实验三 鞭毛染色法及活细菌运动性的观察
- 格式:ppt
- 大小:572.50 KB
- 文档页数:18
实验六细菌的鞭毛染色及其运动性观察生物112 周泓兆1102040226一、目的1.学习并掌握细菌的鞭毛染色法;2.学习并掌握悬挂法观察细菌运动。
二、原理鞭毛只有通过特殊染色方法时,才可在普通光学显微镜下看到。
本实验采用银染法,即先利用媒染剂(本实验使用的媒染剂为鞣酸)促进银离子在鞭毛上的沉积,加粗其直径,这样就能在显微镜下看到深褐色的菌体及褐色的鞭毛。
采用鞭毛染色法可以观察到鞭毛的形态、着生位置和数目,而如果只需要了解供试菌株是否具有鞭毛,则才用悬滴法较简便。
该法可直接在显微镜下通过观察细菌的运动状况来推断鞭毛是否存在。
有鞭毛的细菌在幼龄时具有较,强的运动力,而衰老的细菌鞭毛易脱落,因此观察时应选用幼龄细菌。
三、材料1.菌种:普通变形杆菌(Proteus vulgaris)2.染料:鞭毛染液A液,鞭毛染液B液3.其它:干净载玻片,凹玻片,盖玻片,无菌水,洗瓶,香柏油,二甲苯,擦镜纸,吸水纸,酒精棉球,接种环,酒精灯,镊子。
四、实验步骤1.制备菌悬液:用无菌长滴管取3-5ml无菌水,沿试管壁轻轻加入普通变形杆菌斜面上,将该试管置于28℃温箱中静置10min左右。
2.鞭毛染色(1)制片:取一经洗液浸泡过的干净玻片,滴一滴菌液于玻片的一端,然后轻抬此端,使菌液缓慢流向另一端,并在空气中自然干燥固定。
(2)染色:①在涂片处滴加鞭毛染液A液染色5min②用蒸馏水充分洗净A液③用鞭毛染液B液冲去残水,再加B液于涂片处,静置1min④用蒸馏水洗净B液,自然风干(3)镜检:在涂片上滴加适量香柏油,在油镜下观察鞭毛的形态。
3.悬滴法观察细菌的运动(1)涂凡士林:取一片干净无油的盖玻片,在其四周分别用牙签涂抹少许凡士林。
(2)滴菌悬液:用经过灭菌的接种环取少量菌悬液置于盖玻片中央。
(3)盖凹玻片:将凹玻片的凹槽对准盖玻片中央的菌悬液,并轻轻盖在盖玻片上,使两者粘合在一起,然后反转凹玻片,使菌悬液恰好悬在凹槽中央。
细菌鞭毛染色及活菌运动观察一、实验目的1、学习压滴法观察细菌运动性(活细胞)2、学习并掌握鞭毛染色法并了解鞭毛的形态特征二、实验简介鞭毛是细菌的运动“器官”,细菌是否具有鞭毛,以及鞭毛着生的位置和数目是细茵的一项重要形态特征.细菌的鞭毛很纤细,其直径通常为0 . 01 ~0.02um ,所以,除了很少数能形成毛束(由许多根鞭毛构成)的细菌可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外,一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到,而只能用电子显微镜观察.要用普通光学显微镜观查细菌的鞭毛,必须用鞭毛染色法。
细菌形态学观察包括细菌染色标本检查法和不染色标本检查法。
压滴法属于最常用的不染色标本检查法,主要用于检查细菌的运动性。
细菌的鞭毛极细,直径一般为10—20nm,只有用电子显微镜才能观察。
但是由于设备限制,我们希望能够在普通的光学显微镜下就能够看见细菌鞭毛。
于是,便产生了鞭毛染色法。
1958年Rhodes根据Fontana 的螺旋体改良镀银染色法,建立了一种细菌鞭毛镀银染色法。
试剂分为媒染剂和银染剂。
但是试剂的稳定性低,容易变质。
2002年谷海瀛发明了一种新的细菌鞭毛镀银染色法。
该法将媒染剂分为A、B两种。
A液为酸化FeCl3溶液,B液为15%单宁酸,含甲醛1 ml,用时A、B液等量混合,轻微加热,染片40s,再用银染液涂片加热至微冒蒸汽,染色10 s。
这种方法不仅染色效果好,而且解决了试剂稳定性差的问题,此种试剂常温下至少可保存1年。
通过鞭毛染色,可以观察到鞭毛形态、数量和鞭毛在菌体分布的位置,鞭毛数量和在菌体上的分布位置是鉴定细菌的重要依据之一,根据鞭毛的这些特征,可将有动力细菌分为单端极鞭毛菌、单端丛鞭毛菌、周鞭毛菌、侧鞭毛菌。
有了这种简易的鞭毛染色方法,对于我们的细菌研究来说就更加方便容易了。
三、实验原理细菌鞭毛染色法的基本原理简单染色法适用于一般的微生物菌体的染色,而某些微生物具有一些特殊结构,如鞭毛,对它们进行观察之前需要进行有针对性的染色。
实验七细菌运动力观察[实验目的]1、了解检查细菌运动力的方法。
2、掌握悬滴法检测细菌的运动力。
[实验原理]鞭毛是细菌的一种特殊结构,是细菌运动器官。
细菌是否具有鞭毛是细菌分类鉴定中的重要特征之一。
采用鞭毛染色法虽能观察到鞭毛的形态、着生位置和数目,但此法较复杂烦琐。
采用悬滴法或水封片法(压滴法)直接在光学显微镜下检查活菌是否具有运动能力来判断细菌是否具有鞭毛则快速、简便。
具有运动能力的细菌,可以独立运动,在显微镜下观察时,细菌的真正运动(自动运动)表现为能离开原来位置,不断改变方向的自由地游动。
水的分子运动(布朗运动)也能见于细菌个体,但只能使其在原地摆动,不能远离原来的位置移动。
这种情况,都是外力作用的结果,不是细菌本身的真正运动。
检查细菌的运动力,应用幼年培养物,最好刚从温箱中取出,并在温暖的环境下从速进行。
此外,这种方法也可用来检查微生物对各种化学物质的趋化性。
[实验材料]1、菌种2003Y1,2003Y2(为本实验室分离的菌种)的肉汤培养物2、仪器及其他物品显微镜、接种环、酒精灯、凹玻片、盖玻片、蒸馏水等[实验内容]1、悬滴检查法采用不染色活菌标本来检查其运动能力。
a.不染色标本片的制备取洁净盖玻片一张,用接种环各勾取蒸馏水1-2环于盖玻片四个角,灭菌接种环,再勾取2003Y1或2003Y2幼龄肉汤培养物1-2环于盖玻片中央;另取一干净凹玻片,凹面朝下对角扣于盖玻片上,再将玻片翻转,使菌液液滴向下,即可进行镜检。
若为固体培养物,则需在盖玻片中央先滴上一小滴生理盐水或透明肉汤,再用接种环取待检固体培养物少量(不要过多),混匀于液滴内即可。
盖玻片四角的蒸馏水起到粘附(使凹玻片和盖玻片紧密吸附)、防止液滴干燥的目的。
b. 镜检因细菌无色透明,与背景无明显的色差,故在观察时视野要稍暗。
10倍镜对光后调整光线使视野变暗。
放上悬滴标本片,先用低倍镜找到液滴边缘(因表面张力的作用,液滴边缘有大量的菌体,便于观察),然后再转换高倍镜对焦观察,一般不必使用油镜观察,必须用时,注意防止压坏盖玻片。
细菌鞭毛染色及运动性鉴定摘要:用稀释美蓝对菌体进行染色后在油镜下对菌体的运动性进行观察、鉴定和描述。
鞭毛是细菌的运动器官,用硝酸银染液A液B液对菌体的鞭毛进行染色,并在光学显微镜下对菌体鞭毛的形态特征和着生部位进行观察。
关键词硝酸银染色法压滴法微生物制片镜检前言鞭毛是细菌的运动器官,具有鞭毛的不同的细菌其鞭毛的粗细、长短、着生部位不同,是微生物的一项重要形态特征。
除了少数细菌的鞭毛能够较轻易的观察出来外,一般其他的细菌由于鞭毛微小且透明,一般不能在光学显微镜直接观察到。
故要用光学显微镜对细菌的鞭毛进行观察时,要对细菌的鞭毛进行染色处理使鞭毛直径加粗并与背景色形成对比。
通过硝酸银法对细菌鞭毛进行染色观察,能区分细菌的类型,对细菌的结构进行初步了解,在细菌的分类及鉴定上具有一定的重要意义。
材料与方法1.1 材料1.1.1标准菌株枯草芽孢杆菌铜绿假单胞菌1.1.2溶液和试剂蒸馏水 95%乙醇香柏油 0.01%美蓝硝酸银染液A液B液1.1.3仪器及其他用品载玻片盖玻片镊子光学显微镜胶头滴管酒精灯接种环1.2方法1.2.1压滴法观察细菌的运动性1)涂片1.将载玻片用自然水洗干净后,用纸吸除多余水分。
2.在载玻片滴取半滴蒸馏水到载玻片上。
3.在酒精灯形成的无菌区域内用接种环在铜绿假单胞菌的琼脂斜面上小心地(防止因动作过大而使鞭毛从菌体上脱落)挑取适量的菌苔。
4.将沾有菌苔的接种环置于载玻片中的滴有蒸馏水的区域进行涂抹,使菌悬浮在蒸馏水中。
2)染色在涂有菌体的部分滴加一滴稀释美蓝使其覆盖整个悬浮液。
3)盖盖玻片1.用镊子取出一片盖玻片并将盖玻片放在菌体悬浮液的左侧使盖玻片恰好与悬浮液相接触。
2.将盖玻片用镊子轻轻向左侧移动同时慢慢地盖上盖玻片(注意不要让空气进入片中)。
4)快速镜检在观察时应先用高倍镜观察,看不清楚时再用低倍镜观察。
在观察时应采用暗视野,并要以较快的速度对菌体进行观察以免菌体过早死亡。
主要介绍油镜的使用方法:1.将染色好的载玻片置于显微镜下的载物台上,将对准载物台油镜,调节粗调将载物台合适的高度。
实验四细菌运动性的观察姓名:贾晓霖学号:201000140032班级:生科10.1同组成员:李江湲程子修洪钧烨一、实验目的1、学习压滴法观察细菌运动性。
2、学习鞭毛染色法,观察鞭毛的形态特征。
二、实验原理鞭毛是细菌的纤细丝状“运动”器官。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
鞭毛直径一般为10~30nm,只有用电镜才能直接观察到。
但是,如采用特殊的染色法,则在普通光学显微镜下也能看到它。
鞭毛染色方法很多,但其基本原理相同,即在染色前先用媒染剂处理,让它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。
鞭毛的着生方式多样,有一端单生,如铜绿假单胞菌;两端单生;一端丛生,如荧光假单胞菌;两端丛生,如蔓延螺菌以及周生,如大肠杆菌等。
三、实验器材1、所需菌种枯草芽孢杆菌(周生)铜绿假单胞菌(端生)2、溶液和试剂0.01%美蓝染液,95%乙醇溶液,鞭毛染色液A,鞭毛染色液B。
3、仪器和其他用品酒精灯,载玻片,盖玻片,显微镜,双层瓶(内装香柏油和二甲苯),擦镜纸,接种环,烧杯,试管架,镊子等。
四、实验内容a)压滴法(说明一下我做的是铜绿假单胞菌)1、洗片将载玻片用水加去污粉洗净,自然晾干。
2、涂片在载玻片中央滴一小滴蒸馏水,点燃酒精灯,在火焰旁边从菌种斜面挑取少量菌体与水滴充分混匀。
3、染色、镜检加0.01%美蓝染液染色,之后加盖玻片放于油镜下观察。
附:实验照片b)鞭毛染色(说明一下我做的是铜绿假单胞菌)1、洗片将载玻片用水加去污粉洗净,自然晾干。
2、浸泡将适量95%乙醇倒入烧杯,将洗净晾干的载玻片放入有乙醇的烧杯中,浸泡5min。
3、干燥将载玻片用镊子夹出,点燃酒精灯,将载玻片在酒精灯上小心过火干燥。
4、涂片将一小滴蒸馏水滴在载玻片一端,点燃酒精灯,在火焰旁边从菌种斜面挑取少量菌体与水滴充分混匀,将载玻片有水滴的一端微微竖起,使有菌种的水滴自然从载玻片一端流到另一端,在载玻片上形成一条菌带。
5、干燥自然干燥。
1. 掌握鞭毛染色的原理和方法。
2. 观察细菌鞭毛的形态、数量和分布位置。
3. 了解鞭毛在细菌分类和鉴定中的意义。
二、实验原理鞭毛是细菌的运动器官,对细菌的分类和鉴定具有重要意义。
鞭毛染色是一种特殊染色方法,通过媒染剂和染色剂的作用,使鞭毛变粗,便于在显微镜下观察。
常用的媒染剂有单宁酸、明矾钾等,染色剂有碱性复红、硝酸银、结晶紫等。
三、实验材料1. 菌种:金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌、大肠杆菌。
2. 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基。
3. 试剂:鞭毛染色液(A液)、0.01%美蓝水溶液(B液)、香柏油、二甲苯、无菌水、凡士林。
4. 工具:显微镜、接种环、酒精灯、凹载玻片、盖玻片、镊子、细玻棒、吸水纸。
四、实验步骤1. 活化菌种:将保存的菌种在新制备的牛肉膏蛋白胨斜面培养基上连续移种2-3次,每次于30℃培养10-15h。
活化后菌种备用。
2. 制片:在干净载玻片的一端滴一滴蒸馏水,用无菌操作法,以接种环从活化菌种中取少许菌苔(注意不要带培养基),在载玻片的水滴中轻沾几下。
将载玻片稍倾斜,使菌液随水滴缓缓流到另一端,然后平放,于空气中干燥。
3. 染色:滴加鞭毛染色液A液,染3-5min。
用蒸馏水充分洗净A液,使背景清洁。
将残水沥干或用B液冲去残水。
滴加B液,在微火上加热使微冒蒸汽,并随时补充染料以免干涸,染30~60s。
待冷却后,用蒸馏水轻轻冲洗干净,自然干燥或滤纸吸干。
4. 镜检:先用低倍镜和高倍镜找到典型区域,然后用油镜观察。
菌体为深褐色,鞭毛为褐色。
注意观察鞭毛着生位置(镜检时应多找几个视野,有时只在部分涂片上观察到鞭毛)。
1. 金黄色葡萄球菌:观察到典型的鞭毛,数量较多,主要分布在菌体一端。
2. 普通变形杆菌:观察到鞭毛,数量较少,主要分布在菌体两端。
3. 大肠杆菌:未观察到鞭毛。
六、实验讨论1. 鞭毛染色是细菌鉴定的重要方法之一,通过观察鞭毛的形态、数量和分布位置,可以初步判断细菌的种类。
2. 本实验中,金黄色葡萄球菌和普通变形杆菌均具有鞭毛,而大肠杆菌无鞭毛。
细菌鞭毛染色及活菌运动观察一、目的要求:1、学习并掌握鞭毛染色法并了解鞭毛的形态特征2、巩固显微镜操作技术及无菌操作技术3、学习压滴法观察细菌(活细胞)运动性二、实验器材:1.菌种来源枯草芽孢杆菌1-2d牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物,铜绿假单胞菌1-2d牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物2.溶液和试剂稀释美蓝溶液,质量分数为95%的乙醇水溶液,蒸馏水,硝酸银染液A液和B液3.仪器和其它用品酒精灯,载玻片,盖玻片,显微镜,双层瓶(内装香柏油和二甲苯),擦镜纸,接种环,小试管,烧杯,试管架,载玻片夹子,滴管和滤纸三、基本原理:1.压滴法观察活菌运动鞭毛是细菌的运动器官,在水中可以高速旋转推动菌体前行,细菌的游动不是单纯地一直朝前游,而是伴随着不时的随机翻滚转向,但从表观上看仍表现为细菌的前行。
细菌未染色时无色透明,在显微镜下主要靠细菌的折光率与周围环境的不同来进行观察。
若想观察的更加清晰,可以滴加稀释美蓝等染液进行染色,注意不要染色过重,以免影响观察,有鞭毛的细菌运动活泼,且不同时向一个方向运动,而无鞭毛的细菌则呈不规则布朗运动。
这样便可以在光学显微镜下观察到细菌的运动。
2.细菌鞭毛染色法简单染色法适用于一般的微生物菌体的染色,而某些微生物具有一些特殊结构,如鞭毛、芽孢和荚膜,对它们进行观察之前需要进行有针对性的染色。
鞭毛是细菌的纤细丝状的“器官”。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
鞭毛直径一般为10-30nm,只有用电镜才可以直接观察到。
若要用普通光学显微镜观察,必须使用鞭毛染色法。
首先用媒染剂(如单宁酸或明矾钾)处理,使媒染剂附着在鞭毛上使其加粗,然后用碱性复红(Gray氏染色法)、碱性复品红(Leifson氏染色法)、硝酸银(West氏染色法)或结晶紫(Difco氏染色法)进行染色。
四、实验步骤:(一)压滴法观察活细菌1.洗片用自来水和去污粉将载玻片清洗干净,然后用蒸馏水冲洗2.涂片在载玻片上滴加少量蒸馏水,采用无菌操作将所要观察的菌种接种到水滴中蒸馏水稍显浑浊即可。
细菌鞭毛染色的方法细菌鞭毛染色是一种常用的细菌形态鉴定方法,可以帮助微生物学家观察和描述细菌鞭毛结构,从而推测其遗传特性和功能。
下面将详细介绍三种常用的细菌鞭毛染色方法:简单抗酸杆菌染色法、尾鞭毛染色法和菲尔维改良法。
一、简单抗酸杆菌染色法简单抗酸杆菌染色法是一种鉴别分枝杆菌(Mycobacterium)属中患者血液、尿液、痰、脓液等标本中的分枝杆菌。
这种染色方法利用酸性染料石蜡红,可以使抗酸杆菌的鞭毛显色,增强观察的准确性。
步骤:1.取血液、尿液、痰等标本制备涂片,将标本涂抹在玻璃片上,晾干。
2.用火焰消毒的钳子将玻璃片的涂片轻轻通火,将染料石蜡红涂滴于涂片上,让其覆盖标本。
3.将玻璃片先静止1-2分钟,然后用水冲洗掉过多的染料。
4.用20%硝酸酒精对涂片进行脱色,可观察到分枝杆菌的鞭毛呈红色。
5.再用水冲洗涂片,使其完全清洁。
6.取一滴一滴草绿染料滴在涂片上,均匀涂抹。
7.用水冲洗后晾干,用油镜覆盖玻璃片,镜检。
二、尾鞭毛染色法尾鞭毛染色法用于显示一些有机质,如细菌鞭毛、纤毛,尤其是真细菌和螺旋菌的表面鞭毛。
这种染色方法使用了特定的染料,其中一种叫做尾鞭毛染料,可以与细菌鞭毛发生特异性的染色反应。
步骤:1.取细菌液滴制备涂片,晾干。
2.用尾鞭毛染料滴于涂片表面,使其充分渗透,静置几分钟。
3.用水冲洗涂片,除去未与鞭毛结合的染料。
4.用光学显微镜观察涂片,即可看到染色的细菌鞭毛。
三、菲尔维改良法菲尔维改良法是细菌鞭毛染色中的一种较新的方法,其主要优点是能够清晰地显示出细菌鞭毛的细节结构,对细菌鞭毛的分类和鉴定非常有帮助。
步骤:1.取细菌液滴制备涂片,晾干。
2.用菲尔维液滴于涂片表面,使其充分渗透,静置5-10分钟。
3.用水冲洗涂片,除去未结合的染料。
4.将菲尔维溶液滴于涂片上,再用菲尔维JL染色液(主要成分是菲尔维色素)滴于涂片上,使其充分渗透,静置15-20分钟。
5.用70%酒精脱色1-2秒钟,去除多余的染料。
实验3 细菌的鞭毛染色一实验目的学习细菌的鞭毛染色法二实验原理细菌的鞭毛极细,直径一般为10—20nm,只有用电子显微镜才能观察到。
但是,如采用特殊的染色法,则在普通光学显微镜下也能看到它。
鞭毛染色方法很多,但其基本原理相同,即在染色前先用媒染剂处理,让它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。
常用的媒染剂由丹宁酸和氯化高铁或钾明矾等配制而成。
现推荐以下两种染色法。
三实验器材1.活材料培养12-16h的水稻黄单胞菌(Xanthomonas oryzae),粘质赛氏杆菌(Serratia marcescens)或假单细胞菌(Pseudomonas sp.)斜面菌种。
2.染色液和试剂:硝酸银染色液、Leifson染色液、香柏油、二甲苯。
3.器材:载玻片、擦镜纸、吸水纸、记号笔、玻片搁架、镊子、接种环,显微镜。
四实验方法1.镀银法染色(1)清洗玻片选择光滑无裂痕的玻片,最好选用新的。
为了避免玻片相互重叠,应将玻片插在专用金属架上,然后将玻片置洗衣粉过滤液中(洗衣粉煮沸后用滤纸过滤,以除去粗颗粒),煮沸20min。
取出稍冷后用自来水冲洗、晾干,再放入浓洗液中浸泡5—6天,使用前取出玻片,用自来水冲去残酸,再用蒸馏水洗。
将水沥干后,放入95%乙醇中脱水。
(2)菌液的制备及制片:菌龄较老的细菌容易失落鞭毛,所以在染色前应将待染细菌在新配制的牛肉膏蛋白胨培养基斜面上(培养基表面湿润,斜面基部含有冷凝水)连续移接3-5代,以增强细菌的运动力。
最后一代菌种放恒温箱中培养12—16h。
然后,用接种环挑取斜面与冷凝水交接处的菌液数环,移至盛有1—2mL无菌水的试管中,使菌液呈轻度混浊。
将该试管放在37℃恒温箱中静置10min(放置时间不宜太长,否则鞭毛会脱落),让幼龄菌的鞭毛松展开。
然后,吸取少量菌液滴在洁净玻片的一端,立即将玻片倾斜,使菌液缓慢地流向另一端,用吸水纸吸去多余的菌液。
涂片放空气中自然干燥。
用于鞭毛染色的菌体也可用半固体培养基培养。
细菌鞭毛染色及活细菌的运动性观察摘要:生长在某些细菌表面的纤细丝状运动器官,称为鞭毛。
采用硝酸银染色法对枯草杆菌和铜绿假单胞菌进行鞭毛染色,在光学显微镜下观察菌体形态和菌毛的长短、数量、着生位置,得到清晰的结果。
采用压滴法观察活细菌的运动性,对其运动情况有初步了解。
关键词:鞭毛染色硝酸银染色法压滴法活细菌1前言1.1实验目的1.学习并掌握鞭毛染色法,观察鞭毛的形态特征。
2.学习用压滴法观察活细菌的运动性。
1.2实验原理鞭毛是细菌的纤细丝状运动“器官”。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
鞭毛直径一般为10~30nm,只有用电镜才能直接观察到。
若要用普通光学显微镜观察,必须使用鞭毛染色法。
鞭毛染色的基本原理是在染色前先用媒染剂处理,使媒染剂附着在鞭毛上使其加粗,然后用碱性复红(Gray氏染色法)、碱性复品红(Leifson氏染色法)、硝酸银(West氏染色法)或结晶紫(Difo氏染色法)进行染色。
本实验采用的是硝酸银染色法。
在显微镜下观察细菌的运动性,也可以初步判断细菌是否有鞭毛。
细菌运动性的观察可用压滴法和悬滴法。
观察时,要适当减弱光强度以增加反差,若光线太强.细菌和周围的液体难以区分。
2材料与方法2.1实验器材2.1.1菌种枯草芽孢杆菌牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物,铜绿假单胞菌牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物。
2.1.2溶液和试剂硝酸银鞭毛染液,0.01%美兰水溶液,香柏油,二甲苯,体积分数95%的乙醇。
2.1.3仪器和其他用品酒精灯,载玻片,盖玻片,显微镜,擦镜纸,接种环,镊子,记号笔,滴管和无菌水等。
2.2实验步骤3结果与分析3.1压滴法用压滴法观察枯草杆菌的运动性,盖上盖玻片立即观察时,可以看到浅蓝色的细菌细胞。
盖玻片下里液体流动较明显,菌体随水流运动,运动方向较统一且呈直线状。
待液体稍蒸发,盖玻片下液体充分但不流动时观察,细菌的运动朝不同的方向,运动过程中可转弯;有些细菌在原地左右摆动,应为布朗运动。
篇一:鞭毛染色实验报告年月日山东大学实验报告2011 年10月26 日姓名:年级同组科目微生物题目观察鞭毛染色和运动201001140018一.实验目的学习并掌握鞭毛染色法并了解鞭毛的形态特征巩固显微镜操作技术及无菌操作技术学习压滴法观察细菌运动性(活细胞)二.实验原理细菌鞭毛染色法的基本原理简单染色法适用于一般的微生物菌体的染色,而某些微生物具有一些特殊结构,如鞭毛,对它们进行观察之前需要进行有针对性的染色。
鞭毛是细菌的纤细丝状的运动器。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
鞭毛直径一般为10~30nm,只有用电镜才可以直接观察到。
若要用普通光学显微镜观察,必须使用鞭毛染色法。
首先用媒染剂处理,使媒染剂附着在鞭毛上使其加粗,然后用碱性复红(gray氏染色法)、碱性复品红(leifson氏染色法)、硝酸银(west氏染色法)或结晶紫(difco 氏染色法)进行染色。
压滴法观察活菌运动的基本原理鞭毛的功能相当于船的螺浆,在水中可以高速旋转从而推动菌体前行,因此水体环境才是鞭毛细菌自由驰骋的天地。
鞭毛的旋转速度是非常快的,每秒钟旋转两百到一千多转,比一般的电动机要快得多。
鞭毛的高速旋转是由其附着于菌体上的基体旋转带动的,基体实际上就是鞭毛的基部,它由一个中轴套上两个或四个环构成,镶嵌固定在细菌的体表(细胞膜和细胞壁)中,在科学家的眼中,基体简直就是一台精巧的纳米机械—分子马达,但这个马达并不是靠电流驱动,而是用伴随着细胞膜两侧质子梯度的消失产生的生物能量atp来驱动,鞭毛马达还可以转向(从反时针旋转变为顺时针旋转)从而使菌体发生翻滚进而改变细菌的运动方向,事实上细菌在游动时也并不是单纯地一直朝前游,而是伴随着不时的随机翻滚转向,但从表观上看仍表现为细菌的前行。
细菌未染色时无色透明,在显微镜下主要靠细菌的折光率与周围环境的不同来进行观察。
若想观察的更加清晰,可以滴加稀释美兰等染液进行染色,注意不要染色过重,以免影响观察,有鞭毛的细菌运动活泼,且不同时向一个方向运动,而无鞭毛的细菌则呈不规则布朗运动。