不同发育时期胎儿皮肤中基质金属蛋白酶-9,2及金属蛋白酶-2抑制因子基因表达的变化

同源异型框基因Prrx功能的研究进展徐小桐;张昕;杜娟;杨晓农【摘要】同源异型框(homeobox,HoX)基因是具有较高遗传等级并能控制细胞分化和形态发育的重要基因.同源异型框基因主要在胚胎时期高度表达,对胚胎的发育、分化及对肢体结构和器官发育有重要影响.同源异型框基因Prrx主要包括3种,分别是Prrx1、Prrx2和Prrx3.Prrx基因家族在人和鼠的腭裂、颌骨、四肢、胫腓骨的组织发育中有重要作用,并与大脑、脊髓、神经、心脏等器官的发育密切相关.其中Prrx1和Prrx2基因主要参与胚胎中骨骼和心血管系统的发育,如四肢、颅面、软骨和动脉管.Prrx3基因主要参与胚胎中骨、软骨、大脑、脊髓等的发育.文章针对Prrx基因的功能进行概述,以期为这些基因功能的研究及相关疾病的防控提供一定的参考.%The homeobox (HoX) gene that controls cell differentiation and morphological development is an important gene having highly genetic level.These genes highly express in the embryonic period and affect the embryonic development and differentiation and control the developmentof body structure and organs.The homeobox gene Prrx includes three types,Prrx1,Prrx2 and Prrx3,this family gene plays an important role in the development of cleft palate,jaw,extremities,tibia and fibula in human and mouse,and is also closely related to the development of the brain,spinal cord,nerve,heart and other organs.The Prrx1 and Prrx2 are mainly involved in the development of bone and cardiovascular system in embryo,such as limb,craniofacial,cartilage and arteries,and Prrx3 is mainly involved in the development of embryonic cartilage,bone,brain,spinal cord and so on.This paper reviewed the functions of Prrx gene,so as to provide certainreferences for research on the gene functions and prevention and controlof related diseases.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2017(044)002【总页数】6页(P607-612)【关键词】同源异型框;Prrx基因;生长发育【作者】徐小桐;张昕;杜娟;杨晓农【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041【正文语种】中文【中图分类】R43Homeobox基因是发育基因的超家族，在胚胎发育过程中有重要作用。

金属基质蛋白酶9与疾病的研究进展摘要：金属基质蛋白酶（MMPs）是一组可以选择性降解细胞外基质（ECM）的内肽酶，金属基质蛋白酶9（MMP-9）又名明胶酶B，它是MMPs家族中一个重要成员，能水解弹性蛋白、胶原蛋白、明胶、纤维蛋白等多种细胞外基质成分，在生理情况下参与人体的正常发育，是ECM降解的生理性调节因子。

所有MMPs都受金属基质蛋白酶抑制剂所抑制，两者的不平衡导致许多疾病的发生。

金属基质蛋白酶抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）为MMP-9特异性抑制剂，目前认为MMP-9与TIMP-1是调节ECM降解、合成的主要酶类，MMP-9/TIMP-1比值失衡是多种疾病发生、发展的重要机制之一。

近年研究发现MMP-9还与全身多系统疾病的发生、发展有关，现就MMP-9与多种疾病的相关研究进展进行综述。

关键词：金属基质蛋白酶9；疾病；研究进展金属基质蛋白酶（matrix metalloteinases，MMPs）是一组锌离子依赖的肽链内肽酶，因含金属离子（锌、钙）而得名，现至少已发现26种MMPs，称为MMPs家族，是构成细胞外基质降解最重要的蛋白水解系统。

其抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinases，TIMPs）是调节MMPs的重要因素。

MMPs与TIMPs在维持ECM的动态平衡中起重要作用。

细胞外基质（extracellullar matrix，ECM）是一类由胶原、蛋白聚糖及糖蛋白等大分子物质组成的动态网状结构，ECM不仅起细胞与细胞之间机械支持和连接作用，也是细胞与细胞之间信号传递的桥梁，现已识别丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、基质金属蛋白酶均能降解ECM[1]。

金属基质蛋白酶9（matrix metalloteinases-9，MMP-9）是MMPs家族分子量最大的明胶酶。

肿瘤坏死因子-α和基质金属蛋白酶-9在儿童及成人中耳胆脂瘤中的表达及意义汪志伟;杨海弟;赵晓明;窦晓辉;李永贺【期刊名称】《中国耳鼻咽喉头颈外科》【年(卷),期】2013(20)2【摘要】目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor-α,TNF-α)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在儿童及成人中耳胆脂瘤中的表达差异和临床意义。

方法术中观察22例儿童及36例成人胆脂瘤型中耳炎患者听骨链破坏情况。

采用免疫组化技术检测TNF-α和MMP-9在患者胆脂瘤中的表达。

分析不同年龄组患者听骨链破坏程度和TNF-α、MMP-9表达差异,以及TNF-α、MMP-9表达的相互关系。

结果儿童胆脂瘤型中耳炎患者听骨链破坏程度高于成人患者。

TNF-α在儿童及成人中耳胆脂瘤中的相对吸光度值分别为33.32±3.90和26.61±4.43,MMP-9在儿童及成人中耳胆脂瘤中的相对吸光度值分别为35.50±3.33和27.25±3.83,两者在儿童的表达均明显强于成人,且两者在不同年龄组患者中的表达均呈正相关。

结论 TNF-α和MMP-9在儿童中耳胆脂瘤中的表达强于成人患者,可能是儿童胆脂瘤更具破坏力和侵袭性的重要原因。

【总页数】3页(P99-101)【关键词】肿瘤坏死因子类;明胶酶B;胆脂瘤;中耳;儿童;成年人【作者】汪志伟;杨海弟;赵晓明;窦晓辉;李永贺【作者单位】珠海市人民医院;暨南大学附属珠海医院耳鼻咽喉科;中山大学孙逸仙纪念医院耳鼻咽喉科;南方医科大学珠江医院耳鼻咽喉科【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.基质金属蛋白酶家族及其抑制剂在中耳胆脂瘤中的表达及意义 [J], 邱银秀;杨一兵2.基质金属蛋白酶－2、金属蛋白酶组织抑制因子－2、肿瘤坏死因子－α在胎膜早破中的表达及意义 [J], 姚卉;段丽萍3.肿瘤坏死因子-α和基质金属蛋白酶-9在中耳胆脂瘤中的表达及意义 [J], 付建梅;王建明4.基质金属蛋白酶2在中耳胆脂瘤中的表达及临床病理意义 [J], 王威;吴辉5.基质金属蛋白酶-1、肿瘤坏死因子在中耳胆脂瘤中的表达及相关性研究 [J], 杨琳红;姚雅芬;张爱华;范宗宪;魏晓丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

基质金属蛋白酶MMP-1及其抑制因子TIMP-1在子宫内膜异位症中的表达及意义方永强;周慧;郭新华【期刊名称】《临床军医杂志》【年(卷),期】2005(33)6【摘要】目的研究基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制因子TIMP-1mRNA和蛋白在子宫内膜异位症(EM s)异位和在位内膜组织中的表达,探讨其在子宫内膜异位症发生发展中的作用。

方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化S-P法检测43例EM s的异位和在位内膜及20例正常子宫内膜中MMP-1,TIMP-1mRNA及蛋白的表达水平。

结果在EM s异位内膜中MMP-1mRNA及蛋白均呈高表达,TIMP-1mRNA及蛋白均呈低表达,与EM s在位内膜和正常内膜相比,差异有显著性,P<0.05。

MMP-1/TIMP-1比值在异位内膜和在位内膜分别为1.46±0.57,1.15±0.38,均显著高于正常内膜(P<0.05);而且异位内膜中比值>1的几率(33/39,84.6%)明显高于在位内膜(P<0.05),两者呈显著负相关。

异位内膜组织中MMP-1,TIMP-1mRNA及蛋白的表达无周期性变化,但与r-AFS临床分期有相关性(P<0.05)。

结论异位内膜组织中MMP-1高表达,TIMP-1低表达,导致MMP-1/TIMP-1平衡失调,使异位内膜组织具有更强的侵袭能力,在EM s的发生发展中发挥重要作用。

【总页数】4页(P663-666)【关键词】子宫内膜异位症;基质金属蛋白酶;金属蛋白酶组织抑制因子;反转录聚合酶链反应;免疫组织化学【作者】方永强;周慧;郭新华【作者单位】武警山东边防总队医院;山东大学第二医院;青岛大学附属医院【正文语种】中文【中图分类】R711.71【相关文献】1.基质金属蛋白酶MMP-2 MMP-9及其抑制因子TIMP-1TIMP-2在子宫内膜异位症中的表达及意义 [J], 邱晓红;李荷莲2.基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-1在子宫内膜异位症中的表达及意义 [J], 吕炜;赵国君;佟秀琴;骆伟奇3.基质金属蛋白酶2及其组织抑制因子1在子宫内膜异位症中的表达及其意义 [J], 奚庆华;张玉泉;徐云钊;叶青4.基质金属蛋白酶MMP-3及其抑制因子TIMP-1 在子宫内膜异位症中的表达及意义 [J], 李立吾;彭桂华;刘力伟;李小琼5.子宫内膜异位症合并不孕患者血清中基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1、血管内皮生长因子可溶性受体、胰岛素生长因子-1、单核细胞趋化蛋白-1表达水平及临床意义 [J], 高扬; 朱艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶-2在非负荷期种植体周围骨组织改建过程中的表达刘丽;何福明;李乐乐;胡济安【期刊名称】《华西口腔医学杂志》【年(卷),期】2004(022)004【摘要】目的探讨基质金属蛋白酶-9、2(MMMP-9,MMMP-2)在种植体与骨组织界面愈合过程中的作用.方法在不同时间将种植体植入英国小猎兔犬的前牙及前磨牙区,取得种植不同时间段的标本,用免疫组织化学染色法观察不同时间段种植体周围骨组织中MMP-9、2表达的变化.结果MMP-9主要表达在破骨细胞、巨噬细胞、衬细胞及成纤维细胞的细胞质中;MMP-2主要表达在成骨细胞、成纤维细胞的细胞质及部分破骨细胞中.结论MMP-9、2在种植体植入后周围损伤骨组织的吸收、愈合和骨重建中起重要作用.【总页数】3页(P325-327)【作者】刘丽;何福明;李乐乐;胡济安【作者单位】浙江大学医学院附属口腔医院,修复科,浙江,杭州,310006;浙江大学医学院附属口腔医院,修复科,浙江,杭州,310006;浙江大学医学院附属口腔医院,修复科,浙江,杭州,310006;浙江大学医学院附属口腔医院,病理科,浙江,杭州,310006【正文语种】中文【中图分类】R783【相关文献】1.数字曲面体层X片在评价非负荷期种植体周围骨吸收的临床应用 [J], 康博;郭吕华;陈健钊;林丽娥2.非负荷期种植体周围破骨细胞核因子κB受体活化因子配基、骨保护因子mRNA 的表达变化 [J], 周文娟;柳忠豪;郝鹏杰;许胜;李卓睿3.基质金属蛋白酶-3和金属蛋白酶组织抑制因子-1在兔下颌牵张成骨改建期的表达及意义 [J], 邹淑娟;王志国;胡静;李继华4.两种颈部形态种植体周围非负荷期骨吸收的对比研究 [J], 王宏远;吴凯敏;张晓敏;曹庆堂5.转化生长因子-β1在非载荷期非埋植型种植体周围骨界面改建中的表达变化 [J], 袁林;宋晶晶;杨征毅;王涵;孙晋;曹依娜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

基质金属蛋白酶识别位点概述说明以及解释1. 引言1.1 概述:基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases, MMPs）是一类具有重要生物学功能的酶家族，广泛存在于人体和其他生物体内。

它们在细胞外基质的代谢、细胞迁移、炎症反应、组织修复等多种生物过程中扮演着关键角色。

基质金属蛋白酶通过降解与调控胶原蛋白、纤维连接蛋白等基质成分的结构，参与了许多疾病的发展和进展，如肿瘤转移、心脏病变以及风湿性关节炎等。

1.2 文章结构:本文将依次介绍基质金属蛋白酶的概述、识别位点的重要性以及该领域的研究方法和技术。

首先，我们将对基质金属蛋白酶进行分类定义，并探讨它们在结构和功能特点上的差异。

随后，我们将深入讨论基质金属蛋白酶在生理和病理过程中识别位点的意义，并介绍一些重要识别位点的例子和作用机制。

接下来，我们将详细介绍实验室技术手段、生物信息学分析方法以及基于计算模型预测识别位点的方法。

最后，我们将对基质金属蛋白酶识别位点研究现状进行总结归纳，并展望未来可能的研究方向和应用前景。

1.3 目的:本文旨在全面深入地探讨基质金属蛋白酶识别位点的概述、意义以及相关研究方法和技术。

通过对该领域的综述，我们希望能够提高人们对基质金属蛋白酶与其识别位点之间关系的理解，并促进该领域的进一步研究和应用。

同时，我们也期望为未来开展相关疾病治疗、药物设计等方面的工作提供参考和借鉴。

2. 基质金属蛋白酶概述：2.1 定义与分类：基质金属蛋白酶是一类广泛存在于细胞内和细胞外的酶，其特点在于能够催化多种蛋白质的降解和修饰过程。

它们主要通过断裂或修改细胞外基质中的蛋白质分子，从而参与了许多重要的生物学过程，如组织发育、炎症反应和肿瘤转移等。

基质金属蛋白酶按照结构、底物特异性以及金属离子需求等方面进行了分类，包括胶原酶、凝血酶样蛋白酶、凝血素样活化剂等多个亚族。

2.2 结构与功能特点：基质金属蛋白酶通常由一个完整的蛋白结构域组成，该结构域含有保守性高的催化位点和底物结合位点。

2和MMP-9的表达及意义第31卷第1期2O1O年3月扬州大学(农业与生命科学版)JournalofYangzhouUniversity(AgriculturalandLifeScienceEdition)V oI.31NO.1Mar.2O1O胎膜早破孕妇胎膜组织中NF—KB,COX-2和MMP一9的表达及意义孔祥,卢丹,汪萍,周甜甜.(1.扬州大学临床医学院,江苏扬州225001;2.连云港市第一人民医院,江苏连云港222002)摘要:将病例分为绒毛膜羊膜炎组和非绒毛膜羊膜炎组,采用免疫组化SP法检测32例胎膜早破(PROM)和2O例正常孕妇胎膜组织中核转录因子B(NF-~B),环氧合酶一2(COX～2)及基质金属蛋白酶一9(MMP一9)的表达.结果表明:所有PROM胎膜标本,诊断为绒毛膜羊膜炎者占46.88,正常组中胎膜感染占1O.0O;PROM组胎膜组织中NF一B,COX一2,MMP一9表达明显高于对照组孕妇(P&lt;0.05);绒毛膜羊膜炎组胎膜NF-~B,COX一2,MMP一9表达明显高于非绒毛膜羊膜炎组(P&lt;O.05);胎膜早破组患者胎膜组织中COX2,MMP-9阳性表达与NF-~B采用线性相关分析呈明显正相关关系(P&lt;o.o1).NF—KB,COX一2及MMP一9均参与了PROM的发病.C02,MMP一9基因的表达受多功能N卜KB的调控.NF—KB活化可能是PROM发生的关键因素.关键词:胎儿;胎膜早破;核转录因子B;环氧合酶一2;基质金属蛋白酶一9;免疫组化中图分类号:R714.433文献标志码:A文章编号:1671～4652(2010)01—0016—04 ChangesofnuclearfactorkappaB,cyclooxygenase2andmatrixmetalloproteinase一9inprematureruptureofmembraneKONGXiang,LUDan,W ANGPing,ZHOUTian-tian(1.CollofClinMed,Y angzhouUniv,Y angzhou225001,China;2.TheFirstHospital,Lianyu ngang222002,China)ABSTRACT:Apieceofmembranewasimmediatelycollectedafterlabor,HEstain.Afterdia gnosingchorioamnionitis,allcasesweredividedintotwogroups:chorioamnionitisgroupandnon—chorioamnionitisgroup.Weusedimmunohisto—chemicalmethodtOassesstheexpressionofnuclearfactorkappa(NFKB),cyelooxygenase-2(CoX一2)andmatrixmetal—loproteinase-9(MMP一9)inthespecimensof32PROMpatientsand20norma1puerperas.Theresultswereasfollows :afterHEstain,theinfectionrateinthePR0Mgroupwas46.88%(15/32),whileinthenormalgr oup,itwas10.00(2/20);PositiveNF—KB,COX_2andMMP一9immunoreactivityinfeta1membranesinthePR0Mgroupwassignificantly higherthanthatjnthenorma1group(P&lt;0.05);TheexpressionofNF-B,COX一2andMMP-9inthechorioamnionitis groupwashigherthanthatinthenonchorioamnionitisgroup(P&lt;O.05);Therewassignific antlypositivecorrelationamongNF—KB,COX一2andMMP一9(P&lt;O.O1).hwasconcludedthatthehighexpressionofNF-KB,COX一2andMMP一9 mayplayanimportantroleinthepathogenesisofprematureruptureofmembrane.Theexpres sionofCoX一2andMMP一9wasregulatedbyNF—KB.TheactivationofNF—KBmaybeakeypointintheetiologicalfactorofPR0M.KEYWORDS:fetus;prematureruptureofrrtembrane;nuclearfactorkappaB;cyclooxygenase-2;matrixmetalloprotein～ase一9;immunohistochemistry胎膜早破(PROM)是指胎膜在临产以前发生破裂,是产科的一种常见并发症Ⅲ,易导致感染,早产,脐带脱垂,羊水栓塞,胎儿窘迫,新生儿肺炎,新生儿败血症等并发症,大大增加了围生期母婴的发病率和病死率.探究PROM的病因及发病机制已成为当代产科的重要研究课题.核转录因子一B(NF一B)是近年来发现的一种多效性核转录因子,通常情况下以二聚体形式存在收稿日期:2009一O927基金项目:江苏省社会发展项目(BS2006536);扬州市社会发展项目(YZS2007003) 作者简介:孔祥(1962一),男,江苏泰州人,扬州大学副教授,硕士,主要从事围产医学研究.E-mail:*************第1期孔祥等:胎膜早破孕妇胎膜组织中NF-xB,COX一2和MMP一9的表达及意义17细胞质中.当受到细胞因子,病毒及紫外线等因素刺激后,NF—xB活化进人细胞核,促进多种相关基因的表达,参与启动并调节机体免疫和炎症反应,凋亡及细胞的增殖分化.国外研究报道,人类妊娠及产程进展与妊娠组织中NF—xB活性密切相关l2.].PROM与早产关系密切,研究表明与妊娠维持,分娩发动相关的主要是COX一24].MMP9能够降解基底膜的主要成分IV型胶原,导致胎膜结构薄弱,易于破裂.有研究表明NF—B参与了COX一2,MMP一9表达的调控_6],但在胎膜早破组织中的表达研究尚未见报道.本文研究胎膜早破胎膜组织中NF—B,COX一2和MMP一9的表达,以探讨其临床意义.1材料与方法1.1研究对象选择2006年l1月至2007年5月在扬州大学附属苏北人民医院妇产科住院的初产胎膜早破孕妇32例作为受试对象,分为2组,I组2O例,为足月PROM(tPROM),平均年龄(28.20±3.38)岁,平均孕期为(39.14±0.83)周;II组12例,为未足月PROM(pPROM),平均年龄(28.33±2.57)岁,平均孕期为(33.99±3.69)周.选取同期住院正常足月妊娠初产妇女20例为对照组,平均年龄(27.30±1.56)岁,平均孕期为(39.99±1.06)周.受试组与对照组孕妇均自然分娩,年龄和孕期间进行比较,无显着差异.所有病例均无临床感染征象,无母体疾病及其他产科并发症,单胎头位.2组孕妇均在产后取胎膜破口处2cm×2cm大小胎膜组织,用消毒棉签去掉蜕膜组织,再用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗3次,去掉黏着的血液.10中性福尔马林固定,常规石蜡包埋,用于病理学和免疫组织化学检测.1.2诊断标准1)胎膜早破判定标准:参考第6版《妇产科学》,经下述检查确诊为胎膜早破.①阴道宫颈消毒后,在窥器直视下手触宫底见有羊水流出;②pH试验呈碱性;③阴道后穹窿液涂片检查见胎脂,胎毛或胎儿上皮细胞.2)胎盘绒毛膜羊膜炎的病理诊断标准:胎膜标本病理切片常规HE染色,显微镜下观察,在绒毛膜及羊膜组织中,每个高倍视野中性粒细胞浸润≥3～4个称为绒毛膜羊膜炎组(感染组),无绒毛膜羊膜炎组(无感染组)即每个高倍视野中性粒细胞浸润小于3个或无浸润.1.3方法1)主要试剂:NF—B/p65亚单位鼠抗多克隆抗体(工作浓度1:100),COX一2羊抗多克隆抗(12作浓度1:150),MMP一9兔抗多克隆抗体(工作浓度1:100)试剂盒,DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术公司.2)常规HE染色法检测绒毛膜羊膜炎.3)免疫组化SP法检测胎膜组织中NF—B,COX一2和MMP一9的表达:具体操作严格按试剂盒说明书进行,切片常规二甲苯脱蜡,梯度乙醇脱水;微波修复抗原,一抗置4IC冰箱中过夜,滴加生物素标记的二抗,37℃温箱孵育30rain,DAB显色,苏木素复染.用已知乳腺癌NF—xB/p65阳性片作对照.采用PBS代替一抗作阴性对照.结果判断:NF一~B/p65细胞核内出现明显棕黄色颗粒为阳性细胞,COX一2,MMP一9阳性信号定位于胞质.在高倍镜下(×4OO)对每个标本随机选10个视野进行阳性细胞计数,根据染色强度及范围分别用"+,++,卅"表示阳性细胞数分别为小于259/6,25～50及大于50.细胞数范围小于5定义为"一".1.4统计学方法所有数据用SPSS10.0及EXCEI2003软件统计分析.采用t检验,行×列表.检验及直线相关分析.2结果与分析2.1HE染色行绒毛膜羊膜炎检查所有胎膜早破胎膜标本,感染者占46.88,其中pPROM患者中胎膜感染占66.67,tPROM患者中胎膜感染占35.O0,对照组胎膜感染占1O.()(].l8扬州大学(农业与生命科学版)第31卷2.2胎膜组织中NF一~B/p65,COX一2和MMP一9的表达情况pPROM组胎膜组织中NF一~B/p65,COX一2,MMP一9表达明显高于对照组孕妇(P值分别为0.028,0.023,0.012,均小于0.05);tPROM组胎膜组织中NF一~B/p65,COX一2,MMP一9表达明显高于对照组孕妇(P值分别为0.022,0.041,0.043,均小于0.05);pPROM组与tPROM组问比较差异不显着(表1).表1胎膜组织中NF-~B/p6S,COX-2及MMP-9的表达Tab.1TheexpressionofNF-~B/tm5,COX-2andMMP-9infetalmembranesfrom2.3感染与未感染胎膜组织中NF.KB/p65,COX一2及MMP一9的表达由表2可知,绒毛膜羊膜炎组即感染组胎膜NF一~B/p65,COX一2,MMP一9表达明显高于非绒毛膜羊膜炎组即无感染组(P值分别为0.016,0.040,0.025,均小于0.05)(见表2).表2感染与未感染胎膜组织中NF-~B/p65,COX-2及MMP一9的表达Tab.2TheexpressionofNF-~B/p65,COX-2andMMP-9infetalmembranesfrom chorioamnionitisgroupandnonchorioamnionitisgroup2.4NF-KB/p65,COX一2,MMP一9在胎膜早破pPROM组,tPROM组患者胎膜组织中表达的相关性比较胎膜早破pPROM组,tPROM组患者胎膜组织中COX一2,MMP一9阳性表达与NF一~B/p65阳性表达的关系,采用线性相关分析,NF—IcB与COX一2,NF—IcB与MMP一9,COX一2与MMP一9,结果呈明显正相关关系(r分别为0.738,0.532,0.383,P%0.O1).3讨论胎膜是胎儿的附属物之一,由绒毛膜和羊膜组成.胎膜的外层为绒毛膜,来源于细胞滋养细胞的内层,厚0.O2～0.2mm,主要部分由粗细不等的纤维组成复杂的网状结构,对绒毛膜的强度起决定作用.胎膜的内层为羊膜,亦由细胞滋养细胞层衍化而来,与羊膜腔内羊水和胎儿接触,厚度为0.02～0.05mm.位于基膜以下的致密层由不溶性的胶原纤维和分泌胶原纤维的纤维母细胞构成,特别是以Ⅳ胶原为主,因此胶原纤维的正常结构与功能对保持羊膜的抗张性起着至关重要的作用.完整的胎膜能够使羊膜腔内保持一定的羊水量以保护胎儿及母体的安全,并且能够阻挡阴道病原微生物的上行性侵入.胎膜早破是指胎膜在临产以前发生破裂,是产科常见的并发症.PROM好发因素很多,但病因机制至今尚不清楚.一般认为与以下因素有关,如创伤,宫颈内口松弛,妊娠后期性交引起机械性刺激或引起胎膜炎,羊膜腔内压力升高,胎儿先露部与骨盆入口未能很好地衔接,下生殖道感染及胎膜结构异常或发育不良等.也有人认为孕妇缺少微量元素锌,铜也可引起PROM.很多流行病学,临床,组织学,微生物学和分子生物学资料提示感染或炎症起到了主要的作用.感染是PROM 的重要发病因素之一_1.据报道,与PROM发生关系密切的病原体有溶血性链球菌,淋球菌,沙眼衣原体解脲支原体,生殖支原体,弓形虫,淋球菌和某些厌氧菌.病原体经宫颈口感染胎膜,也可经血行播散至子宫,胎盘,发生羊膜炎,绒毛膜羊膜炎,使胎膜组织水肿,变脆,强度下降;位于宫颈及阴道穹隆部的微生物能够产生膜蛋白水解酶,水解胎膜的细胞外基质,使其强度下降,胎膜易发生破裂.NF_B是近年来发现的一种多效性核转录因子,通常情况下以二聚体形式及其抑制蛋白(I.cB)组成复合物被阻隔在细胞质中.当受细胞因子,病毒,免疫刺激剂,脂多糖及紫外线等多种刺激后,I.cB磷酸化而被降解,NF_JcB活化进入核内,促进细胞因子,趋化因子,粘附分子,生长因子,环氧化酶一2(COX-2),基质第1期孔祥等:胎膜早破孕妇胎膜组织中NF-~B,COX2和MMP一9的表达及意义19金属蛋白酶(MMPs),凋亡相关因子等表达,参与启动并调节机体免疫和炎症反应,凋亡及细胞的增殖分化.作者研究发现,PROM组胎膜组织中NF_KB表达明显高于对照组孕妇,患有绒毛膜羊膜炎组胎膜NF-~B表达明显高于非绒毛膜羊膜炎组.正常胎膜组织中NF_B主要在胞质中表达,PROM胎膜组织中NF-KB的表达增强,主要定位于细胞核表达,细胞核染色呈深棕色.说明PROM胎膜中NF_JcB活化明显,NF_B参与了PROM发病u.环氧合酶(COX)即前列腺素合成酶,是花生四烯酸从膜膦酸酯转化为炎性因子前列腺素类物质的关键限速酶.现认为至少存在以下2种亚型:COX-1和CoX 一2.COXr1是一种结构型酶,在多种组织中微量恒定表达,对外界刺激不敏感,在维持正常生理过程中起重要作用.COX-2为诱导型异构酶,正常生理状态下多数组织不表达,当细胞受各种刺激因素包括生长因子,细胞因子,炎性递质和激素等作用时,其表达迅速上调.研究表明,与妊娠维持,分娩发动相关的主要是COX_2l_4].本研究发现PROM组胎膜组织中CoX_2表达明显高于对照组,绒毛膜羊膜炎组胎膜组织中COX_2表达明显高于非绒毛膜羊膜炎组.这可能是随着妊娠的进展,羊膜中的COX_2表达增加,产生的前列腺素通过自分泌和旁分泌诱导子宫收缩,宫颈成熟,胎膜破裂,可能为分娩发动的原因之一.在对胎膜早破发病机制的研究中,学者们发现胎膜细胞外基质(ECM)的降解失衡是导致胎膜结构薄弱,易于破裂的重要原因,而基质金属蛋白酶(MMPs)在ECM的降解中起着最为重要的作用.基质金属蛋白酶是能有效降解细胞外基质成分的酶类,根据其降解的底物不同,分为4类(间质胶原酶,明胶酶类,基质溶解素和膜型基质金属蛋白酶),其中MMP一9属于明胶酶类.明胶和Ⅳ型胶原的降解在胎膜结构的弱化上起着重要的作用,而MMP-9可特异性地作用于明胶和Ⅳ型胶原,从而诱发胎膜破裂.Romeror等¨1胡发现,自发性胎膜破裂伴分娩孕妇胎膜组织中MMPs的活性明显升高,MMP-9水平的升高更为显着,与本研究结果相符.已经发现在C0X_2基因的5端flanking区域存在两处NF_KB的结合位点,MMP-9基因5端一600位置有一处NF_B的结合位点.本研究表明,NF-B,COX_2,MMP-9在胎膜组织中表达,三者之间具有明显的正相关性.初步认为在胎膜早破发病中,NIcB可能通过直接的转录调控或其他间接的作用对cOX_2,MMP-9的表达起重要的调控作用.参考文献:[1]乐杰.妇产科学[M].6版.北京:人民卫生出版社,2004:145—146.E2]ChapmanNR,Europe—FinnerGN,RobsonSC.Expressionanddeoxyribonucleicacidbindingactivityofthenucle arfactorkappaBfamilyinthehumanmyometriumduringpregnancyandlabor[J].ClinEndoc rinolMetab,2004,89:5683—5693.[3]LappasM,RiceGE.TheroleandregulationofthenuclearfactorkappaBsignallingpathwa yinhumanlabour[J].Placenta,2007,28:543—556.E4]XuY,KnippGT,CookTJ.Expressionofcyclooxygenaseisoformsindevelopingratplace nta,humantermpla—centa,andBeWohumantrophoblastmodel[J].MolPharm,2005,2(6):481—490.[52OlsonDM,AmmannC.Roleoftheprostaglandinsinlabourandprostaglandinreceptorin hibitorsinthepreventionofpretermlabour[J].FrontBiosci,2007,12:1329—1343.[6]NiesporekS,WeichertW,SinnB,eta1.NF—kappaBsubunitp65/RelAexpressioninovariancarcinoma:prognos—ticimpactandlinktoCOX一2overexpression[J].VerhDtschGesPathol,2007,9l:243—249.[7]weiXiao—chao,ZhangXin—ping,LisaMF,eta1.TitaniumparticlesstimulateCOX一2expressioninsynovialfibro—blaststhroughanoxidativestress—induced,calpain-dependent,NF-,cPpathway[J].AmJPhysiolCellPhysiol,2009,297:310—320.[8]KimHS,KimHJ,ParkKG,eta1.Alpha—lipoicacidinhibitsmatrixmetaliopr0teinase9expressionbyinhibitingNF-kappaBtranscriptionalactivity[J].ExpMolMed,2007,39(1):106—113.r9]AgliMD,GalliGV,BosisioE,eta1.InhibitionofNF-KBandmetalloproteinase一9expressionandsecretionbyparthenolidederivatives[J].BioorgMedChemLett,2009,19(7):1858—1860.[1O]陈忠年,杜心谷,刘伯宁.妇产科病理学[M].上海:上海医科大学出版社,1996:307—346.r11]MenonR,Fortunato,SJ.Infectionandtheroleofinflammationinpretermprematurerupt ureofthemembranes_J].ResearchClinicalObstetricsandGynaecology,2007(21):491—504.r12]MarthaL,ClydeR,GregE.eta1.IncreasedExpressionofac—FoxO1proteininprelaborfetalmembranesoverly—ingthecervix:possibleroleinhumanfetalmembranerupture[J].ReproductiveSciences,2009,l6:635—641.[13]Romeror,ChaiworapongsaT,EspinozaJ,eta1.FetalplasmaMMP一9concentrationsareelevatedinpretermrup—tureofthemembranesrJ_.AmJObsterGyneol,2002,187:1125一l13O.(责任编辑刘明寿)。

基质金属蛋白酶9（MMP—9）的研究及临床应用进展作者：吕锦来源：《医学信息》2016年第21期摘要：基质金属蛋白酶9（MMP-9）属于基质金属蛋白酶超家族成员中明胶酶的一种，又称明胶酶B，因其作用底物广泛，表达细胞众多参与多种疾病及恶性肿瘤的侵袭和转移而备受重视，成为最近国际国内研究的焦点之一。

因此，深入了解MMP-9及其与疾病的关系有助于疾病的及时发现、诊断和治疗。

本文就其生物学特点、检测技术及临床应用进行了综述。

关键词：基质金属蛋白酶9；检测技术；临床应用基质金属蛋白酶（MMPs）是一类活性依赖于锌离子和钙离子的蛋白水解酶，其主要的生理作用是降解细胞外基质。

现已发现26种MMPs（MMP-1～26），称为MMP家族，MMPs 几乎能降解细胞外基质的所有成分，如胶原、明胶、黏性蛋白、纤维黏连蛋白、蛋白多糖等，参与人体许多生理和病理过程[1]。

在MMPs中MMP-9，属于基质金属蛋白酶超家族成员中明胶酶的一种，是人体内最重要的蛋白酶之一。

1 MMP-9的生物学特点[2-3]1.1概述 MMP-9是MMPs家族成员之一，是Reponen和Sahlbergl994年在小鼠胚胎发育中的破骨细胞内发现的。

分子量Mr92×103，根据作用底物又名明胶酶B，依据发现的先后顺序MMP-9又名基质金属蛋白酶9，主要作用是保持酶的稳定性。

MMP-9前体可由单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞、泡沫细胞、成纤维细胞、小胶质细胞及肿瘤细胞等分泌，在87位氨基酸残基或附近被酶解激活，参与炎性反应、组织构形、创伤修复、基质结合的生长因子的动员及细胞因子的表达。

1.2 MMP-9的基因结构和功能人MMP-9基因全长26000bp，位于20q11.2～q13.1，含有13个外显子和12个内含子，编码相对分子质量为92×103的蛋白。

MMP-9的启动子区位点，人的MMP-9启动子区还有核因子κB、表达序列标签结合位点和转化生长因子β控制元件。

免疫器官是指实现免疫功能的器官或组织。

根据发生的时间顺序和功能差异，可分为中枢神经免疫器官和外周免疫器官两部分。

1.1 中枢免疫器官调节作用。

1.1.1 （一）胸腺膜，将胸腺分成许多小叶；小叶的外周部分称为皮质，中血液－胸腺屏障是体内为数不多的几个生理屏障之一，其意义目前尚不清楚。

胸腺髓质的毛细血管内皮细胞之间有间隙，抗原性物质可进入髓质，在髓质内还可见多层扁平上皮细胞呈同心圆状排列成的Hassall小体，或称胸腺小体。

直径约25～50μm，其功能尚不清楚。

2．胸腺的免疫功能长期以来对胸腺的功能不甚了解，直到60年代初Miller和Good分别用切除新生小鼠和家兔胸腺的办法证明了胸腺的免疫功能。

0％。

外层细胞在胸腺微环境中迅速增殖，并推动细胞不断+/CD8+）细胞，约占胸腺细胞总数的75％。

双阳性细胞为过渡态细胞，其中90％以上在皮质内凋亡或被巨噬细胞吞噬；据认为，死亡细胞可能是针对自身抗原进行应答的细胞。

少数胸腺细胞继续发育并迁移至髓质，成为单阳性（CD4+或CD8+）细胞，约占胸腺细胞总数的15％。

只有这些单阳的分化成熟；不同的激素作用于不同的细胞发育阶段，有选择地发挥免疫调节功能。

胸腺激素的作用没有种属特异性，所以目前临床应用的胸腺素都是从动物胸腺中提取出1.1.2（二）腔上囊成熟，主导机体的体液免疫功能。

将孵出的雏鸡去掉腔上髓。

1.1.3（三）骨髓产生血细胞，近来证明骨髓还是腔上囊同功器官。

在骨髓异常时，累及的不单是体液免疫，其他免疫功能也发生障碍。

1.2 外周免疫器官外周免疫器官包括淋巴结、脾和粘膜相关淋巴组织等，是免疫细胞聚集和免疫应答发生的场所。

1.2.1（一）淋巴结入。

被膜向外延伸有许多输入淋巴管；向内伸入实质形成皮质，中央部分为髓质。

淋巴结结构示意图皮质区有淋巴小结，又称淋巴滤泡；受抗原刺激后出现生发中心；此区内富含B细胞和滤泡树突状细胞，所以又称非胸腺依赖区。

皮质深层和滤泡间隙为副皮质区，因富含T 细胞又称胸腺依赖区；此区是淋巴细胞再循环的门户，有大量T细胞和巨噬细胞分布在滤泡周围，是传递免疫信息的场所。