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专题8 现代生物科技专题考点考向考情分析基因工程与细胞工程一基因工程 1.考查题型:非选择题。
2.考查形式:根据提供的文字信息作答。
3.命题特点:(1)对基因工程的考查频率较高,侧重考查操作工具的种类、功能以及操作基本程序等。
动物细胞工程技术中的核移植技术及单克隆抗体的制备也有所考查。
二细胞工程(2)题目常借助简洁的文字材料或模式图等考查有关基因工程、动物细胞工程的原理、技术手段等,尤为注重对教材中一些关键词的填充及对结论性语句的准确表述等。
胚胎工程与生态工程三胚胎工程 1.考查题型:非选择题。
2.考查形式:根据提供的文字信息作答。
3.命题特点:(1)从全国卷命题来看,曾考查过胚胎移植的概念。
多以简单的科研实例为载体考查本部分知识,如胚胎移植的概念、基本程序等,有时也会结合基因工程技术或动物细胞工程技术综合考查。
(2)生物技术的安全性和伦理问题为开放性的试题,暂时没有考查。
四生态工程五生物技术的安全性和伦理问题1.(2019年全国Ⅰ卷)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。
基因文库包括和。
答案▶基因组文库cDNA文库2.(2019年全国Ⅰ卷)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是。
在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。
上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
答案▶解旋酶加热至90~95℃氢键3.(2019年全国Ⅱ卷)植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。
与常规的种子繁殖方法相比,这种微型繁殖技术的特点有(答出2点即可)。
答案▶能保持植物原有的遗传特性,繁殖速度快4.(2019年全国Ⅱ卷)通过组织培养技术,可把植物组织细胞培养成胚状体,再通过人工种皮(人工薄膜)包装得到人工种子,这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。
人工种皮具备透气性的作用是。
人工胚乳能够为胚状体生长提供所需的物质,因此应含有植物激素、和等几类物质。
第15讲生物技术实践1. (2018课标全国I ,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。
在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M 培养基。
回答下列问题：(1) M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制 _______ 的生长,加入了链霉素的培养基属于________ 培养基。
(2) M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有_________ (答出两点即可)。
氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有__________ (答出两点即可)。
(3) 若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。
加入的显色剂是________ ,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是_____________________________________________ 。
⑷甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133; 乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。
有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是____________________________ __________ 。
答案(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差解析本题主要考查微生物的培养与应用。
(1)链霉素可抑制细菌生长，从功能上看，添加链霉素的培养基属于选择培养基。
(2)微生物正常生长需要的营养物质有无机盐、氮源、碳源等。
氮源进入细胞后，可以用于合成含氮大分子物质，如核酸、蛋白质等。
2020年高考生物二轮专题生物技术实践一、选择题1.在DNA粗提取与鉴定实验中，将获得的含有DNA的黏稠物分别按下表处理3次，则DNA主要集中在标号( )A.①③⑤B.②③⑤C.①④⑥D.②④⑥2.下列关于腐乳制作的叙述，错误的是( )A.毛霉可利用其体内的酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸B.卤汤中酒的含量越高，杂菌繁殖越快，豆腐越易腐败C.用盐腌制腐乳的过程中，要控制盐的用量，盐的浓度过高会影响口味，过低则不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败D.其制作过程可以表示为：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制3.下列有关传统发酵技术的叙述，正确的是( )A.在果酒的制作过程中，应先去除葡萄的枝梗，再进行多次反复冲洗，这样才可以洗得彻底B.果酒、果醋的发酵装置中，充气口的作用是在发酵时连接充气泵进行充气，排气口的作用是在酒精发酵时排出二氧化碳C.豆腐上布满毛霉菌丝后，需加盐腌制8天左右，这样可以抑制微生物的生长，避免豆腐变质，又能使豆腐析出水分，使豆腐块变硬D.制作泡菜时要选火候好、无裂纹、无砂眼、盖子吻合好的坛子，需要加水密封，目的是隔绝空气，抑制杂菌繁殖4.下列有关微生物分离、纯化及计数的叙述，错误的是( )A.常用富含纤维素的培养基富集培养纤维素分解菌B.平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散并计数C.稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散D.用血细胞计数板计数微生物时，实验结果往往比稀释涂布平板法得到的结果偏大5.消毒和灭菌是两个不同的概念。
下列各项中必须进行灭菌处理的是( )A.牛奶B.培养基C.离体培养的植物组织D.注射药物时的皮肤6.下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是( )A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.待培养基冷却至50 ℃左右(刚刚烫手)时进行倒平板D.待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置7.下列有关生物技术实践的叙述，错误的是( )A.制备凝胶珠时，CaCl2溶液的作用是使胶体聚沉B.固定化酵母细胞分解葡萄糖速度要比游离酵母细胞快C.制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长D.微生物平板培养需倒置平板，目的是防止冷凝水珠污染培养基8.如图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，下列相关叙述正确的是( )A.图1中溶液a是0.14 mol·L－1的NaCl溶液B.图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白质等杂质不溶C.图2所示实验操作中有一处明显错误，可能导致试管2中蓝色变化不明显D.图2试管1的作用是证明2 mol·L－1 NaCl溶液遇二苯胺出现蓝色9.若从植物细胞中提取DNA，发现实验效果不好，如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等，其不可能的原因是( )A.植物细胞中DNA含量低B.研磨不充分C.过滤不充分D.95%冷酒精的量过少10.下列关于酶制剂在生活中应用的相关叙述不合理的是( )A.生物酶牙膏中含有酶，可以分解细菌预防龋齿B.加酶洗衣粉含固定化酶，去污能力比普通洗衣粉要强C.溶菌酶能够溶解细菌的细胞壁，具有抗菌消炎的作用D.多酶片含有多种消化酶，在人体消化不良时可以口服11.下列检测某熟制食品中大肠杆菌是否超标的实验操作，不合理的是( )A.待检测食品需要经过灭菌操作后取样检测B.应设置未接种的培养基，作为实验的对照C.用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数D.接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养12. “DNA粗提取”实验中，应尽可能避免DNA断裂和降解。
第八单兀牛-物技术实践［考纲要求］1.微生物的分离和培养。
2.某种微生物数量的测定。
3.培养基对微生 物的选择作用。
4•利用微生物进行发酵来生产特定产物及微生物在其他方面的应用。
5.运用发酵加工食品的基本方法。
6.测定食品加工中可能产生的有害物质。
7.从生物材料中提取某些特定的成分。
31识主线思雄串联/H.MW 合:.前搖盲Sill--元茵是甜切底的对u 【黜如何谩占 Mfi ：M状元笔记1 •归纳微生物分离与计数中的5个“两”(1) 两种无菌技术一一消毒与灭菌(3) 两类纯化菌种方法 平板划线法、稀释涂布平板法。
(4) 两种对照组一一培养基制备是否合格；培养基是否起到 “筛选”作用(5) 微生物两类计数方法一一活菌计数法与显微镜直接计数法。
2 •传统发酵技术中“氧”的控制|鯉消市袪—1 巴氏消蛊法一一消命'方找紫艸蝇消弗袪一； Mt 1511 ；LU ：尿壺柞再啾-風源的諒戊 :选择培养甚 眾建关:联:'诵陋就乍晦和也附购川• 礬融弹蜒讎晦—…:培營 ［富舎勺蜀竝的选择培养基"特‘屯■ 比较陶种［ 刚牝|；验： 色诛 :戚卡分解附 的知隊i 弹 THt 厂灼饶蓝肃肚 —F 雄火蘭诀 —们;汕漁汽喊備法 仍丼G 应用 厂；芒板划线注 —稀拝济怖平叛茯 ------------ 暗斥菇成井⑧碳源、越遁、水和无机杜种也讣设於 两卅丁纽法 较沖K0,方罠 比播厘朮进意 纤维来井邑鱼一配制暗养呈士 v 赵*倒平桓按种亠培并— ;醉母肃_雄洒制带闕弦住術 皓淋充記］展斛履閑,勰M 的雌樹 m 鱼瞄感 點乳剖作的主蜓雌詢服冉生料: 壬磔* -----------------------迢 ；乳醸歯.一池華制卄:的敢住術 L.联随. ：■亚硝畸盘含缺的间左原理 —技术的应刖- 生物技术 在茸他方iJii 、的应用＞ 拽物件 效成仆 的拙农 理规悄讪 塑处一水蒸伽祕 畅哎情浊 扯胆卉仏 压榨迭 赳曲卜录凰配 曲 僭鉴定M 认单取比険取--戛- 咖 甌舷析祛哒案 s K X a K * a ■■■ a A s. a ■亠=K * a ■ * a K J a ■亠■“= K u ■ & * a ■■■ n * a n * a ■・■■■ 〔四类消种呼吸类型臣产物 1■汙提聽摘翳点圧适用时嫁时琳体色 -看提联与 '分"廃 (2)两类培养基 选择培养基、鉴别培养基无的枝术(1) 严格需氧一一用醋酸菌生产醋酸(毛霉制作腐乳也需氧)(2) 严格厌氧一一用乳酸菌制作泡菜。
专题十五生物技术实践H 核心判断exinpanduan(1)研究和培养微生物的关键是防止杂菌入侵，获得纯净的培养物。
(√)(2)选择培养基是微生物选择培养中常用的，它允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长。
(√)(3)对用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等要进行灭菌，而对实验操作空间、操作者的衣着等要进行消毒。
(√)(4)筛选微生物时要根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻我，如筛选分解尿素的细菌要用尿素作为唯一氮源。
(√)(5)统计菌落数目对细菌进行计数时可用稀释涂布平板法进行接种，也可用平板划线法接种。
(×)(6)筛选纤维素分解菌常用刚果红染色法，根据颜色反应进行直接筛选。
(√)(7)酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，能进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，能进行酒精发酵。
(√)(8)制作果酒或果醋的发酵液和发酵瓶要严格灭菌。
(×)(9)制作腐乳所加的盐和卤汤都能抑制微生物的生长，因此制作腐乳不需要严格的灭菌操作。
(√)(10)常用比色法测定泡菜中亚硝酸盐含量。
(√)(11)橘皮精油主要贮藏在橘皮部分，橘皮精油的有效成分在水蒸气蒸馏时会发生部分水解，而使用水中蒸馏又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法。
(√)(12)胡萝卜素易溶于有机溶剂，可以采用萃取的方法进行提取。
(√)(13)通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径，这两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
(√)(14)利用DNA 溶液遇二苯胺沸水浴加热变蓝的特性对DNA 进行鉴定。
(√)考向一 微生物的培养利用Z 真题回放hentihuifang1．(2018·全国卷Ⅰ)将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。
在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M 培养基。
回答下列问题：(1)M 培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制__细菌__的生长，加入了链霉素的培养基属于__选择__培养基。
2020年高考生物专题复习：生物技术实践一、考点突破（1）微生物的分离和培养（2）某种微生物数量的测定（3）微生物对培养基的选择利用（4）利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用（5）酶的存在与简单制作方法（6）酶活力测定的一般原理和方法（7）酶在食品制造和洗涤等方面的应用（8）制备和应用固定化酶（9）从生物材料中提取某些特定的成分（10）运用发酵技术加工食品的基本方法（11）测定食品加工中可能产生的有害物质（12）植物的组织培养（13）蛋白质的提取和分离（14）PCR技术的基本操作和应用二、重难点提示纵观近几年的高考，本专题考点主要集中在微生物的培养和利用、植物的组织培养、DNA的粗提取和PCR技术操作，诸如血红蛋白的提取与分离、酶技术以及植物有效成分的提取等知识点是新课标所增加的知识点，在今后的高考试题中必然会有体现，复习时也应加以重视。
专家点拨一、本讲内容框架图二、重点知识点拨（一）微生物的培养与应用1. 培养基（1）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
（2）培养基类型①按培养基的物理性质可分为固体培养基和液体培养基两种，其中固体培养基用于菌种分离、鉴定、菌落计数等。
而液体培养基常用于科研或工业生产等。
长有菌落的琼脂固体培养基液体培养基②按培养基的功能可分为选择培养基和鉴别培养基。
③按照人们对培养基中成分的了解程度可分为天然培养基和合成培养基两种。
说明：代谢类型不同的微生物，对培养基营养成分的要求不同，如自养型微生物可以利用无机碳源，而异养型微生物则必须利用有机碳源。
不论代谢类型如何，微生物对营养物质的要求都包括碳源、氮源、水、无机盐、生长因子五类。
2. 关于无菌技术（1）实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌；常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒。
对不同的对象需采用不同的消毒或灭菌方法。
专题八生物技术实践基础自查明晰考位[纵引横连建网络] 提醒：特设长句作答题，训练文字表达能力[边角扫描全面清]1．微生物利用的相关判断(1)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(×)(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(√)(3)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌(×)(4)检测土壤中细菌总数实验操作中，确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数(×)(5)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌(×)2．传统发酵技术的相关判断(1)醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(×)(2)酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精(√)(3)泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵(√)(4)腐乳制作利用了毛霉等微生物产生的蛋白酶和脂肪酶(√)(5)在制作腐乳时，将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量(×)3．植物有效成分提取的相关判断(1)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用干薄荷叶作原料，可采用水蒸气蒸馏法提取(×)(2)用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是酒精，原理是薄荷油易溶于有机溶剂酒精中(×)(3)用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤是：干燥、粉碎、萃取、浓缩、过滤(×)(4)在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解(√)(5)提取的胡萝卜素可通过纸层析法进行鉴定，在鉴定过程中不需要对照(×)考点梳理整合突破整合考点22微生物的培养与应用及传统发酵技术的应用[考点突破固考基]1．图解识记微生物的培养、分离与计数(填图)2．熟记微生物分离与计数的两个实例(填空)(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。
②测定微生物数量的常用方法：活菌计数法和显微镜直接计数。
考点3 植物有效成分的提取、DNA技术1．三种生物成分的提取方法、原理及步骤的比较提取物质提取方法提取原理步骤玫瑰精油蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来①水蒸气蒸馏；②分离油层(加NaCl)；③除水过滤(加无水Na2SO4)橘皮精油压榨法通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油①石灰水浸泡、漂洗；②压榨、过滤、静置；③再次过滤胡萝卜素萃取法使提取物溶解在有机溶剂中，蒸发后得到提取物①粉碎、干燥；②萃取、过滤；③浓缩特别提醒(1)胡萝卜素不溶于水，含水量影响胡萝卜素的萃取效果。
(2)油脂类物质不易挥发，可选用萃取法从菌体中提取。
(3)萃取加热时要加装冷疑回流装置，目的是防止加热时有机溶剂挥发。
(4)β－胡萝卜素在人体肝脏中可被氧化成两分子的维生素A，因此可用于治疗因缺乏维生素A引起的夜盲症等。
2．把握物质分离的5种方法(1)分离油水混合物：分液法。
(2)除去固体物和残渣：过滤法。
(3)除去液体中质量较小的固体残留物：离心法。
(4)除去芳香油中的残留水分：加入无水硫酸钠后过滤的方法。
(5)除去萃取液中的有机溶剂：蒸馏法。
3．明确冷凝管的2种用法(1)冷凝收集油水混合物：如玫瑰精油的提取。
(2)冷凝回流：如胡萝卜素的提取。
4．DNA粗提取与鉴定实验原理(1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，其中在物质的量浓度为0.14 mol/L时最低。
(2)DNA不溶于酒精，但是细胞中的一些有机物如某些蛋白质则溶于酒精，因此可以用酒精提纯。
(3)DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色，因此，二苯胺可用来鉴定DNA分子。
5．DNA的粗提取与鉴定实验流程选取材料→破碎细胞，获取含DNA的滤液→去除滤液中的杂质→D NA的析出与鉴定。
1．(2017·全国Ⅲ，37)绿色植物甲含有物质W，该物质为无色针状晶体，易溶于极性有机溶剂，难溶于水，且受热、受潮易分解。
其提取流程为：植物甲→粉碎→加溶剂→振荡→收集提取液→活性炭处理→过滤去除活性炭→蒸馏(含回收溶剂)→重结晶→成品。
生物技术实践类专项突破1．(原创)家庭酿制的葡萄酒是以葡萄为原料经发酵酿制而成的。
回答下列问题：(1)采摘的葡萄需要洗净、晾干即可，不需要灭菌处理，原因是____________________________________________________________。
(2)虽然没有进行灭菌处理，但是在葡萄酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌，原因是____________________________________。
(3)某人喜欢饮用甜度高的葡萄酒，就在酿制前向发酵瓶中添加了大量的蔗糖，结果在酿出的葡萄酒中几乎检测不到酒精，失败的原因是____________________________________________。
(4)为避免发酵过程中产生的气体使发酵瓶爆裂，采取的措施是______________________________________。
(5)为使发酵瓶中的酵母菌大量繁殖形成种群优势，发酵初期采用的措施有__________________________________________。
答案(1)发酵用的酵母菌是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌(2)酿制条件有利于酵母菌的快速生长，不适宜其他杂菌生长，并且酵母菌产生的酒精也不利于其他微生物的生存(3)浓度太大会导致酵母菌失水，不利于酵母菌成活(4)每隔一段时间将瓶盖拧松，但不要打开(5)先通气使酵母菌大量繁殖，达到一定数量后再隔绝空气解析(1)家庭酿制葡萄酒利用的酵母菌是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌，因此采摘的葡萄不需要灭菌处理。
(2)葡萄酒酿制时发酵液缺氧、呈酸性，有利于酵母菌的快速生长，不适宜其他杂菌生长，并且酵母菌产生的酒精也不利于其他微生物的生存。
(3)如果在发酵瓶中添加大量蔗糖，会导致发酵液的浓度过高，酵母菌失水，不利于酵母菌的成活。
(4)发酵过程中会产生气体，为避免发酵瓶爆裂，可以每隔一段时间将瓶盖拧松，为防止杂菌污染，不要将瓶盖打开。
2020年高考生物二轮专题复习15：现代生物技术专题（附解析）考纲指导1．近五年的全国卷高考试题中对于基因工程的考查频度较高，侧重考查基因工程的工具，操作程序与应用等。
植物细胞工程的应用以及动物细胞工程技术中的核移植技术、单克隆抗体的制备也有所考查。
胚胎移植的概念及移植胚胎的来源也会涉及。
2．本专题以非选择题的形式考查。
题目常借助简洁的文字材料或流程图、结构图等考查有关基因工程、动物细胞工程的原理、技术手段等，尤为注重对教材中一些关键词的填充及对结论性语句的准确表述等。
3．2020年备考时应注意：(1)限制酶、DNA连接酶和载体的作用及PCR技术。
(2)动物的细胞培养与体细胞克隆。
(3)单克隆抗体制备过程。
(4)图解分析法理解胚胎发育的过程和胚胎移植的程序。
思维导图知识梳理考点1基因工程1．几种获取目的基因方法的比较2．比较DNA复制和PCR技术3．与DNA有关的酶的归纳与比较4．将目的基因导入受体细胞的方法比较5．DNA的粗提取与鉴定的方法步骤技巧方法(1)限制酶是一类酶，而不是一种酶。
(2)限制酶的成分为蛋白质，其作用的发挥需要适宜的理化条件，高温、强酸或强碱均易使之变性失活。
(3)在切割目的基因和运载体时要求用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性末端。
(4)将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切两处，同时产生4个黏性末端。
(5)不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同，同一个DNA分子用不同的限制酶切割，产生的黏性末端一般不相同。
(6)限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以便于进行检测。
(7)基因工程中的运载体与细胞膜上物质运输的载体不同。
基因工程中的运载体是DNA分子，能将目的基因导入受体细胞内；膜载体是蛋白质，与细胞膜的通透性有关。
(8)基因工程中有3种工具，但工具酶只有2种。
考点2细胞工程6．植物组织培养的关键点(1)植物组织培养的关键①条件：离体、一定的营养物质、激素(生长素、细胞分裂素)等。
第15讲生物技术实践1.(2018课标全国Ⅰ,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。
在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。
回答下列问题:(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制的生长,加入了链霉素的培养基属于培养基。
(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有(答出两点即可)。
氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有 (答出两点即可)。
(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。
加入的显色剂是,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是。
(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。
有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是。
答案(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差解析本题主要考查微生物的培养与应用。
(1)链霉素可抑制细菌生长,从功能上看,添加链霉素的培养基属于选择培养基。
(2)微生物正常生长需要的营养物质有无机盐、氮源、碳源等。
氮源进入细胞后,可以用于合成含氮大分子物质,如核酸、蛋白质等。
(3)淀粉遇碘液显蓝色,若淀粉被水解,则产淀粉酶的菌落周围的淀粉被水解,形成以菌落为中心的透明圈。
(4)用稀释涂布平板法统计菌落数目时,为保证统计结果的准确性,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数,取结果差别不大组别的平均值,进而得出计数结果。
而乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,即乙同学的结果可信度低。
2.(2018课标全国Ⅱ,37,15分)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题:(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是。
(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能。
在照射前,适量喷洒,可强化消毒效果。
(4)水厂供应的自来水通常是经过(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。
(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是。
答案(1)可以(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽解析(1)能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具可以采用干热灭菌法灭菌。
(2)用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法对牛奶消毒,可以杀死牛奶中的微生物,并且使牛奶的营养成分损失较少,而煮沸消毒法会破坏牛奶的营养成分。
(3)紫外线照射可以破坏DNA结构,杀死物体表面或空气中的微生物;在照射前,适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可以加强消毒效果。
(4)水厂供应的自来水通常是经过氯气消毒的。
(5)高压蒸汽灭菌时,若不排尽锅内的冷空气,会使锅内温度不达标。
3.(2019贵州安顺一模)为探究大肠杆菌CV101菌株和CV103菌株的营养需求,某团队在营养成分相同的含醋酸盐的培养液中分别接种CV101菌株和CV103菌株,并置于相同且适宜的环境中培养,每隔一段时间统计两种菌株的生长状况。
实验数据如图所示,回答下列问题:(1)醋酸盐培养基从物理性质上来看属于培养基,该培养基主要应用是;从功能上来看属于培养基。
(2)由图可知:更适应醋酸盐培养基环境的菌株是,其依据是,原因是。
(3)若要统计培养30小时后醋酸盐培养基中的CV101活菌数,可采用法;为保证能在固体培养基上获得单个菌落,接种前,需取1 mL该菌液进行处理。
答案(1)液体扩大培养选择(2)CV101菌株在一定时间内,CV101菌株在该培养基中数量持续增多,而CV103菌株的数量减少且维持在较低水平CV101菌株能以醋酸盐为碳源(3)稀释涂布平板梯度稀释解析(1)根据题干信息分析,某团队在营养成分相同的含醋酸盐的培养液中分别接种CV101菌株和CV103菌株,因此该培养基属于液体培养基,有利于菌种的扩大培养;从功能上看其属于选择培养基。
(2)据图分析可知,在一定时间内,CV101菌株在该培养基中数量持续增多,而CV103菌株的数量减少且维持在较低水平,说明CV101菌株能以醋酸盐为碳源,因此CV101菌株是更适应醋酸盐培养基环境的菌株。
(3)常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,其中后者可以用于菌种的计数;为保证能在固体培养基上获得单个菌落,接种前,需取1mL该菌液进行梯度稀释处理。
4.(2019课标全国Ⅲ,37,15分)回答下列与细菌培养相关的问题。
(1)在细菌培养时,培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是(填“蛋白”)。
通常,制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调胨”“葡萄糖”或“NaNO3节培养基的pH,其原因是。
硝化细菌在没有碳源的培养基上(填“能够”或“不能”)生长,原因是。
(2)用平板培养细菌时一般需要将平板(填“倒置”或“正置”)。
(3)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是。
(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过处理,这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。
答案(1)蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可以作为碳源利用空气中的CO2(2)倒置(3)在一定的培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征(4)灭菌解析本题借助细菌的培养方法与操作的相关知识,考查考生理解实验原理、方法与操作步骤,并对一些生物学问题进行初步探究的能力;试题通过实验分析和方案探究的形式体现了对科学探究素养的考查。
(1)细菌培养时需要碳源、氮源、水和无机盐等,蛋白胨能同时提供碳源、氮不能提供碳源,可提供无机氮源。
不同细菌生长繁殖所需源,葡萄糖提供碳源,NaNO3的最适pH不同,故制备培养基时需要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH。
作为碳源,故硝化细菌可在没有碳硝化细菌是自养型细菌,可以利用空气中的CO2源的培养基上生长。
(2)为防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染,用平板培养细菌时一般需将平板倒置。
(3)在一定培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征,如特定的形状、大小、颜色、隆起程度等,所以依据菌落的特征,可以初步区分不同种的微生物。
(4)为防止污染环境,使用后的培养基丢弃前要经过灭菌处理,以便杀死丢弃物中所有的微生物。
5.(2019四川雅安三模)有研究者拟从中药渣肥堆的样本中筛选高产纤维素酶菌株,为纤维素酶制剂的研制提供原料。
请回答下列问题:(1)从中药渣肥堆中能分离出纤维素分解菌的原因是。
纤维素分解菌能产生纤维素酶,纤维素酶一般由组成。
(2)从中药渣肥堆中取样后,需要选择培养一段时间,其目的是;选择培养时要对培养瓶定期振荡,其目的是。
(3)若将纤维素分解菌内的酶提取出来,进行固定,一般不采用包埋法,原因是。
(4)筛选获得纤维素酶高活性菌株3株,分别命名为Z-1、Z-2和Z-3。
在相同培养基培养相同时间后,测得3种菌株的菌落直径与产生的透明圈直径结果如表。
菌株编码菌落直径(d)cm透明圈直径(D)cm D/d Z-1 3.43 5.43 1.58 Z-2 1.83 4.86 2.66 Z-3 2.15 4.88 2.27培养基中的纤维素能与产生红色复合物,纤维素被分解后,就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
由表中可知, 菌株纤维素酶的活性最强。
答案(1)纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中,而中药渣富含纤维素C 1酶、CX酶、葡萄糖苷酶(2)增加目的(纤维素分解)菌的数量增加培养液内的氧气含(溶解)量、让培养液与菌体充分接触(3)酶分子较小,容易从包埋材料中漏出来(4)刚果红Z-2解析(1)根据某种微生物生存环境的特点进行筛选的原则,纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中,根据题意,从中药渣肥堆中能分离出纤维素分解菌,说明中药渣富含纤维素。
纤维素酶是一种复合酶,一般包括C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶。
(2)从中药渣肥堆中取样后,需要选择培养一段时间,以增加纤维素分解菌的数量;选择培养时要对培养瓶定期振荡,以便增加培养液内的氧气含(溶解)量,同时让培养液与菌体充分接触,有利于微生物对营养物质的利用,加速繁殖。
(3)固定化酶一般不采用包埋法,原因是酶分子较小,易从包埋材料中漏出。
(4)根据以上分析可知,在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染料,可用来鉴定纤维素分解菌,纤维素与刚果红反应能够形成红色复合物,纤维素被分解后,就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
由表可知,透明圈直径与菌落直径比值越大的菌株的纤维素酶的活性越强,即图中的编码Z-2的菌株纤维素酶的活性最强。
6.生物技术拥有巨大的发展空间,给人们的生活带来了深刻的变化。
某兴趣小组翻阅资料发现橙皮精油和乳酸菌素都具有抑菌的效果,如图为制备橙皮精油和乳酸菌素的流程及其抑菌实验结果,回答下列问题:(1)筛选乳酸菌A时,所用培养基需经法进行灭菌。
将某种细菌接种到培养基上并形成菌膜,最可能采用的接种方法是。
(2)图中,橙皮精油或乳酸菌素接种在培养基上所在的位置。
(3)橙子果肉可用于制备果酒和果醋。
为监测发酵状况,可用法对发酵菌种进行计数,一段时间后统计结果分析可发现,培养液中的菌种种群数量的增长曲线变化规律是种群数量经过一定时间的增长后,趋于稳定。
(4)用蒸馏法提取橙皮精油时,如果想提取较高品质的产品,对温度和时间的要求是。
(5)果胶酶是分解果胶的酶的总称,包括、果胶分解酶和果胶酯酶。
(6)凝胶色谱法是根据分离蛋白质的有效方法。
“血红蛋白的释放”步骤中,在的作用下,红细胞破裂,释放出血红蛋白。
答案(1)高压蒸汽灭菌稀释涂布平板法(2)透明圈(3)抽样检测(4)温度不宜过高,适当延长时间(5)多聚半乳糖醛酸酶(6)相对分子质量大小蒸馏水和甲苯解析(1)培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。
接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法,图中进行抑菌实验时,接种的方法最可能是稀释涂布平板法。
(2)图中进行抑菌实验时,最终可通过测量透明圈的直径(或大小)来比较橙皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
(3)检测培养液中菌种种群数量的变化可以采用抽样检测法。
