高中生物 专题2 课题1 第1课时 培养基和无菌技术练习(含解析)新人教版选修1

2019-2020学年高中生物专题2 课题1 微生物的实验室培养练习新人教版选修1一、培养基1．概念人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

2．种类按照培养基的物理状态划分为液体培养基和固体培养基。

3．营养要素各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

二、无菌技术1．获得纯净培养物关键是防止外来杂菌的入侵，具体操作如下：(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。

(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。

(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

2．消毒和灭菌(1)消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)。

常用的方法有煮沸消毒法和化学药剂消毒法。

(2)灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。

常见的方法有：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基⎩⎪⎨⎪⎧最常用的细菌培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基配制步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板 2．纯化大肠杆菌(1)纯化培养方法：在牛肉膏蛋白胨培养基上纯化大肠杆菌，最常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

(2)纯化培养的原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即获得较纯的菌种。

(3)平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

其具体操作是：①将接种环放在火焰上燃烧，直到接种环烧红。

②在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。

③将试管口通过火焰。

④将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液。

⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。

⑥左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三到五条平行线，盖上皿盖。

第2节微生物的培养技术及应用第1课时微生物的基本培养技术课标内容要求核心素养对接1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。

2．阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。

3．概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室进行微生物分离和纯化的常用方法。

1.科学思维：根据微生物的代谢类型分析培养基的组成。

2．科学探究：讨论并掌握无菌技术的实验操作方法；讨论并掌握微生物的纯培养的方法。

一、培养基的配制1．培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

2．培养基的种类3．培养基的营养组成各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。

二、无菌技术1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止杂菌污染。

2．消毒和灭菌(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。

(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。

(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。

三、微生物的纯培养1．纯培养：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。

由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。

2．微生物纯培养的步骤：微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。

3．酵母菌的纯培养(1)菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。

(2)获得单菌落的方法：平板划线法和稀释涂布平板法。

判断对错(正确的打“√”，错误的打“×”)1．液体培养基含有水，而固体培养基不含水。

(×)提示：液体培养基和固体培养基都含有水，它们的区别为是否含有凝固剂。

2．获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染。

专题2 微生物的培养与应用课时1 微生物的实验室培养(30分钟100分)基础掌握培养基的种类、无菌技术、纯化大肠杆菌方法达标素养通过微生物的实验室培养的学习,培养学生科学探索的素养突破1.病毒为非细胞结构生物体,专性活细胞寄生,培养动物病毒常用的是活鸡胚。

2.消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,不包括芽孢和孢子;灭菌杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。

一、选择题(本大题共6小题,每小题6分,共36分)题组一微生物的培养1.下列有关微生物培养与应用的叙述,正确的是()A.培养基中同一种物质不可能既为碳源又为氮源B.微生物培养前,需对培养基进行干热灭菌C.接种前需对实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理D.微生物培养过程需要适宜的温度2.梯度稀释过程中用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后,要用手指轻压移液管的橡皮头,吹吸三次,其目的是()A.增加试管内的溶氧量B.使菌液与水充分混匀C.使试管中菌液的浓度降低D.使细菌的形态结构发生改变3.下列能选择出分解尿素的微生物的培养基是()A.NaCl、K2HPO4、葡萄糖、尿素、琼脂糖、水、酚红B.NaCl、K2HPO4、葡萄糖、琼脂糖、水、酚红C.NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂糖、水D.NaCl、K2HPO4、牛肉膏、酵母提取物、琼脂糖、水题组二微生物分离及灭菌技术4.接种微生物的方法很多,平板划线法是最常用的一种。

如图是平板划线示意图,划线的顺序为①②③④。

下列操作方法中,错误．．的是()A.划线操作时,将沾有菌种的接种环插入培养基B.平板划线后,培养微生物时要倒置培养C.不能将第④区域的划线与第①区域的划线相连D.在②~④区域中划线前后都要对接种环进行灭菌5.下列操作中,属于灭菌方法的是()A.接种前用酒精棉球擦拭双手和工作台面B.接种中试管口等易被污染的部位通过火焰C.牛奶在80 ℃下煮15 min以杀死其中的微生物D.氯化汞溶液浸泡外植体1~2 min后用无菌水冲洗6.常作为人们鉴别菌种重要依据的是()A.细菌群体的结构特征B.单个细菌的结构特征C.鞭毛、荚膜的有无D.拟核、细胞壁的特征二、非选择题(本大题共2小题,共64分)题组三对微生物培养的综合考查7.(32分)苹果干腐病是一种由茶蔍子葡萄座腔菌引起的疾病。

第2节微生物的培养技术及应用第1课时微生物的基本培养技术[学习目标]1.概述培养基的成分和配制方法。

2.区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法。

3.概述微生物纯培养的基本操作要求。

一、培养基的配制1．培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质——培养基，用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。

2．培养基的种类培养基种类划分标准培养基特点作用固体培养基物理性质加凝固剂，如琼脂微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种半固体培养基容器放倒不致流出，剧烈震动则破散观察微生物的运动、分类鉴定液体培养基不加凝固剂常用于工业生产特别提醒固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。

3．培养基的营养构成(1)主要营养物质：水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。

(2)某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成组分含量提供的主要营养牛肉膏5g 碳源、氮源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g 碳源、氮源和维生素等NaCl 5g 无机盐H 2O定容至1000mL水(3)培养基还需满足微生物生长对pH 、特殊营养物质以及O 2的需求。

例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。

特别提醒培养基的配制原则：目的要明确；营养要协调；pH要适宜。

判断正误(1)牛肉膏和蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质()(2)所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源()(3)培养不同微生物的培养基成分完全一样()答案(1)√(2)×(3)×解析(2)培养自生固氮菌的培养基中可以不添加氮源。

(3)培养不同微生物的培养基成分不完全一样，如培养自养微生物的培养基不需要碳源，培养自生固氮菌的培养基中可以不添加氮源。

1.2.1微生物的培养技术及应用1、关于培养基的配制说法不正确的是()A．在配制培养乳酸杆菌的培养基时，需加入维生素B．微生物的适应性强，配制培养基时可以不考虑pHC．虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐D．配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例【答案】B【解析】培养基除需要满足碳源、氮源、水和无机盐几种营养物质外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，如培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，A正确，B错误；虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐，C正确；不同微生物的生长对各种营养物质的需求不同，配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例，D正确。

2、下列关于灭菌和消毒的理解，正确的是()A．灭菌是指杀死环境中的原核生物B．消毒可以杀死微生物细胞和全部芽孢C．常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法和化学药物法D．常用的灭菌方法有加热法、紫外线法、化学药品法【答案】C【解析】灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子，A错误；消毒可以杀死物体体表或内部的一部分微生物细胞，但是不能杀死芽孢，B错误；常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法和化学药物法等，C正确；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，D错误。

3、下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是()【答案】D【解析】倒平板时，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，防止空气中的杂菌污染，A正确；接种时，左手将培养皿打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，B正确；划线时，从第二次划线开始，每次划线都要从上一次划线的末端开始，让菌种来源于上一次划线末端，这样才能使菌种逐渐稀释，C正确，D错误。

4、有关平板划线操作的说法正确的是()A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D．该方法常用于微生物的分离纯化【答案】D【解析】接种环在使用过程中需要多次灭菌，第一次灭菌是为了杀死其他微生物，每次划线结束后需要灭菌是为了杀死上次残留的菌种，A错误；打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，接种后还需要通过火焰灭菌再塞上棉塞，B错误；将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，还需盖上培养皿盖，防止空气中杂菌混入，C错误。

课题1 微生物的实验室培养(建议用时：30分钟)1．不同的微生物对营养物质的需求各不相同。

下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物的营养物质的描述中，不正确的是( )A．氮源物质为该微生物提供必要的氮元素B．碳源物质也是该微生物的能源物质C．水是该微生物的营养要素之一D．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质B解析对于无机碳源CO2来说，只能作为碳源物质而不能作为能源物质。

2．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是( )A．碳源B．氮源C．无机盐D．生长因子A解析自养微生物能够利用二氧化碳和水合成有机物，不利用现成的含碳有机物，而异养微生物只能利用现成的含碳有机物，所以它们的培养基的主要差别是碳源不同。

3．微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是( )A．细菌的大小、形状、颜色B．菌落的大小、形状、颜色C．有无鞭毛D．培养基的不同B解析微生物的鉴别与分离一般要用固体培养基，由于不同微生物在固体培养基上长出菌落的形状、颜色等各不相同，所以可以作为鉴别的标准。

而一个细菌细胞很小，肉眼无法看到其颜色、形状等。

4．在微生物的实验室培养中，下列各项操作中不需要在无菌条件下进行的是( ) A．配制培养基B．倒平板C．接种D．培养A解析配制培养基时不需要无菌操作，因为配制后的培养基需要进行高压蒸汽灭菌。

5．以下部位不含有微生物的是( )A．洗干净的脸上B．洗完澡后的皮肤C．刷完牙后的口腔D．灼烧之后的接种环D解析用清水洗脸、洗澡、刷牙只是起清洁作用，达不到灭菌效果，只有灼烧过的接种环才是真正无菌的。

6．消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。

下列哪些事物适用于消毒处理( )①皮肤②饮用水③牛奶④注射器⑤培养皿⑥接种环⑦培养基⑧果汁⑨酱油⑩手术刀A．①②③⑧⑨B．④⑤⑥⑦⑩C．①②④⑤⑥⑧D．以上全部A解析消毒指用比较温和的方法杀死微生物的营养细胞，适用于那些不耐高温的液体，如③牛奶、⑧果汁、⑨酱油，这样可以使其中的营养成分不被破坏；另外对要求不是很严格的，如①皮肤、②饮用水，也用消毒的方法处理。

专题二课题1一、选择题1)A．为菌体提供碳源B．为菌体提供氮源C．使培养基保持水分D．使培养基凝固[答案] D[解析] 加入琼脂的主要目的是使培养基凝固。

2．) A．将接种环放在火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连[答案] D3)A．防止杂菌污染B．消灭杂菌C．培养基和发酵设备都必须灭菌D．灭菌必须在接种前[答案] B4)A．灭菌是指杀死一定环境中所有微生物的细胞，不包括芽孢和孢子B．对不同的生物材料，应当采取不同的灭菌方法C．培养基一般采取高压蒸汽灭菌法D．高压蒸汽灭菌法最终使菌体蛋白质凝固变性[答案] A[解析] 灭菌是一种严格的使所有微生物(包括胞体、孢子、芽孢等)均死亡的措施。

5．制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基，关于倒平板的具体描述正确的是)①待培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指完全打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖⑥等待平板冷却5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上A．①③④⑤ B．④⑤⑥C．③⑤ D．①②④⑥[答案] C[解析] 琼脂是一种多糖，在98℃以上可溶解于水，在45℃以下凝固，倒平板时高于50℃则会烫手，低于50℃时若不能及时操作，琼脂会凝固。

无菌操作应贯穿于操作的全过程，皿盖全打开则空气中的微生物会进入培养基。

6)A．温度不同B．时间不同C．前者适用于固体消毒，后者适用于液体消毒D．没有区别[答案] A[解析] 煮沸消毒法所需温度为100℃，巴氏消毒法需70～75℃煮30min或80℃煮15min。

7)A．利于大肠杆菌的接种B．防止杂菌污染C．利于培养基的冷却D．防止皿盖冷却水倒流入培养基[答案] D[解析] 平板倒置可避免凝集在皿盖上的水流入培养基。

2021年高中生物 2.1微生物的实验室培养同步训练（含解析）新人教版选修1目标导航 1.了解有关培养基的基础知识，掌握无菌操作技术的有关内容。

2.了解消毒和灭菌常用的方法及二者的区别。

3.学会以大肠杆菌为材料进行微生物培养与分离纯化的方法。

一、培养基与无菌技术1．培养基(1)概念：人们按照微生物对________________的不同需求，配制出供其________________的________________。

(2)成分：一般含有______、________、________、________，此外还要满足微生物对__________________(即生长因子)、________以及氧气的需求。

营养物质定义作用主要来源碳源能提供所需______的物质构成生物体的________和一些________，有些是异养生物的________无机化合物：CO2、NaHCO3等；有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源能提供所需______的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等特殊营养物质(生长因子)生长必不可少的__________酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等水在生物体内含量很高，在低等生物体内含量更高不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定无机盐为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素细胞内的组成成分，生理调节物质，某些化能常用于培养病毒的是活鸡胚。

2．无菌技术(1)概念：防止一切外来杂菌的侵入，并保持灭菌物品及无菌区域不再被污染的方法，称为无菌技术。

注意在微生物的实验室培养中，无菌技术的核心是________________，________________。

(2)无菌技术的具体内容①对实验操作的________、操作者的________________进行清洁和消毒。

②将用于微生物培养的__________、接种用具和培养基等进行________。

培养基和无菌技术[基础对点]知识点一培养基1.下列关于微生物营养物质的描述正确的是( )A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源B．除水以外的无机物仅提供无机盐C．凡是碳源都能提供能量D．无机氮源也能提供能量答案 D解析对异养型微生物来说，含C、H、O、N四种元素的化合物既是碳源，又是氮源，如蛋白胨，A错误；除水以外的无机物种类繁多，对不同的微生物起的作用可能不同，如CO2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量，NaHCO3可作为自养型微生物的碳源和无机盐，B、C 错误；硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨，同时氨也为硝化细菌提供用于化能合成作用的能量，D正确。

2．下列有关培养基的叙述正确的是( )A．培养基只能是天然物质B．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌C．固体培养基常用于菌种的鉴定和分离D．培养基只能培养细菌答案 C解析培养基按其所含成分，可分为合成培养基(根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计而配制)、天然培养基(化学组成不明确的天然物质)和半合成培养基(以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分)三类，A错误；微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的菌落，不是单个细菌，B错误；固体培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、计数及菌落特征的观察等，C正确；培养基是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，D错误。

3．在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法错误的是( )A．不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用B．在微生物生长温度范围内保持固体状态C．琼脂凝固点低，利于微生物的生长D．琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强答案 C解析琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强，A、D正确；琼脂在水中加热至98 ℃时开始熔化，温度降至44 ℃时才开始凝固，微生物生长最适宜的温度范围一般为16～30 ℃，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态，B正确；琼脂的凝固点相对于微生物生长的温度较高，凝固剂的凝固点不能太低，否则不利于微生物的生长，C错误。