提升到真菌毒素的熔点以上，从而促使

真菌毒素的这些方面，你需要知道同其他检测项目一样，真菌毒素的检测也包括抽样、制样、分析检测等步骤。

那么，这些步骤中哪个对真菌毒素的检测结果影响较大呢？根据相关文献（1974，Whitaker & Dicken）报道，在真菌毒素分析检测过程中，其误差产生的概率如下图所示。

从上图我们可以看出：第一步的抽样是最为关键的，其错误概率高达88%，二次抽样错误概率为10%，而分析方法的错误概率仅为2%，由此可见抽样及二次抽样的关键性。

抽样的关键造成抽样及二次抽样步骤容易出现误差主要是两方面的原因：1.真菌毒素在样品中的分布是不均匀的上图以蛋白质和真菌毒素在样品中的分布情况向我们表明真菌毒素分布的不均匀性。

2.真菌毒素检测的精度都在ppb级别ppb即10亿分之一，是一个非常微量的单位，没有足够的抽样量，会造成很大的误差影响。

下表为美国农业部提供的信息，在一卡车玉米中加标从上表可以得知，如果只取0.45公斤的玉米，检测到的污染数值范围为0-46.9ppb；而若抽样量为4.5公斤，其检测范围为11.6-28.4ppb，由此可见因为抽样量的不同，引起的误差范围就会相去甚远。

抽样注意事项1.抽样的原则由于真菌毒素分布的随机性，抽样的时候要做到多点、随机、均匀，使得每个部位都有相同的概率被取到。

2.抽样的数量FAO和WTO建议没200公斤物料抽样一次，如果所抽样品是混合比较均匀的粉状物料，可以适当的减少抽样点数在实际工作中由于人力、物力有限，所以在实际操作中抽样点数应根据企业实际情况以及物料情况来确定抽样点数。

3.抽样量原料送检样品抽样成品可在500g，原料样品在1000g，这样可以保证检测的最低检测量和检测样品的霉菌毒素的分布均一性。

具体抽样方法1.流动物料抽样•抽样方式：采用适当的取样设备，并控制物料流的速度，使得采样器能从整个物料流截面采样而不会溢出。

•适用范围：适用于运输卡车、火车、轮船散装物料卸料时；筒仓物料存储抽样口抽样；饲料企业打包出料口抽样。

96·FOOD INDUSTRY

分析 检测食品中黄曲霉毒素检测方法研究进展

武洪东 梁山县检验检测中心黄曲霉毒素是一种由黄曲霉菌以及寄生曲

霉等霉菌经过聚酮途径的代谢产生的一种代谢产物，并不是一种单一的物质，而是结构相似、功能相似的一类化合物的总称，我们统一将其称为黄曲霉极其衍生物，这是一种化学性质极其稳定的一种真菌毒素，毒性比较强，误食以后则会可能有致癌的风险，这主要是由于食物在使用以后被人体消化吸收，而黄曲霉毒素具有极强的肝脏亲和力，进而会导致肝出血甚至是肝癌。黄曲霉毒素的前处理技术最初，国家对于黄曲霉毒素的重视程度并不是很高，但是随着全国范围内黄曲霉毒素污染事件发生的越来越多，所以引起了世界范围内的相关机构以及消费者对于食品安全的重视，所以我们当前对于食品检验技术必然会越来越严格，对于进口产品，特别是农产品以及农产品衍生物，都有了限定的黄曲霉毒素含量标准。在对于食品当中的黄曲霉进行检测时，我们在对于黄曲霉毒素进行处理之前，首先需要对黄曲霉毒素进行提取与提纯，我们采用的黄曲霉毒素提取的主要方法是萃取法，利用各种不同的溶剂对于我们已经打碎的食物样品当中的黄曲霉毒素进行提取，一般我们在进行溶剂的选择时，首先应该考虑到当前所需要提取的黄曲霉毒素自身的理化形式以及在提取完成以后下一步的提纯工作应该如何进行，还有在后续的检测过程当中可能会出现的干扰。常见的萃取溶剂有甲醇以及乙腈的水溶液，除此之外，近年来最新出现的超临界流体萃取技术和加压流体萃取技术等技术也逐渐开始在黄曲霉毒素的萃取过程当中开始普及。黄曲霉毒素的检测方法对于黄曲霉毒素的检测方法，我们已经发现的有四十多中，在此基础上，最近有衍生出了一系列全新的检测技术，最常用的检测方法是色谱法，除此之外还有以免疫学知识作为理论依据的检测方法具有实验的整体周期比较短、实验使用到的设备比较简单、检测方法的特异性比较强以及灵敏度高、成本低等多项优点，成为了当前检测黄曲霉毒素又一大有利方法，下面简单介绍几个比较常用的检测方法：

黄曲霉毒素去除方法研究进展黄曲霉毒素(aflatoxin, AFT)是由真菌属的黄曲霉〔Aspergillus flavus〕和寄生曲霉〔Aspergillus parasiticus〕等产生的一类带有香豆素和双呋喃环的毒性代产物。

已经鉴定的黄曲霉毒素有20多种，常见的主要有AFB1, AFB2, AFG1和AFG2(构造见图1)，在污染的农产品和食物中最常见的是AFB1。

另外，AFB1的代产物黄曲霉毒素M1也是人们关注较多的一类黄曲霉毒素，但黄曲霉毒素M1通常存在于动物组织和体液中〔如牛奶和尿液〕。

图1 四种黄曲霉毒素的构造式1黄曲霉毒素的理化性质黄曲霉毒素易溶于乙腈、甲醇、氯仿、二甲基亚砜有机溶剂，微溶于水，不溶于乙醚、石油醚和正己烷等[1]。

黄曲霉毒素在酸性条件下比拟稳定，在碱性条件下，可以破坏黄曲霉毒素的酯环，生成易溶于水的香豆素盐而失去毒性。

黄曲霉毒素对热稳定，在100℃下，20h也不被破坏，只有在268℃以上的高温下才裂解，故一般的烹调过程对黄曲霉毒素没有任何影响[2]。

黄曲霉毒素广泛存在于花生、玉米、小麦、大米等农产品中，尤其是在开展中地区，在高热高湿环境下由于贮存方式不当，这些农产品容易累积黄曲霉毒素。

国际癌症研究机构于1993年将黄曲霉毒素划定为I类致癌物，其中AFB1是被公认的到目前为止致癌力最强的物质。

黄曲霉毒素在体主要分布在肝脏，人体长期摄入含有黄曲霉毒素的食物容易患肝癌[3]。

最短在24周就可以出现肝脏坏死、癌变、结肠癌、胃癌等，严重时可导致死亡，同时，黄曲霉毒素对其他多种组织器官也能造成严重损害，如肾脏，黄曲霉毒素的致癌、致畸、致细胞突变作用己被证实[4]。

AFB1的毒性是氰化钾的10倍，砒霜的68倍，三聚氰胺的416倍。

此外，黄曲霉毒素的致癌力是二甲基业硝胺的70倍，苯并芘〔BHC〕的10000倍[5-6]。

3黄曲霉毒素的限量标准每年世界上约有25%的食物受黄曲霉毒素的污染，特别是花生、坚果、香料和谷物更易受黄曲霉毒素的污染。