血清葡萄糖的测定知识讲解
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血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法是一种常用的检测血清葡萄糖的方法。
它可以检测血清中的水溶性葡萄糖的含量,从而可以反映机体的糖代谢情况。
血清葡萄糖测定方法有多种,其中最常用的是酶联免疫法(ELISA)和磷酸二氢钾滴定法(HK)。
2、酶联免疫法(ELISA)
酶联免疫法(ELISA)是一种常用的血清葡萄糖测定方法。
ELISA技术利用免疫反应原理,把糖尿病患者血清中的葡萄糖水解酶以抗原或抗体的形式结合起来,然后用抗体识别,经过可见性染料和酶的底物分解,用放大效应得到明显的反应信号,通过测量信号来确定葡萄糖的浓度。
ELISA对葡萄糖的检测灵敏度很高,但是分析时间比较长,且需要有特殊的仪器。
3、磷酸二氢钾滴定法(HK)
磷酸二氢钾滴定法(HK)是另一种检测血清葡萄糖浓度的常用方法。
它是一种血清中葡萄糖的滴定法,用40-50℃的磷酸二氢钾溶液作为比色剂,通过比色分析得到血清中的葡萄糖含量。
这种方法分析速度快,结果准确,但是需要较高的技术要求。
4、结论
血清葡萄糖测定方法是一种常用的检测血清葡萄糖的方法,它可以准确反映机体的糖代谢状况。
目前最常用的血清葡萄糖测定方法有酶联免疫法(ELISA)和磷酸二氢钾滴定法(HK),它们具有自己的优缺点,根据实际情况选择合适的方法。
血液葡萄糖的测定方法血液葡萄糖测定方法是用于检测人体血液中葡萄糖含量的一种方法。
葡萄糖是人体重要的能量供应来源,它在体内的浓度与机体的代谢状态密切相关。
因此,对于糖尿病患者来说,监测血液葡萄糖水平非常重要,有助于他们控制血糖水平,维持身体健康。
血液葡萄糖的测定方法有很多种,根据实际需求和方法的可行性,可以选择不同的方法进行测定。
以下将介绍几种常见的血液葡萄糖测定方法。
首先是基于试纸的葡萄糖测定方法。
这种方法常用于家庭血糖监测,便携式血糖仪就是基于试纸原理的。
使用这种方法,只需将试纸置于一滴血液上,试纸上的葡萄糖酶会与葡萄糖发生反应,产生氧化还原反应,导致试纸变色,通过比色板或仪器来判断血糖水平。
这种方法操作简便,但准确度相对较低,适用于一般家庭血糖监测。
其次是荧光法葡萄糖测定方法。
这种方法是基于葡萄糖氧化酶的反应原理,葡萄糖氧化酶与葡萄糖反应生成辅酶还原型,再与辅酶反应产生荧光染料,测量荧光强度来计算血糖浓度。
这种方法灵敏度高,准确度较高,但需要专业的仪器和技术支持,适用于实验室中血糖测定。
此外,还有电化学法葡萄糖测定方法。
这种方法是将血液样品置于电极上,通过电化学反应来测量葡萄糖浓度。
常用的电极有电化学氧化酶电极和谐振速度电极。
电化学法测定血糖准确度高,但仪器复杂,需要专业的操作技术和维护。
最后是光学法葡萄糖测定方法。
这种方法是利用光学仪器,通过检测葡萄糖溶液对特定波长光的吸收或散射来测定葡萄糖浓度。
光学法测定速度快,操作简便,适用于实时监测。
总之,血液葡萄糖测定方法多种多样,每种方法都有其适用的场景和特点。
在选择合适的测定方法时,需要根据实际需求,考虑准确性、操作便捷性以及成本等因素。
对于糖尿病患者来说,定期监测血液葡萄糖水平非常重要,可以根据医生的建议选择合适的测定方法,并保持良好的血糖控制,以维持健康的生活。
血清葡萄糖测定1.实验原理在己糖激酶(HK)催化下,葡萄糖和ATP发生磷酸化反应,生成葡萄糖-6-磷酸(G6P)与ADP。
前者在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)催化下脱氢,生成6-磷酸葡萄糖酸(6PG),同时使NADP还原成NADPH。
NADPH的生成速率与葡萄糖浓度呈正比。
NADPH在波长340nm有吸收峰,可监测吸光度升高速率,计算血清中葡萄糖浓度。
2. 标本:2.1 病人准备:12小时禁食。
2.2 类型:血清或血浆(EDTA,肝素或氟化钠),标本最好不要溶血。
迅速分离血清或血浆,减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。
随机收集尿样。
3. 标本存放:血清、血浆应在血液采集1小时内,尽早分离。
加入糖分解抑制剂(NaF,KF)后的稳定性:15~25℃保存可稳定1天,4~8℃保存可稳定7天。
血清中的葡萄糖,无溶血,无细菌污染,没有添加的防腐剂,在25℃下可稳定8个小时,在4℃下可稳定72小时。
尿样应保存在2~8℃下并尽快进行分析。
脑脊髓液如果避免蒸发可在2~8℃下稳定至少5天,5天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20℃的条件下。
4. 标本运输:常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准:细菌污染、超时送检的的标本。
6. 试验材料:6.1 欧泰克血糖测定试剂盒,罗氏复合定标液,罗氏质控品I、II。
6.1.1 试剂组成:磷酸缓冲液,PH7.6 100 mmol/L三磷酸腺苷(ATP) 4 mmol/L醋酸镁10 mmol/LNAD+ 3 mmol/L己糖激酶(HK)≥25 KU/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)≥75 KU/L6.1.2试剂准备:6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2~25℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂有效期为24个月。
试剂不可冰冻。
开盖后应避免污染。
6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。
6.1.5 注意事项:避免试剂与皮肤及粘膜接触。
6.2 校准品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器:日立7060全自动生化分析仪8. 操作步骤:8.1 项目基本参数:参见7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤:参见7060生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
血液中葡萄糖的测定(邻甲苯胺法)一目的掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法。
二原理血清样品中的葡萄糖在酸性环境中与邻甲苯胺共热时,葡萄糖脱水转化为5-羟甲基α-呋喃甲醛,后者与邻甲苯胺结合为蓝绿色的醛亚胺(Schiff碱)。
血清中的蛋白质则溶解在冰醋酸和硼酸中不发生混浊。
将标准葡萄糖溶液与样品按相同方法处理,在630nm波长处比色,即可测得样品中葡萄糖含量。
邻甲苯胺法测得正常空腹血糖值为3.9~6.11mmol / L (即100ml血清中葡萄糖的正常值为70~100mg)。
邻甲苯胺法对葡萄糖特异性高,测定结果为真糖值,为临床上常用的血糖测定方法。
此方法不受血液中其他还原物质的干扰,测定时也无需去除血浆或血清中的蛋白质。
由于血液葡萄糖在进食后明显升高,所以必须采取空腹血做血液葡萄糖测定,血细胞糖酵解作用会降低血液葡萄糖浓度,所以血液抽出后应及时测定,或用含氟化钠的抗凝剂抑制糖酵解,可稳定24小时。
三操作1.采得待测血样(抗凝)后立即离心以分离血浆(3,000转离心15分钟)。
2.取干燥试管4支,分别标出号码,按下表添加试剂。
3.混匀各管内容物置沸水浴中加热15分钟后取出用流水冷却。
4.以空白管调零,读取各管630nm处吸光度值。
5.计算血糖mmol/L = 测定管吸光值× 5标准管吸光值四实验器材与试剂分光光度计、沸水浴、试管、移液管、电炉、烧杯、洗耳球、试管夹。
邻甲苯胺试剂:称取硫脲(AR)级1.5g,溶于940ml冰醋酸(AR级)中,加邻甲苯胺60ml。
置棕色瓶中至少可用两个月。
此试剂腐蚀性极强,应避免接触皮肤。
12 mmol/L苯甲酸溶液:900ml蒸馏水中加入1.4g苯甲酸,加热助溶,冷却后定容到1L。
葡萄糖标准储存液(100 mmol / L):称取无水葡萄糖(烘箱80烘干至恒重,干燥器中保存)1.802g,溶于80ml苯甲酸溶液中,再定容到100ml。
葡萄糖标准应用液(5 mmol / L):取标准储存液5ml,加苯甲酸溶液至100ml。