实训十 鸡白痢全血平板凝集试验(ok)

一、实验目的本次实验旨在通过全血平板凝集试验检测鸡群中是否存在鸡白痢病原体，为鸡白痢的防控提供科学依据。

二、实验材料1. 实验试剂：- 鸡白痢全血凝集反应抗原- 鸡白痢阳性血清- 生理盐水- 洁净玻璃板- 蜡笔- 7#或9#注射针头- 75%酒精棉球- 移液器2. 实验设备：- 恒温培养箱- 显微镜- 移液器- 吸管三、实验方法1. 样本采集：采集疑似鸡白痢病鸡的全血样本，分离血清。

2. 制备抗原：将鸡白痢全血凝集反应抗原溶解于生理盐水中，配制成一定浓度的抗原溶液。

3. 凝集试验：- 将洁净玻璃板分成三格，用蜡笔标记。

- 在第一格中滴加待测血清，第二格中滴加鸡白痢阳性血清作为对照，第三格中滴加生理盐水作为空白对照。

- 将抗原溶液滴加到待测血清、阳性血清和生理盐水中，轻轻摇匀。

- 观察并记录凝集现象。

4. 结果判断：- 若待测血清中出现明显的凝集现象，且与阳性血清的凝集现象一致，则判定为鸡白痢阳性。

- 若待测血清中没有出现凝集现象，则判定为鸡白痢阴性。

四、实验结果本次实验共检测鸡群中50份血清样本，其中阳性样本10份，阴性样本40份。

五、实验讨论1. 鸡白痢是一种常见的鸡传染性疾病，对养鸡业造成严重损失。

本实验通过全血平板凝集试验检测鸡群中鸡白痢病原体，为鸡白痢的防控提供了科学依据。

2. 本次实验结果显示，鸡群中鸡白痢阳性率为20%，说明鸡白痢在鸡群中存在一定的流行趋势。

因此，加强对鸡白痢的防控措施至关重要。

3. 针对鸡白痢的防控，应采取以下措施：- 加强饲养管理，保持鸡舍清洁卫生，降低鸡群密度。

- 定期进行鸡白痢检测，及时发现并淘汰阳性鸡。

- 加强疫苗接种，提高鸡群免疫力。

- 加强消毒工作，切断病原传播途径。

六、实验结论本次实验通过全血平板凝集试验成功检测出鸡群中鸡白痢病原体，为鸡白痢的防控提供了科学依据。

在今后的工作中，应继续加强鸡白痢的检测和防控，确保养鸡业的健康发展。

实验一鸡白痢的检疫（一）实验目的熟悉和掌握鸡白痢的血清学检疫方法。

（二）实验原理快速全血平板凝集反应（三）实验准备1.抗原：鸡白痢全血凝集反应抗原，由农业部中国兽药监察所购得，或其他来源的合格产品。

抗原为福尔马林灭活的细菌悬液，每毫升含菌100亿。

2.用具：洁净玻璃板、干净纱布、7#或9#注射针头、75%酒精棉球、酒精灯、移液器、手电筒。

（四）实验步骤1.先将抗原瓶充分摇匀，用移液器吸取抗原20 μL，垂直滴于玻片上；2.用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖，以移液器吸取血液一满环(约0．02m1)混入抗原内；3.随即搅拌均匀，并使散开至直径约2cm为度；4.用手电筒反照玻璃板，仔细观察并判定。

（五）结果分析1.抗原与血清混合后在2min内发生明显颗粒状或块状凝集者为阳性。

2.2分钟以内不出现凝集，或出现均匀一致的极微小颗粒，或在边缘处由于临干前出现絮状者判为阴性反应。

3.在上述情况之外而不易判断为阳性或阴性者，判为可疑反应。

（六）注意事项1.抗原应在2～15℃冷暗处保存，从杀菌之日算起有效期6个月。

2.本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡，幼龄鸡敏感度较差。

3.本试验应在20℃以上室温中进行。

4.手电筒反照可以不分阴晴天或白昼。

5.每次使用金属管可以用酒精棉球擦干、消毒。

6.使用酒精灯要特别注意安全：防鸡翅掀翻酒精灯或防工作服碰到火焰。

（七）思考题1.试比较鸡白痢检疫的全血平板凝集反应与血清平板凝集反应的异同点。

2.我国绝大多数鸡群鸡白痢的阳性率比较高，试分析其原因和拟定防制对策。

实验二巴氏杆菌病的实验室诊断（一）实验目的初步掌握巴氏杆菌病的微生物学诊断步骤和方法。

了解巴氏杆菌病的病理变化。

（二）实验准备染色液：美兰染色液、瑞氏染色液、革兰氏染色液（草酸铵结晶紫、革兰氏碘液、95%酒精、沙黄水溶液）、用具：搪瓷盘、碘酊棉、75%酒精棉、组织镊、手术刀（带柄）、普通剪刀、塑料洗瓶、纱布、酒精灯、载玻片、吸水纸（载玻片大小）、铂耳、显微镜、擦镜纸、染色废液缸、甲苯、镜油、血培养基平板、巴氏杆菌病死鸡（三）实验步骤1、分离培养（划线培养）①无菌解剖病死鸡暴露胸腹腔，露出其心、肝、肺等。

鸡白痢全血平板凝集试验操作中应注意的问
题
鸡白痢全血平板凝集试验是一种广泛应用于兽医诊断实验室的方法，用于检测
鸡源性白痢菌的存在。

然而，在进行此项试验时，有一些关键的注意事项需要遵守，以确保准确可靠的结果。

首先，操作人员应始终遵循良好的实验室操作规范，包括使用个人防护装备
（如实验手套、口罩和实验室大衣），确保实验台面的清洁，并定期消毒试验器具。

其次，确保每个步骤的操作准确无误。

在进行鸡白痢全血平板凝集试验时，需
要准备相应的试剂和培养基。

试剂的制备应按照规定的配方和浓度进行，以保证试验结果的可比性。

培养基的制备也需要遵循一定的标准，以确保培养基的质量和可靠性。

在取样过程中，要确保样品的新鲜性和卫生性，以排除外界因素的干扰。

在取
样时，尽量避免任何污染并且确保取得足够的样品量以进行后续实验。

实验的温度和时间也是需要注意的要点。

应根据试验要求，将试验物质置于恰
当的温度条件下进行，以保证反应的进行和结果的可靠性。

最后，结果的读取和判断需要细心和准确。

进行鸡白痢全血平板凝集试验时，
观察样品在试剂加入后的凝集情况，根据凝集的程度判断阳性或阴性结果。

这一步骤需要准确的观察和判断，避免主观干扰导致结果的错误。

总之，鸡白痢全血平板凝集试验是一项重要的实验室检测方法，但在操作过程
中需要注意细节，确保每一步骤的准确可靠。

只有严格遵守操作规程，并注意到这些问题，才能保证试验结果的准确性和可靠性，为兽医诊断提供有力的支持。

家禽科曇2020.1血情和全血年祕凝集方法检测鸠白痢抗体的差异比載刘洋1,潘海萍2,陈轮锋2,严丽端2,严专强1,王占新1,鲁俊鹏1(1.温氏食晶集团股份有限公司，广东新兴527439；2.广东温氏南方家禽育种有限公司，广东新兴527439)中图分类号：S858.312.4文献标识码:B鸡白痢沙门菌可引起雏鸡大批量死亡，产蛋鸡产蛋率下降，成年鸡多呈隐性感染，可长期带毒和排毒。

鸡白痢沙门氏菌为细胞内寄生菌，利用药物治疗只能临床治愈而不能根除，且药物预防和治疗容易产生耐药性，给家禽养殖业带来严重的经济损失⑴,被中国农业部列为二类动物疫病。

《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020)》中明确要求到2020年全国所有种鸡场沙门氏菌病达到净化标准。

平板凝集试验以其方便、快速、实用等特点成为国内外鸡白痢抗体检测最常用的诊断方法之一，检测对象主要包括全血、血清等。

目前我国大部分养殖场都采用平板凝集的方法开展鸡白痢沙门氏菌的净化工作。

1材料与方法1.1主要试剂和仪器鸡白痢-鸡伤寒多价染色抗原、鸡白痢-鸡伤寒阳性血清和阴性血清均购自中国兽医药品监察所。

1.2试验方法将中海的凝集抗原在室温回温30min,采集100只(大部分为即将淘汰的阳性鸡) 20周龄的竹丝鸡进行平板凝集试验测定鸡白痢抗体，每份样品均按照4种不同方法进行检测，比较各检测方法检测结果的差异，具体操作按照试剂说明书进行，见表1。

结果判定以阴、阳性对照血清成立时，在2min内出现肉眼可见的75%的片状收稿日期：2019-12-20文章编号.1673-1085(2020)1-0052-02明显凝集颗粒判为强阳，50%凝集颗粒判为弱阳，25%小凝集颗粒则判为疑似。

表1样品的不同检测方法方法内容方法1全血：抗原=1:1方法2全血：抗原二2:1方法3全血：抗原=3:1方法4血清：抗原=1:12结果与分析2.1不同检测方法的阳性率全血平板凝集试验中，将全血与中海抗原分别按照1：1、2：1、3：1混合进行反应，血清平板凝集试验则按照血清与抗原1:1反应,试验的操作与结果判断均按说明书进行。

动物防疫模拟练习题及答案一、单选题（共66题，每题1分，共66分）1.鸡白痢全血平板凝集试验不适用于（）A、成年鸡B、产卵母鸡C、一年以上的鸡D、幼龄鸡正确答案：D2.腹痛病的特有症状是( )A、异常站立B、运步异常C、骚动不安D、强迫姿势正确答案：C3.下列病中属于人畜共患病的是( )。

A、猪瘟B、猪肺疫C、猪黄痢D、口蹄疫正确答案：D4.卡那霉素是治疗（）感染的抗生素。

A、革兰氏阴性菌B、病毒C、真菌D、革兰氏阳性菌正确答案：A5.母猪产仔后立即给温热饮水是为了（）。

A、促进消化功能恢复B、防止母猪口渴吃掉仔猪C、预防乳房炎正确答案：B6.传染病的流行过程有（）基本环节。

A、2个B、5个C、3个正确答案：C7.鸡开食时间最适宜为出壳后（）小时。

A、24-36B、12C、48正确答案：A8.牛误食2米尾龙绳入瘤胃后应采取（）A、手术疗法B、助消化药物疗法C、抗菌素疗法D、输液疗法正确答案：A9.泄殖腔是（）的直肠后端膨大部分。

A、禽B、犬C、牛D、猪正确答案：A10.应选择（）治疗肠痉挛。

A、硫酸新斯的明B、去甲肾上腺素C、阿托品正确答案：C11.福尔马林熏蒸消毒后，若想快速解除甲醛的刺激性，可用（）加热蒸发中和甲醛。

A、乙酸B、酒精C、浓氨水D、漂白粉正确答案：C12.我国社会主义道德建设的原则是（）A、集体主义B、合理利己主义C、功利主义D、人道主义正确答案：A13.尿中出现（）是肾炎的典型特征。

A、白细胞B、尿素C、碳酸钙结晶D、管型正确答案：D14.今后杀死昆虫的发展方向应是（）。

A、生物杀虫法B、物理杀虫法C、化学杀虫法D、机械杀虫法正确答案：A15.牛瘤胃的功能是（）。

A、进行微生物消化B、浸润饲料C、磨碎饲料正确答案：A16.死后超过（）小时的尸体易腐败分解，一般失去剖检意义。

A、2B、24C、8D、12正确答案：B17.眼结膜消毒用（）A、2％碘酒液冲洗B、0.1％高锰酸钾液冲洗C、75％酒精液冲洗D、2％硼酸液冲洗正确答案：D18.健康猪的粪便（）。

实验一鸡白痢的检疫（一）实验目的熟悉和掌握鸡白痢的血清学检疫方法。

（二）实验原理快速全血平板凝集反应（三）实验准备1.抗原：鸡白痢全血凝集反应抗原，由农业部中国兽药监察所购得，或其他来源的合格产品。

抗原为福尔马林灭活的细菌悬液，每毫升含菌100亿。

2.用具：洁净玻璃板、干净纱布、7#或9#注射针头、75%酒精棉球、酒精灯、移液器、手电筒。

（四）实验步骤1.先将抗原瓶充分摇匀，用移液器吸取抗原20 μL，垂直滴于玻片上；2.用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖，以移液器吸取血液一满环(约0．02m1)混入抗原内；3.随即搅拌均匀，并使散开至直径约2cm为度；4.用手电筒反照玻璃板，仔细观察并判定。

（五）结果分析1.抗原与血清混合后在2min内发生明显颗粒状或块状凝集者为阳性。

2.2分钟以内不出现凝集，或出现均匀一致的极微小颗粒，或在边缘处由于临干前出现絮状者判为阴性反应。

3.在上述情况之外而不易判断为阳性或阴性者，判为可疑反应。

（六）注意事项1.抗原应在2～15℃冷暗处保存，从杀菌之日算起有效期6个月。

2.本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡，幼龄鸡敏感度较差。

3.本试验应在20℃以上室温中进行。

4.手电筒反照可以不分阴晴天或白昼。

5.每次使用金属管可以用酒精棉球擦干、消毒。

6.使用酒精灯要特别注意安全：防鸡翅掀翻酒精灯或防工作服碰到火焰。

（七）思考题1.试比较鸡白痢检疫的全血平板凝集反应与血清平板凝集反应的异同点。

2.我国绝大多数鸡群鸡白痢的阳性率比较高，试分析其原因和拟定防制对策。

动物防疫练习题库及答案1、鸡痘分为（）、混合型和粘膜型三种病型；A、神经型B、内脏型C、败血型D、皮肤型答案：D2、（）的中间宿主是地螨。

A、肝片吸虫B、莫氏绦虫C、异刺线虫答案：B3、革兰氏染色分类法与细菌的（）结构有关。

A、细胞壁B、细胞质C、细胞膜D、荚膜答案：A4、急性猪丹毒病死猪肾充血肿大，呈暗红色，有( )之称。

A、花生肾B、鬼打印C、大黑肾D、大红肾答案：C5、猪的正常体温（）A、37.5－38.5℃B、37-39℃C、39-40℃D、38-39.5℃答案：D6、（）是由维生素E缺乏引起的。

A、皮肤病B、白肌病C、夜盲症D、贫血7、下列属于禽类专用的抗生素是（）A、卡那霉素B、克林霉素C、北里霉素D、泰乐菌素答案：D8、对传染病进行正确诊断和治疗的关键时期为（）A、转归期B、潜伏期C、前驱期D、明显期答案：D9、组织和器官局部血液量增加叫做（）。

A、水肿B、浮肿C、病变D、充血答案：D10、通常干热灭菌所需要的温度和时间是（）。

A、160—180℃,1—2小时B、100—120℃,2小时C、100—120℃,1小时D、100℃，1小时答案：A11、发生新城疫后应最先接种（）。

A、假定健康鸡群B、病鸡群C、可疑鸡群答案：A12、善祛风痰的中药是（）。

A、半夏B、贝母C、桔梗D、天南星13、成年猪腹泻的主要原因是（）引起的。

A、细菌B、病毒C、营养不良答案：B14、病理组织学材料可放入哪种化学药品中保存？（）A、40%甲醛溶液B、灭菌液状石蜡C、50%甘油生理盐水D、95%酒精溶液答案：D15、家畜患贫血时，对血液进行实验室检查，可发现患畜的血液呈现出（）A、血沉减慢，红细胞压积值增高B、血沉加快，红细胞压积值降低C、血沉加快，红细胞压积值增高D、血沉减慢，红细胞压积值降低答案：B16、大母猪阉割时，肌肉应进行（）缝合。

A、荷包B、结节C、康奈尔D、连续答案：B17、（）属于一类传染病。