芦丁和槲皮素的化学检识(课堂PPT)
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槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定槐米为豆科植物槐(Sophora japonica L .)的未开放花蕾。
味苦性凉、具清热凉血、止血之功。
常用于治疗多种出血症:肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。
槐米常炒炭应用。
槐米的主要化学成分为芦丁,其含量可达12~16%,其次含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。
芦丁具有Vitp 样作用,可降低毛细血管脆性和调节通透性。
临床上用作毛细血管脆性引起的出血症,常作为高血压症的辅助治疗药。
[目的要求]1.通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2.掌握槲皮素的制备原理及操作。
3.熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定中的应用4.通过芦丁的结构检识,了解苷类结构研究的一般程序和方法。
[实验原理]芦丁(rutin ):C 27H 30O 16·3H 2O ,浅黄色针状结晶,mp174~178℃(含三分子水);188℃(无水物)。
难溶于冷水(1:8000~10000),可溶于热水(1:180~200),热甲醇(1:10),冷甲醇(1:100),热乙醇(1:60),冷乙醇(1:650);难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等,易溶于碱液。
槲皮素(quercetin ):C 15H 10O 7·2H 2O ,黄色结晶,mp313~314℃(2分子结晶水),316℃(无水物)。
能溶于冷乙醇(1:290),易溶于沸乙醇(1:23),可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等;难溶于水、苯、石油醚等溶剂。
芦丁为黄酮苷,分子中具有酚羟基,显酸性,可溶于稀碱液中,在酸液中沉淀析出,可利用此性质进行提取分离。
利用芦丁易溶热水、热乙醇,较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。
芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖,依此进行制备槲皮素。
通过纸色谱及紫外光谱进行黄酮及糖的鉴定。
[实验内容]一、芦丁的提取分离及精制方法⑴槐米粗粉(50g)置1000ml烧杯中,加入500ml饱和石灰水,加热,并维持pH8~9煮沸20分钟,趁热用脱脂棉滤过滤液药渣用300ml饱和石灰水煮沸10分钟,维持pH8~9趁热滤过滤液药渣(×)合并70℃下用浓HCl调pH至4 ~5沉淀低温(80℃)干燥,称重。
槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定实验名称:槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定实验目的:1)掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理及操作,学会芦丁的精制与水解方法。
2)能运用化学法、色谱法鉴定芦丁。
实验器材:槐花粗粉石灰乳硼砂烧杯纱布蒸馏水抽滤装置盐酸硫酸三角烧杯镁粉α-萘酚硅胶GBa(OH)2 FeCl3K3[Fe(CN)6]苯胺-联苯二甲酸芦丁标准品槲皮素标准品葡萄糖标准品鼠李糖标准品参考文献:(一)主要成分的结构及性质槐花系豆科植物Sophora japonica L.的干燥花蕾。
其主要有效成分为芦丁,芦丁在槐花花蕾中含量高,《药典》规定槐花中芦丁含量不得少于20.0%。
其结构为槲皮素-3-O-芸香糖苷。
(二)基本原理芦丁分子中有较多的酚羟基,有弱酸性,可与碱成盐而溶于水中,加酸酸化后可沉淀析出,因而用碱溶酸沉法提取芦丁。
芦丁的精制是利用它在冷热水中的溶解差异进行的。
(三)操作步骤1.芦丁的提取称取槐花粗粉,置500ml烧杯中,加入0.4%硼砂沸水溶液200ml,在搅拌下加入石灰乳,调至pH8~9,加热微沸20分钟(注意保持pH8~9),并随时补充蒸发的水分,趁热用四层纱布滤过。
同样操作再提取一次,合并两次滤液。
滤液在60~70oC用浓HCl调至pH 3~4,静置过夜使沉淀完全,抽滤,沉淀用蒸馏水洗2~3次,抽干,置空气中晾干,得芦丁粗品。
2.芦丁的精制称量粗品芦丁,按1:200的比例悬浮于蒸馏水中,煮沸10分钟使芦丁全部溶解,趁热抽滤,冷却滤液,静置析晶。
抽滤,结晶置空气中晾干或60~70oC干燥,得精制芦丁,称重,计算收率。
3.芦丁的水解取芦丁,研细后置于250ml三角烧杯中,加入2%H2SO4溶液100ml,直火加热微沸约40分钟,至析出鲜黄色沉淀不再增加为止,放冷抽滤,滤液保留作糖检查,沉淀用少量水洗去酸,抽干水分,晾干称重,得粗制槲皮素,然后用乙醇(95%乙醇约15ml)重结晶得精制槲皮素。