实验四微生物染色

第1篇一、实验目的1. 了解细菌的基本形态结构。

2. 掌握细菌的分离、纯化和鉴定方法。

3. 学习细菌生理生化反应的检测原理和应用。

二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有典型的原核细胞结构。

通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应，可以鉴定细菌的种类。

三、实验材料与仪器1. 材料：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等纯菌株。

2. 仪器：显微镜、接种环、培养皿、酒精灯、无菌水、生理盐水、革兰氏染色液、生理生化试剂等。

四、实验方法1. 细菌形态观察- 将细菌涂布在载玻片上，进行革兰氏染色。

- 使用显微镜观察细菌的形态、大小、染色性等特征。

2. 细菌分离与纯化- 将纯菌株接种于琼脂平板，进行划线分离。

- 观察菌落特征，挑选单菌落进行纯化。

3. 细菌生理生化反应检测- 进行糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、V-P试验等。

- 观察反应结果，判断细菌的生理生化特性。

五、实验结果与分析1. 细菌形态观察- 大肠杆菌：革兰氏阴性，呈杆状，两端钝圆。

- 金黄色葡萄球菌：革兰氏阳性，呈球形，呈葡萄串状排列。

- 肺炎克雷伯菌：革兰氏阴性，呈短杆状，两端钝圆。

2. 细菌分离与纯化- 划线分离后，观察到单菌落形成。

3. 细菌生理生化反应检测- 糖发酵试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖。

- 吲哚试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。

- 甲基红试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。

- V-P试验：金黄色葡萄球菌呈阳性，大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均呈阴性。

六、讨论与分析1. 通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应，可以初步鉴定细菌的种类。

2. 细菌的生理生化反应具有特异性，可用于细菌的鉴定和分类。

3. 在实际应用中，细菌的分离、纯化和鉴定是微生物学研究和临床诊断的重要环节。

七、实验结论1. 通过本次实验，我们掌握了细菌的基本形态结构、分离、纯化和鉴定方法。

2. 我们学会了利用生理生化反应进行细菌的鉴定和分类。

3. 本实验有助于提高我们对微生物学基本理论的认识和应用能力。

实验日期：2017.10.25 实验班级：生物技术指导教师：张建丽姓名：高熹学号：1120152430环境中微生物的分离和纯化1 实验目的1）了解培养基的制备原则和制备程序，熟悉常用培养基的名称2）掌握微生物的分离、接种技术3）了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围，掌握高压蒸汽灭菌的操作方法2 实验原理2.1 显微镜及油镜2.1.1 显微镜普通光学显微镜是由一组光学系统和支持及调节光学系统的机械系统组成。

机械系统包括镜座、镜臂、镜台、物镜转换器、镜筒及调节器等。

镜座是显微镜的基座，使显微镜能平稳地放置在桌子上；镜台又称载物台，是放置标本的地方，镜台上有压片夹用以固定被检标本，标本移动器可使标本前后和左右移动，有的标本移动器带有游标尺，可指明标本所在位置；镜臂用以支持镜筒，也是移动显微镜时手握的部位；镜筒是连接目镜和物镜的金属筒，镜筒上端插入目镜，下端与物镜转换器相接；物镜转换器安装在镜筒的下端，其上装有3~5个不同放大倍数的物镜，可以通过转动物镜转换器随意选用合适的物镜；调节器安装在镜臂基部，是调节物镜与被检标本距离的装置，通过调节粗、细螺旋便可清晰地观察到标本。

光学系统主要包括目镜、物镜、聚光镜和反光镜等，较好的显微镜有内光源。

目镜一般由两块透镜组成，不同的目镜上刻有5×、10×和15×等字符以表示该目镜的放大倍数；物镜是显微镜中很重要的光学部件，由多块透镜组成，根据物镜的放大倍数和使用方法的不同，分为低倍物镜、高倍物镜和油镜等。

被检物体经显微镜的目镜和物镜放大后的总放大倍数是物镜的放大倍数和目镜放大倍数的乘积。

2.1.2 油镜油镜是实验室常用的显微镜之一，清晰度略高于普通光学显微镜，用于观察衣原体，细菌，细胞器等较细微的结构。

使用油镜时，需在玻片上滴加香柏油。

这是因为油镜的放大倍数较高，而透镜很小，光线通过不同密度的介质物体（玻片→空气→透镜）时，部分光线会发生折射而散失，进入镜筒的光线少，视野较暗，物体观察不清。

微生物检验技术一、判断题（将判断结果填入括号中，正确的填“√”，错误的填“×”）：1.微生物可分为细菌、放线菌、霉菌和酵母菌四大类。

（×）2.具有荚膜的肺炎双球菌其毒力强。

（√）3.食用前将食品充分加热可以防止一些食物中毒的发生。

（√）4.细菌在不同生长条件下，形态可能有变化。

（√）5.根据细菌所含DNA的不同，可以将细菌分为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌两大类。

（×）6.所有细菌仅需20~30分钟即可繁殖一代。

（×）7.菌落是指一群在固体培养基表面繁殖形成肉眼可见的集团。

（×）8.大肠杆菌是食品和饮用水卫生检验的指示菌，（×）9.真菌进化程度高于细菌，所以真菌为多细胞的微生物。

（×）10.在微生物中，只有霉菌才能以菌丝体的形式进行生长。

（×）11.酵母菌是一种多细胞的微生物。

（×）12.霉菌主要是通过产生各种有性孢子进行繁殖的。

（×）13.在固体培养基上生长时，霉菌的菌落较大，比较湿润粘稠，不透明，呈现或紧或松的蜘蛛网状、绒毛状或棉絮状。

（×）14.霉菌往往在干燥的环境中大量生长繁殖，有较强的陆生型。

（×）15.微生物营养物质中氮源的功能是：提供氮素和能量来源。

（×）16.微生物吸收营养物质，单纯扩散是利用浓度差，从浓度低的向浓度高的进行扩散。

（×）17.任何微生物培养基中均需含有碳源、氮源、无机盐、生长因子和水分等五种营养物质。

（×）18.微生物在生命活动中需要的能量主要是通过生物氧化而获得。

（√）19.微生物的分解代谢就是将复杂的大分子物质降解成小分子的可溶性物质。

（√）20.微生物的酶具有特殊的催化能力。

可以在发酵工艺上利用任何一种酶来进行生产。

（×）21.细菌生长达到稳定期，菌体生长速度等于零，细菌停止生长。

（×）22.不断加温可以增加细菌的生物化学反应速率和细菌的生长速度。

微生物的染色实验报告微生物的染色实验报告一、引言微生物是一类极小的生物体，包括细菌、真菌和病毒等。

它们在自然界中广泛存在，对人类的生活和健康具有重要影响。

为了更好地研究微生物的形态和结构，染色实验成为一种常用的方法。

本实验旨在通过染色技术观察微生物的形态和结构。

二、实验材料和方法1. 实验材料：（1）细菌标本：如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等；（2）染色试剂：如甲基蓝、碘液等；（3）显微镜和玻片。

2. 实验方法：（1）制备细菌涂片：取一滴细菌液滴在玻片上，用另一块玻片将其均匀涂开。

（2）甲基蓝染色：将制备好的细菌涂片放入甲基蓝溶液中浸泡片刻，然后用水冲洗净。

（3）碘液染色：将经过甲基蓝染色的细菌涂片放入碘液中浸泡片刻，然后用水冲洗净。

（4）观察：将染好色的细菌涂片放在显微镜下观察，并记录所见。

三、实验结果经过甲基蓝染色和碘液染色后，观察到细菌在显微镜下呈现出不同的形态和结构。

1. 大肠杆菌大肠杆菌是一种革兰氏阴性细菌，呈杆状。

在染色后，我们观察到大肠杆菌呈现出深蓝色，细胞形态清晰可见。

通过放大镜，我们可以看到大肠杆菌的细胞体长约为2-3微米，直径约为0.5微米。

细菌细胞内部还可观察到细胞核和胞质等结构。

2. 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性细菌，呈球状。

在染色后，我们观察到金黄色葡萄球菌呈现出浅蓝色，细胞形态圆润。

放大镜下，我们可以看到葡萄球菌的细胞直径约为1微米左右，呈团状生长。

细菌细胞内部可见到细胞壁和胞质等结构。

四、实验讨论通过本实验，我们成功地使用染色技术观察了大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的形态和结构。

染色技术能够使细菌在显微镜下更加清晰可见，有助于研究微生物的特征和生理功能。

细菌的染色实验是一种常用的方法，不仅可以观察细菌的形态和结构，还可以帮助鉴定不同种类的细菌。

在实际应用中，染色技术在医学、食品安全和环境监测等领域具有重要作用。

例如，医生可以通过染色技术快速鉴定细菌感染的类型，从而指导治疗方案的选择。

04 实验四放线菌、酵母和霉菌形态的观察实验目的：1. 了解微生物的形态特征。

2. 熟悉显微镜的使用方法，学习普通染色技术。

3. 学习鉴别放线菌、酵母和霉菌的形态特征。

实验材料：1. 盐酸裂解液、甲醛定型液、碘酒、甲基橙、溴酚蓝等。

2. 放线菌、酵母和霉菌的培养物。

实验步骤：1. 取一小块培养物放在玻片上，滴上一滴生理盐水并用小棒子将其研磨均匀。

2. 放线菌培养物制片：将研磨好的放线菌制成薄片，滴上盐酸裂解液使其变成透明，定型液使其固定，并在空气中晾干。

然后，在火上加热定邦，再用碘酒染色，过后清水洗净，醋酸洗净并晾干或用吹风机吹干。

3. 酵母培养物制片：将研磨好的酵母制成薄片，滴上碘酒染色剂染色，过后清水洗净，醋酸洗净，晾干或用吹风机吹干。

4. 霉菌培养物制片：将研磨好的霉菌制成薄片，滴上甲基橙染色剂染色，过后清水洗净，醋酸洗净，晾干或用吹风机吹干。

5. 用显微镜观察制片。

实验结果：放线菌：放线菌为革兰阳性菌，细胞形状呈弯曲的短小棍形，光学显微镜下看到的细胞较长，一般在1-20微米之间，可以分枝，分枝形成的菌丝从外形上呈现出类似于蜘蛛网的形状。

勃林美细胞内有许多成熟的孢子，呈现为典型的链状。

常常在不规则的小菌落或黏液内生长。

酵母菌：酵母细胞直径一般在2-5微米之间，为单细胞生物，在将染好色的玻片放在光学显微镜下很容易看到直径3微米以上的球形，卵圆形等细胞结构，表面光滑。

细胞质软，柔软而透明。

霉菌：霉菌属真菌，具有多种形态，种类繁多，细胞直径1-5微米，长1-10微米，细胞呈现不规则形状，通常形成的是在菌丝基础上聚合并且扩展而成的菌落。

通过本次实验观察和比较放线菌、酵母和霉菌的形态特征，可以得出以下结论：1. 放线菌为分枝杆菌，细胞型态呈弯曲状，外观类似于蜘蛛网。

2. 酵母为单细胞生物，呈圆球形或卵圆形，表面光滑、整齐。

3. 霉菌属于真菌，细胞形态呈现不规则形状。

微生物实验报告答案【篇一：微生物的革兰氏染色实验报告】=txt> 二、实验目的：1、学习并初步掌握革兰氏染色法；2、认识革兰氏染色的原理；3、稳固显微镜的使用。

三、实验原理：革兰氏染色是 1884 年丹麦病理学家 christain gram 氏创办的，是细菌学中最重要的鉴识染色法。

染色步骤分为四个部分：1、初染：加入碱性染料结晶紫固定细菌图片；2、媒染：加入碘液，碘与结晶紫形成一种不溶于水的复合物；3、脱色：利用有机溶剂乙醇或丙酮进行脱色；g- 和 g+ 细胞壁的比较：1、阳性（ g+ ）菌细胞壁特色：细胞壁厚，只有一层，主要由肽聚糖组成，肽聚糖含量高，构造密切，脂类含量低。

当乙醇脱色时，细胞壁肽聚糖层孔径变小，通透性降低，结晶紫和碘的复合物被保存在细胞壁内，复染后仍显紫色（如芽孢杆菌）。

2、阴性（ g- ）菌细胞壁特色：细胞壁薄，由两层组成，内壁层和外壁层，细胞壁中脂类中脂类物质含量较高，肽聚糖含量较低，网状构造交联程度低，乙醇脱色时溶解了脂类物质，通透性加强，结晶紫与碘的复合物易被乙醇抽提出来，所以，革兰氏阴性菌细胞被脱色，当复染时，脱掉紫色的细胞的细胞壁又着上红色（比如大肠杆菌）。

四、实验器械：1、菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌。

2、溶液和试剂：革兰氏染液、草酸铵结晶紫染液、碘液、 95% 乙醇、番红复染液、水。

3、仪器及其余用品：酒精灯、载玻片、显微镜、接种环、试管架、滤纸、滴管。

五、实验步骤：1、取一个载玻片，将其洗净并沿一个方向擦抹洁净，直至液体不再其上缩短为止；将接种环整平，用灼烧过的接种环在混匀的菌种中取菌，按惯例方法图片，应涂大，不宜过厚。

2、翻开酒精灯，用火焰固定，不宜烤得太狠，不然菌种呈假阳性。

3 、轻旋结晶紫染液滴管，将其旋出，滴加 1 滴草酸铵结晶紫染液覆盖涂菌部位（轻晃使其完整覆盖），染色40s 。

4 、染色达成后倾去染液，水洗至流出水为无色。

5 、将玻片上残留水用滤纸吸去，待其干燥。

芽孢染色法,实验报告(共4篇)第一篇：芽孢染色法的介绍芽孢染色法是一种常见的微生物学实验方法，用来鉴定芽孢菌属的微生物。

芽孢是一种耐热、抗干燥的微生物，具有高度的抵抗力。

芽孢染色法是通过对芽孢进行特定的染色方法，将其区分出来。

整个过程需要一定的技术和经验，但是准确性较高，具有广泛的应用价值。

芽孢染色法通常采用的是后盖玫瑰染色法，这种方法可以使芽孢显现为紫色或红色，而其他细胞则呈现粉红色。

这种异染色效应可以清晰地区分出芽孢与其他微生物。

整个实验流程需要先将样品制备，然后进行固定、染色、脱色和显微观察等过程。

其中，脱色工作至关重要，需要根据样品类型和染色结果进行不同程度的脱色处理。

芽孢染色法在微生物学研究、食品卫生监测、化学工业、制药、农业等领域都有广泛的应用，并被广泛视为一种可靠的检测手段。

芽孢染色法是鉴定芽孢菌的常用方法之一，样品制备是整个实验流程的关键步骤之一。

样品采集需要注意无菌操作，以免在采集、贮存、传递过程中造成样品的污染。

通常采集的样品包括饮用水、土壤、食品、医院等具有可能存在芽孢菌属的环境。

样品制备主要分为前处理和后处理两个环节。

前处理通常包括样品的筛选、洗涤和杀菌处理。

样品筛选的过程中需要去除杂质和不易筛选的部分。

洗涤过程是为了去除样品表面的污垢、腐殖质和防止其他细菌的污染。

杀菌处理时，要选择合适的杀菌方法，同时对杀菌剂的用量和时间进行控制。

后处理通常包括提取和处理芽孢。

提取芽孢的方法通常采用加热和化学处理的方法，让其他微生物死亡，而芽孢则不受影响。

具体的处理方法根据实验需要和样品类型进行定制。

整个样品制备过程需要注意的是，要保持严谨的无菌操作，避免在制备过程中引入其他细菌，影响实验结果。

芽孢染色法是一种特殊的染色方法，需要严格控制每一个步骤。

对于不同的样品类型和设备要求，具体的操作步骤可能会有所不同。

一般而言，芽孢染色法的操作流程包括：准备工作、固定样品、染色、脱色和显微观察。

准备工作：包括准备好所需试剂和设备，做好垃圾清理和无菌操作。