肺炎克雷伯实验报告

第1篇一、实验目的1. 了解细菌的基本形态结构。

2. 掌握细菌的分离、纯化和鉴定方法。

3. 学习细菌生理生化反应的检测原理和应用。

二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有典型的原核细胞结构。

通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应，可以鉴定细菌的种类。

三、实验材料与仪器1. 材料：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等纯菌株。

2. 仪器：显微镜、接种环、培养皿、酒精灯、无菌水、生理盐水、革兰氏染色液、生理生化试剂等。

四、实验方法1. 细菌形态观察- 将细菌涂布在载玻片上，进行革兰氏染色。

- 使用显微镜观察细菌的形态、大小、染色性等特征。

2. 细菌分离与纯化- 将纯菌株接种于琼脂平板，进行划线分离。

- 观察菌落特征，挑选单菌落进行纯化。

3. 细菌生理生化反应检测- 进行糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、V-P试验等。

- 观察反应结果，判断细菌的生理生化特性。

五、实验结果与分析1. 细菌形态观察- 大肠杆菌：革兰氏阴性，呈杆状，两端钝圆。

- 金黄色葡萄球菌：革兰氏阳性，呈球形，呈葡萄串状排列。

- 肺炎克雷伯菌：革兰氏阴性，呈短杆状，两端钝圆。

2. 细菌分离与纯化- 划线分离后，观察到单菌落形成。

3. 细菌生理生化反应检测- 糖发酵试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖。

- 吲哚试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。

- 甲基红试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。

- V-P试验：金黄色葡萄球菌呈阳性，大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均呈阴性。

六、讨论与分析1. 通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应，可以初步鉴定细菌的种类。

2. 细菌的生理生化反应具有特异性，可用于细菌的鉴定和分类。

3. 在实际应用中，细菌的分离、纯化和鉴定是微生物学研究和临床诊断的重要环节。

七、实验结论1. 通过本次实验，我们掌握了细菌的基本形态结构、分离、纯化和鉴定方法。

2. 我们学会了利用生理生化反应进行细菌的鉴定和分类。

3. 本实验有助于提高我们对微生物学基本理论的认识和应用能力。

一、实验目的1. 探讨肺炎的病原学特点。

2. 评估肺炎患者对常用抗生素的敏感性。

3. 为临床治疗肺炎提供科学依据。

二、实验材料1. 实验组：肺炎患者痰液样本（n=30）。

2. 对照组：健康志愿者痰液样本（n=10）。

3. 实验试剂：肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌等病原菌的冻干菌种；抗生素纸片（氨苄西林、头孢噻肟、阿莫西林、左氧氟沙星等）。

4. 实验仪器：细菌培养箱、显微镜、细菌培养皿、酒精灯、无菌操作台等。

三、实验方法1. 样本采集：对肺炎患者和健康志愿者进行痰液采集，严格无菌操作。

2. 细菌培养：将痰液样本接种于血琼脂平板和巧克力琼脂平板，37℃培养24小时。

3. 病原菌鉴定：观察菌落特征，挑取典型菌落进行革兰染色，显微镜观察。

4. 抗生素敏感性试验：将病原菌接种于含有抗生素纸片的琼脂平板上，37℃培养24小时，观察抑菌圈大小。

5. 数据分析：采用SPSS 22.0软件对实验数据进行分析。

四、实验结果1. 病原菌鉴定：肺炎患者痰液中分离出肺炎克雷伯菌（n=12）、铜绿假单胞菌（n=8）、金黄色葡萄球菌（n=5）、肺炎链球菌（n=5）；健康志愿者痰液中未分离出病原菌。

2. 抗生素敏感性试验结果：- 肺炎克雷伯菌：氨苄西林（敏感）、头孢噻肟（耐药）、阿莫西林（耐药）、左氧氟沙星（敏感）。

- 铜绿假单胞菌：氨苄西林（耐药）、头孢噻肟（耐药）、阿莫西林（耐药）、左氧氟沙星（敏感）。

- 金黄色葡萄球菌：氨苄西林（耐药）、头孢噻肟（耐药）、阿莫西林（耐药）、左氧氟沙星（耐药）。

- 肺炎链球菌：氨苄西林（耐药）、头孢噻肟（敏感）、阿莫西林（耐药）、左氧氟沙星（耐药）。

五、讨论1. 肺炎病原菌的多样性：本实验结果显示，肺炎患者痰液中分离出的病原菌种类较多，包括肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌等。

这提示临床在治疗肺炎时应综合考虑多种病原菌，避免单一用药。

2. 抗生素敏感性差异：肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌对氨苄西林和阿莫西林耐药，而对左氧氟沙星敏感。

肺炎克雷伯菌的耐药性分析【关键词】肺炎；克雷伯菌；耐药性The Analysis of Endurance to drug of KlebsiellaKey words:Pneumonia;Klebsiella;Endurance to drug最近几年来，随着广谱抗生素的普遍利用，多重耐药的革兰阴性杆菌引发的各类感染已经成为临床医治的一个难题。

肺炎克雷伯菌(Kpneumoniae)作为一种重要的致病菌，在临床抗感染医治中占有重腹地位。

为了了解该菌的耐药性，为临床合理地利用抗生素提供依据，咱们对2001年至2005年从临床标本中分离的482株肺炎克雷伯菌，用15种抗生素进行了药物灵敏性实验，结果报告如下。

1 材料菌株来源来自2001年1月至2005年12月我院临床各科送检的住院患者的标本，包括痰液、尿液、创面分泌物、胸腔积液、腹水等。

标本分离按卫生部查验操作规程进行。

质控菌株为肺炎克雷伯菌ATCC 35281，购于中国药品生物制品鉴定所。

1．2 菌株分离与鉴定采纳VITEK32型全自动细菌分析仪，GNS506药敏检测卡均为法国生物梅里埃公司产品。

依照卫生部抗生素细菌耐药性监测中心规定的标准操作。

1．3 药敏实验方式及ESBLs菌株的检测 K B纸片扩散法检测其对多种抗生素的耐药性，所监测的15种抗生素：阿莫西林／棒酸、氨苄西林、头孢噻肟、头孢西丁、头孢他啶、头孢噻吩、庆大霉素、亚胺培南、萘啶酸、奈替米星、呋喃妥因、培氟沙星、替卡西林、妥布霉素、复方磺胺。

产ESBLs菌株检测采纳VITEK32全自动微生物分析仪初筛，头胞他啶和头胞他啶／克拉维酸、头孢噻肟和头孢噻肟／克拉维酸纸片(药敏纸片均为Oxoid公司产品)做确证实验，观看时刻和结果评判依据NCCLS 1999年版本［3］的标准。

2 结果2．1 肺炎克雷伯菌的散布情形在分离出的482株肺炎克雷伯菌中，痰标本和分泌物标本别离为55％和21％，其他类型标本占24％。

临床标本中肺炎克雷伯菌分布及耐药性肺炎克雷伯菌是引起医院感染常见的革兰阴性杆菌，属条件致病菌，可引起多部位的严重感染。

随着抗菌药物的广泛使用，肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药性也日趋严重，特别是已发现肺炎克雷伯菌质粒介导的Es—BLs株和产AmpC 酶株，导致临床治疗成本的增加及疾病转归的不可预见性增加。

为了解本院肺炎克雷伯菌的医院感染及耐药现状，为临床医师经验用药提供科学依据，我们对2006--2007年来我院临床标本中分离到的231株肺炎克雷伯菌进行了耐药性分析，现报道如下。

1材料与方法1.1 菌株来源231株肺炎克雷伯菌分离自本院2006年1月--2007年12月住院患者送检的各种标本。

1.2菌种鉴定及药敏试验采用法国生物梅里埃公司ATB Expression细菌鉴定仪及梅里埃ATB G-5药敏试验，以肺炎克雷伯菌ATCC70060作為质控菌株。

超广谱B内酰胺酶检测方法与判定根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)2005年版推荐的纸片扩散法进行。

1.3统计学处理计数资料进行统计学描述分析，病原菌耐药率统计，采用百分率。

2结果2.1肺炎克雷伯菌的检出率及分布住院患者送检标本8 975份，检出肺炎克雷伯菌231株(不包括重复菌株)，检出率为2.57％，位居各种细菌检出率的第3位。

其标本分布痰液129株(55.8％)，尿液41株(17.7％)、咽拭子35株(15.2％)、胆汁8株(3.5％)、血液7株(3.O％)、引流液6株(2.6％)、其他标本5株(2.2％)。

科室分布来源：呼吸内科81株(35.1％)，内科ICU 49株(21.2％)，老年病房44株(19.O％)，泌尿外科20株(8.7％)，泌尿内科9株(3.9％)，神经内科8株(3.5％)，其他科室20株(8.7％)。

2.2 ESBLs检出率231株肺炎克雷伯菌经确认试验，其检出ESBLs阳性菌72株，阳性比例为31.2％，见表1。

3讨论肺炎克雷伯菌是近年来医院感染的常见条件致病菌之一，由于它具有产ESBLs的特点，因此在临床上具有重要的耐药性。

一、实验目的1. 了解克雷伯菌对常见抗生素的敏感性。

2. 分析克雷伯菌的耐药性特征，为临床合理用药提供依据。

二、实验材料1. 克雷伯菌临床分离株2. 常用抗生素：头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类、碳青霉烯类等3. 药敏试验纸片4. 微量稀释法药敏试验试剂盒5. 酶联免疫检测仪三、实验方法1. 药敏试验纸片扩散法：将克雷伯菌接种于琼脂平板，将抗生素纸片贴于平板表面，培养24小时后测量抑菌圈直径，判断克雷伯菌对各种抗生素的敏感性。

2. 微量稀释法药敏试验：采用微量稀释法测定克雷伯菌对亚胺培南、头孢吡肟、头孢他啶、头孢噻肟、头孢哌酮/舒巴坦、呋喃妥因、氨苄西林等抗生素的最低抑菌浓度（MIC）。

3. 酶联免疫检测：检测克雷伯菌对亚胺培南、头孢吡肟、头孢他啶等抗生素的耐药性。

四、实验结果1. 药敏试验纸片扩散法结果：（1）克雷伯菌对头孢菌素类抗生素的敏感性较好，其中头孢噻肟的抑菌圈直径最大，表明其对头孢噻肟的敏感性较高。

（2）克雷伯菌对喹诺酮类抗生素的敏感性较好，其中左氧氟沙星的抑菌圈直径最大。

（3）克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素的敏感性较好，其中阿米卡星的抑菌圈直径最大。

（4）克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的敏感性较好，其中亚胺培南的抑菌圈直径最大。

2. 微量稀释法药敏试验结果：（1）克雷伯菌对亚胺培南、头孢吡肟、头孢他啶、头孢噻肟、头孢哌酮/舒巴坦的MIC值均小于1mg/L，表明其对这些抗生素的敏感性较高。

（2）克雷伯菌对呋喃妥因、氨苄西林的MIC值在4mg/L以上，表明其对这两种抗生素的敏感性较差。

3. 酶联免疫检测结果：（1）克雷伯菌对亚胺培南、头孢吡肟、头孢他啶的耐药率分别为10%、5%、3%。

（2）克雷伯菌对头孢噻肟、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率均为0。

五、结论1. 克雷伯菌对头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类、碳青霉烯类抗生素的敏感性较好。

2. 克雷伯菌对呋喃妥因、氨苄西林的敏感性较差。

3. 克雷伯菌对亚胺培南、头孢吡肟、头孢他啶的耐药率较低，但对头孢噻肟、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为0。

克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌)生物安全评估报告1000字
克雷伯菌属是一类革兰氏阴性菌，可以在土壤、水体等环境中寄生。

其中肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）是一种重要的医院感
染病原体，可以引起各种感染，例如肺炎、泌尿道感染、血流感染等，并且有一定的耐药性。

因此，针对其生物安全评估非常重要。

首先，肺炎克雷伯菌具有较广的耐药性谱，尤其是对多种抗生素的
耐药性。

其主要耐药机制包括菌体外层膜和药物靶点的改变等。

此外，肺炎克雷伯菌还可以产生多种外毒素和内毒素，导致细胞损伤
和机体炎症反应等。

因此，肺炎克雷伯菌的感染对人体健康具有严
重的危害。

其次，肺炎克雷伯菌具有一定的传播能力。

其可在医院内通过人际
接触、污染的物品等途径传播，同时也可通过宿主（如家畜）在环
境中传播。

因此，在医疗机构的环境卫生管理和动物饲养管理等方面，需采取有效措施来防止其传播。

最后，肺炎克雷伯菌在医学和科研领域中也有一定的应用价值。

例
如在研究克雷伯菌耐药性机制、分离与鉴定等方面，可以利用肺炎
克雷伯菌作为研究对象。

综上所述，肺炎克雷伯菌对人体健康具有较大的威胁。

为防止其传
播和感染，需采取有效的防控措施，例如开展严格的感染控制措施、合理使用抗生素等。

同时，也需要深入研究其耐药性机制、生物学
特性以及基因组学等方面的特征，以促进治疗方法的研发和防控措
施的制定。

肺炎克雷伯菌耐药分析目的了解肺炎克雷伯菌的耐药特点，从而指导临床用药。

方法主要用纸片扩散法检测其耐药性。

结果肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素耐药率达到了30%以上，对碳青霉烯类抗生素仍保持敏感性。

结论肺炎克雷伯菌多重耐药。

了解我院痰标本中的肺炎克雷伯菌可指导临床医生及时合理用药。

Abstract：Objective To understand the characteristics of drug resistance；Klebsiella pneumonia，so as to guide the clinical medication. Methods Using disk diffusion method to detect the drug resistance. Results Klebsiella pneumoniae to beta lactam antibiotic resistance rate reached more than 30%，remain sensitive to carbapenems. Conclusion Multiple drug-resistant K.pneumoniae. Understanding of Klebsiella pneumoniae insputum specimens in our hospital to guide clinicians in rational drug use.Key words：Klebsiella pneumoniae；Beta - internal amide antibiotics；Carbon - class antibiotic肺炎克雷伯菌是一种主要的条件致病菌，它广泛的存在于自然界中，常引起多个部位感染，现已成为院内获得性肺炎重要致病菌。

本文针对本院2014年度临床痰标本中分离的肺炎克雷伯菌进行耐药分析，希望能够为临床应用抗菌药物治疗提供参考。

肺炎克雷伯菌的实验活动生物危害评估报告一、细菌的传播与致病肺炎克雷伯菌广泛分布于自然界及人和动物的胃肠道内,是临床标本中常见的细菌,可引起典型的原发性肺炎,该菌在正常人鼻咽部的带菌率1%~6%,但在住院病人中可高达20%;该菌是酒精中毒者、糖尿病人和慢性阻塞性肺部疾病患者并发肺部感染的潜在危险因素;肺炎克雷伯菌也能引起各种肺外感染,包括肠炎和脑膜炎婴儿、泌尿道感染儿童和成人及败血症;近十几年来由该菌引起的免疫低下患者感染和医院感染不断增加,已成为社区感染和医院感染的重要病原菌;其对抗生素的耐药性也不断增强;二、细菌的生物学特性肺炎克雷伯菌属于肠杆菌科克雷伯菌属,为革兰氏阴性杆菌,无鞭毛、无芽胞,但有明显的荚膜;兼性厌氧,对营养的要求不高;三、细菌的实验室检查及其它检查1.标本采集采自不同感染部位的各种标本,主要是痰标本;2.分离培养将标本接种于血琼脂和或MAC选择性培养基,于37℃孵育过夜;可分别形成较大的、凸起、灰白色粘液型的菌落以及MAC上红色易扩散至周围的培养基中、大而厚实、粘液型光亮的菌落;这些相邻的菌落容易发生融合,用接种针沾取时常可挑出长丝状的细丝;3.染色镜检可见革兰氏阴性杆菌,无芽胞,但在菌体外有明显的荚膜;4.生化鉴定该菌氧化酶阴性,发酵葡萄糖产酸产气、动力阴性、吲哚阴性、鸟氨酸脱羧酶阴性、VP试验阳性、脲酶阳性;5.生长试验该菌不能在5℃和10℃生长,但能41℃生长;6.荚膜肿胀试验可利用特异性的抗血清进行荚膜肿胀试验以鉴别本菌属及类似菌属;将待测菌接种于华-弗Worfel-Ferguson培养基上有利于荚膜的产生,经35℃、18~24h培养后,取一滴培养物加于载玻片上,加墨汁一滴或美蓝液一滴,再加入抗血清1接种环,混合后加盖玻片,置显微镜油镜下观察;在菌体周围出现较大的空白圈者为阳性;该菌表现为阳性;7.肠毒素测定对小儿肠炎患者除了要做菌种鉴定外,尚需做肠毒素测定以明确被检菌的致病力;可用兔肠接扎试验、细胞形态变化等方法测定;四、细菌的防治目前几乎所有的肺炎克雷伯菌临床分离株都携带有耐氨卞青霉素和羧卞青霉素的R质粒,由于该菌对抗生素的耐药性一直不断增强,所以临床一定要结合药敏试验的结果进行针对性用药;该菌为条件致病菌,易感人群主要是免疫功能较低下者;因此应及时隔离治疗患者,并作好家庭、社区和医院的消毒;五、细菌的生物安全防护根据病原微生物生物实验室生物安全管理条例中的有关规定,人间传播的微生物名录待颁布肺炎克雷伯菌属于三类,BSL-2;1操作要求1、实验时,未经实验室主任同意,限制或禁止进入实验室;2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆;食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中;3、所有的操作过程应尽量细心,避免产生和溅出气溶胶;4、对于污染的锐器,必须时刻保持高度的警惕,包括针、注射器、玻片、加样器等;5、注射和吸取感染材料时,只能使用针头固定注射器或一次性注射器即注射器和针头是一体的;用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉,或在丢弃前进行人工处理,要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中;非一次性锐器必须放置在坚壁容器中,转移至处理区消毒,最好高压杀菌;6、打碎的器皿不能直接用手处理,必须用其它工具处理,如刷子和簸箕、夹子或镊子;盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在倒掉前,应按照相关的规定进行消毒;7、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前,均应使用可行的消毒方法进行消毒,如高压灭菌;转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内,密封运出实验室;离开该系统进行消毒的物料,在转移前应包装,其包装应符合有关的法规;8、溅出或偶然事件中,明显暴露于传染源时,要立即向实验室主任报告;进行适当的医学评估、观察、治疗,保留书面记录;9、按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其他传染源污染后,实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒;污染的设备在送去修理、维护前,要按照相关的规定消毒；在离开设施转移前,要按照相关的规定打包运输;2安全设备1、正确使用和保养生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其他合适的人员防护设施、或物理遏制装置;2、确定可能形成传染性气溶胶或溅出物的实验过程,包括离心、研磨、匀浆、剧烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源的容器、采集感染标本等;3、涉及高浓度或大体积的传染源时,若选用密封转头或带安全罩的离心机,若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开,则可在开放实验室内离心;4、当必须在生物安全柜外处理标本时,需采取面部保护措施跟镜、口罩、面罩、或其他防溅装置,以免传染源或其他有害物溅或洒到面上;5、在实验室内,必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服;人员到非实验室区域时,防护服必须留在实验室内;防护服可以在实验室内处理,也可以在洗衣房中洗涤,但不能带回家中;6、可能接触潜在传染源、被污染的表面或设备时,要戴手套;一次性手套不用清洗、不能重复使用,不能用于接触“洁净”的表面键盘、电话等,也不应当戴着到实验室外;要备有带滑石粉的乳胶手套;脱掉手套后,要洗手;。

一、实验目的1. 学习细菌分离与鉴定的基本原理和方法。

2. 掌握肺炎克雷伯菌的分离纯化技术。

3. 培养对肺炎克雷伯菌的观察和识别能力。

二、实验原理肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）是一种常见的革兰氏阴性杆菌，广泛存在于人体肠道、呼吸道等部位。

它可引起肺炎、尿路感染、脑膜炎等疾病。

本实验通过分离纯化肺炎克雷伯菌，并进行鉴定，以了解其生物学特性。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 肺炎克雷伯菌标准菌株- 临床样本（如痰液、尿液等）- 琼脂平板、麦康凯琼脂平板、血琼脂平板- 碱性蛋白胨水、营养肉汤、营养琼脂- 生理盐水、无菌棉签、镊子、剪刀、移液器等- 显微镜、酒精灯、高压蒸汽灭菌器等2. 实验仪器：- 恒温培养箱- 紫外线灯- 离心机- 紫外线消毒柜四、实验方法1. 样本处理- 取适量临床样本（如痰液、尿液等），加入生理盐水稀释。

- 用无菌棉签将样本均匀涂布于麦康凯琼脂平板上。

- 将平板置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。

2. 分离纯化- 观察平板上生长的菌落，挑选单菌落接种于血琼脂平板上。

- 将血琼脂平板置于37℃恒温培养箱中培养24小时。

3. 鉴定- 观察菌落特征，如形状、大小、颜色等。

- 对疑似肺炎克雷伯菌的菌落进行以下鉴定实验：a. 观察菌落形态，是否为革兰氏阴性杆菌。

b. 进行氧化酶试验，观察菌落是否产生颜色变化。

c. 进行麦康凯试验，观察菌落是否产生红色变化。

d. 进行脲酶试验，观察菌落是否产生氨气味。

e. 进行DNA-DNA杂交试验，与肺炎克雷伯菌标准菌株进行比对。

4. 结果记录与分析- 记录实验过程中观察到的菌落特征和鉴定实验结果。

- 对实验结果进行分析，判断分离纯化的菌株是否为肺炎克雷伯菌。

五、实验结果与分析1. 样本处理在麦康凯琼脂平板上，观察到红色菌落生长，说明样本中可能含有肺炎克雷伯菌。

2. 分离纯化在血琼脂平板上，观察到革兰氏阴性杆菌菌落生长，疑似肺炎克雷伯菌。

2021第2期 103一 例 猪 肺 炎 克 雷 伯 氏 菌 病 的 诊 疗 报 告刘海林1，郭力伟2（1.新乡市动物疫病预防控制中心，河南 新乡 453003；2.河南农业职业学院洛阳分院，河南洛阳 471002） 中图分类号：S858.285.1 文献标志码：Ａ 文章编号：1002-1957(2021)02-0103-02收稿日期：2020-12-23作者简介：刘海林（1981-），男，河北滦县人，高级兽医师，硕士，主要从事兽医诊疗及实验室检测工作.E-mail：*********************每年冬季猪呼吸道疾病较天热季节会明显增多。

究其原因一方面是气温骤降、温差大，猪受寒后引起咳嗽等疾病；另一方面，猪场冬季封闭过严，空气不流通，有毒有害气体聚集过多，刺激呼吸道黏膜，破坏黏膜屏障，这时猪舍环境中的一些条件性致病菌便会侵入猪体发生呼吸系统疾病。

2019年冬季，新乡市一小型养猪场猪发生呼吸系统疾病，发病日龄主要集中在断奶后1周左右，常规治疗无效，一直有保育猪零星散发该病。

兽医通过临床观察、病理剖检、生化鉴定和PCR等多种方法，确诊猪场感染猪肺炎克雷伯氏菌病，现将具体诊疗情况报告如下。

1 发病情况及临床症状该猪场目前存栏200头，哺乳期仔猪、种猪和肥育商品猪一般不表现临床症状，只有保育猪发病严重，发病日龄主要集中在断奶后的1～2周。

发病初期猪有咳嗽或流鼻涕症状，体温达到40～41.5 ℃。

发病后猪采食量下降，病情严重猪绝食。

病程后期猪表现伸颈、张口呼吸，同时可见猪瞳孔放大，四肢末端、腹部和耳部皮肤出现发绀斑块。

使用磺胺类药物和中药制剂小柴胡注射液进行治疗，效果不明显。

2 病理变化病死猪鼻腔常见有黏液或气泡，解剖后发现病情严重猪的肺脏表面有大面积淤血和充血斑块，膈叶病变更为明显。

肺门淋巴结肿大、充血，多呈现暗紫色。

剪开气管和支气管发现有很多白色泡沫，一些支气管壁发现有充血现象，个别细支气管中可见红色出血性泡沫，主要与肺泡毛细血管出血有关。

肺炎克雷伯菌β?内酰胺酶检测与相关耐药表型分析【摘要】本研究旨在探讨肺炎克雷伯菌β内酰胺酶的检测方法及相关耐药表型分析。

文章首先介绍了肺炎克雷伯菌的基本情况，包括其对人体的威胁和传播途径。

然后详细阐述了β内酰胺酶的检测方法，分析了其原理和应用范围。

接着对肺炎克雷伯菌的耐药性进行了分析，同时展示了相关耐药表型分析的结果。

讨论了这些研究成果在临床应用中的意义，指出了检测与分析对于及时干预和治疗的重要性。

研究结论表明，肺炎克雷伯菌β内酰胺酶检测与耐药表型分析是预防和控制感染传播的有效手段。

未来的研究方向将着重于提高检测方法的灵敏度和精准度，以更好地指导临床实践。

【关键词】肺炎克雷伯菌, β内酰胺酶, 耐药性, 相关耐药表型分析, 临床应用, 研究结论, 未来研究方向1. 引言1.1 背景介绍肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）是一种革兰氏阴性菌，常见于人体的呼吸道和肠道。

它是医院感染中的重要病原菌之一，在长期使用抗生素的情况下，肺炎克雷伯菌对多种抗生素产生耐药性。

β内酰胺酶（β-lactamase）是一种主要的耐药机制，它能够降解β内酰胺类抗生素，导致这类抗生素失去抗菌活性。

检测肺炎克雷伯菌的β内酰胺酶是临床上非常重要的工作，可以指导医生选择有效的抗生素治疗。

目前，主要的检测方法包括酶活性测定、纸片扩散法和分子生物学方法等。

在检测到β内酰胺酶阳性的情况下，还需要进行耐药性分析，了解其对各类抗生素的耐药情况。

本文将重点介绍肺炎克雷伯菌的β内酰胺酶检测方法和相关耐药表型分析的结果，探讨其在临床应用中的意义。

希望通过本研究，提高对肺炎克雷伯菌耐药性的认识，为临床治疗提供更有效的指导。

1.2 研究目的本研究旨在探究肺炎克雷伯菌β内酰胺酶检测与相关耐药表型分析的关系，以期为临床用药提供更准确的指导。

具体来说，我们的研究目的包括以下几个方面：1. 探讨肺炎克雷伯菌的生物特性及致病机制，揭示其对人体健康的危害；2. 分析β内酰胺酶检测方法的原理和应用范围，评估其在临床诊断中的可靠性和准确性；3. 研究肺炎克雷伯菌的耐药性机制，探讨耐药性的形成和发展过程，并寻找抗菌药物的合理应用策略；4. 分析相关耐药表型的临床意义，探讨不同表型对临床治疗的指导作用；通过以上研究，我们旨在为临床对肺炎克雷伯菌感染的防治提供科学依据，促进临床治疗的个体化和精准化，提高患者的治疗效果和生存率。

一、实验目的本实验旨在通过药敏试验，检测特定细菌对不同抗生素的敏感性，为临床合理用药提供科学依据。

通过对细菌耐药性和敏感性的了解，有助于提高治疗效果，降低抗生素滥用带来的不良影响。

二、实验材料与方法1. 实验材料（1）菌株：某呼吸道感染患者痰液分离得到的肺炎克雷伯菌；（2）抗生素：青霉素、头孢噻肟、头孢曲松、万古霉素、庆大霉素；（3）培养基：营养琼脂、麦康凯琼脂；（4）实验仪器：恒温培养箱、接种环、无菌操作台、微量移液器等。

2. 实验方法（1）将肺炎克雷伯菌接种于营养琼脂平板上，37℃恒温培养24小时；（2）用无菌移液器吸取不同浓度的抗生素，滴加于已培养好的肺炎克雷伯菌平板上；（3）将平板放入恒温培养箱中，37℃培养24小时；（4）观察并记录不同抗生素对肺炎克雷伯菌的抑菌圈大小。

三、实验结果与分析1. 青霉素肺炎克雷伯菌对青霉素的抑菌圈大小为5mm，说明肺炎克雷伯菌对青霉素敏感。

2. 头孢噻肟肺炎克雷伯菌对头孢噻肟的抑菌圈大小为8mm，说明肺炎克雷伯菌对头孢噻肟敏感。

3. 头孢曲松肺炎克雷伯菌对头孢曲松的抑菌圈大小为7mm，说明肺炎克雷伯菌对头孢曲松敏感。

4. 万古霉素肺炎克雷伯菌对万古霉素的抑菌圈大小为9mm，说明肺炎克雷伯菌对万古霉素敏感。

5. 庆大霉素肺炎克雷伯菌对庆大霉素的抑菌圈大小为6mm，说明肺炎克雷伯菌对庆大霉素敏感。

四、结论根据药敏试验结果，肺炎克雷伯菌对青霉素、头孢噻肟、头孢曲松、万古霉素、庆大霉素均表现出敏感。

因此，在临床治疗肺炎克雷伯菌感染时，可根据患者具体情况选择以上抗生素进行治疗。

此外，本实验结果为临床合理用药提供了参考依据，有助于降低抗生素滥用带来的不良影响。

同时，也为临床医生在治疗过程中，根据患者病情变化及时调整治疗方案提供了科学依据。

需要注意的是，本实验仅针对肺炎克雷伯菌一种菌株进行药敏试验，对于其他菌株的药敏性还需进一步研究。

同时，在实际临床治疗过程中，还需结合患者病情、病史、药物过敏史等因素，综合考虑选择合适的抗生素进行治疗。

肺炎克雷伯菌的实验活动生物危害评估报告This manuscript was revised on November 28, 2020肺炎克雷伯菌的实验活动生物危害评估报告一、细菌的传播与致病肺炎克雷伯菌广泛分布于自然界及人和动物的胃肠道内，是临床标本中常见的细菌，可引起典型的原发性肺炎，该菌在正常人鼻咽部的带菌率1%~6%，但在住院病人中可高达20%。

该菌是酒精中毒者、糖尿病人和慢性阻塞性肺部疾病患者并发肺部感染的潜在危险因素。

肺炎克雷伯菌也能引起各种肺外感染，包括肠炎和脑膜炎（婴儿）、泌尿道感染（儿童和成人）及败血症。

近十几年来由该菌引起的免疫低下患者感染和医院感染不断增加，已成为社区感染和医院感染的重要病原菌。

其对抗生素的耐药性也不断增强。

二、细菌的生物学特性肺炎克雷伯菌属于肠杆菌科克雷伯菌属，为革兰氏阴性杆菌，无鞭毛、无芽胞，但有明显的荚膜。

兼性厌氧，对营养的要求不高。

三、细菌的实验室检查及其它检查1.标本采集采自不同感染部位的各种标本，主要是痰标本。

2.分离培养将标本接种于血琼脂和或MAC选择性培养基，于37℃孵育过夜。

可分别形成较大的、凸起、灰白色粘液型的菌落以及MAC上红色（易扩散至周围的培养基中）、大而厚实、粘液型光亮的菌落。

这些相邻的菌落容易发生融合，用接种针沾取时常可挑出长丝状的细丝。

3.染色镜检可见革兰氏阴性杆菌，无芽胞，但在菌体外有明显的荚膜。

4.生化鉴定该菌氧化酶阴性，发酵葡萄糖产酸产气、动力阴性、吲哚阴性、鸟氨酸脱羧酶阴性、VP试验阳性、脲酶阳性。

5.生长试验该菌不能在5℃和10℃生长，但能41℃生长。

6.荚膜肿胀试验可利用特异性的抗血清进行荚膜肿胀试验以鉴别本菌属及类似菌属。

将待测菌接种于华-弗（Worfel-Ferguson）培养基上（有利于荚膜的产生），经35℃、18~24h培养后，取一滴培养物加于载玻片上，加墨汁一滴或美蓝液一滴，再加入抗血清1接种环，混合后加盖玻片，置显微镜油镜下观察。

156株耐喹诺酮类抗生素肺炎克雷伯菌药敏结果分析目的：调查分析坪山坑梓地区肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae，Kp）对喹诺酮类抗生素的耐药性。

方法：回顾性分析2014年8月-2017年8月本院就诊患者送检标本2 659份中分离出的非重复性Kp对喹诺酮类抗生素的耐药株数量。

结果：2 659标本中分离出511株Kp，检出率为19.2%，其中ESBLs菌株有214株，占41.8%，非产ESBLs菌株297株，占58.2%；喹诺酮类药物耐药菌株共計156株，其中ESBLs组耐药率51.4%（110/214），非产ESBLs组为15.5%（46/297）。

结论：坪山坑梓地区Kp对喹诺酮类抗生素耐药率偏高，长期动态监测本区域耐喹诺酮类抗生素Kp，对本区域耐药谱的分析以及合理应用抗生素至关重要。

近年来，肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae，Kp）仍是重要的条件致病菌和医院感染的常见病原菌[1-5]，随着临床分离率不断增多，全国细菌耐药监测网（CARSS）发布的2014年以及2015年全国细菌耐药监测报告中，Kp在革兰阴性菌中排第二位，分别占革兰阴性菌的19.4%和19.8%[6-7]。

近年来，喹诺酮类药物在临床广泛应用，Kp对该类药物的耐药率逐年攀升[8-11]，国内有关此方面的基因研究以及流行病学调查较常见[12-20]。

坪山区位于深圳东部，分为坪山镇地区和坑梓镇地区，公立医疗医院只有2家，医疗条件相对落后，本医院负责坑梓地区的综合医疗任务和全区的妇幼保健任务。

目前国内外只有本医院同事从事坪山坑梓地域相关研究[21]，而且2017年度尚无肺炎克雷伯菌耐药谱的分析研究。

因此，本文选取本院各科室送检标本2 659份，调查分析肺炎克雷伯菌对喹诺酮类抗生素的耐药性。

现报道如下。

1 资料与方法1.1 一般资料收集2014年8月-2017年8月本院各科室送检的标本2 659份，对同一患者重复留取的标本不纳入统计。

临床分离的206株肺炎克雷伯菌药敏分析目的：探讨产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性，研究使用抗生素的方法和可实施性。

方法：对笔者所在医院2010年6月-2012年6月通过临床痰细菌培养分离出的206株肺炎克雷伯菌患者进行药敏试验，细菌鉴定及药敏试验采用法国梅里埃ATB细菌鉴定及药敏分析系统。

结果：患者中63株（30.6%）产ESBLs菌株，最敏感的是亚胺培南和美洛培南，耐药率为0；对其余抗生素药物敏感有所降低，对青霉素类和头胞菌素耐药率100%，最不敏感；死亡11例（5.3%），其中产ESBLs菌株感染者死亡4例。

结论：有选择性地使用抗生素药物，加强对患者原发病抑制和增强其自身免疫能力，ESBLs菌株感染者死亡4例（6.35%），对预防尤其是产ESBLs的肺炎克雷伯菌感染病作用明显。

标签：肺炎克雷伯菌；耐药性；流行病学；药敏分析肺炎克雷伯菌是临床上分离的常见细菌，是导致患者出现呼吸道感染的主要病原菌之一，常寄生于人体呼吸道和肠道[1]。

由该细菌导致的感染目前正呈上升趋势，且又是常见的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株，对多种抗菌类药物有较高的耐药性，已成为临床较难控制的病原菌。

笔者所在医院于2010年6月-2012年6月通过对临床痰细菌培养分离出的206株肺炎克雷伯菌的患者进行了药物敏感性试验，现将研究情况报告如下。

1 资料与方法1.1 一般资料笔者所在医院2010年6月-2012年6月共收治206例患者，其中男134例，女72例，年龄7～88岁，平均为53岁。

肠杆菌科鉴定药敏板出自珠海迪尔生物工程有限公司生产提供，所有菌株药敏测试遵循美国临床实验室标准化研究所（CLSI）制定标准执行。

1.2 收集方式待患者早起漱口后咳痰，将咳出的痰液吐入无菌瓶内后即刻进行送检处理，对于部分切开气管以及气管处安置了插管的患者，借助一次性使用的密闭式样吸痰管吸痰。

1.3 ESBLs药敏检测遵循美国临床实验室标准化委员会（CLSI）推出的标准纸片扩散确证法对该病菌进行检测，当头孢噻肟-克拉维酸（30 μg/10 μg）与头孢噻肟（30 μg）、头孢他啶-克拉维酸（30 μg/10 μg）与头孢他啶（30 μg）两组中，无论哪一组的抑菌环直径差不低于5 mm时，则ESBLs为阳性株[2]。

文章编号:1006-3110(2004)06-1142-03【论　著】产ESBL s肺炎克雷伯菌耐药基因分型及药敏试验结果分析张阮章,王沙燕,卢月梅,何　林,陈升汶 摘要:　目的　了解本地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。

　方法　用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌64株,用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC),分别用TEM、SHV 和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR),并对结果进行分析。

　结果　产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高(100%);其次为头孢吡肟(84.4%),哌拉西林/他唑巴坦和环丙沙星的敏感率则分别为71.9%和70.3%。

PCR 扩增结果显示SHV、CTX-M和TEM基因的阳性率分别为81.3%、65.6%和18.8%;53.1%的菌株同时携带多个基因。

　结论　该院医院感染产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高;最常见的基因型是SHV,其次为CTX-M。

关键词:　肺炎克雷伯菌;超广谱β-内酰胺酶;药敏试验;基因分型中图分类号:R-331 文献标识码:AAn Analysis of G enotype and Antibiotic R esistance of ESB Ls-producing K lebsiella Pneumoniae　ZHAN G Ruan-zhang, WAN G Sha-yan,L U Yue-mei,et al.(Shenzhen People’s Hospital,2nd Aff iliated Hospital of Medical College,J inan University,Shenzhen518020)Abstract:　Objective　T o understand the profile of genotype and antibiotic re sistance of strains producing extended spectrum beta-lactamase s(ESBLs).　Methods　46ESBLs-producing K lebsiella pneumoniae strains were determined by phennotyic con firmatory te st.MICs of antibiotic to the isolate s were determined b y the agar dilution method.The pre sence of the TE M,SH V and CTX-M gene s were determined by specific PCR assays.　R esults　MIC te st show the se strains were 100%susceptible to imipenem,84.4%to cefepime,71.9%to piperacillin/tazobactam,70.3%to ciprofloxacin.Of all ES2 BLs,81.3%were SH V,65.6%were CTX-M and18.8%were TE M.53.1%of strains carried more than one type of ES2 BLs gene.　Conclusions　ESBLs-producing K lebsiella pneumoniae showed mo st susceptibility to imipenem.The mo st commom ESBLs in K lebsiella pneumoniae was SH V in our ho spital,and the next was CTX-M.K ey w ords:　K lebsiella pneumoniae;Extended spectrum beta-lactamase s;Antibiotic re sistance;Genotyping 超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases, ESBLs)是由质粒介导的耐药性酶,它不仅能水解青霉素和第一、二代头孢菌素,还能水解第三、四代头孢菌素及氨曲南等,给临床抗感染的治疗带来极大挑战。

深圳动物园15 株肺炎克雷伯氏菌耐药性的检测动物医学院动物医学唐春成（指导老师：杨光友教授）摘要：目的：了解深圳动物园黑猩猩等10种灵长动物肺炎克雷伯氏菌的耐药特性及趋势，指导临床合理用药。

方法：用K-B 纸片扩散法做药物敏感试验。

结果：检测的15 株肺炎克雷伯氏菌对21 种抗生素的药敏结果显示，对萘啶酸、氨苄西林、羧苄西林和四环素的耐药率最高，均为100%；其次为磺胺甲基异恶唑、头孢唑啉(先锋霉素V)、多西环素和多粘菌素B，其耐药率分别是93.33%、87.78%、80%和80%；对环丙沙星、阿奇霉素、诺氟沙星、头孢呋新、加替沙星、奈替米星和磷霉素的耐药率分别是73.33%、73.33%、60%、60%、53.33%、53.33%和53.33%；对头孢西林和呋喃妥因的耐药率均为40%；对头孢噻肟、亚胺硫霉素和阿米卡星的耐药率分别为33.33%、26.67%和20% ；菌株对拉氧头孢钠的耐药率为0 。

结论：该地区肺炎克雷伯氏菌所引起的疾病治疗的首选药氧头孢烯类，其次可合理选用第三代头孢菌素、氨基糖甙类、碳青霉烯类、呋喃类药。

关键词：肺炎克雷伯氏菌；耐药性；检测Resistance testing of 15 bahtsK lebsiella Pneumoniae inShenzhenzooTang Chuncheng Veterinary，Grade2006Directed by Yang Guangyou(professor)Abstract：Objective: To understand the Shenzhen Zoo chimpanzees and other 9 primates Klebsiella pneumoniae‘s resistance characteristics and trends to guide clinical use of drugs. Method: K-B disk diffusion method to do drug susceptibility testing. Results: The detection of 15 bahts Klebsiella pneumoniae to 21 antibiotics showed that the resistance rate of Nalidixic acid, Ampicillin, Carbenicillin and Tetracycline are the highest are 100%；This was followed by SMZ-TMP , cefazolin (Vanguard ADMV), doxycycline, polymyxin B, that drug resistance rate was93.33%,87.78%,80%,80%; to ciprofloxacin, azithromycin , norfloxacin, cefuroxime, gatifloxacin, netilmicin, fosfomycin the resistance rate was 73.33%,73.33%,60%,60%,53.33%,53.33% and 53.33%;Resistance rates of xilin of cephalosporins, nitrofurantoin were 40%; And resistance rates right cefotaxime, imipenem, amikacin were 33.33%, 26.67%, 20%; Fortunately,0 is the resistance rate of strain to Latamoxef sodium. Conclusion: The Klebsiella pneumoniae in diseases caused by treatment of first choice for drug oxacephems, followed by the selection of the third generation can be reasonably cephalosporins, aminoglycosides, carbapenems, furan, amide alcohols medicine. Key words: Klebsiella pneumoniae; resistance; detect 肺炎克雷伯氏菌属于革兰氏阴性肠杆菌科(Enterobacteraceae克) 雷伯菌属(klebsiella)。