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化学分析计量CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGE第29卷，第4期2020年7月V ol. 29，No. 4Jul. 202067doi ：10.3969／j.issn.1008–6145.2020.04.015液相色谱–质谱联用法同时测定大鼠血浆中色氨酸和犬尿氨酸周资凯1，2，郑柳2，鲍益帆2，杨丽2，章志远2（1.南昌大学环境资源与化工学院，南昌 330031； 2.台州市台环环境检测科技有限公司，浙江台州 318020）摘要 建立液相色谱–质谱联用法同时测定大鼠血浆中色氨酸和犬尿氨酸的方法。
先利用活性碳吸附去除复杂基质，再以高氯酸、甲酸酸化沉淀，简单快速去除大量蛋白，然后以液相色谱–质谱联用法进行测定。
总分析时间小于4.00 min ，色氨酸和犬尿氨酸的质量浓度在0.500~1.000×104 μg ／L 范围内与色谱峰面积线性关系良好，检出限分别为0.147，0.148 μg ／L ，测定结果的相对标准偏差不大于4.7%（n =5），方样品加标回收率为99.2%～102.0%。
样品经–80℃冻融循环和室温放置120 h 内稳定性良好。
该方法优化了净化提纯前处理方式，与已报道的方法相比更加灵敏，绿色环保，可保持样本稳定，为需分析高通量生物基质样本的药物动力学相关工作提供一参考。
关键词 色氨酸；犬尿氨酸；代谢途径；液相色谱–质谱联用法；活性碳中图分类号：O657 文献标识码：A 文章编号：1008–6145(2020)04–0067–05Determination of tryptophan and kynurenine in rat plasma by liquid chromatography-mass spectrometryZHOU Zikai 1，2，ZHENG Liu 2，BAO Yifan 2，YANG Li 2，ZHANG Zhiyuan 2(1. School of resources environmental & chemical engineering, Nanchang University, Nanchang 330031, China ；2. Taizhou TaiHuan Environmental detection technology Co., Ltd., Taizhou 318020, China ）Abstract A method for simultaneous determination of tryptophan and kynurenine in rat plasma by liquid chromatography mass spectrometry was established. Firstly, the complex matrix was removed by activated carbon adsorption, then precipitated by perchloric acid and formic acid, then a large number of proteins were simply and rapidly removed, and then determined by liquid chromatography–mass spectrometry. The total analysis time was less than 4.00 min. The mass concentration of tryptophan and kynurenine was in the range of 0.500–1.000×104 μg ／L, which had a good linear relationship with the peak area, and the detection limits were 0.147, 0.148 μg ／L, respectively. The relative standard deviation was not more than 4.7% (n =5), the absolute recoveries were 99.2%–102.0%, The sample had good stability in –80℃ freeze–thaw cycle and room temperature for 120 h. Compared with the reported methods, this method is more sensitive, green and environmental friendly, and can keep the sample stable ，which provides a reference for the pharmacokinetics related to the analysis of a large number of biological matrix samples.Keywords tryptophan; kynurenine; metabolic pathway; liquid chromatography–mass spectrometry; activated charcoal通讯作者 周资凯，硕士，工程师，从事环境化学、分析化学、药物化学和纯化分离技术工作，E–mail:*****************收稿日期 2020–04–13引用格式 周资凯，郑柳，鲍益帆，等.液相色谱–质谱联用法同时测定大鼠血浆中色氨酸和犬尿氨酸［J ］.化学分析计量，2020，29(4): 67–71.ZHOU Z K ，ZHENG L ，BAO Y F, et al. Determination of tryptophan and kynurenine in rat plasma by liquid chromatography-mass spectrometry ［J ］. Chemical analysis and meterage ，2020，29(4): 67–71.人体中的色氨酸和犬尿氨酸代谢途径已被证实与许多疾病和失调有相关联性，如人类免疫缺陷病毒的感染、亨廷顿病、阿尔茨海默病和精神分裂症［1–2］。
高效液相色谱技术在氨基酸分析中的应用氨基酸是构成蛋白质的基本组成单元，其在生物体内具有重要的生理功能。
因此，对氨基酸的分析研究十分重要。
高效液相色谱技术（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）是一种现代化的色谱分析技术，通过对样品中的化合物进行分离和定量分析，广泛应用于各个领域。
在氨基酸分析中，HPLC技术的应用发挥了重要作用。
首先，HPLC技术在氨基酸分析中具有较高的灵敏度和分辨率。
通过选用合适的色谱柱和优化分析条件，HPLC可以对样品中的氨基酸进行有效的分离和检测。
同时，HPLC技术还具有较高的灵敏度，能够实现对微量氨基酸的定量分析。
这使得HPLC技术能够满足对氨基酸分析中高精度和高灵敏度的要求。
其次，HPLC技术在氨基酸分析中具有较强的选择性。
通过选择不同的色谱柱、流动相和检测方法等，可以实现对不同氨基酸的选择性分离。
这使得HPLC技术能够同时对多个氨基酸进行分析，为氨基酸组分的定量和鉴定提供了可靠的手段。
此外，HPLC技术还可以与其他检测方法（如质谱联用）相结合，进一步提高分析的选择性和准确性。
第三，HPLC技术在氨基酸分析中具有较高的分析效率和快速性。
相比于传统的氨基酸分析方法，HPLC技术具有分析速度快、样品处理简单等优点。
它可以通过自动进样系统实现对多个样品的同时分析，大大提高了分析效率。
同时，HPLC技术还可以借助软件进行数据处理和分析，进一步加快氨基酸的分析速度和结果解释。
最后，HPLC技术在氨基酸分析中还具有较强的应用前景和广泛的应用领域。
随着生物学、医学、化学等领域的发展，对氨基酸的研究需求越来越大。
HPLC技术作为一种灵活、高效的分析方法，与其他分析技术相结合，有望在氨基酸分析中发挥更大的作用。
例如，在食品行业中，HPLC技术可用于分析和监测食品中的氨基酸含量，保证食品的质量和安全。
在医学领域，HPLC技术可用于检测人体内的氨基酸水平，对疾病的诊断和治疗提供重要依据。
两种高效液相色谱法测定血清色氨酸的结果比较柳兴其;王清平;唐爱国【期刊名称】《实用预防医学》【年(卷),期】2004()4【摘要】目的比较高效液相色谱 -紫外检测法 (HPLC -UV)与高效液相色谱 -荧光检测法 (HPLC -FLD)测定血清色氨酸的结果 ,了解这两种检测法测定结果之间的相关性。
方法用HPLC -UV和HPLC -FLD同时随机检测 40例临床血清标本的色氨酸含量 ,比较相关性。
用两法对同一混合血清标本各测定血清色氨酸含量 2 0次 ,比较两法精密度。
结果HPLC -UV测定同一份混合血清标本色氨酸含量为( 3 9.85± 1.69) μmol/l(X±S) ,HPLC -FLD测定值为( 4 0 .2 5± 1.0 6) μmol/l。
其浓度差值无显著性意义 (P >0 .0 5 )。
结论两法对 40例临床血清标本色氨酸测定结果一致性好。
【总页数】2页(P693-694)【关键词】氨基酸;高效液相色谱法;紫外检测;荧光检测【作者】柳兴其;王清平;唐爱国【作者单位】中南大学湘雅二医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R-33【相关文献】1.高效液相色谱法快速测定血清中的色氨酸 [J], 张秀玲;于玲;常丽2.高效液相色谱法同时测定血清色氨酸和犬尿氨酸浓度的方法建立及应用 [J], 张晓清;王猛;丁敏3.高效液相色谱法测定孕妇血清中色氨酸及其代谢产物Kynurenine [J], 徐雪梅;夏晓萍4.高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸 [J], 王瑞;唐爱国5.高效液相色谱法测定血清色氨酸 [J], 唐爱国;孟巧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定细胞培养液中色氨酸和犬尿氨酸含量研究
报告
黄文娟;刁娟娟
【期刊名称】《新疆中医药》
【年(卷),期】2015(033)003
【摘要】目的建立色氨酸和犬尿氨酸含量测定的方法.方法采用高效液相色谱-紫1外法同时测定细胞培养液中的色氨酸和犬尿氨酸含量.结果及结论经测定,犬尿氨酸在2.01～31.52mol/L范围内线性关系良好(Y=18.175X-27.361 r=0.998 3),色氨酸在2.44～97.5 1mol/范围内线性关系良好(Y=13.923X-5.3782 r=0.999 5),方法学考察专属性、回收率、精密度、稳定性良好,可用于色氨酸和犬尿氨酸的测定.【总页数】3页(P39-41)
【作者】黄文娟;刁娟娟
【作者单位】新疆医科大学附属中医医院,新疆乌鲁木齐830000;新疆医科大学药学院,新疆乌鲁木齐830011
【正文语种】中文
【相关文献】
1.高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸 [J], 王瑞;唐爱国
2.高效液相色谱法测定体外培养NB4、HL60细胞内及培养液中紫杉醇含量 [J], 梁月琴;董方霆;等
3.LC-MS/MS法测定小鼠肿瘤中犬尿氨酸和色氨酸的含量 [J], 王湛博;刘健;程亚楠;段晓辉;杨勇;尤淋君
4.LC-MS/MS法测定小鼠肿瘤中犬尿氨酸和色氨酸的含量 [J], 王湛博;刘健;程亚楠;段晓辉;杨勇;尤淋君;
5.瘤胃保护性色氨酸饲粮中添加亚叶酸钙对绵羊血浆色氨酸、犬尿氨酸和褪黑素含量的影响 [J], 王根;陈晖;赵芳;高超;赵国栋;李晓斌;马晨;杨开伦
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高效液相色谱——紫外、荧光双检测器同时测定人尿中犬尿氨酸和犬尿喹啉酸赵建幸;罗雪美;詹一鸣;陈波;朱鼎良【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2009(024)009【摘要】目的建立高效液相色谱(HPLC)同时测定人尿中犬尿氨酸(KYN)和犬尿喹啉酸(KYNA)方法.用KYNA/KYN比值评价人体犬尿氨酸氨基转移酶(KAT)活性.方法采用HPLC测定KYN、KYNA,分析柱为安捷伦HC C18反相色谱柱;流动相为10 mmol/L乙酸钠-乙酸缓冲液:7%乙腈=93:7;流速1 mL/min;检测器波长:紫外365 nm,荧光344 am(激发)/398 mm(发射).结果 KYN和KYNA保留时间分别为6.9和11.5 min.水溶液标准与标准加入工作曲线斜率差异无统计学意义(KYN:P=0.406 8;KYNA:P=0.646 2).KYN和KYNA的平均回收率分别为98.74%±7.53%、95.17%±8.17%;稳定性试验的变异系数(CV)分别为3.35%和0.88%;精密度CV分别为2.73%和2.79%;最低检测限分别为0.4和0.2μmol/L.30份健康成年人尿样的KYNA/KYN比值为2.45±1.54.尿中KYNA与KYN含量呈正相关关系(r2=0.375 8,P＜0.001).结论测定方法灵敏、准确、稳定.KYNA/KYN比值评测KAT活性具有简便、实用等特点,可用于相关疾病的临床辅助诊断和基础研究.【总页数】4页(P659-662)【作者】赵建幸;罗雪美;詹一鸣;陈波;朱鼎良【作者单位】上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海市高血压研究所,上海,200025【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.高效液相色谱紫外荧光双检测器测定蔬菜中的克百威 [J], 张燕;闫磊;高文瑞;戴洋洋2.帕金森病患者血清中犬尿氨酸、犬尿喹啉酸及色氨酸的测定及临床意义 [J], 唐亚梅;张付峰;刘勇;常丹丹;任亚萍3.高效液相色谱-荧光检测法同时测定血清中的犬尿氨酸和犬尿喹啉酸 [J], 肖乐东;唐爱国;莫喜明;罗昔波;皮兰敢4.高效液相色谱仪联荧光检测器法测定尿3-甲氧,4-羟基苦杏仁酸 [J], 钟友工;周康;诸骏仁5.犬尿氨酸氨基转移酶和犬尿喹啉酸在自发性高血压大鼠中的变化 [J], 李宁宁;肖冰;张怡;朱鼎良;高平进因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
