鲜乳中抗生素的检验

牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法1.高效液相色谱法（HPLC）：高效液相色谱是一种基于溶剂流动的液相色谱方法，具有灵敏度高、分离能力强等特点。

在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过样品前处理，去除干扰物，然后使用适当的洗脱液将抗生素从固相萃取柱中洗脱出来，最后用高效液相色谱对抗生素进行分离和定量。

2.毛细管电泳法（CE）：毛细管电泳法是一种基于电场作用下溶液中离子迁移速度的分析方法。

该方法具有高分离能力、快速分析速度等特点。

在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品进行前处理，然后通过毛细管电泳仪器进行分析。

该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且样品准备过程相对简单。

3.气相色谱法（GC）：气相色谱法是一种基于色谱柱分离原理的分析方法，通过适当的蒸发和衍生反应可以将抗生素样品转换为易于气相色谱分析的衍生化物。

该方法具有高度选择性、高灵敏度等优点。

在牛奶中检测抗生素残留时，通常需要进行样品前处理。

首先将牛奶样品中的脂肪物质去除，然后使用适当的溶剂将抗生素从样品中提取出来，并通过气相色谱进行分离和定量分析。

4.酶联免疫吸附法（ELISA）：酶联免疫吸附法是一种基于抗原-抗体反应原理的免疫学方法。

在牛奶中检测抗生素残留时，首先利用适当的蛋白质工程技术制备特异性抗生素抗体，然后将牛奶样品中的抗生素与抗体结合，通过酶标记的二抗或亲和素染色法对特异性抗体进行检测。

该方法具有灵敏度高、操作简单等特点。

5.高分辨质谱法（HRMS）：高分辨质谱法是一种基于质荷比检测的方法，具有高灵敏度、高分辨率等优点。

在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过适当的前处理，然后通过质谱仪对抗生素进行定性和定量分析。

该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且可以准确测定其残留量。

总结起来，牛奶中抗生素残留的检测方法包括高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相色谱法、酶联免疫吸附法和高分辨质谱法等。

这些方法具有不同的优点和适用范围，可以根据具体需求选择合适的方法进行检测。

鲜乳中抗生素残留检验鲜乳中抗生素残留检验张志诚 060409123（常熟理工学院，苏州常熟，215500）摘要：利用TTC快速检测法对牛奶中抗生素检测结果进行比较分析，根据检测结果认为样品牛奶中不含青霉素G类抗生素。

关键词：牛奶；抗生素残留；TTC；青霉素GAbstract：The TTC method is used to detect the antibiotic residue in milk.According to testresults,there’s no Penicillin-G class antibiotic residue.Key words：milk; antibiotic residue; TTC method; Penicillin-G class antibiotic 育，引言随着人们对食品安全问题的逐步关TTC不能还原，试验液为无色状态。

根据待注．长期饮用抗生素残留超标乳制品可能引测牛奶的着色情况判定是否有抗菌素存在。

起的菌群失调、产生耐药性。

该问题已引起该法简便、快速，无需特殊设备，2h～3 h消费者和乳品生产企业的高度重视。

虽然我可见报告。

检测各种抗生素所用的TTC法试国《生鲜牛乳收购标准》中并未对抗生素残验的灵敏度(最低检出量)分别为：青霉素留作出要求．。

但绝大部分乳品生产企业在 0．004U／mL，链霉素0．5 U／mL，庆大霉原料乳收购环节都已开展抗生素残留检测素0．4 U／mL，卡那霉素5 U／mL。

工作。

本文利用TTC法(嗜热链球菌抑制法)对牛奶中抗生素残留进行检测。

2.材料和方法1.原理TTC法，即氯化三苯基四氮唑法(tripheye tetrazolium chloride)，是目前我国食品卫生标准中规定的检查牛乳中抗生素残留的检测方法 (GB5409．85)。

样品经80℃杀菌后加入嗜热链球菌菌液。

培养一段时间后加入TTC( 2,3,5-氯化三苯四氮唑），若样品中不含抗菌素或其浓度低于检测限，试验菌繁殖，TTC被还原，试验溶液变成红色。

乳品中抗生素的检测方法引言：抗生素是一种用于治疗和预防疾病的药物，但在食品中的残留量超标可能对人体健康造成负面影响。

乳制品是人们日常生活中常见的食品之一，因此对乳品中抗生素残留的检测方法至关重要。

本文将介绍几种常用的乳品中抗生素检测方法。

一、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是一种常见的用于检测乳制品中抗生素残留的方法。

该方法能够在短时间内对多种抗生素进行分离和定量。

具体操作步骤如下：1.准备样品：将待测乳制品样品样品加入适量的提取剂中，经过摇晃和离心等操作，获得样品提取液。

2.样品的制备：将样品提取液进行蒸发浓缩，得到浓缩样品。

3.高效液相色谱分离：将浓缩样品溶解于适量的溶剂中，并通过高效液相色谱仪器进行分离，获得不同抗生素的峰。

4.定量分析：通过标准曲线法，根据峰的面积或高度进行定量分析，得出样品中抗生素的浓度。

优点：高效液相色谱法能够同时检测多种抗生素，具有较高的定量精度和分辨率。

二、酶联免疫吸附试验法（ELISA）酶联免疫吸附试验是一种利用抗生素与酶标记物结合来检测乳制品中抗生素残留的方法。

具体操作步骤如下：1.制备测定板：首先将具有抗生素特异性的抗体固定在微孔板上。

2.加样：将待测样品加入微孔板中，经过一定的反应时间，让样品中的抗生素与抗体结合。

3.洗涤：用洗涤缓冲液清洗微孔板，去除未结合的物质。

4.酶标记：加入酶标记抗体，使其与结合到微孔板上的抗生素形成复合物。

5.底物溶液：加入底物溶液，通过底物的催化反应，将其转变为有颜色的产物。

6.测定：通过酶标仪器测定样品中产生的颜色和强度，得出抗生素的浓度或者阳性相关性结果。

优点：酶联免疫吸附试验法具有操作简便、快捷、敏感性高等优点，能够检测到低浓度的抗生素残留。

三、质谱法（MS）质谱法是一种通过对乳品样品中的物质进行化学分析的方法，它能够精确地分析样品中的抗生素成分。

该方法结合了质谱仪和色谱仪的特点，具体步骤如下：1.样品制备：将待测乳制品样品加入适量的提取剂中，经过摇晃和离心等操作，获得样品提取液。

实验三、鲜奶中抗菌素残留检验（TTC法）我国《食品卫生法》中规定，奶牛在应用抗菌素期间和停药后5天内的乳汁不得销售。

牛奶中抗菌素残留的最主要原因有两点，一是奶牛患某些疾病如乳房炎时大量应用抗菌素治疗；二是为保证群体饲养奶牛的健康，饲养人员在饲料中广泛添加抗菌素。

牛奶中抗菌素残留不仅会引起某些特殊人群的过敏反应；而且由于人们长期间接吸收低剂量的抗菌素，可引起病原菌对多种抗菌素产生耐药性。

因此，检测牛乳中的抗菌素残留已成为一项急需开展的常规检验工作。

(一)原理乳中有抗菌素存在，则检样中虽加入菌液培养物，但因细菌的繁殖受到抑制而使指示剂TTC不还原，不显色。

与此相反，如果没有抗菌素存在，则加入菌液即行增殖，TTC被还原而显红色。

也就是说检样呈乳的原色时为阳性，呈红色为阴性。

(二)试剂与器材1．水浴锅2．100℃温度计3．灭菌吸管(10ml、1ml)，灭菌试管(15mm×150mm)。

4．脱脂乳(经113℃灭菌20min)5．4% TTC (2,3,5-氯化三苯基四氮唑)水溶液,配制时先用95%乙醇溶解后，再用蒸馏水配成4% TTC浓度。

6．菌种：嗜热乳酸链球菌。

(三)操作步骤1．菌液制备将菌种移种脱脂乳，经36±1℃培养15h后，以灭菌脱脂乳1：1稀释待用。

2．取检样9ml，置无菌试管内，80℃水浴加热5min。

3．冷却至37℃以下，加菌液1ml后36±1℃水浴培养2h，加入TTC 0.3ml 指示剂，室温培养30min。

4．结果观察：乳中有抗菌素存在时，加入指示剂TTC后牛乳不显色，即抗菌素阳性；相反，如果没有抗菌素存在，则加入TTC后显红色，即抗菌素阴性。

抗菌素阳性者，再于水浴中培养30min第二次观察（见表26）。

表26 显色状态判断标准(GB 4789.27－94)显色状态判断未显色者阳性微红色者可疑桃红色～红色阴性。