香菇多糖提取工艺条件和测定方法的研究

香菇多糖提取工艺的研究进展香菇多糖提取工艺的研究进展香菇Lentinusedodes 为担子菌纲伞形科真菌，是世界上第二大食用菌。

香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质，具有抑制肿瘤、调节免疫、抗病毒和抗氧化等多方面的药理活性，且毒副作用小。

香菇多糖的提取常用水提醇沉法、酸碱提取法，但存在提取工艺复杂、溶剂使用量大、时间长等缺点，而且容易造成多糖降解，生物活性降低。

本文主要对近年来香菇多糖提取工艺优化研究方面的进展进行阐述。

1.超声波提取超声波提取法是利用超声波特殊的物理性质，加速介质质点运动、空化作用、振动匀化等以增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，从而使药效物质加速融人溶剂提高有效成分的得率。

王恒等用超声波辅助法从香菇中提取香菇多糖，通过实验优化确定出香菇多糖最佳提取工艺为超声功率200W ，料液比35：1，超声时间40min ，香菇多糖提取率为6.72 ％。

王俊颖等采用超声法浸提香菇多糖通过正交试验设计确定的最佳工艺为料水比1 : 25，超声温度60° C超声时间30min , 超声功率300W ，多糖得率为8.72 ％。

李宏睿等采用正交试验设计，对香菇多糖的提取条件进行优化，并与单纯的热水浸提进行比较。

结果表明，在料水比l：25 ，超声时间35min ，超声功率105W ，热水浸提温度90 ％，浸提时间20min 的条件下，提取效果最好，多糖提取率为13.75 ％，比单纯热水浸提法提高6.22％。

2.微波提取微波辅助提取技术主要是通过调节微波加热的参数，有效地加热物料中的目标成分，对目标成分进行选择性提取。

刘小丽等研究微波辅助法提取香菇多糖采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时间、乙醇用量以及杂蛋白的去除条件分别进行了考察。

试验结果表明最佳提取工艺条件为固液比1：20mL ，微波辐射功率为280W ，辐射时间5min，乙醇与多糖提取液体积比为4：1，香菇多糖提取率可达到9.46 ％。

香菇多糖提取方法探讨
1 引言
香菇多糖作为功能性酒类的一种，具有独特的作用，如抗氧化、抗癌、抗衰老等，是发展分子营养学的重要方向。

因此，研究香菇多糖的提取方法十分必要。

在保证活性物质的完整性和活性的前提下，从自然资源中高效提取，进一步完善多糖技术，是当前香菇多糖研究发展的重要研究课题。

2 香菇多糖的提取方法
1.有机溶剂抽提法：这种方法通常采用有机溶剂，使植物细胞外部的多糖受到溶解，从而将香菇多糖从菇落液中提取出来。

这种溶剂抽提法虽然可以提取大量多糖，但容易对抗氧化剂和其他生物活性物质产生不良影响。

2.超声波提取法：利用超声波作用于总淀粉中，可以迅速将其分解，从而达到香菇多糖的极高提取率。

超声波提取可以保持多糖中活性物质的完整性，在节约能源和保护环境的前提下提取多糖，具有重要的科研价值。

3.发酵法：发酵主要是利用酶的水解作用，将香菇总淀粉分解成多糖，从而实现多糖的提取。

发酵法可以从香菇中获取大量多糖，但节点操作需要特殊的技术，且存在一定的安全风险，需要特别注意。

3 结论
以上是香菇多糖提取方法的简单介绍，每种方法都具有自身优势和局限性。

提取前要考虑植物体结构、多糖特性及其枯萎情况，选择合适的提取方式，以保持多糖的活性和完美性，实现高效率的提取。

香菇中提取多糖的技术研究香菇中多糖的作用：，在民间素有“山珍”之称。

香菇属于高蛋白，低脂肪，高碳水化合物，高纤维素营养食品[1]。

香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒、提高免疫力和刺激干扰素形成等功能[3]，其毒副作用小，疗效高，具有重要的研究和开发价值。

香菇( Lentinus edodes)是侧耳科( Pleara taco ) 的担子菌,含有多种有效药用组分,尤其是香菇多糖( Lentinan 简称LN T)是1种宿主免疫增强剂,具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能[1 ] ,而引起人们的广泛关注。

香菇中含有一种能治疗癌症, 抗恶性肿瘤, 抗病毒, 抗感染, 提高人体免疫力等多种生理功能的物质———香菇多糖。

医学研究证明, 它是通过刺激机体的免疫系统使机体的免疫功能得到恢复和提高, 由机体本身的抵抗力去杀死肿瘤细胞。

它的作用是间接的, 所以毒副作用小, 在各类抗癌药物中, 它被认为是毒副作用可以忽略不计, 剂量低, 疗效好的天然的理想药物一：采用亚临界水技术提取方法，考察了提取香菇多糖的最佳试验条件。

结果表明，最佳提取条件为亚临界水温度150 ℃，液料比30 mL·g-1，浸提时间为5 min，浸提次数为2 次，在该条件下香菇多糖得率可达15.7%，与热水恒温浸提法相比，亚临界水浸提法可明显降低提取时间和提高香菇多糖得率。

传统提取香菇中的多糖主要利用热水浸提法，这种方法不仅浸提时间长，而且提取率不高。

本试验采用亚临界水提取方法，所谓亚临界水也被称为过热水、高压热水或热液态水。

当水在374.2 ℃和22.1 MPa 以上的高温、高压条件下，可形成既非液体又非气体的第四状态，即所谓“超临界状态”。

在此状态下的水称为“超临界水”。

在稍微低于此温度和压力下的水称为“亚临界水”[4]。

同传统的提取方法相比，亚临界水提取具有如下特点[5-6]：不论亚临界水提取对象是液体还是固体，其有效成分的溶解度要比传统方法高得多，提取率也就高得多；亚临界水提取在提取时间内几乎没有能耗，其作用效果迅速且能量消耗较少；亚临界水会使蛋白质、淀粉等变性，给后续的分离、纯化带来方便。

香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究报告1. 研究目标本研究旨在探索香菇中多糖的提取工艺和含量测定方法，以提供一种高效、可行的工艺流程和准确的测定方法，为香菇多糖的应用开发提供科学依据。

2. 方法2.1 香菇多糖提取工艺研究2.1.1 提取试剂选择根据文献综述和前期实验结果，筛选出适合香菇多糖提取的试剂。

常用的试剂有热水、酶解液、强酸、强碱等，选择合适试剂对香菇进行水解提取。

2.1.2 提取工艺优化基于单因素实验和正交实验设计原理，优化香菇多糖提取的工艺参数，包括提取温度、提取时间、料液比等因素。

通过测定提取液中多糖的含量，确定最佳的提取工艺条件。

2.2 香菇多糖含量测定方法研究2.2.1 选择合适试剂反应根据香菇多糖的特性，选用适合的试剂进行反应。

常用的试剂有硫酸、酚硫酸、费林试剂等，可以选择适合的试剂。

2.2.2 建立标准曲线选取不同浓度的香菇多糖标准品，按照测定方法进行测定，记录各标准样品的吸光度或色素生成情况。

根据实验数据，建立标准曲线。

2.2.3 样品预处理将香菇样品经过适当的处理，如研磨、溶解等，使样品中的多糖保持在可测量范围内。

2.2.4 多糖含量测定根据建立的标准曲线和样品的吸光度值，计算出香菇中多糖的含量，并进行统计分析。

3. 发现3.1 香菇多糖提取工艺发现经过实验研究，发现采用热水提取是一种较为有效的香菇多糖提取工艺。

最佳提取条件为提取温度80℃，提取时间2小时，料液比1:10。

3.2 香菇多糖含量测定方法发现在已有的试剂中，硫酸试剂反应较为敏感，可以用于香菇多糖的含量测定。

建立的标准曲线表明，香菇多糖的浓度与吸光度呈现良好的线性关系。

4. 结论本研究通过对香菇多糖的提取工艺和含量测定方法进行深入研究，得出以下结论：1.香菇多糖的热水提取工艺在提取温度80℃，提取时间2小时，料液比1:10的条件下，可获得较高的提取产率。

2.硫酸试剂是一种适用于香菇多糖含量测定的试剂，建立的标准曲线可用于准确测定香菇多糖的含量。

东北产香菇中多糖含量的提取及测定研究陈玉锋,庄志萍,胡志宏(牡丹江师范学院化学化工学院,黑龙江牡丹江157012)摘要 [目的]研究香菇中多糖的提取方法,并对东北产香菇中多糖的含量进行测定。

[方法]分别采取热水浸提法、微波辅助浸提法、超声辅助浸提法探讨了不同香菇多糖提取条件对多糖提取率的影响,确定了超声辅助浸提法为最佳提取方法,并用该方法提取香菇多糖,探讨硫酸-苯酚法测定多糖含量的最佳条件,测定东北产香菇的多糖含量。

[结果]线性方程为y =7.4089c +0.0163,线性相关系数r =0.9987,精密度为RS D <2.00%(n=5)。

[结论]超声辅助浸提法为香菇中多糖含量的最佳提取方法,该方法简便、快速、准确。

关键词 香菇多糖;提取;测定中图分类号 S646.1+2 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)26-14286-03Study on the Extracti on a nd Deter m i nation of Lenti nan i n Mushroo ms CHEN Yu -feng et al (Co lledge of Che m istry and Chem i calEng i neeri ng ,M udanji ng N or malU ni versity ,M udanji ang ,H e il ong ji ang 157012)Abstract [Objecti ve]The am i was to study t he extracti on o f the l enti nan i n mushroo m s and deter m i ne t he content of l enti nan .[M et hod]The e ffecti on of different extraction cond i ti ons on extraction efficiency o f l enti nan i n mushrooms by usi ng ho twater ,m i crowave -assisted ex trac -ti on and ultras onic -assisted extracti on met hord ,and trasonic -assisted extraction methord was t he bestm et hord .Then lenti nan was ex tracted by trasonic -assisted extraction me t hord ,and optm i u m conditions o f the deter m i nati on of lenti nan content were studi ed by pheno l-s u lf uri c aci d m et hord to det er m i ne the lentinan content o f nort heastmushroo m s .[R es ults]The li near equation was y =7.4089c +0.0163,and t he li near coe fficientw as 0.9987,t he precision was RS D <2.00%(n=5).[Concl usion]T rasoni c -assi st ed ex tracti on m et hordw as proved to be sm i ple ,rapi d ,accurate and t he best extracti on method .K ey words L enti nan ;Ex tracti on ;D eter m i nati on基金项目 牡丹江师范学院指导项目(KZ2008008);牡丹江师范学院重点项目(Z2008003)。

香菇中糖类物质离与测定————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：香菇中糖类物质的分离与测定摘要：本实验采用热水浸提和乙醇醇沉的方法提取香菇多糖（Lentinan，LNT），利用正交法得出最佳提取粗多糖的方案，得到的粗多糖回收率为14.05﹪，再对得到的粗多糖进行定性、定量分析。

用苯酚—硫酸法测定已提取出的粗多糖中单寡糖与多糖的含量为35.9%；经过薄层层析和纸层析法分析单糖的组成，其中组成多糖的单糖多属于葡萄糖和阿拉伯糖；用Sepharsose CL—6B柱层析法测定多糖的相对分子量约为5597.58道尔顿。

气象色谱分析单糖含的结果是香菇多糖中的单糖种类有半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖等，其中含量较多的半乳糖和葡萄糖。

关键字：香菇多糖回收率含量组成相对分子量Separation and Determination of carbohydrates in Lentinus edodesAbstract：This experiment extracts of lentinan (Lentinan LNT) by using hot water extraction and ethanol alcohol precipitation method. The orthogonal method to get the optimum extraction of polysaccharides is the best program, resulting polysaccharides recovery of 14.05%, and then to get crude polysaccharide qualitative and quantitative analysis. By using Phenol-sulfuric acid method, extracted polysaccharides single oligosaccharides and polysaccharides content was 35.9%; TLC and paper chromatography analysis monosaccharide composition, the monosaccharide composes mostly of glucose and arabinose; Relative molecular weight of polysaccharide determined by Sepharsose CL-6B column chromatography is about 5597.58 daltons. The results of gas chromatographic analysis of a monosaccharide is galactose, glucose, arabinose, fucose, sugar, and other types of monosaccharides in the lentinan. galactose and glucose are much more among them.Key words： Lentinan; Recoveries; Content; Composition; Relative molecular weight0 引言：糖类化合物是中药的重要成分，随着现代生物化学与分子生物学的不断发展与进步，人们对糖的了解越来越多。

香菇多糖的提取工艺研究郝俊尧【摘要】采用热水法浸提香菇多糖,按照原料处理、烘干、粉碎、称样配比、热水浸提、抽滤、离心、纯化、浓缩、醇提、定容、稀释、苯酚-硫酸法测量、吸光度测量,然后以葡萄糖作为标准品计算香菇多糖得率的工艺流程.在控制单因素的情况下,分别探讨提取时间、提取温度、料液比及提取次数对香菇多糖提取率的影响,测得香菇多糖提取的最佳提取时间3 h、最佳提取温度85℃、最佳提取料液比1:30、最佳提取次数3次.通过正交试验测得在多因素影响下香菇多糖提取的最佳工艺组合为提取温度85℃、料液比1:30、提取时间2 h、提取次数1次,提取率达5.61％.该方法容易操作、准确、灵敏度高,是一种无污染而且花费较少的香菇多糖提取工艺.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2019(058)006【总页数】4页(P110-113)【关键词】香菇;多糖;单因素试验;正交试验;多糖得率【作者】郝俊尧【作者单位】江苏省盐城市高级实验中学,江苏盐城 224000【正文语种】中文【中图分类】S131香菇（Lentinus edodes （Berk.）sing）是世界第二大食用菌，为担子菌亚门担子菌纲伞菌目口蘑科香菇属真菌［1］。

香菇菌肉白色，细密，因其口味鲜美，香味浓郁，营养丰富，并有显著的药用及滋补作用，有“蘑菇皇后”之称，又因其具有抗癌和增强癌症患者抵抗力的作用，又被称作“抗癌新兵”［2］。

香菇中麦角甾醇含量很高，对防治佝偻病有效；香菇含有6大酶类的40多种酶，可以防治人体酶缺乏症；香菇中的脂肪所含脂肪酸，对人体降低血脂有益。

经常食用香菇具有降低胆固醇、防止血管硬化、增强人体免疫功能和防治癌症等作用［3］。

香菇中的香菇多糖是一种非特异免疫刺激剂，可直接激活人体内的T-淋巴细胞，增强抗体形成细胞的功能，具有抗病毒、抗肿瘤等多种功能，引起人们广泛关注［4］。

香菇多糖在体内能使脾脏和腹腔的免疫细胞活性增强，诱生干扰素［5］。

超声波法提取香菇多糖研究背景：香菇多糖的性质：香菇多糖以β~1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能用途：抗肿瘤药。

为化、放疗辅助药。

主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。

生产技术状况：因为香菇多糖的用途广泛，提取比较方便，越来越多的人投身于这方面的研究，是的提取技术方面的大幅度提升。

状况良好。

操作过程：方案设计：香菇多糖的提取香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右）→提取45min（中间停顿2次，每次5min）→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min（中间超声波停2次，每次5min）→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用香菇多糖的测定：1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：将溶液PH 调节至8---9，加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5% (w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液。

2.制作标准曲线：准确吸取1mg/ ml 葡萄糖标准溶液1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0ml 置于50ml 容量瓶定容，准确吸取该系列溶液各2ml ，然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。

3. 样品的测定：取去完蛋白的样液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度。

将吸光度控制在0.2-0.8人员分工：我们分成两组来完成实验，因为有两组待测夜要进行测定。

然后标准溶液是由第一大组完成。

由于操作比较简单，我们就一起完成。

1人对溶液进行去蛋白，2人制作待测液，1人对待测液进行测定，并记录数据。

实验现象：配置待测液时，加入浓硫酸后溶液变成橙黄色。

从而可来额定吸光度。

香菇多糖的提取实验报告1. 掌握香菇多糖的提取方法；2. 了解香菇多糖的物化性质；3. 研究香菇多糖的抗氧化活性。

实验原理：香菇多糖是一种高分子多糖，具有多种保健功效，如抗氧化、抗肿瘤、促免疫等。

香菇多糖的提取方法有多种，其中较为常用的是热水浸提法和酸碱法。

热水浸提法是指将香菇粉末加到一定的温度下的水中，随后进行浸提，加热时间和浸提时间是影响提取率和质量的关键因素。

酸碱法是指将香菇粉末加入一定比例的酸和碱溶液中，进行水解，随后用酒精沉淀，最后用稀酸或碱溶解，并用冷醇进行沉淀和洗涤，得到香菇多糖。

实验材料：香菇粉末、蒸馏水、NaOH、HCl、酒精、醋酸钠、DPPH、卡拉菲指示剂。

实验步骤：实验一：热水浸提法提取香菇多糖1. 取4g香菇粉末，加入200mL蒸馏水中，加热至80℃，并保持2h；2. 将提取液用纱布过滤，分别收集滤液；3. 将滤液浓缩至大约50mL，用三倍体积的酒精沉淀，过滤并收集沉淀；4. 重复上述步骤2和步骤3，直至香菇多糖的浓度达到所需浓度为止。

实验二：酸碱法提取香菇多糖1. 取4g香菇粉末，加入100mL0.1mol/L NaOH中，进行水解，保持100℃，2h；2. 加入等量的0.1mol/L HCl至酸度为2，用酒精沉淀；3. 用10%醋酸钠溶液洗涤沉淀，并用稀棕黑色指示剂观察，直至洗涤液呈现淡黄色；4. 用酒精洗涤沉淀，分别重复上述步骤2-3，将洗涤干燥的沉淀溶解后，混合，加热水浴，调节pH至7左右，沉淀多糖，洗涤，干燥得到香菇多糖。

实验三：测定香菇多糖的抗氧化活性1. 取一定量的DPPH溶液（30mg/L），加入1mL香菇多糖液体，反应30min；2. 测定吸收值，计算香菇多糖的抗氧化活性。

实验结果：通过实验一和实验二分别提取了香菇多糖，得出了两种不同的提取方法的多糖成品。

经过实验三，测得香菇多糖的抗氧化活性，根据吸收值的大小可以判断多糖的抗氧化强弱。

实验结论：热水浸提法和酸碱法提取香菇多糖都是有效的提取方法。

超声波法提取香菇多糖实验报告实验目的：利用超声波法提取香菇多糖，并评估其提取效果。

实验原理：香菇多糖是一种具有多种生物活性的多糖物质，具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等功效。

超声波法是一种常用的物理提取方法，其通过超声波的作用产生的空化、涡流、高温和高压等因素，能够破坏细胞壁，加速提取物质的释放。

实验材料：1.新鲜香菇2.无水乙醇3.超声波浴4.离心机5.蒸馏水实验步骤：1.将新鲜香菇洗净、切片。

2.将香菇片放入无水乙醇中浸泡，浸泡时间为2小时。

3.将浸泡好的香菇片放入超声波浴中，超声波浴的功率设置为200W，浸泡时间为30分钟。

4.将超声波处理后的香菇片用离心机离心，得到上清液。

5.将上清液转移至烧杯中，加入等量的蒸馏水进行稀释。

6.使用酚硫酸法或硫酸-硫酸盐法测定香菇多糖的含量。

实验结果：根据实验测定的结果，得到了超声波法提取的香菇多糖的含量。

实验讨论：比较超声波法提取的香菇多糖含量与其他提取方法的结果，评估超声波法的提取效果，并分析其原因。

结论：通过超声波法提取香菇多糖可以得到较高的提取效果，为后续香菇多糖应用研究提供了基础。

实验改进：1.控制超声波浴的功率和浸泡时间等超声波参数，优化提取过程。

2.比较不同浸泡时间、浸泡温度和液固比对提取效果的影响。

3.与其他物理提取方法进行对比研究，找到最佳的提取方法。

实验总结：超声波法是一种常用的物理提取方法，对于香菇多糖的提取效果较好。

但是在实际应用中还需要进行优化和改进，以提高提取效率和产品质量。

此外，对于香菇多糖的应用和其生物活性的研究也是未来的方向。

香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究白玉静, 佟丽华( 佳木斯大学化与药学院, 黑龙江佳木斯154007)关键词: 香菇多糖; 提取工艺; 测定方法中图分类号: Q 949. 329+. 89 文献标识码: A 文章编号: 1008- 0104 (2006) 01- 0055- 02食用真菌是人类在长期的实践活动中认识得最早、但并未得到充分利用的一类微生物。

因其具有种类繁多、分布广泛 1 、营养成分丰富、药用保健价值高 2 等优点, 目前已成为国内外学者研究的热点。

有些食用菌中具有能抗癌和增强癌症患者抵抗力的生理活性物质, 称为食用菌多糖, 食用菌多糖的生理功能、化学结构以及构效关系正成为多糖研究的前沿阵地, 取得了很大进展, 其中香菇多糖是研究的比较多的一类食用菌多糖。

香菇多糖是香菇中的主要活性成分。

香菇[L en t i n u s edo de s (B e rk ) S o n g ]为担子菌亚门, 担子菌纲, 伞菌目, 口蘑科, 香菇属真菌, 因其口味鲜美, 香味浓郁, 营养丰富, 有显著的药用及滋补作用而被誉为“蘑菇皇后”、“抗癌新兵”、“菌中之秀”3 、“诸菌之冠蔬菜之魁”, 它的学名很多, 有香蕈、冬菇、花菇、香草、香信等。

常食香菇有降低胆固醇、防止血管硬化、增强人体免疫功能和防治癌症的作用4 。

香菇多糖(L en t in an, LN T ) 是一种天然人体免疫调节剂, 具有抗肿瘤、抗感染和调节免疫力等作用。

由于香菇多糖的特殊活性作用, 因此, 建立高效、经济的香菇多糖的提取方法以及含量测定方法具有重要的现实意义。

现对香菇多糖的提取工艺和含量测定方法进行综述。

1 香菇多糖的提取工艺香菇多糖是一种以Β- D 1 →3 葡聚糖残基为主链, 侧链为(1→6) 葡聚糖残基的葡聚糖5 。

传统香菇多糖的提取方法有水提醇沉法、稀碱浸提法、稀酸浸提法和酶法等, 随着对香菇研究的不断深入, 又出现超滤法、微波辅助浸提法以及超声波法等。

原料：香菇。

NaHCO固体，浓硫酸，95%乙醇稀盐酸，PH试纸,复合酶试剂：蒸馏水,葡萄糖，苯酚，铝片，3（木瓜蛋白酶：纤维素酶=2：1），设备和仪器：100ml容量瓶，6个50ml容量瓶,玻璃棒，蒸馏装置（温度计、沸石、三口烧瓶、冷凝管），烧杯若干，锥形瓶若干，棕色瓶一个，抽滤瓶，1、2、5、10ml吸液管，电子天平，真空干燥箱，恒温水浴锅，紫外分光光度计，粉碎机，40、60、80、100目的筛子，DL700—0.55×1。

5超高压等静压机（上海大隆高压设备厂），真空泵，THZ—82A台式恒温振荡器,台式离心机。

1、标准葡萄糖溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖100。

0mg，加蒸馏水溶解并定容于100ml容量瓶中，摇匀，配成浓度为1mg/ml标准葡萄糖溶液备用。

2、5％苯酚试剂的配制。

苯酚水浴加热溶解后称取100g,加铝片0.1g（先用1：6的盐酸除去铝片表面氧化铝后，再称量使用)，加入碳酸氢钠30g,蒸馏,收集178—182℃的馏分，取馏出液7。

5g，加入蒸馏水150mL，得5。

0%的苯酚溶液，置于棕色瓶中备用。

3、标准曲线绘制以葡萄糖作为标准品，采用苯酚—硫酸比色法，用紫外分光光度计测定多糖含量.精密吸取已配制的葡萄糖标准品溶液0.5，1，1.5，2,2.5，3ml置于6个50ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度线，摇匀。

精密吸取2ml，分别加入5％苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入5ml浓硫酸,振摇5min，置沸水浴上加热15min，然后置冷水浴中冷却30min，以溶剂蒸馏水为空白作对照，在400~600nm内扫描，最大吸收波长为490nm。

在490nm处，测吸光值,以浓度为纵坐标，吸光值为横坐标，绘制标准曲线，得出葡萄糖标准品浓度Y（ug/ml）与吸光值X的回归方程：Y=15。

336X—0。

0298，R2=0。

9997。

在2.5~15.0 ug/ml范围内呈线性关系。

预处理:将新鲜清洗干净，除去其根部,将剩下的菌伞挤压,切小块放入真空干燥箱干燥，待香菇恒质量,放入粉碎机中粉碎,将粉碎后的香菇粉依次通过40，60，80，100目的筛子，得到40目以下、40~60目、60～80目、80～100目、100目粒度以上的样品，过筛之后把各级香菇粉分别装到清洁干燥的烧杯中，编号贴上标签，置于真空干燥箱中待用。

第1篇一、实验目的1. 了解香菇多糖的提取方法及其原理。

2. 掌握香菇多糖的提取工艺流程。

3. 优化提取条件，提高香菇多糖的提取率。

二、实验原理香菇多糖是一种具有多种生物活性的多糖类物质，主要存在于香菇子实体中。

香菇多糖的提取方法有热水提取法、酸碱提取法、酶解提取法等。

本实验采用热水提取法，通过加热香菇子实体，使香菇多糖溶解于水中，再通过离心、沉淀等步骤提取香菇多糖。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 香菇子实体：市售优质香菇- 蒸馏水：分析纯- 无水乙醇：分析纯- 95%乙醇：分析纯- NaCl：分析纯- 乙酸：分析纯- 乙醚：分析纯- 磷酸盐缓冲液：pH 7.42. 实验仪器：- 电子天平- 烧杯- 离心机- 恒温水浴锅- 真空干燥箱- 超声波清洗器- 精密移液器- 滤纸- 漏斗- 玻璃棒四、实验步骤1. 香菇子实体的预处理- 将香菇子实体洗净，去除根部，切成小块。

- 将香菇小块放入真空干燥箱中低温烘干，直至水分含量低于10%。

- 将烘干的香菇小块研磨成粉末。

2. 香菇多糖的提取- 称取20g香菇粉末，置于250ml烧杯中。

- 加入100ml蒸馏水，于石棉网上加热至沸，并不断搅拌，煮沸30min。

- 用滤纸过滤，收集滤液。

- 将滤渣再用100ml蒸馏水煮沸30min，过滤，收集滤液。

- 将两次滤液合并，加热浓缩至20ml。

3. 香菇多糖的纯化- 将浓缩后的滤液加入95%乙醇，搅拌并冷却至室温，静置1h。

- 以4000r/min的转速离心10min，收集沉淀。

- 将沉淀置于真空干燥器中干燥，得到粗香菇多糖。

4. 香菇多糖的鉴定- 将干燥后的粗香菇多糖用蒸馏水溶解，制成一定浓度的溶液。

- 采用高效液相色谱法对香菇多糖进行鉴定。

五、实验结果与分析1. 香菇多糖的提取率- 通过实验，得到香菇多糖的提取率为1.5%。

2. 香菇多糖的鉴定- 通过高效液相色谱法，鉴定出香菇多糖的主要成分是β-1,3-葡萄糖。

香菇多糖的粗提取
一、实验目的
了解香菇多糖的理化性质及提取工艺流程。

二、实验原理
香菇是一种药食两用真菌，具有提高免疫力、抗癌、降糖等多种生理功能。

水溶性多糖作为香菇主要活性成分之一，主要以β-1,3-葡聚糖的形式，分子量从几万到几十万不等。

提取香菇多糖的方法有：水提醇沉法（热水浸提法）、碱浸提法和酶解法。

水提醇沉法是最常见的方法。

香菇多糖溶于水。

热水浸提时，香菇的组织细胞破裂，多糖成分浸出，再用乙醇沉淀香菇多糖。

三、实验材料与试剂
原料：干香菇500g
试剂：氯仿、正丁醇、医用纱布、工业酒精
四、实验仪器
粉碎机、旋转蒸发器、烧杯、玻璃棒
五、提取工艺流程
1. 将干燥的香菇子实体粉碎；
2. 加入10倍的蒸馏水，用沸水提取2h，用纱布过滤；
3. 将滤液倒入圆底烧瓶中，在旋转浓缩仪上进行浓缩，浓缩液体积至一定体积；
4. 将浓缩液在4000rpm下离心5min，将上清液转入另一烧杯，除去残渣；
5. 上清液中加入等体积的Sevage试剂（氯仿：正丁醇=4：1 v/v），搅拌5min，静置30分钟；
6. 将混合液体在4000rpm下离心5min, 分离水相；
7. 在水相中加入无水乙醇至酒精终浓度为80%，搅拌均匀，静置10min，4000rpm 下离心5min；
8. 取出沉淀物，放入已称重的干燥表面皿中，在真空干燥箱中80℃下真空干燥；
9. 干燥后，称重，计算多糖的产率。

六、实验准备
Sevage试剂配制：取三氯甲烷和正丁醇，按照4﹕1进行混合。

香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究一、研究背景香菇是一种常见的食用菌，具有丰富的营养价值和药用价值。

其中，香菇多糖是一种重要的生物活性物质，具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等多种生物学活性。

因此，提取香菇多糖并测定其含量具有重要的意义。

二、香菇多糖提取工艺1. 原料准备：选择新鲜的香菇作为原料，洗净后切碎备用。

2. 提取方法：采用水提法进行多糖提取。

将切好的香菇放入适量的水中，加热至沸腾后继续加热2小时左右，然后过滤得到提取液。

3. 沉淀分离：将提取液加入3倍体积的绝对乙醇中搅拌均匀后静置12小时以上，使得多糖沉淀。

然后将沉淀分离出来并用纯水洗净。

4. 浓缩干燥：将分离出来的多糖溶液进行浓缩至一定浓度后干燥得到香菇多糖粉末。

三、香菇多糖含量测定方法1. 蒽醌法：将香菇多糖与蒽醌反应生成有色化合物，通过比色法测定其吸光度从而计算出含量。

具体操作步骤为：取适量的香菇多糖溶液加入适量的蒽醌溶液，加入硫酸后混匀，放置15分钟后用紫外分光光度计测定吸光度。

2. 酚-硫酸法：将香菇多糖与酚反应生成有色化合物，通过比色法测定其吸光度从而计算出含量。

具体操作步骤为：取适量的香菇多糖溶液加入适量的稀硫酸和5%的酚溶液，混匀后放置15分钟后用紫外分光光度计测定吸光度。

3. 高温高压消解法：将香菇多糖样品进行高温高压消解后使用紫外分光光度计进行测定。

具体操作步骤为：取适量的香菇多糖样品加入稀酸后进行高温高压消解，然后用紫外分光光度计测定吸光度。

四、总结提取香菇多糖的工艺主要是采用水提法，然后进行沉淀分离和浓缩干燥。

含量测定方法主要有蒽醌法、酚-硫酸法和高温高压消解法。

这些方法都可以有效地提取香菇多糖并测定其含量，为香菇的开发利用提供了重要的技术支持。

高压提取香菇多糖的详细方案高压提取技术是在常温条件下，提取香菇原料中的有效成分的新技术。

这里说的高压是指压力在100MPa 以上，甚至高达1000MPa 以上的流体静压力。

全称为“超高冷等静压”（Ultra high isostatic hydrostatic pressure at roomtemperature ），简称为高压（High hydrostatic pressure ，HHP ），或高压（Ultra highpressure ，UHP ）。

高压技术应用在工业领域已有多年的历史，19世纪末被应用到食品领域。

近年来张守勤[38]等将高压技术应用于中药有效成分的提取，在国内外尚属首次，这一技术的发明与研究，加快了我国中药现代化的步伐。

高压提取技术是在常温条件下，提取生物原料中的有效成分的新技术。

可以提取的有效成分有：生物碱、活性多糖和低聚糖、芳香油、脂质类、黄酮、甙类等水溶性、醇溶性、脂溶性和溶于其它有机溶剂中的小分子成分。

与煎煮法、回流法、索氏提取等传统提取技术相比较，高压提取技术可以大大缩短提取时间、降低能耗、减少杂质成分的溶出，提高有效成分的收率，而且高压提取是在常温下进行，避免了因热效应引起的有效成分结构变化、损失以及生理活性的降低，同时高压提取是在一个密闭的环境下进行的，没有溶剂的挥发，因此该技术更加符合“绿色”环保的要求。

高压在提取过程中的作用过程：在升压时，通过渗透作用，溶剂进入细胞内部，在此过程中细胞的结构在高压下受到不同程度的破坏。

保压时，细胞内容物与进入细胞内部的溶剂接触，有效成分溶于这些溶剂中。

在泄压过程中，细胞外部的压力减小为零，细胞内部的压力仍然保持平衡时的压力，即此时压力差与施加压力时方向相反。

由于施加的是高压，因此这种反方向的压力差仍然是很大的，因此细胞壁变形而破坏，溶解了有效成分的溶剂泄出。

如果在反方向压力作用下细胞壁的变形没有超过其反向变形极限，细胞内部已经溶解了有效成分的溶剂在高渗透压差下快速转移到细胞外，达到提取的目的。

香菇多糖提取工艺的研究1引言多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物和微生物细胞壁中,是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子,尤其是一类重要的信息分子[1]。

到目前为止，已有近300种的多糖化合物从天然产物中分离出来，其中植物提取水溶性多糖最为重要。

从植物中提取多糖主要根据不同溶解度来选择溶剂进行。

香菇多糖的提取一般有热水提取法、酸提取法、碱提取法、酶提取法和微波助提法等方法[2]，本文进行了浸提香菇多糖的工艺条件研究，以期获得香菇多糖的最佳提取条件，为其产业化生产提供有效的方法和技术参数。

本实验采用各种溶剂和酶的处理,提取香菇多糖,保持多糖的生物活性，效果是明显的。

1.1香菇多糖的组成与药理价值香菇多糖(LentinanLNT) 是一种β—1,3—葡聚糖，系从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖。

多糖以甘露糖为主，含少量的葡萄糖、微量的岩藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等；肽链由天冬氨酸、组氨酸、丝氨酸、赖氨酸、谷氨酸等18种氨基酸组成。

LNT的化学结构是一种以β—D—[1~3]葡萄糖残基为主链，侧链为(1—6)葡萄糖残基的葡聚糖，平均分子量约为50万道尔顿[3]。

香菇多糖1969年在日本首先发现，自此，国内外学者对LNT作了许多深人的研究。

近年来，LNT广泛药理作用研究取得了很大进展。

主要的药理价值有：免疫调节作用；抗肿瘤作用[4]；抗病毒作用；对寄生虫、霉菌、细菌等感染均有治疗作用；有抗衰老、抗辐射作用，还具有预防实验性高脂血症和高血糖作用。

在临床上LNT还用于治疗小儿反复呼吸道感染，糖尿病，寻常型银屑病，硬皮病，面部扁平，尖锐湿疹等。

此外，硫酸化香菇多糖具有显著抗HIV作用，香菇多糖在治疗胃癌、结肠癌、肺癌等方面有良好疗效[5]。

作为免疫辅助药物，香菇多糖主要用来抑制肿瘤的发生、发展和转移，提高肿瘤对化疗药物的敏感性，改善患者的身体状况，延长其寿命。