生物：3.2《月季的花药培养》(新人教版选修1 )(精品课件)

一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状 体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。
如果花药开裂释放出胚状体， 则一个花药内就会产生大量幼小植 株，必须在花药开裂后尽快将幼小 植株分开，分别移植到新的培养基 上，否则这些植株将很难分开。
在花药培养中，特别是通过 愈伤组织形成的花粉植株，常常会 出现染色体倍性的变化。（主要原 因是营养核和生殖核融合造成的。）
培养基的组成
小麦中为N6，马铃薯、月季中为MS，油菜中为B5培养基
实验操作
一、材料的选取
二、材料的消毒
三、接种和培养
（一）材料的选取
选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发 育期。 最常用的方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不 易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝 黑色。
植物组织培养技术与花药培养技术的异同点
项目 植物组织培养技术 相同点 离体的植物组织经脱分化 形成愈伤组织，再分化成 丛芽，诱导出根，然后进 行移栽。 不同点 外植体为体细胞，染色体 数无需加倍。
花药培养技术
取材为花药，培养 的为单倍体幼苗， 植株弱小，高度不 育，必须用秋水仙 素处理，使染色体 加倍，恢复正常植 株的染色体数，而 且为纯种。
（三）接种和培养 灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养
基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产 生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不 利于愈伤组织或胚状体的形成。
通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株 形成后才需要光照。
产生花粉植株的两条途径
分化 花粉 脱 分 化 胚状体 从芽 诱 导 生根 移栽
花粉
再分 愈伤组织 化 从芽
人工种子
又称人造种子、合成种子或无性种子， 就是将组织培养所产生的体细胞胚、 不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁 殖体，包裹在能提供营养的胶囊 （人造胚乳）里，再在外面包上一 层具有保护功能和防止机械损伤的 外膜（人造种皮），造成一种类似 种子的结构，能在一定的条件下萌 发生长，形成完整植株。
影响花药培养的因素 一、材料的选择：
花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般，月季的花药培养 时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说， 在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。 为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。
（二）材料的消毒
2、无菌水清洗
1、花蕾用V/V为70%的酒精浸
4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为 1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
5、无菌水冲洗3~5次
用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或 颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒 即可。
月季的花药培养
基础知识：
（一）、被子植物的花粉发育 （二）、产生花粉植株的两条途径 （三）、影响花药培养的因素
被子植物的花粉发育
花丝
雄蕊：
花药：囊状结构，内有很多花粉粒
花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花 粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期
注意：
①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和 生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞 进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟 时，含有一个营养核和两个精子。 ③两个精子和一个营养核的基因型相同。 减分 有分 ④ 4个小孢子 1花粉母细胞 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有分 8个精子