EDTA依赖性假性血小板减少症1例乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)作为血细胞分析的抗凝剂已经国际血液学标准委员会(ICSH)认定及《全国临床检验操作规程》推荐使用，广泛应用于临床。
但临床发现EDTA可引起少数患者的血小板发生聚集，经血细胞自动分析仪检测可出现假性血小板减少(pseudothrombocytopenia，PTCP)，称为EDTA依赖性假性血小板减少(EDTA - PTCP)。
国内外已见多例报告1-3，我科近期发现一例EDTA-PTCP，报告如下。
1 病例资料患者，女，48岁。
主诉：发热、畏寒、咳嗽、咽痛。
无既往病史。
查体：体温39℃，咽部充血，四肢未见出血点及瘀斑，无牙龈出血。
拟诊为上感。
实验室检查：血常规全血细胞计数分析仪分析显示白细胞计数10.1×109/L，血小板计数37×109/L（EDTA-K2抗凝全血）。
凝血酶原时间(PT) 11.5s, 国际标准化比值0.91, 部分凝血活酶时间(APTT) 29.4s, 凝血酶时间(TT) 16.2s, 纤维蛋白原( FIB )2.5g/L。
疑为PTCP。
2 材料与方法2.1 血小板计数手工法末梢血目视计数：20μl末梢血加入3.8ml的1% 草酸铵稀释液中，混匀后计数。
血细胞自动分析仪分析：使用仪器Coulter-HMX血细胞全自动分析仪，EDTA-K2抗凝全血及枸橼酸钠（CTAD）抗凝全血混匀后上机分析。
2.2 血涂片瑞氏染色镜检：参照《全国临床检验操作规程》4进行操作。
3 结果EDTA抗凝全血标本血细胞自动分析仪分析血小板计数结果显著低于CTAD抗凝全血标本血细胞自动分析仪分析血小板计数结果及末梢血手工计数法结果，见表1。
EDTA及CTAD法采血后10分钟分析与1小时后分析血小板计数结果间无显著差异。
EDTA抗凝标本血涂片瑞氏染色后镜下见血小板凝集，CTAD标本血小板镜下未见凝集。
表格 1 不同抗凝剂及放置时间下的血小板计数结果血小板计数(×109 L-1)EDTACTAD手工法t=10m37145149t=1h391424 讨论PTCP常由血标本中的EDTA抗凝剂引起，导致EDTA-PTCP。
EDTA致血小板计数假性减少的分析摘要目的:了解EDTA盐依赖性假性血小板减少的原因及意义。
方法:用EDTA-K2抗凝真空管采集静脉血,在自动血液分析仪上检测,4例血小板计数明显减少者改用枸橼酸钠抗凝真空管采集静脉血在血液分析仪上重新检测,同时做血涂片检查,采末梢血手工计数血小板。
结果:4例EDTA-K2抗凝计数血小板显著减少者,血涂片见血小板聚集成团,而用枸橼酸钠抗凝及手工计数者血小板均在正常范围内。
结论:EDTA作为血液分析仪的抗凝剂,有时会导致血小板计数假性减少,应引起临床的足够重视。
关键词EDTA 血小板计数血小板聚集资料与方法2007年2月～2009年3月住院患者4例,年龄分别为55岁、65岁、68岁、72岁,男1例,女3例。
仪器与试剂:日本光电MEK-6318K血液分析仪及配套试剂;Olmpus显微镜;草酸铵血小板稀释液(按操作规程[1]配制);EDTA-K2真空抗凝管与枸橼酸钠真空抗凝管;瑞氏染色液。
方法:仪器法为病房护士晨起按要求采集静脉血于EDTA-K2真空抗凝管内至2ml刻度处,检验科收到标本后,在自动旋转式混匀器上混匀,上机检测,发现血小板明显减少者重新采集血液于枸橼酸钠真空抗凝管内,上机检测,同时按操作规程[1]采集末稍血手工计数血小板。
对2种抗凝剂全血进行涂片瑞氏染色显微镜检查。
结果结果见表1。
讨论血小板在体内主要参与止血与血栓形成,此外在动脉粥样硬化和炎症反应中起着重要的作用。
血小板数量的检测是临床上最常用的检测项目之一,EDTA所导致的血小板假性减少如未及时发现,会给病人的诊断和治疗带来很多麻烦,增加不必要的其他检查或治疗,甚至引起医疗纠纷。
因此,检验科工作人员在工作过程中如发现血小板计数明显减少时,必须进行复查及涂片染色显微镜检查,看血小板是否假性减少,涂片是否有血小板成堆现象。
EDTA抗凝原理是与血液中的凝血因子Ⅳ(钙离子)结合成螯合物,使其失去凝血作用,从而阻止血液凝固。
EDTA依赖性假性血小板减少症实验室分析【关键词】EDTA-K2 假性血小板减少；血小板计数；血小板聚集EDTA盐(EDTA-K2)作为血细胞分析的抗凝剂是国际血液标准化委员会认定并得到广泛使用，目前血小板计数实验室普遍采用的是全自动血细胞分析仪[1]，操作方便,重复性好,准确度高等优点已被普及应用，通常情况下使用EDTA二钾作为抗凝剂，对血细胞和血小板计数的影响较小，但临床发现EDTA盐有时会引起少数患者的血小板聚集导致血细胞分析仪在血小板计数出现假性偏低的现象，检测时需要实验室结合临床、排除干扰因素、选择科学可行的检测方法，才能正确报告血小板计数结果。
以防差错事故的发生，以免给临床医生带来困扰，防止医疗纠纷。
1.资料和方法1.1临床资料：患者，女18岁主诉发热、头痛、鼻塞、咳嗽、咽干咽痛等上呼吸道症状。
查体：体温38.2度、咽部充血、扁桃体无肿大，乡镇卫生院拟定为上感进行系列检查，实验室检查:白细胞10.8x109/L,红细胞3.47x1012、血红蛋白115 g／L、血小板计数为27x109/L(EDTA抗凝全血)既往健康、医生建议来上级医院院复查。
我院再次实验室检查：白细胞10.5x109/L、红细胞 3.54x1012、血红蛋白117 g／L、血小板21x109、凝血酶原时间:12.8s、活化部分凝血活酶时间:25.4s、凝血酶时间：12.5s、纤维蛋白原:2.48s、患者平日经期血量正常，无皮肤黏膜出血倾向，四肢未见出血点瘀斑。
怀疑为EDTA依赖性假性血小板减少症。
1.2方法1.2.1仪器与材料：采用希森美康XS500i全自动血液分析仪进行分析，试剂(溶血剂、稀释液、清洗液)为仪器配套试剂。
EDTA-K2抗凝剂和枸橼酸钠抗凝剂。
仪器采用专用校准品进行校准,每日室内质控均在控，参加卫生部室间质评亦在控。
1．8 mg／ml的EDTA-K2真空采血管、109 mmol／L的枸橼酸钠真空采血管均有河北超然医疗器械有限公司提供。
血小板假性减少怎么办？常见血小板假性减少的原因通常为：标本凝集、EDTA依赖性假性血小板减少、冷凝集、大血小板。
一、标本凝集主要包括：（1）采血不顺利，包括技术不熟和患者血管难以采集，造成采集时间过长，使组织因子进入血标本中而产生肉眼看不见的微小凝块；（2）颠倒混匀不充分，影响抗凝效果，从而造成凝块产生或血小板聚集；（3）抽血量与抗凝剂比例不当，造成血小板被稀释或抗凝效果不好。
此时重新采血一般能解决问题。
二、EDTA依赖性假性血小板减少由于用EDTA盐（EDTA盐干粉抗凝剂，乙二胺四乙酸）干粉抗凝剂，在作为免疫介导的血液中，可出现的冷抗血小板自身抗体，使血小板互相凝集现象。
这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体，直接作用于血小板膜糖蛋白IIb/IIIa上。
同时，这种与血小板结合的自身抗体Fc 端可与单核细胞或淋巴细胞膜上Fc受体结合，出现卫星现象。
引起血小板聚集卫星现象后，在全自动血细胞计数仪上检测时，发生假性血小板计数减少的现象。
1、更换抗凝剂：用枸橼酸钠抗凝（凝血象）或肝素抗凝重新采血检测；2、毛细血管发采集末梢血，用预稀释模式检测；3、显微镜计数：采集未抗凝的末梢血20µl，加入到380µl草酸铵稀释液中，计数中央大方格四角及正中五个小方格血小板是数量；三、冷凝集冷凝集：是指由自身抗体引起的，红细胞在冷环境中的凝集成团的现象，采血管壁可见细沙样凝集颗粒。
冷凝集反应一般出现在31℃以下，在0～4℃时最强，红细胞凝集最明显；随温度的升高，抗原抗体复合物逐渐解离，凝块消失。
1、将标本立即放在37℃水浴中，约半小时后，立即机测定；2、将患者带到实验室内，在血球仪仪器旁抽静脉血，在数秒钟内立即上机测定；3、用等量生理盐水置换血浆，将标本离心后，去掉血浆，加入等量生理盐水后上机检测；4、毛细血管发采集末梢血，用预稀释模式检测；5、显微镜计数：将37℃孵育的血液10ul 加入到2.0ml的37℃温盐水中，混合均匀，滴到计数板上计数（可预先将计数板放37℃水浴中加温）。
