回顾性研究骨髓标本巨核细胞微核检查对血液病诊断价值要点

已有许多深入的研究［１－３］ 。 近年的巨核细胞细胞核 形态学研究进一步拓宽了人们对巨核细胞形态学的 研究范畴及其深度［４］ 。 我们在研究血液病患者的 巨核细胞 细 胞 核 形 态 中 发 现 一 种 特 殊 的 细 胞 核 形 态———巨核细胞微核。 细胞微核不同于核的鼓突或 核芽，它是游离于主核的圆形或椭圆性核小体。 幼 红细胞的 Ｈｏｗｅｌｌ－Ｊｏｌｌｙ 小体和淋巴细胞的核外染色
【 关键词】 巨核细胞； 微核试验； 骨髓细胞
Ａ ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉｓｅａｓｅｓ Ｚｈｕ Ｊｉｎｐｉｎｇ， Ｌｕ Ｘｉｎｇｇｕｏ畅Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ， Ｐｕｊｉａｎｇ Ｐｅｏｐｌｅ′ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ， Ｐｕｊｉａｎｇ ３２２２００，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：Ｚｈｕ Ｊｉｎｐｉｎｇ，Ｅｍａｉｌ： ｚｊｐｊｚｊｐ＠１２６畅ｃｏｍ
中华检验医学杂志 ２０１６ 年 ３ 月第 ３９ 卷第 ３ 期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ， Ｍａｒｃｈ ２０１６， Ｖｏｌ畅３９， Ｎｏ畅３
回顾性研究骨髓标本巨核细胞微核检查对 血液病诊断价值国
【摘要】 目的 探讨骨髓标本巨核细胞微核检查在血液病诊断中的价值和意义。 方法 收集
对象与方法
一、对象 回顾性分析浙江大学医学院附属第二医院骨髓 室 ２００２ 年至 ２００９ 年期间存档和资料完整的门诊和 住院患 者 ８６３ 例， 包 括 急 性 髓 细 胞 白 血 病 （ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｂｏａｓｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ，ＡＭＬ） １６７ 例、骨髓增生异常 综合征（ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，ＭＤＳ） ８８ 例、急性 淋巴 细 胞 白 血 病 （ ａｃｕｔｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅ， ＡＬＬ ） １０３ 例、 慢 性 粒 细 胞 白 血 病 （ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ，ＣＭＬ）５６ 例、慢性淋巴细胞白血病（ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ， ＣＬＬ ） ２３ 例、 浆 细 胞 骨 髓 瘤 ４１ 例、淋巴瘤 ２８ 例、骨髓增殖性肿瘤（ 真性红细胞 增多症、特发性血小板增多症和特发 性骨髓纤维 化）３５ 例、 骨髓增生异常－骨髓 增殖 性 肿 瘤 （ ＭＤＳ－ ＭＰＮ） １０ 例、 缺 铁 性 贫 血 （ ｉｒｏｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｅｍｉａ， ＩＤＡ）８６ 例、巨幼细胞性贫血（ ｍｅｇａｌｏｂｌａｓｔｉｃ ａｎｅｍｉａ， ＭＡ） ４０ 例、 溶 血 性 贫 血 （ ｈｅｍｏｌｙｔｉｃ ａｎｅｍｉａ， ＨＡ ） １９ 例、感染性疾病 ４５ 例、特发性血小板减少性紫癜 （ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｏｐｅｎｉｃ ｐｕｒｐｕｒａ， ＩＴＰ） ４２ 例、粒 细胞缺乏症 １１ 例、脾功能亢进 ４７ 例、慢性苯中毒 ２２ 例。 诊断符合张之南主编枟血液病疗效及诊断标 准枠 ［８］ 。 选取 ２５ 份健康体检者的骨髓涂片标本作 为健康对照组，均为志愿参加本项研究。 ２５ 份健康 体检者骨髓样本，排除任何血液病、慢性疾病等，年 龄 ２８ ～６５ 岁，中位年龄 ４８ 岁，其中男性 １７ 例，女性 ８ 例。 二、观察方法 选择厚薄均匀和染色良好的骨髓涂片，经瑞氏－ 姬姆萨染色后，在光学显微镜下进行巨核细胞计数， 每份涂片计数巨核细胞 ５０ 个，不足 ５０ 个，可多张涂 片累 积 进 行 计 数。 观 察 和 描 述 巨 核 细 胞 微 核 （≤５ μｍ）的形态学及其检出率。 镜检实验者均由 具有 ３ 年以上形态学工作经验的检验人员担任。
１）。 二、巨核细胞微核的检出率 健康对照组骨髓涂片未能检出巨核细胞微核，
不同疾病的检出率见表 １。 巨核细胞微核主要见于 髓系肿瘤：ＭＤＳ－ＭＰＮ、ＭＤＳ、ＭＰＮ 和 ＡＭＬ；良性血液 病主要见于 ＭＡ 以及继发性血液学异常的感染和苯 中毒，这些疾病检出率高且可见多个微核。 淋系肿 瘤除偶见于浆细胞骨髓瘤外，在急慢性淋巴细胞白 血病和淋巴瘤患者中均未能检出；贫血中除 ＭＡ 外， 缺铁性贫血、溶血性贫血，以及特发性血小板减少性 紫癜、粒细胞缺乏症、脾功能亢进等其他血液疾患均 未检出巨核细胞微核。 髓系肿瘤中，慢性粒细胞白 血病为例外，未能检出巨核细胞微核。
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中华检验医学杂志 ２０１６ 年 ３ 月第 ３９ 卷第 ３ 期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ， Ｍａｒｃｈ ２０１６， Ｖｏｌ畅３９， Ｎｏ畅３
质块是我们比较熟悉的细胞微核。 一般认为，化学 毒性物质 对 细 胞 的 损 害 是 细 胞 微 核 产 生 的 主 要 原 因，检测淋巴细胞微核常被用来评估致癌物质对细 胞损伤的程度［５］ ，对白血病治疗中产生的幼红细胞 微核和淋巴细胞微核及其意义早有报道［６－７］ ，但对巨 核细胞微核的形成及其意义鲜有文献报道，其在骨 髓涂片中对血液病相关诊断的应用价值也还不甚明 了。 我们通过 ８６３ 例血液病患者骨髓涂片镜检巨核 细胞微核发现，其形成具有一定的特殊性，且在血液 病的分型和鉴别诊断中有着重要的意义。
三、巨核细胞微核与疾病类型的关系 在检出率高的疾病组中，ＡＭＬ 巨核细胞微核主 要见于 Ｍ６、Ｍ２、Ｍ４ 和 Ｍ５ｂ，而不见于 Ｍ３、 Ｍ５ａ 和 Ｍ７ 等白血病细胞纯的类型；感染性疾病大多见于重 症患者（表 ２）。 骨髓增殖性肿瘤中，巨核细胞微核 则主要见于特发性骨髓纤维化，而真性红细胞增多 症和特发性血小板增多症较为少见。 ＡＭＬ 和 ＭＤＳ 中还与病态造血有关，伴病态造血的 ＡＭＬ 有意义地 高于不伴病态造血患者，多系病态造血的 ＭＤＳ 明显 高于非多系病态造血者，各组间比较除骨髓增殖性 肿瘤（ ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ｎｅｏｐｌａｓｍ， ＭＰＮ） 组外，差异 均有统计学意义（表 ２）。 四、巨核细胞微核与巨核细胞数量的关系 巨核细胞微核与巨核细胞多少有关，将巨核细 胞分为≥１００ 个 ／片和 ＜１００ 个 ／片两组，≥１００ 个 ／ 片组其微核检出率都高于 ＜１００ 个 ／片组，其中 ＡＭＬ 和 ＭＤＳ 两组比较差异有有统计学意义（表 ３）。 五、巨核细胞微核与巨核细胞类型的关系 巨核细胞微核与巨核细胞大小有关，微核见于
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 Ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅｓ； Ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｕｓ ｔｅｓｔｓ； Ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｃｅｌｌｓ
巨核细胞是 １８９０ 年 Ｗｏｗｅｌｌ 在骨髓中发现的， 自从 １９８２ 年 ＦＡＢ 协作组提出病态巨核细胞以来， 人们对其形态学及其意义，尤其是淋巴样巨核细胞
ＤＯＩ：１０．３７６０ ／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－９１５８．２０１６．０３．０１１ 作者单位：３２２２００ 浙江省浦江 县人民 医院 检验科 （ 朱金 平） ；浙 江大学医学院附属第二医院骨髓室（ 卢兴国） 通信作者：朱金平， 电子信箱：ｚｊｐｊｚｊｐ＠１２６．ｃｏｍ
三、统计学分析 计数资料用 ＳＰＳＳ１４畅０ 统计软件包进行统计，各 种疾病患者标本的巨核细胞微核的检出率用百分率 表示，采用 χ２ 进行比较分析，Ｐ ＜０畅０５ 为差异有统 计学意义。
结果
一、巨核细胞微核形态学结果 巨核细胞微核为圆形或椭圆性，一个至多个，可 小至 １ μｍ，类似（ 幼） 红细胞 Ｈ－Ｊ 小体，多个出现时 为大小不一，位于核旁或远离细胞核甚至游离于细 胞外，常可观察到大核、小核至微核的过度形态（ 图
【 Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｖａｌｕｅ ａｎｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｅｓｔｉｎｇ ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉ ｉｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｓｍｅａｒｓ ｆｏｒ ｈｅｍａｔｏｐａｔｈｙ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ畅Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｓｍｅａｒｓ ｆｒｏｍ ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ８６３ ｃａｓｅｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈｅｍｏｐａｔｈｙ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ２００２ ｔｏ ２００９ ａｔ ｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ ｚｈｅｊｉａｎｇ ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎｅ畅Ｓｍｅａｒｓ ｆｒｏｍ ２５ ｈｅａｌｔｈｙ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｃｏｎｔｒｏｌ畅Ｔｈｅ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｓｍｅａｒｓ ｗｅｒｅ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ Ｗｒｉｇｈｔ－Ｇｉｅｍｓａ ｓｔａｉｎｉｎｇ畅Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅｓ， ｍｏｒｐｈｏｕｓ ａｎｄ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉｓ ｗｅｒｅ ｒｅｃｏｒｄｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｌｏｗ ｐｏｗｅｒ ｌｅｎｓ ａｎｄ ｉｍｍｅｒｓｉｏｎ ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ畅 Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｉｓｅａｓｅｓ， ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｓｕｂｔｙｐｅｓ， ｔｏｔａｌ ｎｕｍｂｅｒ ａｎｄ ｔｙｐｅ ｏｆ ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ畅Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉｓ ｗｅｒｅ ｒｏｕｎｄ ｏｒ ｏｖａｌ ｗｉｔｈ ｖａｒｙｉｎｇ ｓｉｚｅ， ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ ｉｎ ｐａｒａｎｕｃｌｅａｒ ｏｒ ａｗａｙ ｆｒｏｍ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｄ ｅｖｅｎ ｆｒｅｅ ｉｎ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ， ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｌａｒｇｅ ａｎｄ ｍｅｄｉｕｍ ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅｓ畅Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉｓ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｓｔ ｉｎ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ， ｐａｒｔｉｃｕｌａｒｌｙ ｉｎ ｔｈｅ ｓｕｂｔｙｐｅ ｏｆ Ｍ６， Ｍ２， Ｍ４ ａｎｄ Ｍ５ｂ ｗｉｔｈ ｄｙｓｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｓｉｓ畅Ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉｓ ｃｏｕｌｄ ａｌｓｏ ｂｅ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ＭＡ， ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｅｎｚｏｌｉｓｍ， ｂｕｔ ｒａｒｅｌｙ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ畅Ｃｏｎｃｌｕｔｉｏｎ Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉ ｗａｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｉｔｓ ａｍｏｕｎｔ， ｓｉｚｅ ａｎｄ ｔｙｐｅ畅Ｔｈｅｒｅ ｉｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｓｔｉｖｅ ｒａｔｅｓ ｏｆ ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉ ｔｅｓｔｉｎｇ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈｅｍａｔｏｐａｔｈｉｅｓ ａｎｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｓｕｂｔｙｐｅｓ畅Ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｅ ｍｉｃｒｏｎｕｃｌｅｉ ｔｅｓｔｉｎｇ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｖａｌｕａｂｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｅｓ ｏｆ ｈｅｍａｔｏｐａｔｈｙ畅（Ｃｈｉｎ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ， ２０１６， ３９：１９７－２００ ）