幼苗鉴定图谱

2018年第11期扫一扫看全文本文DOI：10.16675/14-1065/f.2018.11.095品种纯度检验中存在的问题及建议□王成顺袁刚摘要：品种纯度检验的方法有很多，真正能广泛应用的方法较少。

田间小区种植鉴定技术简单、适用范围广，是目前应用最广泛的方法，但在实际操作中也存在着一些亟待解决的问题。

关键词：纯度检验；存在问题及建议文章编号：1004-7026（2018）11-0132-02中国图书分类号：S339.31文献标志码：A（秦皇岛市种子管理总站河北秦皇岛066004）品种纯度是构成种子质量的重要指标，是种子质量评价的重要依据，是保证良种优良遗传特性充分发挥的前提。

品种纯度与种子的遗传基础有关，属于品种的遗传品质，品种纯度的高低直接影响作物的产量和品质，全国每年假种子和低纯度种子案件时有发生，给农民和农业生产造成重大损失，真实性和品种纯度鉴定是目前我国种子质量管理中最突出问题之一。

1纯度检验的内容品种纯度检验包括两方面内容，即品种真实性和品种纯度。

品种真实性是指一批种子所属品种、种或属与文件记录是否相符，品种纯度是指品种在特征特性方面典型一致的程度。

在品种纯度鉴定之前，应先进行种子真实性鉴定，如果种子真实性有问题，品种纯度鉴定就毫无意义。

2纯度检验主要方法及评价品种纯度检验的对象可以是种子、幼苗或较成熟的植株，纯度检验的方法很多，但真正能广泛应用的方法较少。

2.1种子形态法种子形态法是最简便、最快速的方法，仅适用于籽粒较大、籽粒形态丰富的作物及品种间差异明显的样品的鉴定，应用价值不大。

2.2幼苗鉴定法适合于幼苗形态性状丰富的作物，如十字花科、豆科等双子叶植物，因苗期所依据的性状有限，测定结果不太准确。

2.3电泳法电泳方法相对来说还是比较快速准确的方法，具有一定的使用价值，但电泳法对于某些品种，特别是亲缘关系较近的品种或组合难以鉴别。

2.4分子技术分子检测技术具有快速准确可靠的特点，特别是SSR法，技术发展迅速，在国内已被广泛应用于各主要作物及蔬菜的品种纯度检验，但SSR法技术复杂、检测成本高，难以在种子检验机构中得到普及和应用。

品种鉴定是种子市场监管和品种审定准入的主要内容，是育种工作的重要阶段，也是衡量成果能否转化的重要环节。

因此，品种鉴定在种子生产、加工、储藏及经营贸易等流通过程中具有重要意义和应用价值。

但在种子流通中，为节省成本与缩短时间周期，往往忽略品种鉴定的重要性，导致仍有种子掺假的案件发生，给生产造成了难以挽回的损失[1]。

杂交水稻是我国最主要的农作物，对保障国家粮食安全起到举足轻重的作用，因此，随着全国杂交水稻种植面积比重逐年增大，对杂交水稻种子的质量（主要是真实性和纯度）检查和监督尤为重要。

目前，杂交水稻品种鉴定的方法主要有形态鉴定法、生化鉴定法、DNA 分子技术鉴定法。

1形态鉴定法1.1种子形态鉴定法种子形状比较稳定，故形态鉴定方法简单，快速经济。

主要通过观察种子的外观形态特征，包括种子的长宽度与大小、形状、颜色、光泽、种皮形态、垩白、胚乳等性状，借助仪器或工具（如放大镜、解剖镜等）观察，进行品种鉴定，一般情况下可鉴定出杂交水稻样品的真实性[2-3]。

但由于这些性状只适用于品种间差异较大的样品鉴定，且受鉴定者经验的制约，品种鉴定结果可靠性较差，应用范围较窄。

1.2幼苗形态鉴定法在相同条件的温湿度、光照等环境下，对种子进行培养，当发芽良好的种子生长发育到适合鉴定的幼苗阶段，结合独特的形态特征进行比较鉴定。

李稳香等用幼苗形态鉴定法，发现应用于鉴定威优、汕优、协优系统的杂交一代均有较好效果，尤以鉴定威优46效果与田间种植鉴定结果均基本一致[4]。

此鉴定方法较简单，易于操作，成本低，鉴定周期短，鉴定结果较准确。

但由于幼苗期所依据的性状有限，且受种子处理方法与生长环境的影响颇大。

因此，该鉴定方法只适用于幼苗形状差异较明显的品种。

1.3田间种植鉴定法田间种植是鉴定品种最为可靠的方法之一，主要依据品种的特征特性进行鉴定。

将种子适时催芽、播种，秧苗栽插到田间，通过水肥管理、病虫害预防等，直到抽穗时进行鉴定。

我国每年冬季都会在海南岛进行田间种植鉴定，这种鉴定方法比较简单，鉴定结果较为符合大批量的实际生产。

收稿日期:2008-04-27;修回日期:2009-03-31作者简介:刘明珍(1974-),女,汉,助理研究员,硕士,主要从事药用植物的组培及分子生物学研究;通讯作者:陈乃富(1962-),男,汉,教授,硕士,主要从事植物生化及植物资源开发应用研究,E 2mail:cnf505@s ohu 1com 。

基金项目:皖西学院自然科学青年研究项目(WXZ Q0716);植物细胞工程安徽省工程技术研究中心重点资助项目(CPCG2007001A )doi ∶10.3969/j 1issn 11008-9632.20091051034道地药材霍山石斛及其相似种的分子鉴定刘明珍1,陈乃富2,3,刘秀珍4,邓　辉2,3,李耀亭2,3,何祥林5(11皖西学院专科部,六安237012;21植物细胞工程安徽省工程技术研究中心,六安237012;31皖西学院化学与生命科学系,六安237012;41巢湖学院体育系,巢湖238000;51安徽省霍山县长冲中药材有限责任公司,霍山237266)摘要:为检测霍山石斛与霍山产铜皮石斛、霍山产铁皮石斛及其它产地的几种药用石斛的差异,对霍山石斛及其相似种进行I SS R 分子标记比较研究。

结果表明,尽管霍山石斛及其相似种的外部形态差异较小,但在I SSR 分子标记指纹图谱上却存在着显著而稳定的差异。

因此,根据I SS R 分子标记指纹图谱所显示的多态性位点差异,能准确鉴别霍山石斛及其相似种植物及药材。

此方法简单、稳定性高、可重复性好,在霍山石斛的分子鉴定研究中有较大的应用价值。

关键词:霍山石斛;霍山产铜皮石斛;霍山产铁皮石斛;I SSR 分子标记指纹图谱;鉴别中图分类号:Q94312文献标识码:A 文章编号:1008-9632(2009)05-0034-03霍山石斛(D endrobium huoshanense C 1Z 1Tang et S 1J 1Cheng ),又名霍石斛、霍斛、米斛、大别山石斛。

玉米种子纯度鉴定方法作者：刘景云来源：《现代农业科技》2011年第03期摘要总结了几种玉米种子纯度的鉴定方法，包括籽粒形态鉴定法、幼苗鉴定法、田间小区种植鉴定法、生化指纹图谱鉴定法、DNA指纹图谱鉴定法等内容，以期为玉米种子的标准化鉴定提供参考。

关键词玉米种子；纯度；鉴定方法中图分类号 S513；S339.31 文献标识码B文章编号 1007-5739（2011）03-0103-02玉米种子纯度鉴定包括品种真实性和品种纯度鉴定，品种真实性是指一批种子所属品种、种或属与品种描述（标签和品种描述等）是否相符。

品种纯度是指品种个体和个体之间在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数（或株、穗数）占供检本作物种子数（株、穗数）的百分率表示[1]。

玉米种子纯度是玉米种子分级的主要依据，是决定玉米产量高低的重要因素之一，而且是种子包装必须标注的指标之一。

企业生产和销售的每一批种子都必须经过严格的纯度检验，为了方便、快速、准确地鉴定种子纯度，对其方法的研究显得尤为重要。

1籽粒形态鉴定法籽粒形态鉴定法主要是利用种子的花粉直感现象，来判断种子是否杂交，从而鉴定种子纯度的方法。

种子个体性状的遗传信息是由DNA成对的显性基因和隐性基因决定的，当代种子表现其显性性状，F0代种子的胚乳是由母本子房接受父本花粉发育而来，并表现出花粉显性的直感现象，从而表现父本种子的显性特征。

例如，以黄早四类型为母本，以籽粒深色型为父本的玉米种子可以利用籽粒形态鉴定法，由于母本籽粒浅黄透明、白顶等性状是由隐性基因所控制，而其父本深黄色、不透明、黄顶等性状是由显性基因所控制，其F0代种子由于花粉直感现象，籽粒变为黄色或深黄色、透明度差、无白顶现象。

利用此种籽粒变化来鉴定品种真实性和品种纯度。

籽粒形态鉴定法虽然省时、省工，靠种子检验工作者的经验，但具有很大的局限性，只有特定组合才可以利用此方法。

特别是在种子调运过程需做出快速判断时才可以应用。

党参种子发芽检验标准研究中草药栽培与鉴定2010级牛小兵指导老师张延红摘要：[目的]本文针对目前党参中药材种子无统一发芽测定方法及国家标准，种子质量控制无法可依的现状，确定党参种子适宜的发芽条件。

[方法]借鉴国际种子质量检验规程，应用发芽势、发芽率和发芽指数等指标，对影响党参种子发芽试验的前处理、光照条件、温度和发芽床进行了研究。

[结果]试验确立了党参种子发芽的适宜条件：2%NaClO处理10min，20℃恒温黑暗培养适合党参种子的萌发，发芽床以沙上最佳。

根据种子萌发特性，确定了发芽势和发芽率的统计时间，5d为初次计数时间，9d为末次计数时间。

[结论]前处理、光照条件、温度和发芽床对党参种子发芽均有显著的影响，其最适发芽条件可作为党参种子的质量检验参考标准。

关键词：党参种子；发芽试验；发芽温度；发芽床党参：为桔梗科植物党参Codonopsis pilosula （Franch.） Nannf.、素花党参Codonopsis pilosula Nannf.var. modesta （Nannf.） L. T. Shen或川党参Codonopsis tangshen Oliv.的干燥根。

别名：防风党参、黄参、防党参、上党参、狮头参、中灵草、黄党。

是我国常用名贵药材之一，在中医药中使用量很大，性平，味甘、微酸。

归脾、肺经。

具有补中益气，健脾益肺。

用于脾肺虚弱，气短心悸，食少便溏，虚喘咳嗽，内热消渴。

主要分布于山西中部、陕西南部、甘肃、青海、四川西北部等。

对党参形态学、生物学、化学成分、药理作用、组织培养等方面的研究较多，但对党参种子发芽检验标准较少，无法对市场上的种子的质量进行有效控制，致使种子市场混乱。

发芽试验是检验种子质量的重要依据，发芽试验的标准化可有效促进种子市场的规范化。

本研究较全面地探讨了影响种子发芽的前处理、光照条件、温度、发芽床等因素，寻找适于党参种子萌发的最佳条件及幼苗鉴定标准，并确定种子发芽试验的初次和末次记数时间，为制定种子质量检验规程提供依据。

DNA(脱氧核糖核酸)是细胞染色体中的遗传基因,其分子各个片段就代表各个遗传信息。

由于DNA指纹图谱直接反映DNA水平上的差异,它成为当今最先进的遗传标记系统。

DNA指纹图谱技术主要有:限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polym or2 phism,简称RF LP)、随机扩增多态性(Random am plified polym orphic DNA,简称RAPD)、小卫星DNA (Mini2satellite DNA)、微卫星DNA (Microsatellite DNA)、内部简单重复序列(ISSR)、扩增片段长度多态性(Am plified fragment length polym or2 phism,简称AF LP)等等。

一、DNA指纹图谱的方法11RF LP方法RF LP方法是G rodzicker等人于1974年发明的。

它是一种利用限制性酶切片段长度差异来检测生物个体之间差异的分子标记技术。

RF LP方法于上个世纪80年代开始应用于植物,在水稻、小麦、玉米、蕃茄和马铃薯等作物上的研究都已有报道。

但RF LP的多态信息含量是相对而言的,在一些作物上RF LP探针可进行品种间及种间的鉴别,而在小麦、马铃薯、大豆等作物上的多态性较低。

特别是小麦,它是严格的自花授粉作物,基因组较大,多态性很低(即使在相当分散的品种间也是如此)。

因而,RF LP方法在指纹图谱中的应用受到限制。

21RAPD方法RAPD方法是Willams等人于1990年发明的。

它是利用扩增DNA片段长度差异来检测生物个体的分子标记技术。

它可在对物种没有任何分子生物学研究的情况下,对其进行基因组指纹图谱的构建。

其相对于RF LP方法较简便,DNA用量也较少,且省去了使用放射性同位素,受到了许多学者的重视。

Welth1991年曾用RAPD分析玉米杂交种的品种纯度,He等人1992年曾用RAPD识别小麦品种,在花生、小麦、水稻等作物上也曾进行过深入研究。