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Agilent 1200 LC[Agilent Chemstation B.04.02 Classic (中文)]现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、 目录二、 培训目的 (3)三、 培训准备 (3)1. 仪器准备 (3)2. 溶剂准备 (3)四、 方法建立 (3)1. 开机准备 (3)2. 数据采集方法编辑 (5)9 G1310A(单元泵) (5)9 G1312A，G1312B XL(二元泵)/G1311A(四元泵)： (7)9 G1313A(标准型自动进样器)，G1329A/B(自动控温自动进样器) (8)9 G1367B/C/D(高性能自动进样器) (9)9 G1328A(手动进样器) (11)9 G1316A,G1316B XL(柱温箱) (11)9 G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器) (13)9 G1315B/D ,G1315C XL(二极管阵列检测器)/ G1365B/D ,G1365C XL(多波长紫外检测器) (15)9 G1362A(示差检测器) (17)9 G1321A(荧光检测器) (19)9 G4218A(蒸发光散射检测器) (23)3. 数据分析方法编辑 (25)9 谱图优化 (25)9 积分参数优化 (25)9 校正 (27)9 打印报告 (28)9 光谱 (29)4. 建立全新完整方法向导 (31)9 新建完整方法： (32)9 保存方法： (36)9 保存即时改变的方法 (36)9 调用方法： (36)5. 进样 (36)9 单针进样 (36)9 序列进样 (37)五、 关机 (37)1. 关闭检测器的灯 (41)2. 冲洗系统 (41)3. 封存色谱柱 (41)4. 关闭电脑 (41)5. 关闭模块 (41)六、 RRLC(快速液相)注意事项 (41)七、 Agilent 1200保养维护 (43)八、 Agilent 1200常见问题解决方法 (45)二、 培训目的9基本了解1200LC硬件操作。
Agilent 1200系列手动进样器参考手册注意安捷伦科技有限公司© ，Inc. 2006根据美国和国际版权法，未经安捷伦公司书面许可，本书内容不得以任何形式复制（包括电子存储修改或翻译）。
手册部件号G1328-97010版本版本02/06德国印刷Agilent TechnologiesHewlett-Packard-Strasse 876337 Waldbronn, Germany 声明本书内容如有改变，恕不另行通知。
安捷伦科技公司对本材料，及由此引出的任何商务和特种用途不承担责任。
安捷伦科技公司对本手册中可能有的错误或与装置、性能及材料使用有关内容而带来的意外伤害和问题不负任何责任。
如果安捷伦与用户对本书中的警告术语有不同的书面协议，这些术语与本书中的警告术语冲突，则以协议中的警告术语为准。
技术许可本书对硬件和/或软件的介绍已获得特许，未经许可，不得使用或复制。
权力限制说明如果软件用于某一美国政府基本合同或次级合同，软件的使用将作为下列情况之一被许可：按照法案DFAR252.227-7014（1995年6月）确定的“商业计算机软件”；或者按照法案FAR2.101 (a)确定的“商业条款”；或者按照法案FAR 52.227-19（1987年6月）确定的“限制计算机软件”；或者任何相当机构法规或合同条款。
软件的使用，复制或解密受安捷伦科技标准商业许可条款的管理，美国政府的非DOD部门和机构将获得不比法案FAR 52.227-19 (c)(1-2)（1987年6月）大的权利。
美国政府的用户将获得不比法案FAR 52.227-14(c) (1-2)（1987年6月）或DFAR252.227-7015 (b) (2)（1995年11月）确定的限制权利大的权利，这一原则适用于任何技术数据。
安全警告小心小心提示表示危险提醒您在操作过程中注意，如果执行不当，将影响产品或丢失重要数据。
不要忽视小心提示。
Agilent 1100、1200高效液相色谱仪使用操作规程（SOP）一、适用范围：本SOP适用于Agilent(HP) 1100、1200高效液相色谱仪的使用操作。
二、责任人：液相分析人员。
三、程序：1．高效液相色谱仪的主要配备部件1．1 1100型在线脱气机(Degasser)四元泵(Quat.Pump)自动进样器(ALS)柱温箱(p)可变波长检测器(VWD)1.2 1200型在线脱气机(Degasser)四元泵(Quat.Pump)自动进样器(ALS)柱温箱(TCC)A可变波长检测器(VWD)2．启动仪器打开不间断电源UPS，开启高效液相仪各部件及计算机电源。
3．启动化学工作站3．1 在进入Windows平台后，点击左下角“start”菜单，依次展开“programs”、“chemstations”菜单，菜单下的“Instrumental Online”对仪器进行在线控制,“Instrumental Offline”对数据进行离线处理。
3．2 点击“ Instrumental Online”，进入Chemstation工作站，弹出权限选择窗口，有两种权限等级可供选择。
“Manager”权限拥有对化学工作站所有的操作权限，但以此权限进入化学工作站，必须有最初设定的密码。
“Operator”权限仅能对色谱图进行积分打印等操作，用此权限不需要密码可直接进入化学工作站。
3．3 化学工作站用户界面共5个视窗：3．3．1 方法和运行控制（Method and Run Control）视窗：用于控制仪器和采集数据。
设置分析所用的仪器参数、访问方法选项，如运行时间选项表（Run Time Checklist ），并设置序列（Sequence），也可浏览实时仪器参数。
3．3．2 数据分析（Data Analysise）视窗：用于对已经采集的数据进行处理。
3．3．3 报告格式（Report Layout）视窗：用于设计特定的报告格式。
Agilent 1200 系列标准和制备自动进样器用户手册注意©安捷伦科技有限公司， 2008根据美国和国际版权法，未经安捷伦公司书面许可，本书内容不得以任何形式复制（包括电子存储修改或翻译）。
手册部件号G1329-97012版本11/08Germany印刷Agilent TechnologiesHewlett-Packard-Strasse 876337 Waldbronn仅供研究之用。
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Agilent 1200型高效液相色谱仪操作规程1 开机1.1 从上至下依次打开 1200 LC 各模块电源，打开电脑主机。
1.2 待各模块自检完成后双击桌面上的“仪器1（联机）”图标，化学工作站自动与1200LC工作站连接。
1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 单击“视图”菜单中的“系统视图”、“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
2 脱气2.1 把流动相放入溶剂瓶中2.2 打开冲洗阀2.3 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。
2.4 设“流量”为 5mL/min ，单击“确定”。
2.5 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“启动”，单击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止, 切换通道继续冲洗直到所有要用通道无气泡为止。
2.6 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“控制”选项，选中“关闭”，单击“确定”关泵，关闭冲洗阀。
2.7 单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“设置泵”选项，进入参数编辑画面，设流速为1.0mL/min。
2.8 单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，也可输入停泵的体积，单击确定。
3 数据采集方法编辑3.1 从”方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，点击除“数据分析”外的三项，单击“确定”。
3.2 样品信息从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，在对话框中输入“操作者名称”。
“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”（区别: “手动”每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。
“前缀/计数器”在“前缀”框中输入前缀,在“计数器”框中输入计数器的起始位,仪器会自动命名。
3.3 方法信息在方法菜单中选择“方法信息”选项，在“方法注释”中加入方法的信息（如测试方法等），单击“确定”。
3.4 泵参数设定在桌面上点击泵图标，从选项菜单中点击“泵设置”，在对话框中“流速”处输入流量,如1mL/min ，在各通道“溶剂”处输入需要的比例 ,也可“插入”一行“时间表”，编辑梯度,在“压力限”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子 ,单击“确定”。
Agilent 1200型高效液相色谱仪操作规程1目的规范Agilent 1200型高效液相色谱仪的操作，确保使用本仪器的检验结果准确可靠。
2实验步骤2.1开机2.1.1准备好流动相并安装色谱柱。
2.1.2依次打开仪器各部件电源开关(在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器或荧光检测器等)，约5 min后，仪器进入待机状态，此时仪器各部件指示灯应无色或呈黄色。
2.1.3打开电脑，点击亿【Instrument 1 online】，约30s后，计算机进入工作站2.2色谱条件的设定2.2.1直接设定在操作页面的右下部——色谱工作参数中设定。
将鼠标移至要设定的参数，如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击【OK】，即完成。
2.2.2调用已设置好的文件在命令栏【Method】下，选择【Load Method】，或直接单击快捷操作的【Load Method】图标，选定文件名，单击【OK】，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同“4.2.1”项下，在色谱工作参数中做修改；也可以在命令栏【Method】选择【Edit Entire Method】，随后工作站即按顺序出现一系列参数设置页面，在每个页面中键人设定值，单击【OK】，即完成。
2.2.3编辑新文件先在命令栏【Method】下，选择【New Method】，然后再在命令栏【Method】下，选择【Edit Entire Method】，在每个参数设置页面下输入设定值，完成后，在命令栏【Method】下，选择【Save Method】，给新文件命名，单击【OK】，即完成。
2.3 仪器的运行当色谱参数设置完成后，单击工作站流程图右下角的【ON】，仪器开始运行。
此时，画面颜色由灰色转变成黄色或绿色，当各部件都达到所设参数时，画面均变为绿色，左上角红色的Not Ready变为绿色的Ready，表明可以进行分析。
Agilent 1200 LC（中文版 B01.01）现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、培训目的：●基本了解1200LC硬件操作。
●掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、培训准备：1、仪器设备：Agilent 1200LC●G1310A :(单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。
● G1313A（标准型自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1314A（VWD检测器）。
● G1362A（示差检测器）。
●色谱柱: Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm, 5um column P/N 993967-9022、溶剂准备：●色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇。
●二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“显示顶部工具栏”，“显示状态工具栏”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开冲洗阀。
7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。
8 、设流速：5ml/min，点击“确定”。
9、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
10、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，关闭冲洗阀。
11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：1.0ml/min。
Agilent 1200 制备液相色谱 现场培训手册捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部培训目的•基本了解1200制备液相色谱硬件构成•了解制备液相色谱原理•掌握化学工作站中关于制备液相色谱部分的参数设定，馏分收集，数据分析等操作培训准备一．仪器设备：Agilent 1200制备液相色谱•分析级制备液相色谱G1322A（脱气机）；G1379B（微池脱气机）G1310A（单元泵）；G1312A，G1312B（二元泵）；G1311A（四元泵）G1329A（标准型自动进样器）；G1367A（微盘自动进样器）G1316A，G1316B（柱温箱）G1314B，G1314C（可变波长紫外检测器）G1315C，G1315D（二极管阵列检测器）G1365C，G1365D（多波长检测器）G1364C（分析级馏分收集器）•制备级制备液相色谱G1361A（制备泵）；G1391A（双制备泵，供梯度进样用）G2260A（标准制备型自动进样器）G2258A（双环自动进样器，可兼作分析/制备使用）G1383A（制备柱挂架）G1315C，G1315D（二极管阵列检测器，配合制备级流通池使用）G1365C，G1365D（多波长检测器，配合制备级流通池使用）G1364B（制备级型馏分收集器）二．色谱柱：•分析级制备液相色谱Zorbax Eclipse XDB-C18 150X4.6, 5um column) or equivalentP/N 993967-902 / 5063-6600•制备级制备液相色谱ZORBAX SB-C18, 50 mm x 9.46mm (846975-202) or equivalent三．溶剂及调试用样品准备：•色谱级纯度乙腈或者甲醇•二次蒸馏纯水•延迟体积校正用染料样品（G1946-85020）•LC用调试样品(01080-68704)注：本手册内涵盖的内容为制备液相模块的内容，其他模块如分析级泵，分析级自动进样器，柱温箱等，请参看安捷伦1200液相色谱现场培训手册等制备液相色谱原理一．什么是制备液相色谱？制备液相这一术语通常是和大容量色谱柱、高流速联系在一起的。
Agile nt 1200液相色谱仪操作规程设备组成：G1311A （四元泵）、G1329A （标准型自动进样器）、G1316A （柱温箱）、G1314B （VWD 检测器）、 G1315D （ DAD 检测器）。
基本操作步骤： （一）、开机：1、 打开计算机，进入 Windows XP 画面。
（IP 地址由Bootp Service 程 序写入）2、 打开1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击仪器1联机”图标，或（点击屏幕左下角的开始”选择程序”选择“ Agile nt Chemstatio n,选择仪器1联 机”化学工作站自动与1200LC 通讯，进入的工作站画面如下所示。
ft>-dr雄前篩*■丸 馬?!側［电!漏|.启占击豪聊. Start 卫倉3 £ ®琴 » |谥便”.dD:..」^jl2.一一| 电]12.」JJC:...|-JC:...|匕®备辭❹厚口旦宕糧* 2L ：514、从 视图”菜单中选择 方法和运行控制”画面，点击 系统视图”样品 视图”使其命令前有 V”标志，来调用所需的界面。
J&I 划立申刁ffiflSBkRJ 肚馭“ S.'ilMJ 序珊幻«l^v：i 中團闽 WBtKH ） 7屈丨 irii djj A£i可 序列 卑由£LLQADTKT: ROttST.S R0UTINE.5DEFfcVU.Dw>OD.JitTHQKUMJ(IE斶dE0LJ 方法 &£F_LL. M—用郭 UEF_LC.fiLhiMvKE.S 上秋运行[140114序？WI 品！ |方袪|其』-Z 邑1叩IC.2価可用C ：.血!:讥BO5、把流动相放入溶剂瓶中6、手动旋开冲洗阀。
7、点击“泵”图标，点击“设置泵”选项，进入泵编辑画面。
8、设流速：3-5ml/min ，点击“确定”。
Agilent 1200 LC（中文版 B01.01）现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、培训目的：●基本了解1200LC硬件操作。
●掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、培训准备：1、仪器设备：Agilent 1200LC●G1310A :(单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。
● G1313A（标准型自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1314A（VWD检测器）。
● G1362A（示差检测器）。
●色谱柱: Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm, 5um column P/N 993967-9022、溶剂准备：●色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇。
●二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“显示顶部工具栏”，“显示状态工具栏”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开冲洗阀。
7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。
8 、设流速：5ml/min，点击“确定”。
9、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
10、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，关闭冲洗阀。
11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：1.0ml/min。
12、点击泵下面的瓶图标，如下图所示（以单元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积，点击“确定”。
（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：●从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…”项，如下图所示选中除“数据分析”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。
2、方法信息：●在“方法注释”中加入方法的信息（如：测试方法）。
●点击“确定”，进入下一画面。
3、泵参数设定：（以四元泵为例）●在“流速”处输入流量,如1ml/min，在“溶剂 B”处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入”一行“时间表” ,编辑梯度。
在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
●点击“确定”，进入下一画面。
4、自动进样器参数设定:（以标准G1313为例）●选择合适的进样方式, 如图所示，进样体积 5.0ul ,洗瓶位置为6号。
“标准进样”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。
“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。
“使用进样器程序”---可以点击“编辑”按钮进行进样程序编辑。
●点击进“确定”，进入下一画面。
5、柱温箱参数设定:●在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。
并选中它,点击“更多>>”键,如图所示,选中“与左侧相同”，使柱温箱的温度左右一致。
●点击“确定”，进入下一画面。
6、VWD检测器参数设定:●在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在“峰宽 (响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s)。
●在“时间表”中可以“插入”一行，输入随时间切换的波长，如1min ，波长=300nm。
点击“确定”，进入下一画面。
7、RID检测器参数设定:●色谱条件:进样体积: 20ul 。
光学单元温度: “关闭”。
极性: “正极性”。
峰宽(响应时间) : 4s 。
●如图所示: “光学部件温度”---若环境温度控制在±2℃,设定为“关闭”, 若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。
“峰宽 (响应时间)”---大多数分析设为“4s”，只有在高速分析下设为更短。
“分析后自动循环”---在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相，检测器连续运行，可随时投入使用。
● ***** 点击RID图标，选择RID Control ：Heater 设为On，若要循环流动相，必须将“Recycling Valve”设为ON。
手动purge 参比池，将其设为On，并输入Purge 时间。
8、 在“ 运行时选项表 ”中选中“ 数据采集”，点击“确定”。
9、 点击“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定”。
10、 从菜单 “视图”中选中“在线信号”,选中“信号窗口1”,然后点击“改变…” 钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定”。
(如同时检测二个信号,则重复10,选中“信号窗口2”。
单击“改变”键，即可弹出右侧的“编辑信号图谱”窗口，进而选择所需的谱图信号。
11、从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，如下图所示，输入操作者名称，如“安装工程师”；在“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”。
区别: 手动--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。
Pr—在前缀/计数器----“前缀”框中输入前缀，在“计数器”框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd数据0001，vwd数据0002……。
12、点击“确定” ,从“仪器”菜单选择“系统开启”。
13、等仪器准备好，基线平稳，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”，进样。
(若无自动进样器，则基线平稳后，进样并搬动手动进样阀，启动运行。
)（DAD, VWD色谱图如下所示：）（三）、数据分析方法编辑:1、从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面。
2、从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名，如下图所示。
点击“确定”，则数据被调出。
3、做谱图优化：从“图形”菜单中选择“信号选项”，如下图所示。
从“范围”中选择“满量程”或“自动量程”及合适的时间范围或选择“自定义量程”调整。
反复进行，直到图的比例合适为止。
点击“确定”。
4、积分:●从“积分”菜单中选择“积分事件”选项，如下图所示。
选择合适的“斜率灵敏度”，“峰宽”，“最小峰面积”，“最小峰高”。
●从“积分”菜单中选择“积分”选项，则数据被积分。
●如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。
●点击左边“√”图标，将积分参数存入方法。
5、打印报告:●从“报告”菜单中选择“设定报告”选项，进入如下图所示画面。
●点击“定量结果”框中“计算”右侧的黑三角，选中“面积百分比”，其它选项不变。
●点击“确定”。
●从“报告”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告”底部的“打印”钮。
(四)、关机:●关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。
●退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。
●关闭Agilent 1200各模块电源开关。
(五)、Agilent 1200 LC维护保养：1、色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死（如乙腈/甲醇适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相）。
2、手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口。
3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。
4、带seal-wash的 1200，要配制90%水+10%异丙醇，开启seal-wash清洗泵，溶剂不能干涸。
5、注意事项见说明书，或由现场工程师介绍。
****注意：1、本教材仅适用于现场工程师培训讲解参考之用，内容为工作站现场培训的一般要求，请根据用户的仪器配置及现场用户的需求进行相应的培训内容增删。
2、安捷伦公司对本教材可能存在的错误及其后果不承担任何法律责任，我们适时推出新版本的培训教材，恕不另行通知。
维护知识问答1、为什么溶剂和样品要过滤?溶剂和样品过滤非常重要，它会对色谱柱、仪器起到保护作用，消除由于污染对分析结果的影响。
色谱柱：由于填料颗粒很细，色谱柱内腔很小，溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。
仪器：溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损，同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。
2、为什么HPLC用缓冲盐时要加在线Seal-wash选项？HPLC用缓冲盐时,由于泵头内的缓冲盐溶液存在高压析盐现象,析出的细小盐粒非常坚硬,它附着在蓝宝石活塞杆上,随着蓝宝石活塞杆的往复运动,容易产生划痕,并磨损密封垫,造成漏液等故障现象。
在线Seal-wash选项能有效的带走可能存在的缓冲盐结晶。
缓冲盐的浓度在0.1mol或大于0.1mol时,必须使用该在线冲洗选项.清洗液配制: 90%水+10%异丙醇.该混合液可抑制菌类生长和减小水的表面张力，不能干涸。
3、为什么Agilent 1200LC的流动相管路非常细?在使用HPLC时,应特别注意”柱外效应”对分析结果的影响，由于样品分子在液体流动相中的扩散系数比在气体中小4~5个数量级，液体流动相的流速也比气相慢1-2个数量级。
因此，样品进入色谱柱后，在柱子以外的任何死体积（进样器、柱接头、连接管、检测器）中，样品分子的扩散和滞留，都会引起色谱峰的展宽，而使柱效降低。
为使柱外效应减之最小，获得理想的分析结果，Agilent 1200LC 使用加工工艺难度高的毛细管线作为流动相管路。
毛细管线分类：0.17mm内径 ------绿色 ;0.12mm内径-------红色。
PEEK 管线：内径 -----0.13mm;0.18mm;0.25mm;0.5mm。
毛细管线优点: 柔韧性好.***Agilent 公司同时备有1/16in 的粗外径毛细管线,适用于不同习惯的用户 ,优点是刚性好,但柔韧性差一些。
4、流动相使用前为什么要脱气？流动相使用前必须进行脱气处理，以除去其中溶解的气体（如O2），以防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至检测器时，因压力降低而产生气泡。
气泡会增加基线的噪音，造成灵敏度下降，甚至无法分析。
溶解的氧气还会导致样品中某些组份被氧化，柱中固定相发生降解而改变柱的分离性能。
若用FLD，可能会造成荧光猝灭。
常用的脱气方法比较：氦气脱气法：利用液体中氦气的溶解度比空气低，连续吹氦脱气，效果较好，但成本高。
加热回流法：效果较好，但操作复杂，且有毒性挥发污染。
抽真空脱气法：易抽走有机相。
超声脱气法：流动相放在超声波容器中，用超声波振荡10-15min，此法效果最差。
在线真空脱气法：Agilent1200LC真空脱机利用膜渗透技术，在线脱气，智能控制，无需额外操作，成本低，脱气效果明显优于以上几种方法，并适用于多元溶剂体系。
