5.真菌毒素的检测解析
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真菌毒素是一些真菌,如曲霉属、青霉属及镰孢属,在生长过程中产生的易引起人和动物病理变化和生理变态的次级代谢产物。
研究证实,真菌毒素可以引起人类和动物的急性或慢性中毒,可损害机体的肝脏、肾脏、神经组织、造血组织及皮肤组织等,部分真菌毒素已被证实具有致癌、致畸、致细胞突变的“三致”作用。
据世界粮农组织(FAO) 报告,全球每年约有25%的农作物遭受真菌及其毒素污染,造成的经济损失每年达数千亿美元。
几种典型的真菌毒素及其危害:迄今发现已有300 种真菌毒素,粮食中主要真菌毒素有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、展青霉素、单端孢霉烯族毒素、玉米赤霉烯酮、伏马毒素等。
不同种类的毒素有各自的特点及危害。
(一)黄曲霉毒素(Aflatoxin, AFT)黄曲霉毒素(AFT)是由黄曲霉和寄生曲霉所产生的一种次生代谢物,具有很强的毒性和致癌性。
AFT是一类结构相似的物质,包括B1,B2,G1,G2,M1,M2,P1,R1等十七种异构体。
在紫外线的照射下可发出荧光,根据荧光颜色的不同,可以把黄曲霉毒素分为B族和G族。
AFT耐热,加热到280℃是才发生裂解而破坏,所以一般的烹调加工很难将其清除。
AFT 在中性、酸性溶液中很稳定,在PH9-10的强碱性溶液中,能迅速分解,产生钠盐,但此反应是可逆的,在酸性条件下又能形成带有荧光的AFT。
1、易受污染的食品黄曲霉毒素对粮食食品的污染非常广泛,主要受污染的食品有:花生及其制品、玉米、棉籽、大米、小麦、大麦及豆类及其制品。
其中花生及其制品、玉米污染严重,其次是大米、大麦,豆类很少受污染。
2、对人体的危害AFT按急性毒性分级属于极毒类,其LD50为0.24~0.32mg/KgBW(雏鸭)对人主要引起急性中毒性肝炎和中毒性脑病。
黄曲霉毒素的慢性中毒发生在高温高湿地区黄曲霉毒素污染严重的地区,表现类似雷耶氏症,如1963年发现于泰国的神经系统疾病,每年泰国有几百名1-13岁的儿童,由于类似于雷耶氏症的急性脑病和内脏脂肪变性而死亡。
真菌毒素1.黄曲霉毒素:黄曲霉毒素(AFT)是一类化学结构类似的化合物,均为二氢呋喃香豆素的衍生物。
黄曲霉毒素是主要由黄曲霉(aspergillus flavus))寄生曲霉(a.parasiticus))产生的次生代谢产物,在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。
发现历史20世纪60年代在英国发生的十万只火鸡突发性死亡事件被确认与从巴西进口的花生粕有关.进一步的黄曲霉毒素B1调研证明,这些花生粕被一种来自真菌的有毒物质污染这些研究工作最终使人们发现了黄曲霉(Aspergillus.flavus)产生的有毒代谢物质。
黄曲霉毒素(Aflatoxins).是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物特曲霉也能产生黄曲霉毒素,但产量较少.产生的黄曲霉毒素主要有B1,B2,G1,G2 以及另外两种代谢产物M1,M2.其中M1 和M2是从牛奶中分离出来的.B1,B2,G1,G2,M1 和M2 在分子结构上十分接近.。
发展史1960年,英国发现有10万只火鸡死于一种以前没见过的病,被称为“火鸡X病”,再后来鸭子也被波及。
追根溯源,最大的嫌疑是饲料。
这些可怜的火鸡和鸭子吃的是花生饼。
花生饼是花生榨油之后剩下的残渣,富含蛋白质,是很好的禽畜饲料。
科学家们很快从花生饼中找到了罪魁祸首,一种真菌产生的毒素。
它被命名为“aflatoxin ”,就是全国人民在蒙牛的努力下学会的又一个科学名词——“黄曲霉毒素”。
自那以后,黄曲霉毒素就获得了科学家们的特别关照,对它的研究可能是所有的真菌毒素中最深入最广泛的。
目前发现的黄曲霉素有十几种。
蒙牛介绍给公众的“黄曲霉毒素M1”主要出现在各种奶中。
M就是“奶”的意思。
它还有一个兄弟M2。
其实M1和M2并不是黄曲霉菌产生的,毒性也并不是最强。
毒性最强的排行“B1”,B表示蓝色,因为它在紫外光的照射下会发出蓝色荧光。
除了亲兄弟B2之外,它还有堂兄弟G1和G2,因为在紫外光下发射黄绿色荧光而得名。
真菌毒素真菌是微生物中的高等生物,是一类有细胞壁,不含叶绿素,无根叶茎,以腐生或寄生方式生存,能进行有性或无性繁殖的微生物。
自然界中的真菌分布十分广泛,并可作为食品中正常菌相的一部分用来加工食品,但在特定情况下又可造成食品的腐败变质。
有些真菌本身不仅作为病原体引发人类疾病,其代谢产物真菌毒素(mycotoxins)也对人及动物造成危害。
真菌毒素是农产品的主要污染物之一,人畜进食被其污染的粮油食品可导致急、慢性真菌毒素中毒症(myco—toxicc)ses)。
我国是一个农业大国,小麦、玉米、大米及花生等是居民的主要食品原料,每年因霉变而导致25000t粮食不能食用。
出口粮食由于真菌毒素超过输入国限量标准而遭警告或降低等级的现象时有发生。
某些食物中毒、慢性病及癌症的发生与摄入含有真菌毒素的食品有关。
1985~1992年,我国河南、广西、河北、安徽和江苏等省的部分地区共发生由赤霉病麦或霉玉米导致的人畜脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxvnivalenol,DON)中毒15起。
特别是在1991年春夏之交,我国部分省市遭受特大洪涝灾害,受灾严重的安徽、江苏、河南等省正值小麦收获季节,暴雨使小麦的收割、脱粒等操作无法进行,导致大量小麦发霉,仅安徽一省就有13万多人因食用霉变小麦而发生急性中毒,严重危害了人民的身体健康。
一、真菌毒素的种类目前为止,全世界已经发现了300多种结构不同的真菌毒素,其中已经被分离鉴定的有20多种。
Hesseltine就真菌毒素对农业及人类健康的危害程度和对社会经济发展影响的重要性,对世界上30多个国家和地区进行了调查,结果表明,排在第一位的是黄曲霉毒素,其次为赭曲霉毒素A(ochratoxin A,0TA)、单端孢霉烯族化合物、玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)、橘青霉素(citrinin)、杂色曲霉素(sterigmatocystins,ST)、展青霉素(patulin,Pat)、圆弧偶氮酸(cycloplazonlc acid,CPA)等,该项调查进行之时伏马菌素(fumonisins,FMs)尚未被发现。
分析检测玉米中真菌毒素污染情况分析柴彦军(河北省唐山市滦南县第一中学,河北唐山 063000)摘 要:目的:对2020年在11个省份收集的85份玉米样品进行真菌毒素检测分析。
方法:采用胶体定量免疫层析法和酶联免疫试剂盒法对样品中黄曲霉毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)及玉米赤霉烯酮的含量进行检测,并按照《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》(GB 2761—2017)对结果进行分析评价。
结果:黄曲霉毒素B1的检出最高含量为38.39 μg/kg,超标率为3.5%;呕吐毒素的检出最高含量为3 087.2 μg/kg,超标率34.1%;玉米赤霉烯酮检出最高含量为2 351.0 μg/kg,超标率为40.0%。
结论:2020年收集的玉米中真菌毒素超标率较高,其中呕吐毒素和玉米赤霉烯酮污染程度较重,黄曲霉毒素B1的污染比其余的2种毒素污染轻,玉米中真菌毒素总体污染情况需引起重视。
关键词:玉米;真菌毒素;污染分析真菌毒素是真菌产生的次级代谢产物,种类繁多,人们已发现的真菌毒素有400多种,且在粮食和饲料原料中普遍存在[1-2]。
常见的真菌毒素种类主要有黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)等,玉米、花生、稻谷、小麦等谷物及其制品容易受到真菌毒素的污染[3]。
黄曲霉毒素具有较强的毒性和致癌性,玉米赤霉烯酮有雌激素作用,会造成神经系统亢奋,危害母畜的生殖系统。
呕吐毒素会引起猪拒食、生长能力以及对传染病的抵抗能力下降[4-5]。
真菌毒素的污染会给动物带来严重危害,人体也会通过食品的食物链传播间接遭受真菌毒素的危害。
通过对粮食及饲料原料中真菌毒素的严格检测,监管与防治粮食及饲料原料中真菌毒素污染是十分重要的。
在基层由于条件限制,无法使用高效液相色谱法/液相色谱-串联质谱法进行玉米中真菌毒素的检测,快速检测方法可以在不用大型仪器的前提下,快速了解玉米中真菌毒素污染水平,对粮食质量安全控制与饲料原料质量安全控制具有重大意义。
UPLC-MSMS摘要】目的采用超高压液相色谱- 串联质谱联用技术UPLC- M S /M S,同时测定小麦粉中5 种真菌毒素。
方法样品用84 /16 的乙腈/水混合液匀浆提取超声提取30 m in,离心后,上清液经MycoSep226 多功能净化柱净化,经AcquityUPLC BEHC18 柱( 50 mm × 2.1 mm,1.7 μm particle size)分离,6 m in 内5 种真菌毒素完全分离。
结果采用外标法定量,在2μg/L~100μg/L 的浓度范围内呈良好的线性关系,r>0.996。
加标平均回收率为:82%~110,RSD:1.7%~9.6%;检出限<2.0μg/kg。
结论该方法具有预处理简单、检测速度快、灵敏度高的优点,可适用于小麦粉样品中真菌毒素的确认和准确定量检测,可满足我国对真菌毒素的最低检出要求。
运用建立的方法对广东省各地的396 份小麦粉进行含量测定。
【关键词】外标法;UPLC- MS /MS;小麦粉;真菌毒素【中图分类号】R657.63【文献标识码】A【文章编号】1276-7808(2015)-07-369-02大多数的谷物非常容易遭受真菌的污染,严重影响着食品安全[ 1]。
单端孢霉烯族B类毒素[Deoxynivalenol(DON)、3- Acetyldeoxynivalenol( 3- ADON)、15 - Ace tyldeoxynivalenol(15 - ADON)、Nivalenol(NIV)、Zearalenone(ZON)],是最为普遍存在的污染真菌。
如果食用含上述毒素的谷物食品,则会产生极大的毒副作用。
单端孢霉烯族B 类毒素能够导致厌食、呕吐、贫血、出血以及免疫抑制的症状[2]。
因此,欧盟对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZON)等分别做出了500~1000μg/kg,20~75μg/kg的限量规定;食品安全国家标准GB 2761—2011食品安全国家标准食品中真菌毒素限量中规定谷物及其制品(大麦、小麦、麦片、小麦粉)中DON限量指标是1000μg/kg,谷物及其制品(小麦、小麦粉)中ZON限量指标是60μg/kg。
中药有害成分的检测方法中药是中国传统医药的重要组成部分,其疗效受到广大群众的认可和使用。
然而,由于中药的种类繁多,并且往往以天然植物为原料,中药中存在一定的有害成分潜在风险。
因此,对中药中存在的有害成分进行检测是保障中药质量和人民健康的重要举措。
中药中的有害成分主要包括重金属、农药残留、霉菌和真菌毒素等。
这些成分可能对人体造成慢性毒性作用,引发中毒和各种健康问题。
为了确保中药的安全性和疗效,需要进行有效的检测方法。
下面将详细介绍几种常用的中药有害成分检测方法。
首先,重金属是中药中常见的有害成分之一。
由于土壤、水源等环境因素的污染,中药中可能存在铅、汞、砷等重金属。
这些重金属会积累在人体内,引起神经系统、肾脏和肝脏等器官的损伤。
常用的重金属检测方法包括原子吸收光谱法、电感耦合等离子体质谱法和荧光光谱法。
这些方法能够准确地分析中药中重金属元素的含量,为判断中药是否超过安全标准提供依据。
其次,农药残留也是中药中常见的有害成分。
农药在种植过程中被使用,残留在中药材中,对人体健康有一定风险。
为了检测中药中的农药残留,常用的方法包括气相色谱法、高效液相色谱法和液质联用技术。
这些方法能够对农药的种类和含量进行快速、准确的检测,为中药质量的控制提供技术支持。
此外,中药中的霉菌和真菌毒素也是有害成分的来源之一。
中药常以天然植物为原料制成,加工过程中容易受到霉菌和真菌的污染。
霉菌和真菌毒素对人体健康的影响很大,可能诱发肝脏疾病和免疫系统损伤等。
为了检测中药中的霉菌和真菌毒素,常用的方法包括聚合酶链反应法、高效液相色谱法和毛细管电泳法。
通过这些方法可以对霉菌和真菌毒素进行快速而准确的检测,保障中药的安全性和质量。
总之,对中药中的有害成分进行检测是保障中药质量和人民健康的重要手段。
通过重金属、农药残留、霉菌和真菌毒素的检测,可以及时发现和排除潜在的安全隐患,保障中药的品质和疗效。
中药的安全性和有效性对于保障人民的健康具有重要意义,因此,中药有害成分的检测方法必须不断完善,并得到广泛应用。
食品微生物检验习题含参考答案一、单选题(共40题,每题1分,共40分)1、真菌繁殖的主要特征是()A、营养类型B、孢子C、细胞壁结构D、隔壁正确答案:B2、细菌的芽孢是A、细菌生长发育的一个阶段B、一种细菌接合的通道C、一种繁殖方式D、一种运动器官正确答案:A3、溶血性链球菌在血清肉汤中生长时,管中的现象是A、块状沉淀B、絮状或颗粒状沉淀C、均匀生长D、混浊正确答案:B4、细菌在生物学分类上属于()A、多核生物类B、原核生物类C、真核生物类D、单核生物类正确答案:B5、血清培养基用流通蒸汽加热灭菌,通常温度不超过100℃,应每日()灭菌A、1次B、2次C、3次D、4次正确答案:A6、下列描述不正确的是A、由于低温对微生物生长有抑制作用,故广泛用于保藏食品和菌种。
B、天然培养基的化学成分不十分明确。
C、巴氏消毒是由巴斯德创建的。
D、对于厌氧菌,氧气对其有毒,但不可致死正确答案:D7、革兰氏染色中结晶紫染色的时间是()A、20-30 minB、1-2 minC、1-2sD、20-30 s正确答案:B8、豆奶出现变质菌落总数超标的主要原因为()造成A、水质B、杀菌不彻底C、包装污染D、配料污染正确答案:B9、紫外线杀菌消毒空气时,开灯照射()关灯,间隔30分钟后后方可进入室内工作。
A、30minB、20minC、15minD、10min正确答案:A10、酵母菌的主要繁殖方式为()A、有性孢子繁殖B、分裂繁殖C、无性孢子繁殖D、出芽繁殖正确答案:D11、生鲜牛乳中抗生素残留试验选用菌种为()A、丙酮菌B、乳酸杆菌C、酵母菌D、嗜热乳酸链球菌正确答案:D12、以下属于酸性染色剂的是()A、伊红B、孔雀绿C、结晶紫D、番红正确答案:A13、细菌生长繁殖中需营养物质其中的铵盐、硝酸盐、蛋白胨等属于哪一类物质()A、无机盐类B、碳源C、氮源D、维生素类正确答案:C14、志贺氏菌属包括福氏志贺氏菌等()个群A、4B、8C、5D、6正确答案:A15、以下哪种方法适于衰退菌种的复壮A、纯种分离B、采用有效的保藏方法C、低温冷藏D、无菌操作正确答案:A16、革兰氏染色的关键操作步骤是()A、复染B、酒精脱色C、碘液固定D、结晶紫染色正确答案:B17、国家标准有效期一般为()年A、10年B、3年C、2年D、5 年正确答案:D18、凡能满足某一菌种的野生型菌株营养要求的合成培养基简称为:()A、M.MB、C.MC、S.MD、N.M正确答案:A19、含血清培养基应采用下面的()法灭菌。