最新血清葡萄糖的测定

血清葡萄糖GLU测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理本试剂基于在精密度和准确性方面具有很高可靠性的Trinder’S方法，在防止已知化合物（如尿酸、谷胱甘肽和肌酐等）的干扰进行了进一步的改良。

GOD葡萄糖+ H2O+ O2 H2O2+葡萄糖酸 PODH2O+AAP + HBA 醌亚胺（红色）H2O 式中：AAP 为4-氨基安替比林；HBA 为4-羟基苯甲酸上述反应中，红色醌亚胺色素的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比，通过在波长500nm波长处测定吸光度的变化值，即可测得样本中葡萄糖的浓度。

3 标本：3.1 病人准备：12小时禁食。

3.2 类型：血清，标本最好不要溶血。

迅速分离血清或，减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。

随机收集尿样。

3.3 标本存放：血清应在血液采集1小时内，尽早分离。

加入糖分解抑制剂（NaF，KF）后的稳定性：15～25℃保存可稳定1天,4～8℃保存可稳定7天。

血清中的葡萄糖，无溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在25℃下可稳定8个小时，在4℃下可稳定72小时。

尿样应保存在2～8℃下并尽快进行分析。

脑脊髓液如果避免蒸发可在2～8℃下稳定至少5天，5天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20℃的条件下。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5标本拒收标集：细菌污染、超时送检的的标本。

4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司GLU试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1（R1）：过氧化物酶 375U/L 4-羟基苯甲酸15mmol/L4-氨基安替比林0.75mmol/L磷酸盐缓冲液110mmol/L试剂2（R2）：葡萄糖氧化酶6000U/L 磷酸盐缓冲液110mmol/L4.1.2 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月4.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法是一种常用的检测血清葡萄糖的方法。

它可以检测血清中的水溶性葡萄糖的含量，从而可以反映机体的糖代谢情况。

血清葡萄糖测定方法有多种，其中最常用的是酶联免疫法（ELISA）和磷酸二氢钾滴定法（HK）。

2、酶联免疫法（ELISA）
酶联免疫法（ELISA）是一种常用的血清葡萄糖测定方法。

ELISA技术利用免疫反应原理，把糖尿病患者血清中的葡萄糖水解酶以抗原或抗体的形式结合起来，然后用抗体识别，经过可见性染料和酶的底物分解，用放大效应得到明显的反应信号，通过测量信号来确定葡萄糖的浓度。

ELISA对葡萄糖的检测灵敏度很高，但是分析时间比较长，且需要有特殊的仪器。

3、磷酸二氢钾滴定法（HK）
磷酸二氢钾滴定法（HK）是另一种检测血清葡萄糖浓度的常用方法。

它是一种血清中葡萄糖的滴定法，用40-50℃的磷酸二氢钾溶液作为比色剂，通过比色分析得到血清中的葡萄糖含量。

这种方法分析速度快，结果准确，但是需要较高的技术要求。

4、结论
血清葡萄糖测定方法是一种常用的检测血清葡萄糖的方法，它可以准确反映机体的糖代谢状况。

目前最常用的血清葡萄糖测定方法有酶联免疫法（ELISA）和磷酸二氢钾滴定法（HK），它们具有自己的优缺点，根据实际情况选择合适的方法。

血液中葡萄糖的测定（邻甲苯胺法）一目的掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法。

二原理血清样品中的葡萄糖在酸性环境中与邻甲苯胺共热时，葡萄糖脱水转化为5-羟甲基α-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺结合为蓝绿色的醛亚胺（Schiff碱）。

血清中的蛋白质则溶解在冰醋酸和硼酸中不发生混浊。

将标准葡萄糖溶液与样品按相同方法处理，在630nm波长处比色，即可测得样品中葡萄糖含量。

邻甲苯胺法测得正常空腹血糖值为3.9～6.11mmol / L (即100ml血清中葡萄糖的正常值为70～100mg)。

邻甲苯胺法对葡萄糖特异性高，测定结果为真糖值，为临床上常用的血糖测定方法。

此方法不受血液中其他还原物质的干扰，测定时也无需去除血浆或血清中的蛋白质。

由于血液葡萄糖在进食后明显升高，所以必须采取空腹血做血液葡萄糖测定，血细胞糖酵解作用会降低血液葡萄糖浓度，所以血液抽出后应及时测定，或用含氟化钠的抗凝剂抑制糖酵解，可稳定24小时。

三操作1.采得待测血样（抗凝）后立即离心以分离血浆（3,000转离心15分钟）。

2.取干燥试管4支，分别标出号码，按下表添加试剂。

4.以空白管调零，读取各管630nm处吸光度值。

5.计算血糖mmol/L = 测定管吸光值× 5标准管吸光值四实验器材与试剂分光光度计、沸水浴、试管、移液管、电炉、烧杯、洗耳球、试管夹。

邻甲苯胺试剂：称取硫脲(AR)级1.5g，溶于940ml冰醋酸(AR级)中，加邻甲苯胺60ml。

置棕色瓶中至少可用两个月。

此试剂腐蚀性极强，应避免接触皮肤。

12 mmol/L苯甲酸溶液：900ml蒸馏水中加入1.4g苯甲酸，加热助溶，冷却后定容到1L。

葡萄糖标准储存液（100 mmol / L）：称取无水葡萄糖（烘箱80烘干至恒重，干燥器中保存）1.802g，溶于80ml苯甲酸溶液中，再定容到100ml。

葡萄糖标准应用液（5 mmol / L）：取标准储存液5ml，加苯甲酸溶液至100ml。

实验名称：葡萄糖氧化酶法测定血清（浆)葡萄糖【实验原理】葡萄糖可由葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸并产生过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，能与苯酚及4-氨基安替比林作用产生红色醌化合物。

醌的产量与葡萄糖量成正比。

醌化合物呈红色，其颜色深浅与葡萄糖含量成正比，在500nm出测定其吸光度，对照标准科计算出葡萄糖的含量。

【实验准备】一、材料（1）血清（2）血浆：以草酸钾-氟化钠为抗凝剂的血浆二、试剂（1）试剂R1：磷酸盐缓冲液100mmol，pH7.5，苯酚10mmol/L。

（2）试剂R2：磷酸盐缓冲液100mmol，pH7.5，葡萄糖氧化酶16 000U/L，过氧化物酶1 000U/L，4-氨基安替比林2.0mmol/L。

（3）葡萄糖校准液：5.550mmol/L（1mg/ml）（4）生理盐水。

（5）工作试剂（酶酚混合液）：取R1试剂4.5ml与R2试剂0.5ml混合在10ml试管中。

三、器材（1）试管和试管架（2）移液枪（3）722型分光光度计（4）酶标仪（5）恒温水浴箱（6）酶标板（7）板条（8）生化培养箱【实验步骤】（1）取酶标板一块，板条一条，设定空白孔A1，标准孔A2、A3，测定孔A4、A5，按【实验结果】葡萄糖（GLU）浓度（mmol/L）=（A测定孔平均值/A校准孔平均值）×5.55参考值：3.89~6.11mmol/L测得数据为A2 A3 A4 A50.085 0.05 0.03 0.037(0.037+0.030)/2——×5.55 ﹦2.75mmol/L（0.085+0.050/2【实验讨论】①移液枪操作熟练程度直接影响测定结果，吸样前需多练习②测定标本以草酸钾-氟化钠为抗凝剂的血浆较好。

③由于尿液中尿酸等干扰物质浓度过高，会干扰过氧化物酶反应，出现结果假性偏低，因此葡萄糖氧化酶法不能直接测定尿液葡萄糖含量，但可直接测定脑脊液葡萄糖含量。

④本法测定葡萄糖原理中反应式第一步是特异反应，第二步特异性较差，所以第二步易引起误差。

血液葡萄糖的测定方法血液葡萄糖测定方法是用于检测人体血液中葡萄糖含量的一种方法。

葡萄糖是人体重要的能量供应来源，它在体内的浓度与机体的代谢状态密切相关。

因此，对于糖尿病患者来说，监测血液葡萄糖水平非常重要，有助于他们控制血糖水平，维持身体健康。

血液葡萄糖的测定方法有很多种，根据实际需求和方法的可行性，可以选择不同的方法进行测定。

以下将介绍几种常见的血液葡萄糖测定方法。

首先是基于试纸的葡萄糖测定方法。

这种方法常用于家庭血糖监测，便携式血糖仪就是基于试纸原理的。

使用这种方法，只需将试纸置于一滴血液上，试纸上的葡萄糖酶会与葡萄糖发生反应，产生氧化还原反应，导致试纸变色，通过比色板或仪器来判断血糖水平。

这种方法操作简便，但准确度相对较低，适用于一般家庭血糖监测。

其次是荧光法葡萄糖测定方法。

这种方法是基于葡萄糖氧化酶的反应原理，葡萄糖氧化酶与葡萄糖反应生成辅酶还原型，再与辅酶反应产生荧光染料，测量荧光强度来计算血糖浓度。

这种方法灵敏度高，准确度较高，但需要专业的仪器和技术支持，适用于实验室中血糖测定。

此外，还有电化学法葡萄糖测定方法。

这种方法是将血液样品置于电极上，通过电化学反应来测量葡萄糖浓度。

常用的电极有电化学氧化酶电极和谐振速度电极。

电化学法测定血糖准确度高，但仪器复杂，需要专业的操作技术和维护。

最后是光学法葡萄糖测定方法。

这种方法是利用光学仪器，通过检测葡萄糖溶液对特定波长光的吸收或散射来测定葡萄糖浓度。

光学法测定速度快，操作简便，适用于实时监测。

总之，血液葡萄糖测定方法多种多样，每种方法都有其适用的场景和特点。

在选择合适的测定方法时，需要根据实际需求，考虑准确性、操作便捷性以及成本等因素。

对于糖尿病患者来说，定期监测血液葡萄糖水平非常重要，可以根据医生的建议选择合适的测定方法，并保持良好的血糖控制，以维持健康的生活。

葡萄糖含量的测定方法
葡萄糖含量的测定方法有以下几种常用的方法：
1. 试纸法：使用葡萄糖试纸，将样品滴在试纸上，根据试纸变色的程度来判断葡萄糖含量的高低。

2. 酶法：使用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，然后使用染色剂和催化剂形成有色产物，并通过光度计检测产物的吸光度来确定葡萄糖含量。

3. 高效液相色谱法：利用高效液相色谱技术分离和测定样品中的葡萄糖。

通常需要配备专用的色谱柱、检测器和流动相等设备。

4. 球团光度法：基于葡萄糖在碱性条件下与邻苯二甲酸酐反应生成有色产物的原理，通过测定产物的吸光度来确定葡萄糖含量。

5. 环境传感器法：利用特定的生物传感器或化学传感器，将葡萄糖与传感器反应产生信号，并通过测量信号的强度来测定葡萄糖含量。

这些方法各有优缺点，适用于不同的实验需求和场景。

在实际应用中，可以根据实验目的、设备和条件选择合适的方法进行测定。

葡萄糖测定标准操作规程1.检验原理：（葡萄糖氧化酶法）葡萄糖氧化酶（GOD ）利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢。

过氧化物酶（POD ）在色原性氧受体4-氨基安替比啉（4-AA ）和对羟基苯甲酸钠去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder 反应。

红色醌类化合物的生成量成正比。

D-葡萄糖+2O +O H 2−−→−GOD 葡萄糖酸+22O H222O H +4-AA+对羟基苯甲酸钠−−→−POD 红色醌类物质+4O H 2 2.试剂组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清或用草酸钾-氟化钠抗凝的血浆。

在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释：6.1在给定的样本/试剂比例和条件测定时，本试剂线性范围可达25mmol/L。

样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本，最大稀释倍数为10.6.2.单位换算：mg/dl=mmol/L×187.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊或以水空白在500nm处吸光度大于0.200时不能使用。

8.试剂性能指标8.1试剂外观：R1：无色或淡红色透明液体，无悬浮物及沉淀；R2无色透明液体，无悬浮物及沉淀。

8.2装量：不低于标识值。

8.3空白吸光度：在500nm处，光径1cm时，空白吸光度A≤0.2008.4线性范围：试剂的线性区间为[2.2-25]mmol/L，在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b)[2.2-4.7]mmol/L区间内，线性绝对偏差不超过±10U/L；（4.7-25）mmol/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。

8.5准确度：使用参考物质测定时，当浓度≤4.16mmol/L，实测值与标识值偏差应不超过±0.833mmol/L，当浓度＞4.16mmol/L，实测值与标识值偏差应在±20%范围内。

血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法的步骤如下：
1. 采集血液样本，一般常用的是静脉血。

2. 将血样离心，使血浆和血细胞分离开。

3. 取血浆样本进行血清葡萄糖测定。

常用的血清葡萄糖测定方法有：酶促反应法、葡萄糖氧化酶法、光度法等。

4. 酶促反应法：将血清样本与一定浓度的葡萄糖酰胺酶和葡萄糖脱氢酶一起反应，生成NADH。

通过测量NADH的吸光度来计算血清中的葡萄糖含量。

5. 葡萄糖氧化酶法：将血清样本与一定浓度的葡萄糖氧化酶反应，生成过氧化氢和D-酮糖。

再用过氧化物酶反应掉过氧化氢，最后通过吸光度计算血清中的葡萄糖含量。

6. 光度法：将血清样本与一定浓度的酚啉试剂和磷酸缓冲液混合后，通过加热反应，测量其吸光度，然后计算血清中的葡萄糖含量。

7. 根据所用方法的不同，测定结果会有一些差异，请根据实验室所用的方法进行测定。

葡萄糖检测标准
葡萄糖检测标准根据不同情况而有所差异，具体如下：
1. 空腹血浆葡萄糖水平应该低于毫摩尔每升。

2. 75克葡萄糖耐量试验当中两小时的血糖应该是小于毫摩尔每升。

3. 随机的静脉血浆葡萄糖水平不应该超过毫摩尔每升。

4. 对于糖尿病的诊断标准，空腹血糖大于等于毫摩尔每升，糖耐量试验当中两小时血糖大于等于毫摩尔每升，随机静脉血浆葡萄糖水平大于等于毫摩尔每升。

5. 空腹血糖介于和之间的为空腹糖调节受损，餐后2小时血糖介于和毫摩尔每升之间的为糖耐量异常。

以上数据仅供参考，具体的葡萄糖检测标准建议咨询专业医生。

葡萄糖的含量测定方法
葡萄糖的含量测定方法有很多种，以下列举几种常用的方法：
1. 麦芽糖法：将待测样品经过酶解、酸化、有机溶剂萃取等处理后，使用酶促反应使麦芽糖水解为葡萄糖，再经过比色或滴定的方法测定葡萄糖的含量。

2. 高效液相色谱法（HPLC）：将待测样品经过预处理后，采用高效液相色谱技术进行分离和定量分析，根据葡萄糖在色谱柱中的保留时间和峰面积来测定葡萄糖的含量。

3. 空间滴定法：将待测样品与一定浓度的溴酸溶液反应生成溴分子，并滴加碘化钾溶液进行滴定，直至出现持久的黄棕色终点，根据滴定液的用量计算葡萄糖的含量。

4. 加热滴定法：将待测样品与酚酸缓冲液和硝酸铜溶液混合，加热至70-80C，然后滴加碘化钠溶液进行滴定，根据滴定液的用量计算葡萄糖的含量。

这些方法的选择取决于实验条件、样品性质以及需要的精确度和灵敏度等因素。

在实际应用中，可以根据需要选择适合的方法进行葡萄糖含量测定。

⾎清葡萄糖测定标准操作规程葡萄糖测定标准操作规程1 检验申请单独检验项⽬申请：空腹⾎清葡萄糖测定(缩写GLU)，餐后2h葡萄糖测定，各种体液葡萄糖测定；组合项⽬申请：葡萄糖耐量试验(缩写OGTT)。

临床医⽣根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采⾎约2 ml，不抗凝，置普通试管中。

或采⽤含分离胶的真空采⾎管。

2.1.2检验申请单和⾎标本试管标上统⼀且唯⼀的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单⼀起及时运送⾄检验科。

专⼈负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不⾜：少于0.3ml的全⾎标本，或少于0.1ml的⾎清或⾎浆。

2.1.5.2对反应吸光度有⼲扰的标本，包括严重溶⾎、严重浑浊的标本。

2.1.5.3⽆法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4抽⾎后室温放置超过4h以上的标本。

2.1.5.5静脉滴注⼤剂量维⽣素C后⽴即抽⾎的标本。

2.1.5.6其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离⼼分离出⾎清，并及时将⾎清与⾎球分离。

2.2.2标本保存时间：不抗凝⾎标本如⾎清未与⾎块分开，共存同⼀试管中，室温（15～25℃）下⾎清葡萄糖很不稳定，普通冰箱中（2～8℃）稳定1天。

加氟化钠的⾎液标本室温（15～25℃）下稳定4h。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，单独分离出⾎清后，密闭置4～8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采⾎前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

检查空腹⾎清葡萄糖的须在禁⾷12h以上早晨抽⾎。

2.3.2餐后2h葡萄糖检查，受检者于餐后2h准时抽⾎。

2.3.3葡萄糖耐量试验检查的⾎液标本，在服⽤75克葡萄糖后，分别于0.5h、1h、2h及3h准时抽⾎。

2.3.4为了避免葡萄糖被酵解，单独测定葡萄糖时，⾎标本可氟化钠-草酸钾抗凝，氟化钠⽤量为1.5mg/ml⾎。