GOD法测定血清中葡萄糖浓度

临床上测定血糖浓度的原理
临床上测定血糖浓度的原理主要有以下几种方法：
1. 葡萄糖氧化-还原法：使用葡萄糖氧化酶（GOD）将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，同时还原辅酶（如辅酶NAD+），导致辅酶的吸收光谱发生变化。

通过测量吸光度变化来确定血液中的葡萄糖浓度。

2. 葡萄糖酸脱氢酶法：使用葡萄糖酸脱氢酶（GDH）将葡萄糖酸还原为葡萄糖，同时将辅酶还原为辅酶NADH。

然后通过测量辅酶NADH的吸收光谱来确定血液中的葡萄糖浓度。

3. 电化学法：将血液型的电极浸入葡萄糖溶液中，根据葡萄糖产生的氧化还原反应，测量电解质浓度来计算葡萄糖浓度。

4. 免疫测定法：利用特定抗体与葡萄糖结合，形成抗原抗体复合物。

然后通过测量复合物的光学、电化学或放射性信号来确定血液中的葡萄糖浓度。

这些方法各有优劣，临床根据需要选择合适的方法来测定血糖浓度。

葡萄糖测定方法范文1.血糖仪检测法血糖仪是一种小型的便携式电子设备，可以准确测量血液中的葡萄糖浓度。

该方法常用于个人家庭监测，也可以由医生在诊所或医院进行测量。

血糖仪通常与测试试纸一起使用，试纸上含有特定的化学物质，可以与血液中的葡萄糖反应产生颜色变化，然后通过电子设备进行读数，从而确定血糖浓度。

2.葡萄糖氧化酶法（GOD-PAP法）葡萄糖氧化酶法是一种常用且经济实惠的葡萄糖测定方法。

它利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并与PAP酶（对氨基酚磺酸酯酶）和4-氨基酚（对氨基酚）发生反应，产生一种可见光吸收的紫色产物。

紫色的强度与血液中的葡萄糖浓度成正比，可以通过比色法或分光光度计进行测量。

3.葡萄糖脱氢酶法（GDH法）葡萄糖脱氢酶法是一种常用的葡萄糖测定方法，也被广泛用于血糖仪中。

该方法利用葡萄糖脱氢酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酮，并与辅酶NAD(P)+反应，产生NAD(P)H。

NAD(P)H的浓度与血糖浓度成正比，可以通过比色法或分光光度计进行测量。

4.高效液相色谱法（HPLC法）高效液相色谱法是一种精确而灵敏的葡萄糖测定方法，常用于临床和科研实验室。

该方法利用高效液相色谱仪分离血液中的葡萄糖，并通过紫外光检测器测量葡萄糖的浓度。

该方法不受干扰物质的影响，并且具有较高的准确性和重复性。

在实际应用中，葡萄糖测定方法的选择取决于不同的因素，包括可用的设备和试剂、测量的准确性和精确性要求、操作的便捷性以及花费等。

此外，不同的葡萄糖测定方法对于样品的要求也有所不同，一般需要经过预处理，如抗凝剂处理、离心沉淀、过滤等。

总之，葡萄糖测定是一项重要的实验室检查方法，能够帮助医生评估人体内的血糖水平，对疾病的诊断和治疗起到重要作用。

各种葡萄糖测定方法各有优缺点，选择适合的方法需要考虑实际需求和实验条件。

godpod法测血糖实验报告一、实验目的本次实验旨在探究 godpod 法在血糖检测中的准确性、可靠性以及操作的便捷性，为临床血糖监测和糖尿病的诊断与管理提供参考依据。

二、实验原理Godpod 法是一种基于葡萄糖氧化酶（GOD）和过氧化物酶（POD）的酶促反应来测定血糖浓度的方法。

葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下与显色剂发生反应，产生可测量的颜色变化，通过比色法测定吸光度，进而计算出血糖浓度。

三、实验材料与设备1、实验试剂葡萄糖标准液（浓度分别为 28mmol/L、61mmol/L、111mmol/L）葡萄糖氧化酶试剂过氧化物酶试剂显色剂2、实验仪器分光光度计移液器恒温箱离心机试管、刻度吸管等四、实验步骤1、样本采集采集空腹静脉血 3ml，注入含有抗凝剂的试管中，轻轻混匀。

以 3000r/min 离心 10 分钟，分离血浆备用。

2、标准曲线绘制分别取不同浓度的葡萄糖标准液 01ml，加入到试管中，然后加入30ml 葡萄糖氧化酶试剂和 03ml 过氧化物酶试剂，充分混匀。

将试管置于 37℃恒温箱中孵育 15 分钟。

取出试管，在分光光度计上于 505nm 波长处，以空白管调零，测定各标准管的吸光度。

以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

3、样本测定取01ml 待测血浆样本，按照与标准曲线绘制相同的步骤进行操作，测定吸光度。

4、计算结果根据样本的吸光度，在标准曲线上查出对应的葡萄糖浓度。

五、实验结果1、标准曲线绘制的标准曲线呈现良好的线性关系，相关系数 r 为 0998。

2、样本测定结果对 10 份血浆样本进行测定，结果如下（单位：mmol/L）：｜样本编号|测定值|｜｜｜｜1|52|｜2|68|｜3|49|｜4|75|｜5|58|｜6|82|｜7|46|｜8|63|｜9|71|｜10|55|六、结果分析1、准确性将测定结果与已知的血糖参考值进行比较，发现大部分样本的测定值与参考值偏差在允许范围内，表明 godpod 法具有较高的准确性。

葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖【原理】葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ， GOD) 利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。

过氧化物酶 (peroxidase ， POD) 在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体 4- 氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即 Trinder 反应。

红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。

【试剂】1 ． 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液 (pH7.0) 称取无水磷酸氢二钠 8.67g 及无水磷酸二氢钾 5.3g 溶于蒸馏水 800ml 中，用 1mol/L 氢氧化钠 ( 或 1mol/L 盐酸 ) 调 pH 至 7.0 ，用蒸馏水定容至 1L 。

2 ．酶试剂称取过氧化物酶 1 200U ，葡萄糖氧化酶 1 200U ， 4- 氨基安替比林 10mg ，叠氮钠 100mg ，溶于磷酸盐缓冲液 80ml 中，用 1 mol/L NaOH 调pH 至 7.0 ，用磷酸盐缓冲液定容至 100ml ，置 4 ℃保存，可稳定3 个月。

3 ．酚溶液称取重蒸馏酚 100mg 溶于蒸馏水 100ml 中，用棕色瓶贮存。

4 ．酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合， 4 ℃可以存放 1 个月。

5 ． 12mmol/L 苯甲酸溶液溶解苯甲酸 1.4g 于蒸馏水约 800ml 中，加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至 l L 。

6 ． 100mmol/L 葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖 1.802g ，溶于 12mmol/L 苯甲酸溶液约 70ml 中，以 12mmol/L 苯甲酸溶液定容至 100ml 。

2h 以后方可使用。

7 ． 5mmol/L 葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液 5.0ml 放于 100ml 容量瓶中，用 12mmol/L 苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。

【操作步骤】1 ．自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。

酶法(GOD -PAP 法)测血清葡萄糖实验目的熟悉酶法测定血液中葡萄糖糖浓度的原理掌握测定血糖的意义实验原理本方法采用两种酶（GOD ：葡萄糖氧化酶；POD ：过氧化物酶）测量葡萄糖含量，具体反应如下：葡萄糖 ＋ O 2−−→−GOD葡萄糖酸 ＋ H 2O 2H 2O 2 ＋ 4-氨基安替比林＋酚−−→−POD醌亚胺染料(红色) ＋ H 2O醌亚胺染料在500nm 处有吸收峰，其颜色的深浅与葡萄糖的浓度成正比。

实验时采用已知浓度的葡萄糖溶液作标准管，经反应测定A 标，待测样品在同样条件下反应后测定A X ，这样可计算得到样品中葡萄糖浓度。

本法测得人血糖的正常值约为3.9一6.1mmol/L 。

仪器设备各类分光光度计，自动生化分析仪均可 学生实验仪器一套试剂1．酶试剂：葡萄糖氧化酶(G0D)＞1200U过氧化物酶(PAP)＞1200U“U”是酶的活性单位4—氨基安替比林0．8mmol/L2．磷酸缓冲液pH7．23．葡萄糖标准液：100mg／dL(5.55mmol/L)实验操作1．酶工作液配臸：酶试剂与缓冲液根据标本量，临用前按体积比1﹕4混匀，2—8℃可保存一个月。

2．标本处理：抽取全血37℃保温5分钟，3000转离心10分钟，取上清液备用。

3．取小试管3支编号，按下表操作：说明：①理论上1号管应再加入10μL蒸馏水才能与其它各管溶液体积一致，但是10μL体积对总体积影响很小，故不精确加入亦可。

②酶工作液的体积视当时的反应条件而定，此为建议值。

总之使反应后的红色溶液吸光度值适当(A 值在0.2到0.5之间)即可。

③10μL 液体不易精确加入，实验时要仔细检查移液枪的密封性。

此外，移液枪外壁沾有的少许残留液体也要用滤纸小心吸干。

各管加好后，混匀，臵37℃水浴10分钟，0.5cm 光径比色杯在500nm 波长下比色(722型分光光度计)。

计算C X ：血清中葡萄糖浓度； C 标：标准液中葡萄糖浓度 A X ：待测管吸光度； A 标：标准管吸光度A X / A 标= C X / C 标(因每一管中加入的其它试剂体积一致) C X = C 标· A X / A 标代入已知数据即得。

葡萄糖测定标准操作规程1.检验原理：（葡萄糖氧化酶法）葡萄糖氧化酶（GOD ）利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢。

过氧化物酶（POD ）在色原性氧受体4-氨基安替比啉（4-AA ）和对羟基苯甲酸钠去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder 反应。

红色醌类化合物的生成量成正比。

D-葡萄糖+2O +O H 2−−→−GOD 葡萄糖酸+22O H222O H +4-AA+对羟基苯甲酸钠−−→−POD 红色醌类物质+4O H 2 2.试剂组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清或用草酸钾-氟化钠抗凝的血浆。

在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释：6.1在给定的样本/试剂比例和条件测定时，本试剂线性范围可达25mmol/L。

样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本，最大稀释倍数为10.6.2.单位换算：mg/dl=mmol/L×187.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊或以水空白在500nm处吸光度大于0.200时不能使用。

8.试剂性能指标8.1试剂外观：R1：无色或淡红色透明液体，无悬浮物及沉淀；R2无色透明液体，无悬浮物及沉淀。

8.2装量：不低于标识值。

8.3空白吸光度：在500nm处，光径1cm时，空白吸光度A≤0.2008.4线性范围：试剂的线性区间为[2.2-25]mmol/L，在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b)[2.2-4.7]mmol/L区间内，线性绝对偏差不超过±10U/L；（4.7-25）mmol/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。

8.5准确度：使用参考物质测定时，当浓度≤4.16mmol/L，实测值与标识值偏差应不超过±0.833mmol/L，当浓度＞4.16mmol/L，实测值与标识值偏差应在±20%范围内。

实验四葡萄糖的测定（POD-GOP法）一．实验目的1. 掌握葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法测定血糖；2. 学习使用分光光度计；3. 学习微量移液器的使用二．实验原理葡萄糖氧化酶(GOD)葡萄糖+O2 葡萄糖酸+ H2O2过氧化物酶(POD)H2O2 + 酚+ 4-氨基安替比林醌+ H2O+O2红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比，在505nm有吸收峰三．试剂1. 试剂1：磷酸盐缓冲液70mmol/L酚10.6mmol/L pH 7.02. 试剂2：磷酸盐缓冲液70mmol/L4-氨基安替比林0.8mmol/L葡萄糖氧化酶>10U/ml过氧化物酶> 1U/ml pH 7.03. 标准葡萄糖溶液 5.55mmol/L4. 兔子血清四．操作步骤1.配制工作液：取等量试剂1和试剂2混合均匀2.按下表加入有关试剂3. 充分混匀，置于37℃水浴15分钟，显色后，在波长505nm处，以空白调零，读取标准管和样品管的吸光值A4. 实验结果计算：葡萄糖（mmol/L）=[样品管吸光度（A样）/标准管的吸光度（A标）]×标准液浓度五．实验数据及结果1.数据记录2.计算结果葡萄糖=0.489/0.237*5.55mmol/L=11.45mmol/L=206.35mg/dl思考题哪些方法可增加血糖测定的准确性？答：1.增加测定的重复次数2.加样的准确，如在使用微量移液器量取液体时要称量准确，向试管中加液的顺序要正确3.可根据所得数据绘制标准曲线，并通过标准曲线求出浓度4.在使用分光光度计时注意操作准确以上的这些方法都可以增加血糖测量的准确性。