血涂片和骨髓图片制备
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血涂片的制作流程
血涂片是一种常见的临床检查方法,用于观察血液中的细胞形态和数量,以帮助医生诊断疾病。
下面将介绍血涂片的制作流程。
1.采集血液样本
首先需要采集患者的血液样本。
通常采用的方法是在患者的手臂上绑上一条绷带,使血管充血,然后用一根针头穿刺血管,将血液采集到一根试管中。
2.制作血涂片
将采集到的血液样本滴在玻片上,然后用另一根玻片将其涂开,使血液均匀地分布在玻片上。
这个过程需要非常小心,以避免血液样本的污染或损坏。
3.固定血涂片
将制作好的血涂片放在一个固定剂中,通常使用的是甲醛或乙醇。
这个过程可以固定细胞的形态和结构,以便更好地观察。
4.染色
将固定好的血涂片放在染色剂中,通常使用的是伊红染或吉姆萨染。
这个过程可以使细胞更加清晰地显示出来,以便更好地观察和分析。
5.观察和分析
将染好色的血涂片放在显微镜下观察和分析。
医生可以通过观察细胞的形态、大小、数量和排列方式来判断患者的健康状况,例如是否存在贫血、感染或癌症等疾病。
血涂片制作流程需要非常小心和精确,以确保获得准确的结果。
这个过程需要专业的技能和经验,只有经过专业的培训和实践,才能够熟练掌握。
血涂片的制备
血涂片是一种常见的医学检查方法,它可以通过显微镜观察血液细
胞的形态和数量,从而帮助医生诊断疾病。
下面将从材料准备、制备
步骤和注意事项三个方面介绍血涂片的制备方法。
一、材料准备
制备血涂片需要的材料有:血液样本、玻璃片、无菌棉签、生理盐水、甲醇、乙醇、甲苯、染色剂(如吉姆萨染色液)等。
二、制备步骤
1.取一块干净的玻璃片,用无菌棉签在玻璃片上涂上一层薄薄的血液样本。
2.将玻璃片放在通风处晾干,使血液样本充分干燥。
3.将玻璃片浸泡在生理盐水中,轻轻摇晃,使血液样本充分溶解。
4.将玻璃片取出,用无菌棉签擦拭干净。
5.将玻璃片浸泡在甲醇中,固定细胞形态。
6.将玻璃片取出,用无菌棉签擦拭干净。
7.将玻璃片浸泡在乙醇中,使细胞脱水。
8.将玻璃片取出,用无菌棉签擦拭干净。
9.将玻璃片浸泡在甲苯中,使细胞透明。
10.将玻璃片取出,用无菌棉签擦拭干净。
11.将玻璃片浸泡在染色剂中,染色。
12.将玻璃片取出,用无菌棉签擦拭干净。
13.将玻璃片放在通风处晾干,制备完成。
三、注意事项
1.制备血涂片时要注意无菌操作,避免污染。
2.血液样本要新鲜,避免血液凝固。
3.制备过程中要注意时间控制,避免细胞形态变化。
4.染色剂的选择要根据需要进行,不同染色剂对细胞的染色效果不同。
5.制备完成后要注意保存,避免受潮和污染。
总之,血涂片的制备是一项细致的工作,需要严格按照步骤进行操作,才能得到准确的检查结果。
希望本文能对大家有所帮助。
实验二、血涂片的制备和血细胞的观察目的要求1.掌握血涂片的的制备方法2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态基本原理涂片技术是制备血液样品最常用的技术。
将血液样品制成单层细胞的涂片标本,染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。
实验用品1。
器材:医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片;2。
试剂:Wright’s染液:Wright’s色素粉末0.1g,溶于60 ml甲醇.方法与步骤1.采血采血前用70%酒精棉球消毒人的指腹或耳垂,干后用采血针刺破指腹或耳垂的皮肤;动物采血时先将耳部剪毛,酒精消毒后,刺破动物耳部皮肤,挤去第一滴血不要(因含单核白细胞较多)。
2.涂片挤出第二滴血置于载玻片的一端,再取另一张边缘光滑的载玻片,斜置于血滴的前缘,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿玻片端展开成线状,两玻片的角度以45°为宜(角度过大血膜较厚,角度小则血膜薄),轻轻将载玻片向前推进,即涂成血液薄膜(图2—2).推进时速度要一致,否则血膜成波浪形,厚薄不匀,初学者可把玻片放在桌上操作.3.染色待涂片在空气中完全干燥后,滴加数滴Wright’s染液盖满血膜为止,染色1~3 min。
然后滴加等量的缓冲液(pH6.4)或蒸馏水,使其与染液均匀混合,静置2~5 min。
用蒸馏水冲去染液,吸水纸吸干。
4.镜检显微镜观察可见人红细胞为凹圆盘形,无核,淡红色,缘部分染色较深,中心较浅,直径7-8微米。
白细胞数目少,为圆形。
颗粒白细胞(1)嗜中性颗粒白细胞:体积略大于红细胞,细胞核被染成紫色分叶状,可分1-5叶,直径10-12微米;(2)嗜酸性颗粒白细胞:略大于嗜中性白细胞,细胞核染成紫色,通常为2叶,胞质充满嗜酸性大圆颗粒,被染成鲜红色,直径10-15微米;(3)嗜碱性颗粒白细胞:体积略小于嗜酸性白细胞,细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒,颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少,核1—2叶,染成淡蓝色,直径10—11微米.无颗粒白细胞(1)淋巴细胞:可观察到中、小型两种.小淋巴细胞与红细胞大小相似,圆形,核致密,染成深紫色.周围仅一薄层嗜碱性染成淡蓝的细胞质。
血涂片的制作流程
血涂片是一种常见的临床检查方法,它可以通过放大视野,观察患者血液中的细胞形态和数量,帮助医生判断病情。
下面是血涂片的制作流程。
1. 患者采血:医生使用一根细针在患者的手臂、腿或者其他部位抽取一定量的血液。
采血时需要注意卫生,以避免感染。
2. 血液制样:将采集到的血液滴在玻璃片上,用另一张玻璃片将其挤压成一条长条状。
然后用力拉开两个玻璃片,使血液涂匀在玻璃片上。
制样时需注意控制力度和速度,以避免影响细胞形态。
3. 固定处理:将加工好的血涂片放入甲醛或其他固定液中,使细胞保持原状。
4. 上色:将血涂片浸泡在甲苯染料中,使细胞染色。
染色时要注意温度和时间的控制,以避免过度染色。
5. 脱水:将染色后的血涂片浸泡在乙醇中,使其脱去多余的染料。
6. 封片:将血涂片放在玻璃片上,涂上一层透明胶片,使其不受外界污染和损害。
通过以上步骤,制作好的血涂片可以在显微镜下进行观察和分析。
这种方法简单易行,不仅可以帮助医生诊断疾病,还可以提高患者的治疗效果。
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血片骨髓片制备一、准备工作:(一)清洁玻片:玻片须边缘光滑,十分清洁干燥,不带有油质,新玻片要先浸在清洁液(重铬酸钾2份,硫酸3份,水25份)内,除去游离碱质(否则染色偏碱,不适于观察),用自来水冲洗,再浸在70%酒精内,用时取出,并在火焰高处烘干。
旧的玻片要先用肥皂水煮10余分钟后,再用温水冲洗干净。
边缘玻碎、玻面有划痕的不能再用。
因手上带有油渍,在取用玻片时只可用两手指挟住玻片的两边,不可触及玻面。
(二)推片:推片推端要光滑(常用凹玻片做推片)并将其中锐角用镊子掰掉lmm左右(既宽度较载片窄2~3mm),在油石上平磨光滑。
因异常细胞如瘤细胞等,体积大比重轻,只在涂片边缘尾端才易找到,如涂膜宽至边缘,容易漏诊。
二、制片方法:三、注意事项:(一)玻片:玻片洁净,手指不能触及玻片面,将玻片一张一张地摆开,准备5张以上。
(二)推片:如置于载片上的血滴液或骨髓液滴较小,应推得较慢,且成<30°角时涂片较薄;如血滴或骨髓滴较大,应推得较快,且成>30°角时涂片较厚。
推时要注意用力均匀,动作不快不慢,不可复推。
(三)涂片:一张好的涂片应该厚薄均匀,分头、体、尾三部,尾部呈弧形,上下两边整齐(最好留出1~2mm的空隙)。
于显微镜下观察时,各类有核细胞分布均匀,红细胞互下重叠,而又不太分散者,为最佳涂片。
(四)涂片张数:抽出骨髓后应迅速涂片5张以上,涂片应薄而匀。
同时涂血片2~5张作为对照用和细胞化学染色等。
(五)染色:髓片染色时,先染2张,方法基本与血片染色相同,但染色液应稍淡,时间应稍长些。
其余的涂片留做细胞化学染色用。
(六)晾干涂片:涂好骨髓片后,应立即拿起标本,在空气中来回摆动,使之快干,以免细胞皱缩而形态变异,但不能在火焰上烘烤。
(七)骨髓液不宜用抗凝剂:尤其是双草酸盐抗凝剂易使细胞发生自溶现象,使核致密、变形、细胞内出现草酸盐结晶等。
必要时可用肝素抗凝。
(八)死后涂片:死亡后半小时内可采取骨髓液制作涂片,此时细胞已有改变,但不影响诊断。
血涂片及骨髓涂片的制作与读片潘志强2006-3-30实验准备一.器材:载玻片:每只动物一块盖玻片:每只动物一块滴管:4个橡皮吸头:4个中号镊子:4把大剪刀:4把眼科镊:4把玻璃棒:4根烧杯:1000 ml,2个量筒:100ml、500 ml、1000 ml各一蜡笔棕色小口瓶碾钵载玻片处理:一般将载玻片先用洗衣粉水溶液煮沸20分钟,用流水冲洗,再经清洁液浸泡过夜,用流水反复冲洗,最后入95%酒精浸泡约1小时。
取出,以洁净布巾夹持玻片边缘擦干备用。
二.试剂:瑞氏染液240ml瑞氏染料粉剂0.1g纯甲醇(AR)60ml将粉剂放入洁净干燥碾钵内,先加少量甲醇研磨使染料溶解,然后将已溶解的染料倒入洁净的棕色玻璃瓶内,剩下未溶解的再加入少量甲醇研磨,如此反复,直至染料完全溶解为止。
新配制的染液需密封保存,室温放置1周后才能使用。
染料存放越久,染色效果越好。
磷酸盐缓冲液1%KH2PO4 30ml1%Na2HPO4 20ml加蒸馏水至800 ml,调PH值到6.5~7.0,定容至1000ml。
甲醇鸡蛋清:蒸馏水与鸡蛋清按1/1的比例稀释。
中性树胶:如果中性树胶过于粘稠,可将中性树胶与二甲苯按7/3的比例稀释。
二甲苯实验步骤一.涂片(一)血液涂片的制作(1)需载玻片2张,分别称为玻片1和玻片2(推片)。
(2)用玻片1一端接约3mm直径的血滴,将此玻片1保持水平。
(3)取另一边缘平整的载玻片2(推片),将其前端放在血滴前,与片1保持30°角并稍向后移与血滴接触,即见血液沿片2(推片)下缘散开,使血液展开并充满整个推片的宽度。
(4)立刻将推片与载玻片呈30°角,边轻压推片边将血液按下图的箭头方向推动涂抹,至血液铺完血膜为止。
(5)挥动片1使血膜吹干,用蜡笔将血膜边缘圈画备染色。
(6)每只动物涂片一张。
(7)一张良好的血片,要求厚薄适宜,头、体、尾分明。
(8)置30min~1hr后较利于观察红细胞的形态。