香菇多糖提取工艺(课堂PPT)

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香菇多糖的提取工艺

5、复合酶解,酸与热水相结合浸提法向香菇处理物中加适量纤维素酶和果胶酶,目的是为了酶解细胞表面结构及细胞间连接物, 使其部分糖类物质的溶出。加 20倍体积的水在 40 ℃水浴恒温下浸泡 80min。后再迅速升温煮沸 60min,用 4层纱布过滤后收集滤液, 再调节 pH分别为 4. 5、5.0、 5.5 ,进行酸浸提, 然后再用 4层纱布过滤后收集滤液。合并两次滤液。浓缩。
复合酶解、酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的改进工艺原料 → 复合酶解→酶解液→ 水浸提→ 酸浸提→ 浸提物→ 真空浓缩→ 浓缩液→ 酒精沉淀→ 沉淀物→ sevage法脱蛋白→ 水相→ 丙酮洗涤→ 多糖粗制品
操作要点
1、原料预处理选取质量合格的干香菇若干,经植物高速磨碎机磨成粉末, 称取相应香菇粉末 , 加入适量酒精使香菇粉末成糊状。
香菇多糖(1entinan，LNT) 香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成分，是香菇的主要有效成分，是一种宿主免疫增强剂(host defense potentiator， HDP)，临床与药理研究表明，香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用。
香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成分，香菇多糖中的活性成分是具有分支的β— (1—3)— D—葡聚糖，主链由β—(1—3)连接的葡萄糖基组成，沿 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ链随机分布着由β—(1—6)连接的葡萄糖基，呈梳状结构。
8 、 sevage法脱蛋白将上述沉淀溶于适量的蒸馏水中,分别加入 20 %体积的氯仿和 7 %体积的异戊醇生成絮状凝聚物, 用高速离心机在 5000r pm离心 15min得沉淀。重复上述操作, 直至无凝聚物生成。
9、丙酮洗涤脱水将酒精沉淀物用丙酮洗涤脱水两次, 倒入放有干燥滤纸的培养皿中 (滤纸重0.98g) ,然后将培养皿放在 50℃ 的烘干箱中进行干燥 3h ,得到香菇多糖粗制品。

香菇多糖提取工艺 ppt课件

超声波提取法向香菇处理物中加入蒸馏水，进行超声波处理浸提。
8000r/min离心五分钟，取上清液，用旋转蒸发仪浓缩至10~20ml，加入两倍体积的无水乙醇，进行醇沉。放置过夜后再次离心，留取沉淀物，干燥至恒重。
复合酶浸提法向香菇处理物的中加 0.1g纤维素酶和0.5g果胶酶,目的是为了酶解细
胞表面结构及细胞间连接物,使其部分糖类物质的溶出。往酶解后的香菇处理物中加入 20 倍体积的蒸馏水,并在40水浴恒温下浸泡80min 。迅速升温沸腾90min ,后过滤得滤液。离心沉淀,上清液浓缩,乙醇沉淀。
香菇多糖提取工艺
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
香菇多糖提取工艺
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香菇多糖提取工艺
复合酶解,酸与热水相结合浸提法向香菇处理物中加 0.1g纤维素酶和 0.5g果
胶酶,目的是为了酶解细胞表面结构及细胞间连接物, 使其部分糖类物质的溶出。加 20倍体积的水在 40 水浴恒温下浸泡 80min。后再迅速升温煮沸 60min,用 4层纱布过滤后收集滤液, 再调节 pH分别为 4.5、5.0、5.5 ,进行酸浸提, 然后再用 4层纱布过滤后收集滤液。合并两次滤液。浓缩。
热水浸提法向香菇处理物中加入 20倍体积的蒸馏水,并在 40℃ 水浴恒温下浸泡 4h。
放置冰箱冷冻柜中冷冻过夜。将香菇浸泡液从冰箱中取出, 解冻后在恒温水浴箱内分别抽提 30min、 60min、90min ,用4层纱布过滤后收集滤液。向滤渣中加入20倍体积的蒸馏水再抽提一次, 沸煮时间同上用 4层纱布过滤后收集滤液,合并两次滤液。

实验三香菇多糖的分离提取

实验三香菇多糖的分离提取实验三香菇多糖的分离提取一、实验目的让学生了解香菇多糖的理化性质及提取工艺流程，掌握真空浓缩技术。

二、实验原理香菇是一种药食两用真菌，具有提高免疫力、抗癌、降糖等多种生理功能。

水溶性多糖作为香菇主要活性成分之一，主要以β-1,3-葡聚糖的形式，分子量从几万到几十万不等。

通过有机溶剂提取，真空浓缩技术进行分离提取。

三、实验材料与试剂原料：干香菇500g试剂：氯仿、正丁醇、医用纱布、浓硫酸、苯酚、工业酒精四、实验仪器组织捣碎机、水浴锅、旋转蒸发器、1cm比色皿、751分光光度计、电子天平、台式离心机、试管、量筒、烧杯、玻璃棒五、提取工艺流程1. 1kg干香菇切成小块，以1：10（重量比）加入水，用组织捣碎机进行均质；2. 取200mL均质液放入1L烧杯中，再加入300mL蒸馏水，加热至沸后，温火煮沸1小时，（注意：煮沸过程中用玻璃棒不断搅拌，以免烧杯底部发生糊结；并间歇加入少量水，使杯内液体体积保持在500mL左右；3. 加热完毕后，将杯内液体用8层纱布过滤，除去残渣，上清液转入另一烧杯中；4. 将上清液倒入圆底烧瓶中，在旋转浓缩仪上进行浓缩，浓缩条件为-0.1MPa 、60℃，浓缩液体积至100mL左右停止；5. 将浓缩液在1×10000g离心10min，将上清液转入另一烧杯，除去残渣；6. 上清液中加入等体积的氯仿正丁醇浓液（体积比为4：1），搅拌5min，静置30分钟；7. 将混合液体在1×5000g下离心20min,分离水相；8. 在水相中加入终浓度为80%的酒精，搅拌均匀，静置20min，1×5000g下离心10min；9. 取出沉淀物，放入已称重的干燥表面皿中，在真空干燥箱中80℃下真空干燥；10. 干燥后，称重，计算多糖的产率；11. 准确称取干燥后多糖20mg于500ml容量瓶中，加水定容；12. 取定容液2ml加入6%苯酚1ml，混匀，再加入浓硫酸5ml，混匀，放置20min后，于490nm测吸光度；13. 葡萄糖标准曲线的制定：准确称取葡萄糖20mg定容于500ml 容量瓶中，分别取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml，补水至2ml，依12步骤反应液，并分别测吸光度，根据葡萄糖浓度和吸光度绘制标准曲线；14. 根据香菇多糖吸光度和葡萄糖标准曲线，计算多糖纯度。

香菇多糖黄原胶结冷胶优秀课件

香菇多糖的制备方法
•酶解法是一些生物或者物理的辅助方法
• 酶提取法的原理是利用蛋白酶对细胞壁的降解作用，减小细胞壁对多糖溶出的阻碍，从而提高多糖提取率。采用的酶制剂可以是单酶，也可以是多种蛋白酶（果胶酶、中性蛋白酶和纤维素酶）按照一定比例混合的复合酶。
•该法具有得率高、条件温和等优点，但由于蛋白酶制剂的价格比较高，会增加提取工艺成本，不利于大规模生产应用
香菇多糖的一级分子结构
香菇多糖的结构
• 天然香菇多糖的二级结构是β-三股绳状螺旋型，但加入尿素或二甲亚砜后或在不同浓度 NaOH 溶液下立体构型转变为单绳螺旋结构.主链和侧链是单一螺旋有序构象，胶体结构的结合区域会形成多螺旋构象；由 D-葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖、L-阿拉伯糖、D-木糖等组成。
带有硫酸根或乙酰基基团的香菇多糖，其水溶性大大提高。
香菇多糖能溶解于浓度为0.5 M的NaOH 溶液中，溶解度可达50~100mg/mL。
在不同的NaOH 中具有不同的旋光度。香菇多糖在 0.5M NaOH 溶液中的极限粘
度为 0.6~1.3（c=g·100 mL-1Molish 反应呈阳性，茚三酮反应呈阴性等。
四、香菇多糖中粗蛋白的去除
•经乙醇沉淀后的粗多糖中蛋白质的含量较高, 常用 Sevag 法脱除蛋白,。
•将多糖水溶液 1/5 体积加入氯仿, 随之再加入氯仿体积 1/5 的正丁醇。混合物剧烈振摇 20 min, 离心, 倾出上层清液, 除去中间层变性蛋白和下层氯仿。
•将 Sevag 法结合酶法去蛋白效率可提高 68 %, 且可以节省大量的试剂和时间
香菇多糖黄原胶结冷胶
主要内容
➢ 香菇多糖的结构 ➢ 香菇多糖的性质 ➢ 香菇多糖的制备方法 ➢ 香菇多糖的应用

香菇多糖的分离与鉴定课件

10
15
吸光度
y = Ax + C，R2 =
0.8
0.6
0.4
0.2
0 0
10 15 20 25 30 35 40 45 Glucose Concentration (μg/mL)
20
25
30
35
香菇多糖
样品 1
吸光度
测得浓度（μg/mL）
含糖量 %
样品 2
样品 3
含糖量 % = 测得浓度 / 配制浓度 × 100 %
香菇多糖的分离与鉴定
生物物质分离工程
Name Affiliation
Start
Registered
多糖
抗肿瘤
免疫调节
抗氧化降血脂
香菇多糖的分离与鉴定
学习目标
（1）掌握对香菇多糖的提取和分离方法（2）掌握香菇多糖的总糖含量、单糖组成
和相对分子质量的测定方法
学习内容
（1）多糖的提取（2）多糖的总糖含量测定（3）多糖的单糖组成测定（4）多糖的相对分子质量的测定（5）多糖的酶解
=
%
3
分子量的测定
实验步骤
高效尺寸排阻色谱法分析香菇多糖相对分子质量 ➢ 配制50mmol/L乙酸铵溶液作为流动相，0.45μm膜过滤，超声30min脱气 ➢ 称取5mg香菇多糖，加1mL水，于60℃ 30min充分溶解，0.45μm膜过滤 ➢ 采用尺寸排阻色谱柱TSKgelG5000 与TSKgelG3000串联，连接蒸发光散射仪，
开速率快、混合物易分离、可平行分析多个样品，酶解后的样
品不需要处理即可点样。
致谢
汕头大学教学改革项目（38030210）广东省教育创新计划项目（18219114）

香菇多糖开题报告ppt

Page 9
二
研究内容
研究方法：香菇多糖主要的提取方法有热水浸提法、稀酸(碱)浸提法、酶解法、超声波提取法、微波提取法等。本课题主要讨论的是在上提取方法找出最优的提取方法，为香菇多糖的工业化生产工艺的建立提供实验依据。
Page 10
香菇多糖的提取
香菇多糖主要的提取方法有热水浸提法、稀酸(碱)浸提法、酶解法、超声波提取法、微波提取法和深层发酵培养提取法等。本课题主要讨论的是在同一种分离纯化的基础上以上组合提取方法更能有效且经济的提取香菇多糖。
Page 4
香菇多糖的作用
1.香菇多糖的抗肿瘤活性香菇多糖具有抗肿瘤作用，它没有化疗药物的毒副作用。香菇多糖进入抗体后诱导产生一种具有免疫活性的细胞因子，在这些细胞因子的综合作用下，机体免疫系统增强，对肿瘤细胞起防御与杀伤作用。香菇多糖通过激活巨噬细胞，增强抗体依赖性细胞诱导的细胞毒（ADDC），发挥抗肿瘤活性；此外，香菇多糖还能使肿瘤部位的血管扩张和出血，导致肿瘤出血坏死和完全退化
刘欢page选题依据香菇中有效活性成分多糖的提取工艺进行研究研究内容研究方案进程计划page香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成分香菇多糖中的活性成分是具有分支的13d葡聚糖主链由13连接的葡萄糖基组成沿主链随机分布着由16连接的葡萄糖基呈梳状结构
香菇多糖的提取方法研究
指导教师：刘召明
学生姓名：刘欢
热水浸提法：
具体方法：香菇粉，加蒸馏水， 90 ℃水浴提取，静置，过滤,滤液浓缩后，加入甲醇,充分混匀,静置，离心,取上清浓缩，加入甲醇,静置 ,离心得沉淀，加甲醇、乙醚洗涤后,自然风干得粗香菇多糖,称重。
稀酸(碱)浸提法
从香菇中提取多糖的提取剂有：酸液、碱液、酶及热水等，提取剂为酸(碱)时，即所谓的酸(碱)提取法。

香菇多糖的提取

干燥
香菇多糖
热水浸提法提取香菇多糖
工艺流程
香菇粉加蒸馏水 90摄氏度氺浴提取
过滤静置离心，得上清液
滤液浓缩
加入甲醇，充分混匀，静置
加甲醇，乙醚洗涤后自然风干得粗的香菇多糖
微波法提取香菇多糖
在微波法提取多糖的实验中，影响多糖提取率的主要
因素有：微波功率、提取时间以及提取次数等。随着微波功率的提高，加热速度增大，分子运动速度加快，
香菇多糖
HDP)，临床与药理研究表明，香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用
香菇多糖的提取方法
A B C D E
热水浸提法
酸碱浸提法
超声波浸提法
微波法
复合酶解
提取工艺流程
预处理过滤
干燥
三种方法
浸提（多糖与细胞分离）
取滤液
Байду номын сангаас
醇析
无水乙醇70%
粗多糖
BECM法
去除杂蛋白
复溶(无离子水) 甲醇分级沉淀
香菇多糖配合其他药物治疗慢性乙型肝炎，可提高乙肝病毒标
志物的转阴作用，减少抗病毒药物的副作用。
香菇多糖在食品中
香菇多糖是一种特殊的生物活性物质，是一种生物反应增强剂和调节剂，它能增强体液免疫和细胞免疫功能。香菇多糖主要成份为葡聚糖、甘露糖肽等多糖以及多种氨基酸，具有抗肿瘤、治肝保肝、增强机体免疫力等作用。
香菇多糖的提取
生药1513 第二组
第一部分香菇多糖的概念第二部分提取方法与工艺
目录
第三部分热水浸提法提取
第四部分微波法提取流程第五部分香菇多糖的检测第六部分生活中香菇多糖

香菇多糖的提取PPT课件

A
热水浸提法
B
酸碱浸提法
C
超声波浸提法
D
微波法
E
复合酶解
提取工艺流程
预处理
浸提（多糖与细胞分离）
过滤取滤液
醇析无水乙醇70%
干燥三种方法粗多糖
复溶(无离子水)
去除杂蛋白 BECM法分级沉淀甲醇
干燥
香菇多糖
热水浸提法提取香菇多糖
工艺流程
香菇粉加蒸馏水 90摄氏度氺浴提取滤液浓缩过滤静置
谢谢您的观看与聆听
Thank you for watching and listening
香菇多糖的提取
1513 第二组1 Nhomakorabea 前言点击此处输入相关文本内容
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2
目录
第一部分香菇多糖的概念第二部分提取方法与工艺第三部分热水浸提法提取第四部分微波法提取流程第五部分香菇多糖的检测第六部分生活中香菇多糖
香菇多糖的检测
A
紫外可见光谱分析
B
薄层分析
C
红外光谱分析
D
凝胶柱层析检测
薄层分析：娃胶H薄板110℃活化1H后取
水解完全的香菇多糖和木糖甘、露糖、葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等标样溶液,分别于薄板点样, 以正丁醇:乙酸:乙脂:乙酸:甲醇:水=2:12:4:4:1 为展开剂展开,苯胺O二苯胺O丙酮显色。
Q&A问答环节
敏而好学，不耻下问。学问学问，边学边问。
He is quick and eager to learn. Learning is learni ng and asking.

食用菌多糖提取的原理及方法ppt课件

5
香菇多糖提取的方法
方法2：香菇发酵液经离心（3000r/min， 10~15min钟），弃上清夜得菌丝体。取菌丝体2Kg（湿重），用沸水（90~100℃）浸提3次，合并3次的热水提取液，加入3倍体积的96%酒精，充分混合，置于4℃下静置沉淀，弃上清夜，沉淀晾干后为棕色无定形粉末，即KS-2粗品。
2
食用菌速冻工艺
工艺流程离心得菌丝体
沸水浸提
沸水浸提
醇提
得粗多糖
3
香菇多糖提取的方法
方法1：将香菇发酵液过滤，洗涤滤渣（菌丝体），再将香菇菌丝体于95~100℃下烘干，然后粉碎成小块。称取菌丝体（干） 30g，加600mL水，于96~100℃水浴2.5H，离心（4000r/min，10min钟），收集上清夜；
4
香菇多糖提取的方法
沉淀物加水600mL，于96~100℃再次水浴浸提2.5H，离心收集上清夜，合并2次的离心上清夜，真空浓缩至 4~5mL，加20mL无水酒精混匀，静置过夜，弃上清夜后，用85%酒精洗涤2 次，再弃上清夜，晾干沉淀物即为香菇多糖。30g菌丝体经该工艺提取，可得480mg香菇多糖，收率为1.6%。
四节食用菌多糖提取的原理和方法
多糖利用深层液体发酵培养香菇菌丝体后，从发酵液中提取菌丝体，从而得到胞内香菇菌丝体，再从菌丝体中，利用它在酒精和水，及酶液的不同溶解度来提取胞内多糖。将菌丝体抽提、浓缩、离心，取上清液脱色透析，透析液再浓缩、离心，最后用溶液沉淀、洗涤干燥而成。
6

香菇多糖的复合酶法提取

环保性
复合酶法提取过程不需要使用强酸、强碱或有机溶剂，对环境友好。
可重复性
复合酶法提取工艺稳定，可重复性强，适合大规模生产。
复合酶法提取的局限性
成本高
对某些物质提取效果不佳
复合酶的生产成本较高，导致整个提取过程的成本增加。
对于某些结构特殊的物质，复合酶法提取效果可能不佳。
酶的来源有限
用于提取香菇多糖的酶主要来源于微生物发酵，来源有限制。
参考文献
参考文献1
香菇多糖的复合酶法提取工艺研究，探讨了不同酶种类和浓度对提取效果的影响，为优化提取工艺提供了理论依据。
参考文献2
香菇多糖的生物活性研究，分析了香菇多糖在免疫调节、抗肿瘤、降血糖等方面的生物活性，为多糖的应用提供了科学依据
。
参考文献3
香菇多糖的化学结构与功能关系，探讨了多糖的分子量、单糖组成等因素与其生物活性的关系，为多糖的结构改造和功能优
抗肿瘤
香菇多糖对多种肿瘤细胞具有抑制作用，能够诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤生长和扩散。
降血糖
香菇多糖能够降低血糖水平，对糖尿病具有一定的辅助治疗作用。
抗氧化
香菇多糖具有抗氧化活性，能够清除自由基，延缓衰老。
香菇多糖的来源和分布
来源
香菇多糖主要来源于香菇的子实体和菌丝体。
分布
香菇多糖主要分布于香菇的细胞壁中，其中子实体和菌丝体中含量较高。
香菇多糖的提取方法
传统提取方法
包括热水提取、酸碱提取等，但提取效率较低，且容易造成环境污染。
复合酶法提取
利用多种酶分解香菇细胞壁，释放出香菇多糖，具有提取效率高、环保等优点。
02 复合酶法提取原理
酶法提取的原理

香菇多糖PPT课件

响其抗肿瘤活性
2019/11/10
优质
4
性质
香菇多糖为白色或棕黄色粉末, 对光和热稳定, 具吸湿性, 相对分子质量较大, 无甜味和还原性, 部分能溶于水,在水中的溶解度随分子质量增大而降低,水溶液为中性,不溶于甲醇、已醇、丙酮等有机溶剂
2019/11/10
优质
5
作用机理
• 香菇多糖对正常机体并无免疫促进作用，但能使荷瘤式或感染后的机体的免疫应答得以提高。其制剂在动物体内筛选试验中未见直接抗癌效果，却明显促进体外淋巴细胞培养物的转化作用。曾经发现胸腺切除的动物注射抗淋巴细胞血清后，可削弱香菇多糖的抗肿瘤活性，且它的作用还能被巨噬细胞抑制剂角叉菜胶和硅胶所削弱。所以说，香菇多糖是一种胸腺依赖型T细胞导向并有巨噬细胞参与的特殊免疫佐剂。它能识别脾脏及肝脏中抗原的巨噬细胞，促进淋巴细胞活化因子的产生，释放各种辅助性T细胞因子，增强宿主腹腔巨噬细胞吞噬率，当宿主机体注射香菇多糖数小时后，一些具生理活性的血清因子如急性期蛋白诱导因子、血管扩张和出血诱导因子、IL-1生成诱导因子、IL3和集落刺激因子的水平达到峰值。这些因子作用于淋巴细胞、肝细胞、血管内皮细胞后，产生许多有效免疫应答，同时导致胸腺内的前体 T细胞趋于成熟、分化、增殖并向外周释放。
• 所得产品紫外吸收光谱显示，产品杂质含量少，红外光谱显示结构与直接热水浸提法一致。采用超临界 CO2 辅助提取后，香菇多糖的提取率和质量显著提高。
脱脂，脱胶脱色除臭
2019/11/10
优质
8
纯化
• 常用的纯化方法有:沉淀法、柱层析法、制备性高效液相法、制备性区域电泳法、超滤法等。目前多采用各种不同的凝胶层析柱色谱和离子交换柱色谱。

香菇多糖的复合酶法提取.pptx

➢ 香菇多糖是香菇中分
离出的一种重要的具有生理活性的物质。
第1页/共19页
➢ 香菇多糖的作用：
香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤，调节免疫力、降血糖、抗氧化等功能。有关香菇多糖的研究，特别是结构方面的研究已引起国内外学者的高度关注，并有望成为多糖领域的研究热点。
第2页/共19页
与其他抗肿瘤药物相比，香菇多糖几乎无任何副作用，对胃癌、鼻咽癌、直肠癌、乳腺癌和慢性粒细胞白血病等有抑制和防止术后微转移的作用，是目前已知最强的免疫增强剂之一。
酶法提取由于反应特异性强、条件温和易获得、提取时间短、提取率高、绿色节能等已引起广泛的关注，具有较大的应用潜力，且随着对酶法技术的不断研究，酶法与其他技术如超声波、超高压、微波等技术的联用也将第17页成/共1为9页另一个热点研究方向。
Thቤተ መጻሕፍቲ ባይዱnks
第18页/共19页
1.其作用条件温和。 2.通过酶法破壁去除杂质可以明显提高
提取率，缩短提取时间。 3.可减少能源消耗。 4.有效的保存多糖的生物活性。
第6页/共19页
复合酶提取香菇多糖：
复合酶
纤维素酶+木纤维素酶+中木瓜蛋白酶+ 中性蛋白酶+ 瓜蛋白酶性蛋白酶纤维素酶纤维素酶
多糖得率（%）12.90
7.02
第3页/共19页
香菇多糖的提取方法：
热水浸提法稀酸(碱)浸提法微波法提取香菇多糖超声波提取法深层发酵培养提取法酶解法
第4页/共19页
酶解法：
酶解法就是指在浸提的过程中加入相应的酶来水解纤维素、果胶、蛋白质分子等，以使多糖从细胞中分离出来。
第5页/共19页

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将香菇清洗干净，除去其根部，将剩下的菌伞挤压，切小块放入真空干燥箱干燥，待香菇恒质量，放入粉碎机中粉碎，将粉碎后的香菇粉依次通过40，60，80，100目的筛子，得到40目以下、40～60目、 60～80目、80～100目、100目粒度以上的样品，过筛之后把各级香菇粉分别装到清洁干燥的烧杯中，编号贴上标签，置于真空干燥箱中待用。
热水浸提法向香菇处理物中加入 20倍体积的蒸馏水,并在 40℃ 水浴恒温下浸泡 4h。
放置冰箱冷冻柜中冷冻过夜。将香菇浸泡液从冰箱中取出, 解冻后在恒温水浴箱内分别抽提 30min、 60min、90min ,用4层纱布过滤后收集滤液。向滤渣中加入20倍体积的蒸馏水再抽提一次, 沸煮时间同上用 4层纱布过滤后收集滤液,合并两次滤液。
4
(2) 各种生产方法比较
主要的多糖提取方法有如下几种: 热水浸提法、酸（碱）浸提法、微波提取法、超声波提取法、复合酶处理→水(或酸)浸提→浸提物→真空浓缩→浓缩液→酒
精沉淀→沉淀物→sevage法脱蛋白→水相→丙酮洗涤→多糖粗制品
5
酸浸提法向香菇处理物中加盐酸溶液使其最终浓度分别为 0.3mol/L、0.4mol/L、
0.5mol/L , 置于60℃恒温水浴中浸提 8h , 加适量的NaOH中和至中性,过滤,浓缩。
微波提取法向香菇处理物中按1:25加入去离子水浸泡过夜,粉碎,在一定微波条
件下提取,冷却后离心,从上清液中取样测定其中多糖含量。
香菇多糖提取
张志挺 14生科一班 29号
1
1、香菇多糖
(1) 香菇多糖结构式
分子式：〔 C42H72O36 〕n 分子量：〔1152.9995〕n
(2) 香菇多糖性质
香菇多糖（lentinan;LNT）是从香菇中分离纯化的一种葡聚糖，是以增强 T细胞和巨噬细胞功能为主的免疫增强剂。
密度：1.88g/cm3；沸点：1472℃ at 760 mmHg。溶于碱溶液或甲酸，微溶于热水或二甲亚砜，不溶于冷水、醇、乙醚、氯仿、吡啶或六甲基磷酰胺。对硫酸和盐酸稳定。
1986年获日本厚生省批准生产并外销。
1988年我国卫生部批准进口，现今我国已有几家国产LNT上市(如南京振中和福州梅峰等)。香菇多糖由于是单一组分，质量易于控制，且具有疗效高，剂量低，毒副作用小等优点，受到医生的青睐。
自此,世界各地掀起了一股从大型真菌中寻找抗肿瘤药物的热潮。有关香菇多糖的研究尤其活跃,包括提取工艺及分离纯化研究,香菇多糖理化性质及药用价值研究。但对多糖理化性质、结构、药效、药理等方面仍无定论,仍须继续深入研究。
同时，香菇多糖还具有抗逆转录病毒活性。因此，香菇多糖是一种有待开发的
抗流感的保健食品。
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2、香菇多糖的发展历史
(1) 诞生与发展过程
1968年GoroChihara首先从香菇子实体中浸提出6种香菇多糖,并证明其中一种具有明显的抗肿瘤作用,定名为Lentinan
1970 年Chihard 和Sasaki 用热水浸提结合有机溶剂沉淀从香菇中提取到另外4 种多糖。
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(3) 香菇多糖的功能
香菇多糖具有激活细胞免疫、调节多种体液免疫因子、诱导α-干扰素生成，调节机体免疫应答反应，诱导白细胞对肿瘤浸润，导致肿瘤部位血管扩张、出血、坏死，阻止病毒与宿主细胞的结合，提高SOD〔超氧化物歧化酶〕活性，抑制MDA〔丙二醛〕生成，抗脂质氧化，降低胆固醇，调节糖代谢、改善糖耐量、扩张胃肠道产生饱腹感而减轻食欲，降低血糖等功能。
复合酶解,酸与热水相结合浸提法向香菇处理物中加 0.1g纤维素酶和 0.5g果
胶酶,目的是为了酶解细胞表面结构及细胞间连接物, 使其部分糖类物质的溶出。加 20倍体积的水在 40 水浴恒温下浸泡 80min。后再迅速升温煮沸 60min,用 4层纱布过滤后收集滤液, 再调节 pH分别为 4.5、5.0、5.5 ,进行酸浸提, 然后再用 4层纱布过滤后收集滤液。合并两次滤液。浓缩。
用，减少抗病毒药物的副作用。此外，香菇多糖可用于治疗结核杆菌感染。
②、香菇多糖在保健食品领域的应用
香菇多糖是一种特殊的生物活性物质，是一种生物反应增强剂和调节剂，它
能增强体液免疫和细胞免疫功能。香菇多糖的抗病毒作用机制可能在于其提高
感染细胞免疫力，增强细胞膜的稳定性，抑制细胞病变，促进细胞修复等功能。
超声波提取法向香菇处理物中加入蒸馏水，进行超声波处理浸提。
8000r/min离心五分钟，取上清液，用旋转蒸发仪浓缩至10~20ml，加入两倍体积的无水乙醇，进行醇沉。放置过夜后再次离心，留取沉淀物，干燥至恒重。
复合酶浸提法向香菇处理物的中加 0.1g纤维素酶和0.5g果胶酶,目的是为了酶解细
胞表面结构及细胞间连接物,使其部分糖类物质的溶出。往酶解后的香菇处理物中加入 20 倍体积的蒸馏水,并在40水浴恒温下浸泡80min 。迅速升温沸腾90min ,后过滤得滤液。离心沉淀,上清液浓缩,乙醇沉淀。
采用复合酶解工艺原料预处理→复合酶解→酶解液→真空浓缩→浓缩液→酒精沉淀
→沉淀物→丙酮洗涤→多糖粗制品
复合酶解、酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的改进工艺原料预处理→复
合酶解→酶解液→水浸提→酸浸提→浸提物→空浓缩→浓缩液→酒精沉淀→沉淀物 →sevage法脱蛋白→水相→丙酮洗涤→多糖粗制品
② 操作要点的对比
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(3) 现在常用的生产方法
以上几种方法均有优点和缺点，而现如今也都在被使用！
3 、生产技术
(1)生产原理:
多糖溶于热水,不溶于60%以上乙醇,也不溶于氯仿正丁醇.热水浸提时，香菇组织膨胀破裂，多糖成分浸出，所以用热水提取,乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质;因为热水也可以将蛋白类物质提取出来,所以用氯仿正丁醇萃取除去提取液中的蛋白。 (2) 原料及要求:
(4) 香菇多糖的应用
①、香菇多糖在医药领域的应用
香菇多糖在治疗胃癌、结肠癌、肺癌等方面具有良好疗效。作为免疫辅助
药物，香菇多糖主要用来抑制肿瘤的发生、发展与转移，提高肿瘤对化疗药物
的敏感性，改善患者的身体状况，延长其寿命。
香菇多糖与化疗剂联合使用，有减毒、增效的作用。
香菇多糖配合其他药物治疗慢性乙型肝炎，可提高乙肝病毒标志物的转阴作