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常见出血实验模型的建立方法出血性疾病是临床常见病和多发病。
选择、建立合适的出血实验模型是研究出血性疾病和止血药物的重要手段。
探索和研究出血模型的建立方法对于止血药物的筛选和药效学评价等都具有重要意义。
近年来,许多学者将致损因素和中西医病因结合起来,应用各自设计的动物模型对止血药物及其作用机制进行了大量的实验研究,其中涉及到脑、眼、肺、胃、胰腺和子宫等常见出血部位。
现将不同部位常见出血动物模型建立方法在国内的研究进展介绍如下。
1 脑出血模型建立稳定、可重复、贴近人类的脑出血(ICH)模型是实验及临床研究的关键。
目前常用的ICH模型主要有脑内注入自体血模型、胶原酶诱导ICH 模型、自发性ICH 模型和微气囊植入ICH 模型。
实验动物常选用猪和大鼠,有以下几点原因:①猪在解剖、组织、生理、营养代谢等方面与人类极为接近,脑容量较啮齿类动物大20~30倍;②大鼠脑血管解剖及生理接近人类。
相关实验资料如生理、生化、药理、形态等较多,便于比较研究,大鼠价廉,且易繁殖获得纯种动物,利于实验结果的一致性。
曾锦旗等用颅内直接注血法建立大鼠出血性中风中经络模型以及动脉粥样硬化性家兔出血性中风中经络模型。
结果出血性中风大鼠出现明显血肿,组织病理学改变与人类出血性中风中经络相似。
兔脑出血模型建立在动脉粥样硬化的基础上,更接近于临床。
戴如飞等通过立体定向术向大鼠脑内注入一定量的自体血建立脑出血模型,成功率高(93.3%),方法简便,与临床脑出血相似。
研究者认为该模型适合研究脑实质出血的自然过程、病理形态学特点及药物疗效观察。
于海洲等在实验研究中发现家兔在造影后经常死亡,或出现昏迷、偏瘫、血尿等并发症,对实验结果存在一定的影响。
为此改进了以往经颈总动脉或股动脉插管至主动脉弓的造影方法,参照临床应用的经肱动脉穿刺逆行椎基底动脉造影方法,采用22号套管针穿刺腋动脉法行基底动脉造影,较好地解决兔模型造影死亡率高的问题。
建立蛛网膜下腔出血模型一般采用两种方式:一是将自体动脉血直接注入蛛网膜下腔;二是刺破颈内动脉颅内段某一部位,使血液自动流入蛛网膜下腔。
硫代乙酰胺诱导大鼠急性肝性脑病模型建立的用药时间研究谭琳玲;潘锦瑶;郑德俊;马军;宋雨鸿【摘要】目的：通过硫代乙酰胺（TAA，300 mg·kg-1·d-1）不同用药时间诱导A型肝性脑病，比较大鼠的行为学、生物化学以及组织学改变，探讨造模最适时间。
方法将大鼠分为A、B、C、D四组，其中A组为正常对照组；B、C、D三组用TAA（300 mg·kg-1·d-1）分别连续灌胃2 d、3 d、4 d，A组用相等量生理盐水灌胃4 d。
比较各组大鼠行为学变化、脑功能评分、AHE的诱导率和致死率，并分析各组给药结束24 h后血氨、ALT、AST、TBIL的差异。
结果 C、D组比B组大鼠脑功能评分高，差异有统计学意义（P<0.0083）；C、D组比B组诱导率高（P<0.0083），而D组比B、C组的大鼠致死率高，差异有统计学意义（P<0.0083）；C、D组血氨及ALT、AST、TBIL肝功能指标比B组高，差异有统计学意义（P<0.0083）；C、D组TAA用药后肝组织学观察炎症浸润、坏死、纤维化等损害最明显。
结论300 mg·kg-1·d-1的TAA连续灌胃3d，行为学改变显著，致死率较低，血氨较高，肝功能损害明显，为TAA诱导大鼠急性肝性脑病适宜时间。
%Objective To explore the appropriate medication time of inducing acute hepatic en-cephalopathy of rats by different medication time of thioacetamide (TAA, 300 mg·kg-1·d-1) to change behav-ioral, biochemical and histological status. Methods The animals were categorized in 4 groups(A, B, C, D)and A group was normal control group. Gastric lavage was performed with TAA (300 mg·kg-1·d-1) for two days, three days and four days in group B, C, D respectively. Control group was treated with equal amount of physio-logical saline for four days. The behavior changes, brain function score, AHE induced morbidity andmortality were compared, and the differences of ammonia, ALT, AST, TBIL in each group were analyzed 24 hours after the end of administration. Result The grading scores of brain function in C and D groups were higher than in B group (P<0.0083). The induction rate of C and D groups was higher than that of B group (P<0.0083), while the death rate of D group was significantly higher than B, C groups (P<0.0083). The level of ammonia, ALT, AST, TBIL in C and D groups was higher than in B group (P<0.0083). Histological findings showed that C and D groups were better to induce inflammation, necrosis and fibrosis in the liver of AHE animals. Conclu-sion Gastric gavage with TAA(300 mg·kg-1·d-1) for 3 days was the appropriate medication time to induce AHE.【期刊名称】《现代消化及介入诊疗》【年(卷),期】2013(000)006【总页数】5页(P344-348)【关键词】肝性脑病;急性肝性脑病;硫代乙酰胺;大鼠【作者】谭琳玲;潘锦瑶;郑德俊;马军;宋雨鸿【作者单位】510000 广州医科大学附属广州市第一人民医院;510000 广州医科大学附属广州市第一人民医院;510000 广州医科大学附属广州市第一人民医院;510000 广州医科大学附属广州市第一人民医院;510000 广州医科大学附属广州市第一人民医院【正文语种】中文肝性脑病（hepatic encephalopathy，HE）是由急性肝功能衰竭（acute liver failure，ALF）、不伴有肝脏细胞学疾病的门体静脉分流旁路疾病、肝硬化、以及门脉高压或门体分流术引起的代谢紊乱性中枢神经系统病变[1]。
实验性肝硬化大鼠模型中一氧化氮和肝功能的检测摘要:目的：探讨一氧化氮（NO）在实验性肝硬化内毒素血症大鼠中的作用。
方法：40只健康SD雄性大鼠，随机分为:①正常+LPS组(对照组);②肝硬化组(TAA组);③肝硬化+LPS组(TAA+LPS组);④肝硬化+LPS+AG组(氨基胍组)。
用硫代乙酰胺(TAA)诱导肝硬化模型时间共计10周,对照组自由饮清水。
于模型造成后,各组动物经腹主动脉穿刺采血观察丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基酸转移酶(AST)、一氧化氮(NO)的浓度。
结果：TAA组、AG组、TAA+LPS组动物血浆内NO水平依次升高,且各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。
结论：一氧化氮参与了肝硬化内毒素血症所致的肝损伤,但它未起到保护作用,与内毒素对机体的损伤有关。
关键词：一氧化氮；氨基胍；肝硬化内毒素血症Detection of nitric oxide and liver function in rat model ofexperimental cirrhosisZhang Ping Zhang Aiyun Jiao Yun Li Yang (correspondence author)Department of Infectious Diseases, General Hospital of Ningxia Medical University, Yinchuan, Ningxia 750004 2 Department of Infection, People's Hospital of Ningxia Autonomous Region, Yinchuan, Ningxia750004Abstract: objective: to investigate the role of nitric oxide (NO) in rats with endotoxemia in experimental cirrhosis. Methods :40 healthy SD male rats, randomly pided into :1 normal LPS group (control group); Cirrhosis group (TAA group); Liver cirrhosis LPS group (TAA LPS group); Cirrhosis LPS AG group (aminoguanidine group). Cirrhosisinduced by thioacetamide (TAA) for a total of 10 weeks, The control group was free to drink clear water. After the model, Theconcentrations of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and nitric oxide (NO) were observed in all groups. Results: The levels of plasma NO in TAA group, AG group, And the difference between each group was statistically significant (P<0.05). Conclusion: Nitric oxide is involved in liver injury caused by endotoxemia in liver cirrhosis, But it's not protective, Related toendotoxin damage to the body.Keywords: nitric oxide; aminoguanidine; endotoxemia in cirrhosis1987年发现血管内皮细胞舒张因子的本质是一氧化氮(NO)以来, 已知多种细胞如内皮细胞、巨噬细胞、神经细胞、中性粒细胞、肝巨噬细胞、肝细胞等均可以精氨酸为底物合成NO。
硫代乙酰胺诱导的小鼠肝内胆管癌模型特点研究张玉;梅琼;沈玉先【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2024(40)5【摘要】目的建立硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导的小鼠肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)模型并探讨该模型的特点及形成机制,为ICC的病理机制和治疗药物的研究提供实验基础。
方法C57BL/6J小鼠分为正常对照组和TAA组,正常对照组小鼠饮用灭菌水,模型组小鼠饮用600 mg·L^(-1)的TAA溶液,连续饮用32周。
眼球取血,检测血清中ALT、AST、DBIL和TBIL的水平;观察两组小鼠肝脏形态;HE、天狼猩红、Masson和普鲁士蓝染色观察肝脏组织病理改变;免疫组化检测CK7、CK19、Ki67、CD68、TNF-α和α-SMA的表达水平;RT-qPCR和Western blot检测ICC相关标志物mRNA和蛋白的水平;免疫荧光双标记检测肝脏组织中HNF4α+CK19+双阳性细胞。
结果与正常对照组比较,TAA组小鼠肝脏表面呈细颗粒状、质硬,肝内呈肿块性病变;病理检查结果显示,肝组织有炎症细胞浸润,肿瘤细胞排列成管状,肝组织有明显的纤维化;血清中ALT、AST、DBIL和TBIL水平升高;肝脏组织中ICC标志物CK7、CK19及细胞增殖标志物Ki67表达上调;免疫细胞标志分子CD68和TNF-α表达增多,肝星状细胞活化标志物α-SMA的阳性染色增多;肝组织中出现HNF4α+CK19+双表型细胞。
结论TAA可用于诱导小鼠ICC模型,该模型具有炎症免疫细胞浸润、纤维化及ICC分子标志物增高等特点,这与人类的ICC非常相似,可用于评价内源性分子和外源性药物对ICC作用的研究。
【总页数】7页(P992-998)【作者】张玉;梅琼;沈玉先【作者单位】安徽医科大学基础医学院药理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R-332;R322.47;R363-332;R364.5;R735.8【相关文献】1.硫代乙酰胺诱导的A型肝性脑病小鼠焦虑样反应观察2.硫代乙酰胺诱导大鼠急性肝性脑病模型建立的用药时间研究3.硫代乙酰胺诱导肝硬变门脉高压大鼠肝组织一氧化氮、透明质酸和CD44水平变化实验研究4.益肾健脾利湿方对乙硫氨酸诱导的非酒精性脂肪肝小鼠的保护作用5.根皮素对硫代乙酰胺诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
前沿讲座肝星状细胞在纤维形成和纤维化逆转中的作用Tatiana Kisseleva，David A Brenner美国，纽约，哥伦比亚大学，药学系摘要肝纤维化的发生可由多种慢性疾病引起。
肝脏损伤诱导胶原蛋白生成细胞的活化以及细胞外基质蛋白的过量沉积。
这一过程由多种细胞共同配合完成。
肝细胞的凋亡和炎性细胞激发纤维原性和炎症原性细胞因子的分泌，如转化生长因子-¦Â1，血管紧张素Ⅱ，瘦素等，并依次活化作为Ⅰ型胶原蛋白主要来源的肝星状细胞。
本文旨在综述肝纤维化发病机理的最新研究进展。
关键词：Ⅰ型胶原蛋白，肝星状细胞，肝纤维化引言肝纤维化是多种肝脏疾病的归宿，以细胞外基质（ECM）蛋白，尤其是Ⅰ型胶原蛋白的过量沉积为特征。
其发生由肝细胞损伤，炎性细胞聚集，胶原蛋白生成细胞活化等一连串事件引起。
肝星状细胞（HSC）是Ⅰ型胶原蛋白的主要来源，在未受损伤的肝脏中维持休眠状态，在损伤应激时便活化为生成胶原的成肌纤维细胞。
除HSC外的其它细胞也参与胶原蛋白生成。
也就是说，来源于小血管的成肌纤维细胞在损伤应答时迅速增生，激发胶原蛋白合成。
此外，近期有一些研究指出骨髓来源的成肌纤维细胞和纤维细胞对在肝纤维化进程中ECM的沉积同样发挥作用。
肝脏损伤引起肝细胞与非实质细胞之间复杂的相互作用。
肝细胞损害在肝纤维化发病进程中发挥激发的作用。
凋亡的肝细胞释放活性氧簇（ROS）和细胞因子，从而引发炎性细胞（淋巴细胞和巨噬细胞）的聚集；并释放促进HSC活化和胶原蛋白沉积的可溶性因子（肿瘤坏死因子¦Á[TNF-¦Á]、成纤维细胞生长因子[FGF]）。
接着，活化的HSC分泌炎症原性细胞因子，上调粘附分子，进一步加速炎性细胞聚集。
同时，肝原性巨噬细胞（Kupffer细胞）不仅分泌ROS，还产生纤维原性细胞因子（转化生长因子[TGF]-¦Â1、TNF-¦Á），从而激活HSC和白细胞外溢。
消化系统疾病动物模型〔一〕胃肠疾病动物模型1、急性胃炎动物模型〔1〕酸制剂诱发急性胃炎模型：Wistar大鼠，雄性，300g，大鼠禁食24h，在清醒状态下，用下述试剂或物质灌胃：①水杨酸制剂〔如20mmol／L阿司匹林或水杨酸溶液〕按100mg／kg体重灌胃；②2ml10mmol／L的醋酸或2ml不同浓度的盐酸〔1、10、100mmol／L〕；③2ml同种动物胆汁或2mmol／L的牛磺胆酸；④2ml15％的乙醇。
4h 后处死动物，剖检可见胃内发生急性弥漫性炎症改变。
胃粘膜外表有浅表腐败、出血，粘膜层内见中性粒细胞浸润。
〔2〕胆汁反流性胃炎模型：碱性肠液倒流入胃，刺激胃粘膜可引起炎症，即胆汁反流性胃炎。
常见于原发性或继发性幽门功能紊乱或胃切除手术后。
本法取上部小肠的碱性肠液注入已结扎幽门的同种大鼠胃内，使之对胃粘膜产生持续刺激，形成胃炎。
动物选取雄性Wistar大鼠，体重180～220g,制备上部小肠液，向胃内注入小肠液，2 ml/只〔正常对照组注入2 ml生理盐水〕。
缝合腹壁，腹腔注射阿托品5 mg/kg体重，以抑制胃液分泌，利于胃粘膜损伤模型的形成。
处死大鼠，开腹，结扎贲门，取出胃，沿胃大弯剪开。
用滤纸吸干外表水分，立即称量胃重，以胃湿重/体重之比〔胃系数〕表示胃水肿程度。
肉眼观察并计数整个胃粘膜出血点数，作为损伤指数。
模型组动物胃系数和损伤指数明显增加，肉眼观察模型组胃粘膜充血、水肿，皱襞减少，颜色暗红，并有大量散在出血点。
2、慢性胃炎动物模型〔1〕大鼠慢性萎缩性胃炎模型酗酒、用药不当、饮食习惯不良、幽门螺杆菌感染、自身免疫等是此病的主要病因。
组织病理学是评价造模成功的最主要指标，主要观察和测量胃粘膜厚度、粘膜肌层厚度、腺体数量、壁细胞数量、固有层炎细胞浸润程度和肠化生发生率等。
综合法一：胆汁〔去氧胆酸钠〕+热水+主动免疫综合法二：去氧胆酸钠+热糊+主动免疫综合法三：去氧胆酸钠+酒精+氨水+吲哚美锌3、动物胃粘膜肠上皮化生模型〔1〕X线胃部分照射诱发胃粘膜肠化生模型：选用5～8周龄的Wistar 或JCL/SD大鼠。
硫代乙酰胺诱导大鼠持久性肝纤维化模型的制备薛改;刘建芳;闫成;张庆霞;郑丽;侯艳宁【期刊名称】《世界华人消化杂志》【年(卷),期】2015(0)12【摘要】目的:用硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)灌胃法诱导大鼠形成肝纤维化,建立一种稳定持久实用的大鼠肝纤维化模型.方法:将♂SD大鼠随机分为正常组和模型组,模型组采用质量浓度为3%的TAA对SD大鼠进行隔天灌胃,灌胃量为160 mg/kg体质量[灌胃体积(m L)为体质量(g)/187.5];正常组采用溶剂蒸馏水代替TAA灌胃.灌胃6 w k后处死大鼠,采集血清和肝组织,血清分别进行肝功能(血氨、碱性磷酸酶、总胆红素、白蛋白/球蛋白)和细胞因子[肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、肝素结合表皮生长因子(heparin-binding epidermal growth factor,HB-EGF)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、a-平滑肌抗体(a-smooth muscle antibody,a-SMA)]水平检测,肝组织分别进行HE和Masson染色,并对纤维化程度进行病理分级.留取部分成模大鼠,停止灌服TAA 11 wk后,取肝组织做HE染色,观察肝纤维化自愈情况.结果:TAA灌胃6 wk后,大鼠肝纤维化形成率为100%.与对照组相比,模型组大鼠肝功能变化显著,其中血氨、碱性磷酸酶和总胆红素浓度显著升高,白蛋白/球蛋白比值显著降低(P<0.01);血清中细胞因子HGF 与HBEGF水平显著降低,IL-6、a-SMA水平显著升高(P<0.01).停用TAA 11 wk 后,与11 wk前相比,HE染色显示肝组织纤维化程度,未见显著变化.结论:TAA灌胃6 wk可以形成稳定和持久的肝纤维化,肝纤维化形成率高且速度快,是一种简便实用的肝纤维化模型制备方法.【总页数】6页(P1937-1942)【关键词】肝纤维化;肝硬化;硫代乙酰胺;灌胃法【作者】薛改;刘建芳;闫成;张庆霞;郑丽;侯艳宁【作者单位】白求恩国际和平医院药剂科;河北医科大学研究生学院【正文语种】中文【中图分类】R575【相关文献】1.硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化模型合并肾脏病变 [J], 秦冬梅;李静;陈文;王新春2.硫代乙酰胺(TAA)诱导的肝硬化大鼠模型中骨髓间充质干细胞治疗肝纤维化的效果 [J], 刘凯3.苦参碱对硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠的影响 [J], 覃仁武; 邱绍勤; 陈赛专4.水飞蓟宾对硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad3信号通路的调节作用 [J], 李燕菊;于鲁海;冯杰;韩忠诚;赵婷;李红健;马俊鹏;孙力;玛尔江·巴哈提别克;王燕5.硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化模型的制备 [J], 马雪根;王秀文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
