不同血液筛查核酸检测模式检测结果的分析

无偿献血者HBV、HIV和HCV核酸检测分析

【摘 要】目的：分析针对无偿献血者的血液样本进行HBV、HIV和HCV核酸检测的可行性，评价酶联免疫吸附实验（ELISA）对于此三种病毒的检出有效率。方法：收集2015年1月-2015年6月我市10000份无偿献血者的血液样本，提取样本中的HBV、HIV及HCV的核算，同步使用TMA技术和ELISA法检测样中针对三种病毒存的抗原和抗体。结果：核酸检测结果显示，在接受检查的10000份血液样本当中，有9例样本为HIV病毒的窗口期；有5例样本为HBV病毒的窗口期；本次入选的10000例血液样本未有HCV窗口期病毒检出。结论：无偿献血者的血液质量需要进行全面的检测和分析，通过核算检测分析，可以有效的检出HBV、HCV、HIV的窗口期病毒，有效的保证血液的质量与安全，为患者的生命安全提供良好的保障。

【关键词】HBV；HIV；HCV；核酸检测

血液的质量与安全对于社会的安全稳定和保障患者的生命健康具有重要的意义。血液是传播病毒的主要途径，因此加强血液病毒控制十分必要[1]。文中对我市的10000份血液样本进行了核算检测，检出效果良好，具体检测过程参见下文：

1资料与方法

1.1一般资料

本次研究对象为2015年1月-2015年6月来自我市血液采集中心的10000份无偿献血者的血液样本。男性样本5963份、女性样本4037份，所选择的全血样本均为10ml；所有样本在获取之前，均与献血者进行了沟通与说明；为保证样本的有效性，所有受检样本的提取均严格遵从相应的操作规程，并在规定的时间内完成核酸检测的所有步骤。

1.2检测方法

本次研究所使用的检测仪器包括全自动酶免分析仪FAME24/20（瑞士澳斯邦生物技术有限公司）；全自动核酸检测分析系统ChiTas Bss1200自动纯化仪；ABI7500实时荧光定量仪（上海浩源生物科技有限公司）；抗HBV试剂盒、抗HCV试剂盒、抗HIV试剂盒均购自科华伯乐.万泰丽珠化学技术有限公司；核酸检测试剂及相应的鉴别试剂（上海浩源生物科技有限公司）。

ELISA法与胶体金法检测血液抗-HIV结果对比分析

摘要】目的 了解ELISA法与胶体金法检测血液抗-HIV的灵敏度、特异性以及ELISA法测定的S/CO值的强、弱与胶体金法的符合率。方法 采有用两种ELISA试剂同时检测抗-HIV抗体，对任何一种呈反应性的标本均进行双孔复查，同时用胶体金法进行检测，复查仍为阳性反应的标本，留取同源血袋血浆及填报资料一同送市疾病预防控制中心用WB法进行确认。结果 ELISA法检测抗-HIV呈阳性反应的156人份血液中有105例WB法确认为阳性，阳性率为67.31%，其中95例为胶体金法阳性，符合率为90.48%（95/105）；ELISA法呈强阳性反应与ELISA法呈弱阳性反应的WB法确认阳性率比较χ2=100.30，P＜0.01。结论 ELISA法检测试剂不同的厂家存在技术的差异，都有一定的漏检率及假阳性率，胶体金法因方法学原因，存在漏检和检测假阳性的可能；ELISA法检测抗-HIV呈S/OD值呈强、弱阳性结果确认为阳性中存在显著性差异，S/OD值越高，与WB法试验结果符合率越高。

【关键词】 ELISA法 胶体金法 WB法 HIV-Ab 检测

为了了解ELISA法与胶体金法的灵敏度、特异性以及ELISA法测定的S/CO值的强、弱与胶体金法的符合率，笔者对本市2005～2011年份检测的无偿献血者份标本的HIV-Ab检测结果进行回顾性分析比较，结果报告如下：

1 材料与方法

1.1 标本来源

2005～2011年贵港市无偿献血者200 603人份血样，其中ELISA法检测抗-HIV呈反应性标本156人份。

1.2 仪器与试剂

Uranus全自动酶免仪、Xantas加样器、佰乐7515型洗板机。使用ELISA试剂（北京万泰公司、珠海丽珠公司、厦门新创公司、北京金豪公司及荷兰生物梅里埃）及胶体金试剂（杭州艾康）。

丙型肝炎病毒抗体的两种检测方法结果比较

黄乙清

【摘 要】目的 比较双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法与间接ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)灵敏度和特异性,为无偿献血的血液筛查提供参考依据.方法 采用双抗原夹心ELISA法和间接ELISA法分别对1500份无偿献血者标本(经血液筛查抗-HCV阴性标本1416份,抗-HCV阳性标本84份)进行检测,记录标本结果与丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)的符合性,评价两种检测方法的差异.结果 双抗原夹心ELISA法检测84份抗-HCV阳性标本的灵敏度为97.6%(82/84),间接ELISA法的阳性检出率为85.7%(72/84),双抗原夹心ELISA法灵敏度高于间接ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05);双抗原夹心ELISA法的特异性为100.0%(1416/1416),高于间接ELISA法的85.9%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 双抗原夹心法的灵敏度和特异性优于间接法,可降低间接ELISA法引起的假阳性,减少血液不必要浪费,同时也避免了献血者淘汰.

【期刊名称】《海南医学》

【年(卷),期】2016(027)023

【总页数】2页(P3935-3936)

【关键词】丙肝病毒抗体;双抗原夹心法;间接ELISA法;灵敏度;特异性

【作 者】黄乙清

【作者单位】海南省血液中心检验科,海南 海口 570311

【正文语种】中 文 【中图分类】R512.6+3

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HC)感染引起的一种世界性传染病，主要通过输血和血液制品等途径传播。为控制HCV经血液传播，要求对献血者进行抗-HCV的检测。常用的第三代抗-HCV检测试剂，包被用抗原一般包括HCV-core、NS3、NS4和NS5抗原，特异性和灵敏度达99%[1]。目前国内对献血者HCV感染的筛查,主要依赖间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其血清中的抗-HCV。而间接ELISA法也存在一定的假阳性[2]，主要是由于抗-HCV ELISA试剂均采用二抗作酶结合物，由于血清中IgG含量高，故少量的非特异性吸附可造成假阳性结果，血清中类风湿因子等也可能干扰检测结果。双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法是利用酶标记抗原代替间接法中的酶标记二抗，检测的是包括IgG、IgM等在内的总抗体[3]，因此从方法学的原理上解决了间接法的这些缺陷，近年已在抗HBsAg抗体、梅毒抗体、抗HIV抗体等的检测中得到了成功的应用。双抗原夹心法检测试剂对抗体进行两次特异性反应，可降低间接法酶标抗引起的假阳性[4]。国家对于丙肝感染的预防，目前仍无有效的疫苗，主要通过增加检测试剂的敏感性和特异性，有效减少血液资源的浪费和保障临床输血安全。笔者通过对常规筛查的1 500份献血者标本进行两种血清学方法比较，现将结果报道如下：

Ｉ　ＭＥ口工Ｃ二二ＡＬＬＡ目口口ＡＴ口口Ｙ　Ｂ［二二工ＥＮｅＥＢ医学检验　ＣＨ工ＮＡ　ＨＥＡＬ　ＴＨ工Ｎ口Ｕ日ＴＱＹ　抗一ＨＣＶ阳性反应血清中ＨＣＶ核酸检测结果分析　臧希卉　吉林省疾病控制中心消毒所．吉林长春１３００００　【摘要】目的探讨和研究抗一ＨＣＶ阳性反应血清进行ＨＣＶ核酸指标检测的效果。方法收集２０１１年６月一２０ｌ３年５月７６　例抗一ＨＣＶ呈阳性反应的受检者血清，使用ＨＣＶ核酸扩增酶免检测ＨＣＶ核酸指标。结果通过本次试验中收集的５０份通　过２种ＥＬＩＳＡ试剂来检测抗一ＨＣＶ呈阳性反应血清。其中，共有７份抗一ＨＣＡ呈阳性受检者，运用２种试剂进行检测都显示出　强阳一ｔ￣（Ｓ／ＣＯ大于１　０１，其ＨＣＶ核酸检测也全部显示为阳性（比例为１００％），其它４３份抗一ＨＣＡ阳性受检者，经检测均显示为　较弱的阳性。其中经ＨＣＶ核酸检测呈现阳性的占４６．５％。另外，经过运用单种试剂来检测的抗一ＨＣＶ阳性血清，都呈现较弱　的阳性。且该ＨＣＶ核酸检测的阳性率也比较低，同时运用双种试剂检测抗一ＨＣＶ阳性的特异性，均比运用单种试剂而进行　检测的抗ＨＣＶ阳性要高，二者对比其差异具有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论若抗ＨＣＶ呈阳性且ＨＣＶ核酸检测也呈阳性的　可以确定为ＨＣＶ感染；若抗ＨＣＶ阳性而ＨＣＶ核酸检测呈阴性，则可能和ＨＣＶ核酸检测的灵敏度、抗一ＨＣＶ检测试剂的特　异性或者病毒基因变异等很多因素相关。　【关键词】抗一ＨＣＶ；阳性反应；ＥＬＩＳＡ　ＨＣＶ检测　【中图分类号】Ｒ４４６．６　【文献标识码】Ａ　［文章编号】１６７２—５６５４（２０１４）０３（ｃ）一１５Ｏ一０２　为了防止丙型肝炎的交叉感染发生，往往在对抗一ＨＣＶ指标　进行筛查的时候，都会采用灵敏度较高的试剂来完成筛选。目前，　为了快速地缩短运用抗一ＨＣＶ进行检验的“窗口期”，很多机构已　将ＨＣＶ核酸的检测方法使用于对抗一ＨＣＶ的筛选［１】。为了探讨与　分析抗一ＨＣＶ阳性反应中．受检者血清中的ＨＣＶ核酸的检测状　况，本研究选取部分受检者抗一ＨＣＶ阳性的血清，进行ＨＣＶ核酸　指标的相关检测和研究。取得了较好的效果，现进行如下报道。　１资料与方法　１．１一般资料　收集本所从２０１１年６月一２０１３年５月期间筛选出血清抗一　ＨＣＶ阳性反应标本一共１５２份，其中，同时使用两种ＥＬＩＳＡ的试　剂而进行检测呈阳性反应的血清一共５０份．使用单种试剂而通过　检测呈阳性反应的血清一共１０２份，主要包括使用试剂２检测出　的阳性（含使用试剂１检测出阴性）标本共有５９份；使用试剂１来　检测出的阳性（包含使用试剂２检测出阴性）标本共有４３份。　１．２检测方法　使用ＨＣＶ核酸扩增酶免检测试剂盒（由华美生物制造）、抗一　ＨＣＶ　ＥＬＩＳＡ检测试剂和基因扩增仪以及高速冷冻离心机等。抗　ＨＣＶ阳性的标本采用受检者的单份血清进行ＨＣＶ核酸扩增酶　免的检测，然后依照说明书来进行操作，首先在采集血液以后。于　６　ｈ内进行血清的分离，放置于零下７０℃的冰箱内进行冷冻保存，　在实验之前解冻后，取每份样品１００ｐ￣Ｌ的放到样品管内。再用酶　免样品处理液和乙醇（浓度为７５％）来处理血清样品，弃上清以后　快速进行烘干；然后将１其在样品管内冷却，并加入反转录酶与　反转录混合物以后进行孵育，另外加入尿嘧啶ＤＮＡ糖基化酶和ＰＣＲ　扩增反应的混合物，迅速在扩增仪内进行扩增处理［２１；之后把扩增　的产物转移到捕捉板内，同时加入杂交反应液后。在温度是３７℃　的环境中，进行孵育、洗板并显色，最后再用酶标仪来确认检测的　结果，然后分析。　１５０中国卫生产业　１．３统计学原理　本文研究所得的数据全部采用软件ＳＰＳＳ　１８．０进行统计学进　行处理，两组之间的计数资料对比采用ｘ　的检验，全部计量资料　用均数加减标准差进行表示，以尸＜０．０５，表明差异具有统计学意　义。　２结果　通过本次试验中收集的５Ｏ份通过２种ＥＬＩＳＡ试剂来检测　抗一ＨＣＶ呈阳性反应血清。其中，共有７份抗一ＨＣＡ呈阳性受检者，　运用２种试剂进行检测都显示出强阳性（Ｓ／ＣＯ大于１０），其ＨＣＶ　核酸检测也全部显示为阳性（比例为１００％），其它４３份抗一ＨＣＡ　阳性受检者，经检测均显示为较弱的阳性（Ｓ／ＣＯ小于５），其中　ＨＣＶ核酸检测显示阳性的共２０份（占４６．５％）。　另外，通过运用１种试剂来检测抗一ＨＣＶ阳性血清，都显示　出较弱阳性（Ｓ／ＣＯ小于５），该ＨＣＶ核酸检测的阳性率也比较低　（１１例，占１０．８％），说明抗一ＨＣＶ阳性反应血清中的ＨＣＶ核酸的　检出率和Ｓ／ＣＯ数值的高低存在相关性。同时，运用２种试剂检　测抗一ＨＣＶ阳性率要比运用１种试剂进行检测抗ＨＣＶ阳性率，　二者对比，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。见表１。　表１不同试剂抗一ＨＣＡ阳性血清核酸扩增酶免检结果对比　３讨论　本次试验中收集的５０份抗ＨＣＡ阳性中，有７份抗ＨＣＡ呈阳　性受检者，运用２种试剂进行检测都显示出强阳　￣（Ｓ／ＣＯ大于１　ｏ），　其ＨＣＶ核酸检测也全部显示为阳性（比例为１００％），因此可以证　明．若抗ＨＣＶ呈阳性并且ＨＣＶ核酸检测也呈现阳性，