COSMOSIL高效液相色谱柱使用说明书一序言二使用注意

高效液相色谱仪使用说明书序言高效液相色谱仪（High-performance liquid chromatography, HPLC）是一种常用的分离技术，广泛应用于药物分析、食品安全监测、环境检测等领域。

本说明书旨在提供关于高效液相色谱仪的基本操作原理、使用方法和注意事项等信息，以帮助用户正确、高效地使用该仪器。

一、仪器概述高效液相色谱仪主要包括进样系统、色谱柱、泵液系统、检测器和数据处理系统等基本组成部分。

1. 进样系统进样系统用于将待测样品引入色谱柱中进行分离。

常见的进样方式包括自动进样器、手动进样器和微量注射器等。

2. 色谱柱色谱柱是分离相和固定相组成的圆柱体，是进行样品分离的关键组件。

用户应根据待测样品的特性选择适当的色谱柱型号和填充物。

3. 泵液系统泵液系统通过输送流动相将样品送入色谱柱中，并提供足够的压力以保持流速和流动相性质的稳定。

泵液系统可根据实际需求配置恒压、梯度或等压梯度等控制方式。

4. 检测器检测器用于监测和记录样品的化学信号，并将其转化为可读的信号输出。

常见的检测器包括紫外可见检测器、荧光检测器、电化学检测器等。

5. 数据处理系统数据处理系统用于采集、处理和分析检测到的信号，通常配备有专业的软件。

用户可根据需要选择合适的数据处理系统，并进行适当的参数设置。

二、操作方法1. 仪器准备（1）保证仪器通电正常并处于稳定工作状态。

（2）检查流动相储液瓶中是否有足够的流动相，并确保其配制符合要求。

（3）检查色谱柱的连接情况，确保柱座和柱连接部位严密无泄漏。

（4）开启数据处理系统，确保与色谱仪的连接正常。

2. 样品准备根据实验要求选择合适的样品，并进行必要的前处理工作，如过滤、稀释等。

3. 进样操作（1）将样品溶液通过合适的进样方式加入进样器中。

（2）设置进样体积和进样方式等参数，并进行进样操作。

4. 流动相系统设置（1）根据实验要求选择合适的流动相，注入流动相储液瓶中。

（2）设置流速、梯度等参数，并进行流动相系统的初始化。

液相色谱柱的正确安装和使用说明液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。

被过滤广告一、液相色谱柱的安装：1、液相色谱柱的结构：a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。

柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。

7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。

3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接，中间也放置压环用于柱接头的密封。

为了尽量减少柱外死体积，在安装色谱柱时，用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底，然后再拧紧空心螺钉。

压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2．5mm长或其他固定尺寸)。

在两端柱接头内，柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网)，用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。

空柱各组件均为316#不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。

但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。

b、柱填料：液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。

正相柱：多以硅胶为柱填料。

根据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3—10µm的范围内。

另一类正相填料是硅胶表面键合—CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。

反相柱：主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。

也有无定型和球型之分。

常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等，其颗粒粒径在3—10µm之间。

2，色谱柱的安装：a、拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。

b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。

液相色谱柱使用说明液相色谱柱是一种常见的色谱技术应用于分离和分析化合物的工具。

本文将为您详细介绍液相色谱柱的使用说明，包括如何选择合适的柱子、柱子的安装步骤、样品的准备和加载、柱子的使用注意事项以及柱子的保养和储存方法。

1.选择合适的液相色谱柱在选择液相色谱柱之前，需要考虑以下几个因素：-样品的性质和分离要求：不同的柱子对不同性质的化合物有着不同的分离效果。

根据样品的极性、大小和稳定性等因素，选择合适的柱子（例如反相柱、正相柱、离子交换柱等）。

-流动相的选择：根据样品溶解度和分离要求，选择合适的流动相（溶剂、缓冲液等）。

2.液相色谱柱的安装步骤-将柱床冲洗干净：使用纯溶剂（如甲醇、乙醇等）反复冲洗柱床，直至流出的溶液无色透明。

-将液相色谱柱连接至色谱仪：在连接针嘴前，先用一根塑料贴纸封住柱子的两端，然后将针嘴旋入液相色谱柱的出口。

-将柱子连接到色谱仪：将柱子放入色谱仪的支架上，并确保柱子的连接口与色谱仪的进样器连接正确。

3.样品的准备和加载-样品的准备：将样品溶解在适当的溶剂中，使其达到合适的浓度，并在必要时进行过滤或稀释。

-样品的加载：使用自动进样器或手动进样器，将样品加载到液相色谱柱中。

避免过量的样品装载和过高的进样速度。

确保样品溶液完全进入柱子，并记录样品加载的详细信息。

4.液相色谱柱的使用注意事项-避免干涸：始终保持柱子中的液相色谱柱湿润，避免出现干涸和损坏的情况。

在使用完毕后，必要时用合适的溶剂进行洗脱，然后用空气或氮气进行保护。

-遵循柱子的使用范围：柱子通常有推荐的温度和压力范围。

超出这些范围可能会导致柱子性能下降或甚至损坏。

-避免高浓度的盐类溶液：高浓度的盐类溶液可能对柱子产生不良影响，导致柱子的损坏或压力升高。

5.液相色谱柱的保养和储存方法-定期清洗：根据使用频率，定期清洗液相色谱柱。

使用纯溶剂进行冲洗，以去除残留的样品和杂质。

-保持柱子湿润：柱子在存储期间应保持湿润。

用合适的溶剂进行洗脱，并用盖子密封柱子的两端，以避免柱床干燥。

液相色谱柱使用注意事项在使用液相色谱柱时，需要注意以下事项以保证柱子的性能和使用寿命。

1.流动相流动相是液相色谱分离的基础，应选择与样品相容、纯度高、稳定性好的流动相。

在使用前，应进行过滤和脱气处理，以避免对柱子造成损害。

2.柱子选择根据不同的样品和分离要求，应选择合适的液相色谱柱。

选择时需要考虑柱子的类型、粒径、孔径、填料等参数。

对于复杂的样品，建议使用具有更强分离能力的反相柱。

3.柱子清洁在使用前，应对液相色谱柱进行清洁，以去除柱子内部的杂质和污染物。

清洁时应使用温和的清洁剂，如甲醇、乙醇等，并避免使用强烈的清洁剂或酸碱溶液。

4.操作温度液相色谱柱应在规定的操作温度下使用。

过高的温度可能导致柱子的性能下降或损坏，而过低的温度则可能导致样品分离效果不佳。

在使用过程中，应密切关注柱温的变化。

5.压力变化压力变化是液相色谱分离的关键参数之一。

在使用过程中，应密切关注压力的变化情况。

若出现压力波动或异常升高，应立即采取措施解决问题，以免对柱子造成损害。

6.流动相流速流动相流速是影响液相色谱分离效果的重要因素之一。

应根据分离要求和样品性质选择合适的流速。

过快的流速可能导致柱子的性能下降或损坏，而过慢的流速则可能导致样品分离效果不佳。

7.样品处理在进样前，应对样品进行处理，以去除杂质和干扰物质。

处理方法包括样品萃取、净化、浓缩等。

处理时应避免对样品造成污染或损失。

8.柱子储存在使用完毕后，应对液相色谱柱进行妥善的储存。

储存时应避免阳光直射、高温、潮湿等不利环境条件。

同时，应定期对柱子进行检查和维护，以保证其性能和使用寿命。

高效色谱仪色谱柱的使用事项色谱仪操作规程高效色谱仪色谱柱的使用事项包括色谱柱的平衡、再生和维护等。

一、色谱柱的平衡：高效液相色谱仪反相色谱柱是保存在乙腈中，新柱应先用10～20倍柱体积的甲醇或高效色谱仪色谱柱的使用事项包括色谱柱的平衡、再生和维护等。

一、色谱柱的平衡：高效液相色谱仪反相色谱柱是保存在乙腈中，新柱应先用10～20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱，确定确保分析样品所使用的流动相与乙腈－水互溶。

每天用充分的时间以流动相平衡色谱柱，会在处理问题方面获得最大的“补偿”，而且色谱柱的寿命会变得更长。

平衡操作步骤：1、平衡开始时，将流速缓慢提高，用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线。

缓冲盐或离子对试剂流速假如较低，需要较长时间来平衡。

2、假如使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水“过渡”。

即每天分析开始前，必需先用纯水冲洗30min以上，再用缓冲盐流动相平衡。

分析结束后，必需先用纯水冲洗30min以上，除去缓冲盐之后，再用甲醇冲洗30min保护色谱柱。

二、色谱柱的再生：1、建议用来冲洗色谱柱的溶剂体积：（1）Ф4×125mm色谱柱：柱体积为1.6mL，所用溶剂体积为30mL。

（2）Ф4×250mm色谱柱：柱体积为3.2mL，所用溶剂体积为60mL。

（3）Ф10×250mm色谱柱：柱体积为20mL，所用溶剂体积为400mL。

2、再生方法：（1）极性固定相的再生：正庚烷，乙酸乙酯，丙酮，乙醇，水。

（2）非极性固定相的再生：水，异丙醇，乙腈，水。

3、注意事项：（1）在对用NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能以铵根离子形式存在，因此应在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后用水冲洗至碱溶液完全流出。

（2）假如用有机溶剂－水不能完全洗去硅胶表面吸附的杂质，在水洗后加用0.05M的稀硫酸冲洗特别有效。

三、色谱柱的维护：1、使用预柱、保护柱和分析柱。

硅胶在极性流动相和离子性流动相中有确定的溶解度。

高效液相色谱柱的正确使用液相色谱操作规程色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。

对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。

关于色谱柱的安装、维护、保色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。

对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。

关于色谱柱的安装、维护、保存以及由色谱柱导致的这样那样的色谱故障也是一门学问。

高效液相色谱柱的正确使用包含：加装保护柱，过滤流动相和样品，净化样品，避免过高的柱压，注意温度和酸碱度，正确及时的冲洗等。

1.加装保护柱保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。

尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱必不可少的措施。

保护柱填料应与分析柱一致,粒径可较分析柱大。

保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析(5～1次)后,出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。

2.过滤流动相和样品流动相通常由水或缓冲溶液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有机溶剂用色谱纯级,水用石英亚沸水或其它超纯水时,在能确保水和有机溶剂的质量且没有受到污染时,过滤并无更多实际意义。

当流动相中含有缓冲盐时,则过滤是必要的,如前所述,当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异,夏季一般不超过48h,冬季一般不超过一周)后,在使用前还应重新过滤。

所配制的样品试液在注入流路系统前均要经.45μm(.22μm则更好)孔径滤膜过滤。

要注意区分水系和油系,二者不可混用,以防止滤膜溶解而造成污染。

装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换,以避免滤器因过载而起不到过滤作用。

最全的色谱柱使用手册！色谱又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质(样品)与固定相和流淌相之间的作用力(安排、吸附、离子交换等)的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分别。

01柱色谱为向玻璃管中填入固定相，以流淌相溶剂浸润后在上方倒入待分别的溶液，再滴加流淌相，由于待分别物质对固定相的吸附力不同，吸附力大的固着不动或移动缓慢，吸附力小的被流淌相溶剂洗下来随流淌相向下流淌，从而实现分别。

02纸色谱以滤纸条为固定相，在纸条上点上待分别的混合溶液的样点，将纸条下端浸入流淌相溶剂中悬挂，溶剂由于毛细作用沿滤纸条上升，样点中的溶质从而被分别。

03薄层色谱是在玻璃板上涂以固定相涂层，然后点样，下端浸入溶剂，同样自下而上分别。

常用于探究柱色谱试验条件，溶剂和固定相的选择等。

常用固定相有石膏、氧化铝、蔗糖、淀粉等，常用流淌相为水、苯等各种有机溶剂。

影响色谱柱使用寿命的主要因素流淌相因素1.流淌相pH不同基质的填料具有不同的pH适用范围。

常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mgL-1，且在pH1～9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量，考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流淌相pH范围约为1～8。

键合相硅胶填料则由于键合层的屏蔽作用,使填料对流淌相的适应范围大大增加，如现在广泛使用的反相色谱填料C18(十八烷基硅烷键合硅胶)，其pH适用范围可达2～10。

当流淌相pH值超出酸性范围时，键合相易发生水解而流失；当流淌相pH超出碱性范围时，会加速硅胶的溶解而释放出絮状物堵塞柱子，这两种反应均是不行逆反应，特殊是在温度较高（40℃）的环境下，会使柱效快速降低而报废。

2.流淌相变质当前使用最为广泛的是硅基键合相填料，当以水溶液作为流淌相或流淌相中含有肯定浓度的磷酸盐缓冲液时，水溶液中或缓冲盐溶液中会滋生出一些细菌或霉菌，从而堵塞固定相颗粒间的空隙。

特殊是对于多元自动比例混合的高效液相色谱仪来说,水相或缓冲盐相单独存贮，因存放时间较长而简单发生此类问题。

1、色谱柱的使用说明：（1）色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。

在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。

（2）流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。

另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。

当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。

（3）样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。

在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。

2、色谱柱的保存（1）反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。

注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。

（2）长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。

储存的温度最好是室温。

3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。

液相色谱柱安装与使用说明1.准备工作：事先准备好所需的色谱柱和色谱条件，选择适当的流动相和检测方法。

2.检查色谱柱：检查色谱柱的包装是否完好，确认柱头和底部不受损。

查看柱子的规格型号和有效期，确保符合实验要求。

3.柱连接：将色谱柱与液相色谱仪的柱接口相连接。

柱接口通常有螺纹接口和快速连接接口，按照仪器的要求选择合适的接口。

4.柱连接密封：使用适当的柱接口垫片来保证柱与柱接口之间的严密密封，以防止漏液和杂质污染。

5.流动相装填：根据实验需求选择合适的流动相，并根据仪器的要求装填到流动相贮箱中。

6. 流速设置：根据实验要求设置合适的流速，一般应在0.5-2.0mL/min的范围内。

7.初始温度设置：根据样品的性质和分析方法，选择合适的柱温度，并进行预热。

柱温度对于保证分离效果和保护液相色谱柱起到关键作用。

1.不要轻易触摸色谱柱的柱头和底部，以免造成污染或损坏。

2.在使用液相色谱柱之前，应用流动相洗涤柱子，以去除悬浮在柱子内的杂质和残留物。

3.色谱柱在长时间使用后会产生杂质沉积，应定期进行反向冲洗和再生。

4.柱温度的设置应根据样品的性质和方法进行优化，一般来说，越高的温度有助于加快分析速度，但也可能导致分离效果下降。

5.不同的流动相和检测方法可能对色谱柱造成不同程度的腐蚀和损害，需要根据实验要求选择合适的条件。

6.注意保持流动相的纯净度，避免使用未经过滤的溶剂。

7.使用完毕后，及时将色谱柱和流动相贮箱进行清洗和保存，以免柱子受到污染和损坏。

总结：液相色谱柱的正确安装和使用对于保证分析结果的准确性和重现性非常重要。

在安装液相色谱柱之前，必须仔细检查柱子的包装和品质，保证柱子的完好和有效期。

在使用过程中，要注意保持良好的实验操作和仪器维护，定期进行柱子的清洗和再生。

通过正确的安装和使用，可以有效延长柱子的使用寿命，保持分析结果的稳定性和准确性。

高效液相色谱柱的使用与维护
液相色谱法是一种研究物质组成的非常有用的分析方法，液相色谱柱是其中重要的组成部分。

高效液相色谱柱具有高分辨率、高灵敏度和快速分析能力等优点，在物质结构分析、比较分析、药物质量真实性检测等方面得到了广泛的应用。

高效液相色谱柱包括筒体、固定相、移动相和柱口等原件，其功能是使溶剂中的被分析物质分离并聚集在移动相中，以获得良好的精确度和灵敏度。

因此，在使用高效液相色谱柱的时候，需要正确的使用和维护。

一、高效液相色谱柱的正确使用
1、正确选择液相色谱柱。

在选择液相色谱柱的时候，必须正确考虑柱型、长度、内径、固定相、移动相等因素，保证实验数据的准确性。

2、正确安装液相色谱柱。

在安装柱子之前，应该先检查它的外观，确保没有任何损伤，然后根据实验要求正确安装柱子、柱体、柱头、柱柄，并紧固螺丝，以确保实验的准确性。

3、正确操作液相色谱柱。

在操作液相色谱柱之前，应该先做好实验准备，检查仪器的各项参数，建立校正曲线，并根据实验要求正确调整移动相的流量和温度，以保证测得准确和可靠的实验数据。

二、高效液相色谱柱的正确维护
1、定期检查液相色谱柱。

定期检查柱子的外观，确保没有任何损伤，检查柱体、柱头、柱柄和螺丝的松紧情况，并且按照实验要求
正确维护柱子。

2、定期清洗液相色谱柱。

定期清洁柱子，以避免污垢滋生，降低仪器的精度和准确度，并减少仪器的维护次数。

3、定期更换柱子。