√ 色谱柱使用常识

色谱柱使用注意事项如下：
1.避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。

温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。

2.防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。

3.如果仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。

4.应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。

5.如使用柱温控制装置时，应注意在通人流动相后才能升温。

6.一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。

否则反冲会迅速降低柱效。

7.选择使用适宜的流动相，以避免固定相被破坏。

8.避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。

9.及时更换损坏的色谱柱。

10.在使用过程中，要定期检查色谱柱是否正常工作。

如发现柱压升高、峰形变差、分离效果降低等情况，应及时处理。

色谱柱的使用和维护色谱柱是一种用于分离混合物的重要工具，广泛应用于化学分析、环境检测、药物研发等领域。

为了保证色谱柱的正常使用和延长其寿命，以下将介绍色谱柱的使用和维护方法。

一、色谱柱的使用1.色谱柱的激活新购买的色谱柱通常需要进行激活处理，以去除柱内杂质和保证柱的稳定性。

常见的激活方法包括使用最终使用的溶剂/流动相进行洗脱或者使用强极性溶液进行反向激活。

激活后，需用洗脱溶剂或流动相进行平衡。

2.样品的前处理样品的前处理对色谱柱的使用和维护至关重要。

首先，要确保样品的纯度和浓度，以避免对色谱柱产生污染。

其次，对于有机溶剂溶解的样品，最好使用过滤器进行过滤，以防止固体颗粒和杂质进入色谱柱。

3.流动相的选择正确选择和配置流动相对于色谱柱的使用非常重要。

根据需要分离的组分特性，选择合适的流动相性质和组成，并根据需要进行酸碱调节、添加缓冲剂等。

此外，注意保持流动相的流速稳定，并定期更换或再生。

4.检测器的设置根据需要检测的组分，选择合适的检测器并进行适当的设置。

常见的检测器包括紫外-可见吸收光谱仪（UV-Vis）、荧光检测器、质谱仪等。

在使用检测器前，要确保其正常工作并进行校准。

5.流量控制使用色谱仪时，应保持流量的稳定性。

定期检查和校准流量控制器，并调整至适当的设置，以确保色谱柱正常运行。

6.色谱条件的优化根据分析需要，在保证分离效果的前提下，进行色谱条件的优化。

包括优化流速、温度、柱渗透性、梯度洗脱程序等，以提高分离效果和保护色谱柱。

二、色谱柱的维护1.洗脱和平衡每次使用完色谱柱后，应进行洗脱以去除残留的样品和杂质，并用适当的溶剂进行平衡。

洗脱和平衡步骤的操作要轻柔，避免使用高压流动相进行冲洗。

对于一些特殊样品，如蛋白质和多肽，可以使用具有较强亲和性的溶剂进行洗脱和平衡。

2.色谱柱的储存条件当色谱柱暂时不使用或需要长期储存时，应注意以下几点：首先，将色谱柱从设备上拆卸下来，用纯净溶剂充分洗脱并平衡，保证柱内干净；其次，封闭柱两端，避免进入灰尘和空气，可以使用柱塞或盖子进行封闭；最后，将柱放置在干燥、阴凉的地方存放，避免受到阳光直射和高温。

色谱柱基础知识的总结1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论，那什么样的柱子可以反冲，什么不可以。

反冲后是正者用，还是反着用。

具体到各型号柱子不仅是ODS柱，其他如正向柱、氨基柱、离子交换柱等最好都有解释。

答：一般的正相反相柱应该都能反冲，只有两端筛板孔径不对称的柱子不能反冲，不过目前这样的柱子已经比较少见了。

反冲是为了把柱头的污染物冲洗掉，反冲后还是正着用比较好，以免柱子的两头都被污染。

我们一直提倡的是：正向使用，反向冲洗。

2、我在做方法开发的时候,用乙腈和水作为流动相,在调整梯度的时候发现,刚开始用60%乙腈, RT为2.5分钟,调到40%乙腈,RT没有变化,30%也没有变化,一直调到20%的时候,RT突然变到了约13分钟,请问这是什么原因?我用的是离子交柱。

答：离子交换柱的保留时间主要由洗脱液的离子强度和pH决定，你现在讲的比较简单，需要把你的方法说的详细一点才能做具体的分析。

譬如分析物是什么情况，其含有极性电离基团和非极性基团是什么性质？离子交换柱是聚合物基质还是硅胶基质？水相是什么缓冲盐？3、对于一根常用的c18柱，拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护？为什么要这样做？答：新柱活化，实际上是一个平衡的过程，除了用流动相平衡外，有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡，特别是测定分子量比较高的多肽，尤其重要。

因为分子量高的物质分子，扩散速度慢，平衡所需时间也相应较长。

具体平衡方式也很简单，多进几次样品，直到峰面积和保留时间稳定，再进行正式进样测定。

如果要加快平衡时间，把前面用来平衡的进样样品浓度加大，或者不等洗脱完成，连续进样多针。

用待测物对新柱平衡，目的是将硅胶基质填料表面具有非特异性吸附的位点的吸附能力饱和掉。

4、测定多肽，一般采用什么柱子？流动相是乙腈和水，还有微量的TFA。

特别是像类似三肽的短肽，应该怎么选择柱子？答：分子量不高的多肽一般选用常规C18柱就能测定，也有用离子交换柱、水性C18柱和Hilic亲水作用柱的。

液相色谱柱使用注意事项在使用液相色谱柱时，需要注意以下事项以保证柱子的性能和使用寿命。

1.流动相流动相是液相色谱分离的基础，应选择与样品相容、纯度高、稳定性好的流动相。

在使用前，应进行过滤和脱气处理，以避免对柱子造成损害。

2.柱子选择根据不同的样品和分离要求，应选择合适的液相色谱柱。

选择时需要考虑柱子的类型、粒径、孔径、填料等参数。

对于复杂的样品，建议使用具有更强分离能力的反相柱。

3.柱子清洁在使用前，应对液相色谱柱进行清洁，以去除柱子内部的杂质和污染物。

清洁时应使用温和的清洁剂，如甲醇、乙醇等，并避免使用强烈的清洁剂或酸碱溶液。

4.操作温度液相色谱柱应在规定的操作温度下使用。

过高的温度可能导致柱子的性能下降或损坏，而过低的温度则可能导致样品分离效果不佳。

在使用过程中，应密切关注柱温的变化。

5.压力变化压力变化是液相色谱分离的关键参数之一。

在使用过程中，应密切关注压力的变化情况。

若出现压力波动或异常升高，应立即采取措施解决问题，以免对柱子造成损害。

6.流动相流速流动相流速是影响液相色谱分离效果的重要因素之一。

应根据分离要求和样品性质选择合适的流速。

过快的流速可能导致柱子的性能下降或损坏，而过慢的流速则可能导致样品分离效果不佳。

7.样品处理在进样前，应对样品进行处理，以去除杂质和干扰物质。

处理方法包括样品萃取、净化、浓缩等。

处理时应避免对样品造成污染或损失。

8.柱子储存在使用完毕后，应对液相色谱柱进行妥善的储存。

储存时应避免阳光直射、高温、潮湿等不利环境条件。

同时，应定期对柱子进行检查和维护，以保证其性能和使用寿命。

最全的色谱柱使用手册！色谱又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质(样品)与固定相和流淌相之间的作用力(安排、吸附、离子交换等)的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分别。

01柱色谱为向玻璃管中填入固定相，以流淌相溶剂浸润后在上方倒入待分别的溶液，再滴加流淌相，由于待分别物质对固定相的吸附力不同，吸附力大的固着不动或移动缓慢，吸附力小的被流淌相溶剂洗下来随流淌相向下流淌，从而实现分别。

02纸色谱以滤纸条为固定相，在纸条上点上待分别的混合溶液的样点，将纸条下端浸入流淌相溶剂中悬挂，溶剂由于毛细作用沿滤纸条上升，样点中的溶质从而被分别。

03薄层色谱是在玻璃板上涂以固定相涂层，然后点样，下端浸入溶剂，同样自下而上分别。

常用于探究柱色谱试验条件，溶剂和固定相的选择等。

常用固定相有石膏、氧化铝、蔗糖、淀粉等，常用流淌相为水、苯等各种有机溶剂。

影响色谱柱使用寿命的主要因素流淌相因素1.流淌相pH不同基质的填料具有不同的pH适用范围。

常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mgL-1，且在pH1～9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量，考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流淌相pH范围约为1～8。

键合相硅胶填料则由于键合层的屏蔽作用,使填料对流淌相的适应范围大大增加，如现在广泛使用的反相色谱填料C18(十八烷基硅烷键合硅胶)，其pH适用范围可达2～10。

当流淌相pH值超出酸性范围时，键合相易发生水解而流失；当流淌相pH超出碱性范围时，会加速硅胶的溶解而释放出絮状物堵塞柱子，这两种反应均是不行逆反应，特殊是在温度较高（40℃）的环境下，会使柱效快速降低而报废。

2.流淌相变质当前使用最为广泛的是硅基键合相填料，当以水溶液作为流淌相或流淌相中含有肯定浓度的磷酸盐缓冲液时，水溶液中或缓冲盐溶液中会滋生出一些细菌或霉菌，从而堵塞固定相颗粒间的空隙。

特殊是对于多元自动比例混合的高效液相色谱仪来说,水相或缓冲盐相单独存贮，因存放时间较长而简单发生此类问题。

1、色谱柱的使用说明：（1）色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。

在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。

（2）流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。

另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。

当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。

（3）样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。

在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。

2、色谱柱的保存（1）反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。

注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。

（2）长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。

储存的温度最好是室温。

3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。

色谱柱的使用操作规程是色谱柱是色谱分析中非常重要的工具，正确的使用操作规程可以确保色谱柱的寿命和分析结果的准确性。

以下是一份详细的色谱柱使用操作规程，共计1200字。

1. 色谱柱保存和准备1.1 色谱柱的保存：色谱柱通常由玻璃或者金属制成，应当避免与湿气、灰尘以及高温的环境接触。

保存时，应当将色谱柱放置在干燥、清洁且温度适宜的地方。

避免长时间曝光于阳光下。

储存条件的稳定性对于保持色谱柱的性能至关重要。

1.2 色谱柱的检查：在使用色谱柱之前，应当对其进行检查，确保柱身无破损、裂纹或者污染。

同时，应当检查色谱柱的规格和批号是否与实验所需完全匹配。

1.3 色谱柱的条件适应：某些色谱柱在使用之前需要进行条件适应。

一般的做法是，在使用之前进行几个小时的溶剂通过柱操作，以确保色谱柱的平衡状态，并且清除可能影响分析结果的残留物。

2. 连接色谱柱2.1 连接前准备工作：在连接色谱柱之前，应当确保色谱仪的泵和检测器已经打开，工作正常。

同时，应当确保带压装样器、流量计、接头等设备已经准备就绪。

2.2 连接色谱柱：先将附近日期较长的色谱柱拆下来，再将新的色谱柱连接上。

连接时，要注意使用适当的扭力，防止柱子变形或者破裂。

2.3 采用适当的接头：连接色谱柱时，要使用适当的接头和密封件，确保无泄露、无死角，以及良好的稳定性。

3. 柱子的清洗3.1 色谱柱的初始化：在首次使用某个新的色谱柱之前，必须进行初始化。

一般的做法是通过注入溶剂来清洗色谱柱，直到溶剂的出图稳定为止。

3.2 溶剂的选择：在清洗色谱柱时，应选择与待测样品相同的溶剂或者相似的溶剂，以确保能够有效清除之前的样品残留物，并且不影响下一个样品的分析。

3.3 清洗的步骤：一般的清洗步骤包括预洗、洗脱和再平衡。

预洗时，可以使用较强的溶剂，如甲醇或者乙醇，以清除可能附着在色谱柱上的杂质。

洗脱时，可以使用更强的溶剂进行清洗，如乙腈或者丙酮。

再平衡时，可以使用溶剂与待测样品相同的溶剂，以使色谱柱恢复到平衡状态。

色谱柱的使用说明色谱柱是一种在色谱分析中广泛使用的关键设备，它能够通过分离混合物中的组分以及测定它们的相对含量。

不同的色谱柱具有不同的分离机理和特点，因此每种色谱柱在使用前都需要仔细阅读其使用说明书，以了解其正确的使用方法和注意事项。

以下是色谱柱使用说明的一般内容：1.色谱柱的储存：色谱柱在储存期间需要避光、避湿、避高温，以免对其质量产生不良影响。

柱子应垂直存放，避免受到侧面压力。

定期检查柱子上是否有裂纹、损坏或其他异常情况。

2.安装色谱柱：在安装色谱柱前，需要进行适当的准备工作，如用洗涤剂或溶剂清洗色谱柱，以去除表面的杂质。

然后在柱子的接口处使用密封垫圈，确保柱子和接口之间的密封性。

安装时，需要根据仪器的要求和色谱柱的规格调整柱床高度和流速。

安装完成后，检查柱床是否均匀填充。

3.色谱条件的选择：正确选择色谱条件对于得到准确的分析结果至关重要。

色谱柱的选择应根据样品的特性、分离需求和分析目标来确定。

例如，对于非极性化合物的分离，应使用非极性柱；对于极性化合物的分离，则需要使用极性柱。

此外，还需合理选择进样方式、流速、温度等色谱条件，并根据需要进行优化。

4.样品的制备和进样：对于色谱分析之前，样品可能需要经过一系列的预处理步骤，如萃取、浓缩、溶解等。

进样前，需要对样品进行适当的稀释，以避免柱子堵塞或过载。

确保样品进样前是清洁无杂质的，以免污染柱子或影响分析结果。

还需根据样品的特性，选择适当的进样方式，如气相色谱中的气态进样、液相色谱中的静态进样或动态进样等。

5.色谱的运行和操作：在进行色谱分析时，需要根据选择的色谱条件设置好仪器的运行参数，如载气流速、柱温、检测器灵敏度等。

同时，还需注意检测器的基线稳定性、测量范围、线性范围等，以确保准确的定量分析。

在运行过程中，还需注意实验室的环境条件，如温度、湿度等，并及时记录实验过程和结果。

6.色谱柱的维护和保养：为了延长色谱柱的使用寿命和维持准确的分析结果，需要进行定期的维护和保养工作。

色谱柱操作规程
《色谱柱操作规程》
一、使用前准备
1.1 检查色谱柱是否有损坏或污染
1.2 准备好色谱柱需要用到的溶剂和试剂
1.3 准备好色谱仪器和相关设备
二、装柱操作
2.1 检查柱子的填料是否均匀，如有不均匀情况需重新填料2.2 使用正确的柱子连接件连接色谱柱和色谱仪
2.3 用适当的方法装载样品进入色谱柱
2.4 在装载样品之前，进行柱子的平衡操作，以确保实验的准确性
三、流动相操作
3.1 准备好流动相，确保流动相的纯度和稳定性
3.2 用注射器将流动相缓慢地注入色谱柱中，直到柱子完全充满
3.3 确保流动相的压力和流速在正常范围内
四、运行及维护
4.1 启动色谱仪器，设置好运行参数
4.2 监控运行过程中的色谱柱压力和流速
4.3 如果发现异常情况，立即停止运行并检查色谱柱及相关设备
4.4 实验结束后，用适当的方法对色谱柱进行保养和清洗，以
确保下次使用时的准确性和稳定性
五、安全注意事项
5.1 操作过程中要严格遵守化学品的安全操作规程
5.2 避免色谱柱受到外部物质的污染和损坏
5.3 注意色谱柱及相关设备的维护和保养，确保使用安全和稳定性
六、记录和报告
6.1 在操作过程中要及时记录实验数据和观测结果
6.2 对实验结果进行分析和总结，撰写实验报告
6.3 如有必要，将实验结果提交并交流给相关部门或同行
以上即是《色谱柱操作规程》，希望能够对使用色谱柱的实验人员有所帮助。

色谱柱使用管理规程1.引言色谱柱是一种常用于分离和分析样品的设备，使用良好的色谱柱能够提高实验结果的准确性和精确性。

为了保证色谱柱的正常运行和延长其使用寿命，制定色谱柱使用管理规程是非常必要的。

2.色谱柱使用前的准备工作2.1.质检在使用新的色谱柱之前，首先需要进行质检。

检查色谱柱的外观是否正常，是否有损坏或污染。

然后进行准确测量长度和内径，以确保记录准确的柱容。

最后进行背压测试，检查色谱柱是否存在堵塞或压力异常情况。

2.2.管理与标识2.3.储存条件未使用的色谱柱应储存在干燥、低温和避光的环境中，以防止色谱柱受潮、变质或因受热而损坏。

应将色谱柱储存在其原来的包装中，避免与有机溶剂、水或其他化学物质接触。

3.色谱柱的使用3.1.选择合适的色谱柱根据实验需要选择合适的色谱柱。

考虑样品特性、分离要求、工作温度和流动相等因素，选用适合的色谱柱。

同时，在综合考虑性能指标和经济性的基础上，选择质优价廉的色谱柱。

3.2.样品准备在进行色谱柱分析之前，需要对样品进行适当的前处理。

避免样品中存在杂质、固体残留物和颗粒物等可能对色谱柱造成损害的成分。

如果需要，可以通过过滤、稀释、萃取或其他方法预处理样品。

3.3.柱前准备在首次使用色谱柱之前，需要进行柱前准备工作。

这包括填充柱床、进行平衡和去除气泡等步骤。

根据色谱柱的要求和分析方法的要求，执行具体的操作步骤。

3.4.柱后维护在使用色谱柱的过程中，应根据需要进行柱后维护。

如果发现色谱柱的分离效果下降、背压升高或峰形变得异常，应及时执行柱后清洗和再生操作。

在使用过程中，应定期检查色谱柱的状态并记录相关数据。

4.色谱柱的更替色谱柱是一个易损耗的部件，具有一定的使用寿命。

当色谱柱无法达到预期的分离效果或背压过高时，需要进行更替。

更替色谱柱时，应根据实验要求选择新的色谱柱，并进行详细记录。

5.事故处理如果在使用色谱柱的过程中发生意外事故，应第一时间停止实验并采取相应的措施。