微生物室微镜检查法 sop文件

显微镜使用操作规程[目的]保证显微镜工作正常，确保输血安全。

[适用范围]莱卡显微镜。

［职责]检测是否染菌,菌体生长是否正常。

［使用与操作］1、插上电源插头，向后转动电源开关“即亮度调节手轮”打开电源。

2、灯光照明调节：继续向后转动亮度调节手轮,灯炮越亮，直至获得所需亮度。

3、调焦:①将10×物镜和10×目镜安装在显微镜上；②将标本置于载物台中间；③缓慢旋转粗调焦手轮使载物台上升至标本与物镜靠近;④再反向缓慢旋转粗调焦手轮使载物台下降,同时在10×目镜里搜索图像；⑤当10×目镜里有模糊图像时,再用微调焦手轮精细调焦,直至观察到清晰的图像；⑥最后再根据需要旋转转换器以转换其它倍率的物镜.4、聚光镜调节：转动聚光镜调节手轮可使聚光镜上下移动，使用高倍物镜时聚光镜可上升，使用低倍物镜时聚光镜可下降。

仪器出厂时已调节好聚光镜中心与物镜光轴共轴、聚光镜上升至最高位置时其顶端低于载物台表面0.2mm，因此使用时不必自行调节。

5、光源调节：将仪器底座下的光源调节螺钉松开，将灯丝调节至视场中心，再拧紧光源调节螺钉，以便在最佳照明下进行观察.6、孔径关栏调节：左右移动聚光镜可变光栏操纵杆即可调节孔径关栏大小.通常，当孔径光栏开启到物镜出瞳的70～80%时，就可得到足够对比度的良好图像。

7、双目镜筒调节瞳距调节：双手分别抓住双目镜筒同时轻轻向外拉伸(或向内推压），同时将双眼对准左、右目镜进行观察，当左、右目镜中的图像合并为一时即可。

视度调节：转动视度圈，使视度圈上的零刻度线与其下端的白点对齐，此时是零视度位置。

对于左右眼视度不同的操作者，调节视度,可达到双眼同时看清图像的目的。

8、油浸时的观察:使用时必须在100×物镜的前片透镜与盖玻片间加浸油,如果有气泡进入油层,会使像质变差.要驱出气泡，可转动转换器若干次或再加一点油.油浸观察结束后，必须及时将物镜前片透镜和沾有油污的部件逐个用专用擦拭液清洗擦拭干净。

引言：正文：一、微生物室的设备和设施要求1.1实验室的建设和布局1.1.1根据实验需求确定微生物室的面积和位置。

1.1.2确保实验室空间具备足够的通风条件和灭菌设备。

1.1.3根据实验室安全性要求，设置进口门和出口门，以及相应的安全措施。

1.2微生物室的设施和设备1.2.1确保微生物室内设备和设施的正常运行和灭菌。

1.2.2定期维护并记录微生物室内仪器设备的维修情况。

1.2.3确保实验室内有足够的实验材料和培养基。

1.3微生物室的清洁和消毒1.3.1制定定期的清洁计划和消毒程序。

1.3.2使用适当的消毒剂对微生物室内表面进行清洁和消毒。

二、微生物室的操作流程2.1进入微生物室的准备工作2.1.1穿戴适当的实验服和防护用品。

2.1.2检查实验室门窗是否关闭严实。

2.1.3检查个人内外物品是否符合实验室要求。

2.2微生物样本的准备和处理2.2.1准备所需的培养基和培养物。

2.2.2从培养物中取样进行聚类。

2.2.3根据实验要求进行鉴定和分离。

2.3微生物实验的操作步骤2.3.1根据实验要求准备好必要的实验试剂和设备。

2.3.2遵循标准实验流程进行微生物实验。

2.3.3对实验进行必要的控制和实验组设置。

2.4实验数据的记录和保存2.4.1使用规定的数据记录表格和方法进行数据记录。

2.4.2将实验数据进行整理和归档，确保数据的完整性和可信度。

2.4.3根据实验需求制定数据保存的规定和办法。

2.5微生物实验的结束和清理2.5.1清理实验台面和设备，保持微生物室的整洁。

2.5.2妥善处置实验产生的废弃物和污染物。

2.5.3关闭实验室门窗，并进行必要的安全检查。

三、微生物室中的样本处理3.1微生物样本的采集和保存3.1.1确定采集样本的合适时间和方法。

3.1.2使用合适的容器和介质进行样本采集和保存。

3.1.3进行样本标识和记录，确保样本的追溯性。

3.2微生物样本的预处理3.2.1根据实验要求和样本特点，进行样本的预处理。

标准操作规程SOP编制人：审核人：批准人：修订版号：生效日期：临床微生物室标准操作程序（SOP）目录1.标本采集与送检原则标准操作程序————————WSW-SOP-12.血液标本的采集标准操作程序——————————WSW-SOP-23.尿液标本留取标准操作程序———————————WSW-SOP-34.粪便标本采集标准操作程序———————————WSW-SOP-45.样本接收、核对标准操作程序——————————WSW-SOP-56.临床微生物实验室安全标准操作程序———————WSW-SOP-6正确采集和处理标本是实验室取得正确结果的前提，必须予以重视。

但对标本采集的方法和时间，标本的来源，实验室常不能加以控制，实验室人员有责任通过各种方式，指导医师和护士正确采集标本。

特制定以下原则，以便统一标准执行。

【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。

【基本原则】1.送检报告单应注明被检人的姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验目的、抗生素使用情况，使实验室正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。

2.尽量在抗生素使用前采集标本。

3.在采集血液等标本时，应严格无菌操作，避免杂菌污染。

4.标本采集后应立即送到实验室，床边接种可提高病原菌的检出率。

5.以拭子采集的标本如咽拭子、伤口拭子或肛拭子等，最好采用运送培养基送检，应采用吸水性好、不宜干燥的材料取样。

6.混有正常菌群的标本，如痰、尿、伤口拭子、不可置肉汤培养基送检。

7.盛标本容器需经灭菌处理，但不得使用消毒剂。

指导血液及骨髓标本的正确采集。

【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】1.一般采血部位为肘静脉，疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。

切忌在静脉滴注药物处（或一手滴药，另一手采血）采集血标本；2.选择体温上升时才血可提高阳性率。

微生物实验室SOP文件目录01 试剂贮存和配制区工作制度02 标本处理区工作制度03 细菌自动分析区工作制度04 试剂贮存和配制区标准操作程序05 标本处理区标准操作程序06 细菌自动分析区标准操作程序07 紫外消毒标准操作程序08 消毒液配制使用标准操作程序09 普通冰箱使用标准操作程序10 超低温冰箱标准操作规程11 洁净工作台使用操作规程12 VITEK32型自动分析系统标准操作程序13 移液器使用标准操作程序14 高速离心机操作标准操作程序15 冰箱维护和保养标准操作程序16 电热恒温水浴箱操作程序17 洁净工作台维护和保养程序18 可移动紫外消毒车使用操作程序19 加样器校准标准操作程序20 离心机维护保养操作程序21 温度计校准程序22 试剂的质检操作程序23_微生物实验室岗位职责（暂行)24 临床标本的保存程序25 普通培养阴性操作程序26 真菌培养阴性操作程序27 苛养菌培养阴性操作程序28 抗酸杆菌培养阴性操作程序29 支原体培养检验操作程序30 临床检验及收费程序31 微生物检验收收费价格01、标本处理区工作制度进入本区需穿工作服、工作鞋.本区只能进行：临床标本的保存，标本接种、培养、及其菌株检验前处理、菌悬液制备、染色标本检查、非上机鉴定与药敏试验操作等危险操作，其它操作不得在此区进行。

在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套、口罩和帽子,严格按照操作规程进行。

工作结束后必须立即对工作区进行清洁或消毒。

非本实验室工作人员未经允许不得进入.02、试剂配制和无菌区工作制度进入该区需穿专用工作服和工作鞋。

本区只能进行贮存试剂的制备、试剂的分装和平板的制备。

在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程进行。

工作结束后必须立即对工作区进行清洁和消毒。

非本实验室工作人员未经允许不得进入.无菌室公能用于分装培养管或倒制平板培养基操作。

使用前以紫外灯消毒至少30分钟，定期用乳酸熏蒸，彻底消毒.无菌室仅限操作者进入，操作时严格关门.室内备有空调设备，以保证不因温度而影响工作.03、试剂配制和无菌区工作制度进入该区需穿专用工作服和工作鞋。

微生物实验室SOP文件在现代科学研究中，微生物实验室扮演着至关重要的角色。

微生物实验室是进行微生物研究、检测和分析的地方，它们的工作对于保障食品安全、环境保护以及人类健康具有重要意义。

为了确保实验室工作的准确性、可重复性和安全性，制定和遵守一套科学的操作规程（SOP）文件是必不可少的。

一、实验室安全措施实验室安全是微生物实验室工作的首要任务。

SOP文件应包含详细的实验室安全措施，如实验室进出的流程、实验室内的个人防护装备要求、废弃物处理等。

此外，实验室应配备紧急救援设施，如安全淋浴、灭火器等，并确保实验室人员熟悉使用方法。

二、实验室设备操作规程微生物实验室通常配备了各种各样的设备，如培养箱、离心机、PCR仪等。

SOP文件应详细规定每种设备的正确使用方法、操作步骤以及维护保养要求。

例如，培养箱的温度和湿度调节、离心机的使用规范以及PCR仪的温度梯度设定等。

三、微生物培养与处理规程微生物培养是微生物实验室的核心工作之一。

SOP文件应包括微生物培养的操作规程，如培养基的配制、菌种的接种、培养条件的设定等。

此外，还应规定微生物培养过程中的质量控制要求，如菌种的纯化、污染的处理等。

四、微生物实验室的生物安全规程微生物实验室中常涉及到一些潜在的生物危（wei）险物质，如致病菌、毒素等。

为了保障实验室人员的生命安全和健康，SOP文件应明确规定生物安全的要求和操作规程。

例如，实验室人员应接受相关的生物安全培训，严格遵守生物安全级别的要求，正确使用生物安全柜等。

五、实验数据记录和分析规程科学研究的可靠性和可重复性依赖于实验数据的准确记录和分析。

SOP文件应规定实验数据的记录要求，如记录表格的格式、数据的保存方式等。

此外，还应规定数据分析的方法和标准，以确保实验结果的准确性和可信度。

六、实验室清洁和消毒规程实验室的清洁和消毒是保障实验结果准确性和实验人员健康的重要环节。

SOP文件应规定实验室的清洁和消毒要求，如实验台面、设备、试剂瓶等的清洗和消毒方法。

目的：建立微生物限度检验的标准程序。

适用范围：原辅料、中间产品、成品及所有需要控制微生物限度的物料。

责任：进行微生物限度检验的人员对实施该规程负责，检验室主任对本规程的有效执行承担监督检查责任。

程序：1.设备及用具：微生物限度检查用设备及用具，应包括保证菌检操作的环境及各项试验所用的仪器用具等。

1.1菌检操作设备超净工作台、30一35℃及20一25℃恒温培养室（箱）、真空泵、生物学显微镜、酒精灯。

1.2 仪器、用具除菌滤器、抽滤瓶、吸管、注射器、试管、量筒、烧杯、载玻片、培养皿、注射器针头、镊子、剪子、橡皮塞、橡皮管、棉花、吸管筒、接种针、工作衣、帽、口罩、鞋等。

1.3 试剂1.3.1培养基：营养琼脂培养基、营养肉汤培养基、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基（YPD）、胆盐乳糖培养基（BL）、虎红琼脂培养基、曙红亚甲蓝琼脂培养基（EMB）、麦康凯琼脂培养基（MacC）、三糖铁琼脂培养基（TSI）、十六烷三甲基溴铵琼脂培养基、胆盐硫乳琼脂培养基（DHL）、沙门氏、志贺氏菌属琼脂培养基（SS）、四硫磺酸钠亮绿增菌液（TTB）、亚碲酸盐肉汤培养基、卵黄高盐琼脂培养基、5%乳糖发酵管、甘露醇高盐琼脂培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基、糖、醇发酵培养基、枸橼酸盐培养基、蛋白胨水培养基、绿脓菌素（pyocyanin）测定用培养基（PDP琼脂）、赖氨酸脱羧酶试验培养基、硝酸盐胨水培养基、尿素琼脂培养基、氰化钾培养基、明胶培养基。

1.3.2试药虎红（四氯四碘荧光素）、牛肉浸出粉、沙黄（番红）、枸橼酸铁铵、DL-赖氨酸、L-赖氨酸、磷酸二氢铵、酸性复红、液体石蜡、胰蛋白胨、牛胆盐、酚红。

1.3.3试液亚碲酸钠（钾）试液、亚甲蓝试液、甲基红试液、二盐酸二甲基对苯二胺试液、氢氧化钾试液、沙黄（番红）试液、虎红试液、无菌对氨基苯甲酸试液、草酸铵试液、盐酸试液、无菌尿素试液、无菌枸橼酸钠-氯化钠试液、氯化三苯四氮唑试液、a-萘酚乙醇试液、曙红钠试液、亮绿试液、氰化钾试液、靛基质试液、结晶紫试液、碘试液。

1. 目的：微生物限度检查应符合现行中国药典的规定，保证检验结果可靠性。

2. 范围：所有需做微生物限度检查的产品及纯化水。

3. 责任人：QC主任及微生物检验员对本SOP的实施负责。

4. 程序：4.1 本SOP以中国药典2005年版二部附录ⅪJ为依据。

4.2 微生物限度检查法是指检查非规定灭菌制剂及原辅料受微生物污染程度的一种方法。

必须在洁净环境下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行，其全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。

实验室应保持温度18～26℃（作温湿度记录，见附件1）。

4.3 培养基的制备：将所需培养基按购买的脱水培养基标签上的规定进行称量、稀释、溶解、分装、灭菌、贴标签；置冰置中2 10℃冷藏备用。

培养基配制后应及时作记录（见附件2）。

4.4 稀释液的配制：4.4.1 pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾3.56g，磷酸氢二钾7.23g，氯化钠4.30g，蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，滤清，分装，121℃灭菌30分钟，即得。

4.4.2 0.9%无菌氯化钠溶液：取氯化钠9.0g，加水溶解使成1000ml，过滤，分装，121℃灭菌30分钟，即得。

4.5 供试品取样4.5.1 检验量是指一次试验所用的供试品量（g、ml）。

4.5.2 供试品的检验量为10g或10ml。

4.6 供试液的制备：4.6.1 固体：取供试品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀后，作为1∶10的供试液。

4.6.2 水：直接接种法。

水层作为1∶10的供试液。

4.7 细菌、霉菌与酵母菌检查法：4.7.1 每次实验前开启净化系统使运转1小时以上，同时开启净化台和紫外灯并作记录（见附件3）。

操作时，用75%酒精棉对供试品容器表面进行擦拭消毒。

4.7.2 计数方法：4.7.2.1 平皿法。

检查时，按已验证的计数方法进行供试品的细菌、霉菌及酵母菌数的测定。

4.7.2.2 取制备好的供试液，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释成1∶10、1∶102等稀释级。

一、简易SOP文件：1。

1、标本接收筛选方案:1.1。

1、痰标本:目测：黄色、灰色、血性、铁锈色，浑浊、稠厚，呈现团块状的标本为合格标本;而无色、白色、有黑色小点，清稀，呈现泡沫状，有明显食物渣滓、纸屑灰尘、泥土的为不合格标本.显微镜下筛选：对经过目测筛选的标本须经过显微镜下再次筛选，凡脓细胞>25/HP且复层鳞状上皮<10/HP的标本为合格标本，可进入下一步程序；而脓细胞〈10/HP或复层鳞状上皮〉25/HP的标本为不合格标本，应拒收.1.1。

2、尿标本：目测:采用一次性无菌杯，杯盖严密者为初步合格；显微镜下筛选：标本经过离心后镜检，凡有较多复层鳞状上皮的，脓细胞较少而细菌数量较多的、或有大量尿结晶析出的均为不合格标本，应拒收。

1.1.3、大便标本：采用一次性无菌杯，杯盖严密，无明显灰尘、泥土或纸屑者为合格标本. 1。

1。

4、咽拭子标本：须采用显微镜下筛选，凡无脓细胞的标本为不合格标本，应拒收；而脓细胞>10/HP的为合格标本。

——怀疑为风湿热、猩红热的病人除外。

1。

1。

5、血液、骨髓、心包液：凡未接种于血培养瓶中的均为不合格标本，应拒收。

1。

1.6、各种穿刺液：所有标本均采用无菌容器送检或未接种于血培养瓶中,否则为不合格标本，应拒收。

1.1.7、脑脊液、生殖道标本：采用一次性无菌杯或直接接种于血培养瓶中，由医护人员（住院病人）或病人家属（门诊病人）当面交送给专业微生物检验人员，经过询问是在30min内，保温保湿条件下运送的方为合格标本，否则应拒收。

1。

1.8、其他标本：必须是采用无菌容器运送的，且在相应规定时间内送检的才是合格标本. 1。

2、标本预处理:1.2。

1、痰标本：按《全国临床检验操作规程》（第二版）相关章节，采用先用20ml生理盐水洗涤两次,经过10ml生理盐水稀疏后，用接种钩钩取脓性部分，采用压片法制作痰涂片，再在杯中加入胰蛋白酶消化1-2小时后接种。

1.2。

2、尿标本：WBC<5/HP的尿标本不用进行培养，因为很少会出现没有细胞渗出的尿路感染.当WBC>5/HP时，取4 ml离心后，弃去上清液,留下200µl混匀后接种，剩余标本涂片干燥后染色；不离心标本用于菌落计数，方法，取5ml生理盐水，加入50µl尿液标本，混匀后取100µl接种，结果×1000为每毫升菌落数。

临床微生物学检验(sop)确保高压效果的可靠性。

【适用范围】蒸气式高压锅。

【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。

【操作方法】1．将水加到高压锅内至其刻度线，将欲灭菌物品放入锅内，关闭锅门，拧紧螺丝并确认已经封闭。

2．打开排气阀。

3．打开蒸汽开关，向锅内输入蒸汽或接通电源，使产生蒸汽。

4．观察排气阀的排气情况，待排出的气体由冷气变为蒸汽，压力表达到0.05mPa 时，关闭排气阀。

5．观察压力表，当压力升至0.15mPa时，开始计时。

6．压力达0.15mPa后，可调节进气阀，减少进气量，维持压力并使其稳定在0.15mPa。

电加热时，可切断电源，维持压力持续15分钟，至多不超过30分钟，否则营养物质破坏。

7．关闭进气阀门或切断电源，让锅内物品自然冷却，不可马上打开排气阀，以免发生意外。

8．待锅内压力降为零时，可打开锅盖，取出物品。

操作人员部门主管质量负责人姓名 ****** ****** ****** 日期 **年**月**日确保培养箱温度恒定。

【适用范围】各种类型隔水式、温度设定为27℃、35℃、42℃、56℃培养箱。

【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。

【操作方法】1．培养箱应放置于水平地面（或坚固的水平台），电源电压须匹配。

2．从注水口先将隔水箱内的水注满到浮标要求的位置。

3．将温度调节旋扭调至所需温度，然后将电源开关拨至“开”处。

4．每次使用时应在培养箱顶部插入标准温度计，监测实际温度。

5．培养箱工作温度波动范围应控制在±10C以内。

6．培养箱正面贴有温度记录表，记录每天上班和下班时温度，如温度超出正常范围，指示该温度的刻度应划上红圈，并把修正温度记录下来。

7．培养箱内外应保持清洁。

操作人员部门主管质量负责人姓名 ****** ****** ******日期 **年**月**日保证培养基的质量。

6.7微生物验收标准见附表3。

6.8微生物检测取样计划具体见下表:
6.8.1备注：以上均需按取样计划进行，其中成品、原材料可根据每天检验工作量做适当调整；出现异常情况，要根据实际情况进行连续取样检测。

6.9附表1：双料及单料管操作说明
6.9.1取样量（稀释后）大于1ml的用双料，小于lml（包括lml）的用单料
6.9.2具体取单料还是双料我一般是根据产品标准要求定的，主要包括3类情况：
6.9.2.1产品大肠菌群测定结果要求小于等于300/100ml（g）的时候，稀释10倍的做3管（每管取样1ml）；稀释100倍的做3管（每管取样1ml）；稀释1000倍的做3管（每管取样1ml）
6.9.2.2产品大肠菌群测定结果要求小于等于30/100ml（g）的时候，稀释10倍的做6管，包括3管双料（每管取样10ml）、3管单料（每管取样1ml）；稀释100倍的做3管（每管取样1ml）6.9.2.3产品大肠菌群测定结果要求小于等于3/100ml（g）的时候，原液做6管，包括3管双料（每管取样10ml）、3管单料（每管取样1ml）；稀释10倍的做3管（每管取样1ml）
6.9.3实际上，用乳糖胆盐发酵管时，只要“加到培养基里的菌悬液的量”大于1ML，就用双料，其余的（1和1以下）用单料。

这里的菌悬液的量不是指其中原样品的量，而是实际吸取的液体。

6.9.4之所以要用双料和单料是因为从理论上说，加到培养基里的样品的量多，它含大肠菌群的量就多，它们生长发育新陈代谢所需要的营养就多，所以要用双料，否则它们会因为营养不良而表现不出他们应该反映的现象。

6.10附表2：稀释度选择及菌落数报告方式
6.11附表3：微生物判定标准。

分发单位生产部〔〕质量管理部〔〕质检中心〔〕动力设备部〔〕固体制剂车间〔〕注射剂车间〔〕物供部〔〕人力资源部〔〕行政办公室〔〕销售部〔〕计财部〔〕1 适用范围:本规程规定了微生物限度检查方法及操作要求，适用于本公司检品的微生物限度检查。

2 责任人:•质检中心生测组检验员。

3 仪器、设备:超净工作台恒温培养箱生化培养箱显微镜高压蒸气消毒器酒精灯无菌衣、裤、帽、口罩消毒鞋刻度吸管(1ml、10ml) 具塞试管(20ml) 三角瓶(100ml) 平皿(φ90mm) 乳钵镊子接种环棉花洗耳球除菌滤器抽滤瓶(1000ml) 微孔滤膜(≤0.45μm) 恒温干燥箱4 试验前的准备工作4.1 用具的包扎:4.1.1 刻度吸管：在刻度吸管上端管内，松松地塞进少许棉花，然后分别用纸严密卷好，再取一层消毒布与牛皮纸包好。

4.1.2 用布袋将洗净晾干的无菌衣、裤、帽、口罩、配套装入，扎紧口袋，再用牛皮纸包扎好。

4.1.3 每批样准备20个清洁的φ90mm平皿，用消毒布和牛皮纸包扎好。

4.1.4 滤器: 将微孔滤膜先在水中浸泡湿润,取出后固定在细菌滤器的滤板上。

滤板上、滤膜下均用耐高温垫圈垫好,上好滤器。

滤器的螺旋灭菌前勿拧太紧，滤器上口用8层纱布及牛皮纸包扎，装妥后放入瓷盒内，再将盛滤器的瓷盒盖好盖子，用牛皮纸包扎。

4.2 用具的灭菌:无特殊要求,请参照《卧式圆形压力蒸气消毒器SOP》操作。

4.3 洁净室的消毒及检测:无特殊要求,请参照《洁净室清洁SOP》、《沉降菌取样SOP 》操作。

4.4 培养基的配制:请参照商品干燥培养基使用说明书规定方法配制，测试其pH值,应符合规定,否则应校正。

5 细菌、霉菌及酵母菌计数5.1 计数培养基的适用性检查5.1.1 菌种:⑴大肠埃希菌[CMCC(B)44102]⑵金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]⑶枯草芽胞杆菌[CMCC（B）63504]⑷白色念珠菌〔CMCC（F）98001〕⑸黑曲霉〔CMCC（F）98003〕5.1.2 菌液的制备：5.1.2.1 接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、桔草芽胞杆菌的新鲜培养物至营养肉汤中；接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30-35℃培养18-24小时。

第一篇 绪 论第一节检验项目一．临检室开展的检验项目：检验项目 检验仪器 试剂名称 检验方法血常规 TEK200 配套试剂 电阻抗法、光电比色ABO血型鉴定 ——一氧化碳血红蛋白——定性检查尿液干化学 Uritest-300 —— 光电比色尿沉渣 DiaSys R/S 2003 —— 标准计数池镜检 尿妊娠试验 ——便常规一般性状检查，显微镜检查：细胞类型、食物残渣、寄生虫卵或原虫化验检查，隐血试验。

脑脊液检验一般性状检查：颜色、透明度、凝固性；显微镜检查：细胞总数、白细胞数及分类浆膜积液检验一般性状检查：颜色、透明度、凝固性；显微镜检查：细胞总数及有核细胞计数、有核细胞分类。

精液检验一般性状检查：量、颜色及透明度、粘稠和液化、酸碱度；显微镜检查：活率、活动力、数量、形态、其它细胞。

前列腺液检验：红细胞、白细胞、卵磷脂小体、其它细胞阴道分泌物检验：清洁度、滴虫、霉菌。

二．血液室开展的检验项目：编写者：审批者：审批日期：Page １ of 213检验项目 检验仪器 试剂名称 检验方法 血象检验骨髓象检验红斑狼疮细胞检验血凝项检验 血凝分析仪CA530 配套试剂 详见仪器操作 血流变检验 LBY-N6B血流变仪 —— 同上三．生化室开展的检验项目：检验项目 检验仪器 试剂名称 检验方法肝功(ALT AST ST/LT GGT ALP TP ALB GLO A/G TBIL DBIL IBIL )、肾功（BUN CRE UN/CR UA CO2CP）、心肌酶（CK CKMB α-HBDH LDH LD/HB）、血脂（CHO TG HDL LDL）、离子（K Na Cl Ca Mg P）、淀粉酶(AMY)、血糖(GLU)、风湿系列(CRF ASO CF)、尿微量蛋白 自动生化分析仪OLYMPUS AU400四．免疫室开展的检验项目：检验项目 检验仪器 试剂名称 检验方法肺支原体检验 —— 金标免疫斑点法 人类免疫缺陷病毒HIV 1+2型抗体诊断—— 金标法梅毒检验 —— 梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂盒心肌抗体检验 抗心肌（AHMA）IgG抗体酶联试剂盒结核抗体检测 —— 金标免疫斑点法 人囊虫病检测 —— 人囊虫病（CYT）检测试剂盒甲型肝炎病毒IgM 抗体诊断 洗板机、酶标仪 甲型肝炎病毒IgM抗体诊断试剂盒酶联免疫法丙型肝炎病毒抗体（Anti-HCV）诊断 洗板机、酶标仪 丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒酶联免疫法编写者：审批者：审批日期：Page ２ of 213戊型肝炎病毒抗体诊断洗板机、酶标仪 戊型肝炎病毒抗体诊断试剂盒酶联免疫法乙型肝炎病毒表面抗原诊断洗板机、酶标仪 乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒乙型肝炎病毒表面抗体诊断洗板机、酶标仪 乙型肝炎病毒表面抗体诊断试剂盒乙型肝炎病毒核心抗体诊断洗板机、酶标仪 乙型肝炎病毒核心抗体诊断试剂盒乙型肝炎病毒e抗原诊断洗板机、酶标仪 乙型肝炎病毒e抗原诊断试剂盒乙型肝炎病毒e抗体诊断洗板机、酶标仪 乙型肝炎病毒e抗体诊断试剂盒FT3 ACS:180PLUS 配套试剂FT4 ACS:180PLUS 配套试剂TSH ACS:180PLUS 配套试剂AFP ACS:180PLUS 配套试剂CEA ACS:180PLUS 配套试剂ISI ACS:180PLUS 配套试剂CpS ACS:180PLUS 配套试剂五．微生物室开展的检验项目：检验项目 检验仪器 试剂名称 检验方法 细菌培养+药敏试验 计算机 生化管及药敏纸片 对应生化、测直径 淋球菌涂片检验 显微镜、玻片 革兰染液 涂片镜检 滴虫、霉菌涂片检验 显微镜、玻片 革兰染液 涂片镜检 结核杆菌涂片检验 显微镜、玻片 抗酸染液 涂片镜检 院内感染监测 根据标准分析注：以上表单内容若有疏漏之处，详见第三篇检验仪器操作部分。

引言概述微生物实验室在科学研究、医学诊断和药品开发等领域扮演着重要角色。

为了确保实验室操作的规范性和安全性，制定和执行标准操作规程(SOP)文件变得至关重要。

本文旨在介绍最新微生物实验室SOP文件（二）的内容和结构。

该SOP文件的内容涵盖了实验室的日常操作、样品处理、设备使用、风险防控以及数据管理等方面。

正文内容1.实验室规范操作1.1实验室安全和卫生要求强调实验室内个人防护措施，如戴口罩、手套、实验服等；确定实验室安全区域，警示标识的使用；指导实验室内的废弃物管理。

1.2实验室设备操作规范提供常见实验设备的正确使用方法，如培养箱、离心机等；对于有特殊要求的实验设备，如PCR仪，提供详细的操作步骤。

1.3样品收集和处理引导样品采集的方法和规范；介绍样品处理过程中的注意事项，如消毒处理、样品保存等。

2.样品处理流程2.1样品接收和标记规定样品接收的流程和记录方式；强调样品标记的重要性，以确保正确识别和追溯。

2.2样品准备和稀释提供适当的样品准备和稀释的指导；强调按照标准操作程序进行操作，避免样品污染和误差。

2.3样品培养和分离介绍不同类型的培养基的选择和制备；引导分离微生物的方法，如纯培养、拮抗筛选等。

2.4样品保存和运输提供正确的样品保存条件和时间；强调样品运输的准备工作，如合适的包装、冷链运输等。

3.设备使用与维护3.1实验设备的验证和校准详细说明实验设备验证和校准的程序和周期；强调校准结果的记录和维护。

3.2设备的日常使用提供设备的日常清洁和消毒方法；强调设备使用前的检查和注意事项。

3.3设备维护与故障处理提供设备维护的周期和方法；引导故障排除的步骤和常见故障的解决方法。

4.风险防控措施4.1生物安全操作规范(BSC)的使用解释BSC的原理和分类；强调在特定实验条件下使用BSC的重要性。

4.2操作中的风险评估引导实验人员进行实验过程中的风险评估；提供风险控制方法和措施。

4.3废物处理和生物安全风险评估介绍实验室废物的分类和处理方法；强调进行生物安全风险评估的必要性。

微生物限度检查SOP1.适用范围：适用于本公司各品种微生物限度检查。

1.职责检验员：严格按SOP进行检验。

QC主管：监督检查执行情况。

2.定义微生物限度检查法系指非规定灭菌制剂及原、辅料、包材受到微生物污染程度的一种检查方法，包括染菌量及控制菌的检查。

3.微生物限度检查的一般要求4.1环境要求微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。

检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。

单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

4.2.供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。

4.3培养温度要求除另有规定外，本检查法中细菌培养温度为30～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23～28℃；控制菌培养温度为35～37℃。

4.4检验结果报告单位检验结果以1g、1ml、10g、10ml或10cm2为单位报告，包材按相应质量标准的规定进行。

4.5抽样和样品保存4.5.1.按批号随机抽样，抽样量为检验用量（2个以上最小包装单位）的3倍量。

4.5.2.抽样时，凡发现有异常或可疑的样品，选取有疑问的样品，但机械损伤、明显破裂的包装不得作为样品。

4.5.3凡能从药品、瓶口（外盖内侧及瓶口周围）外观看出长螨、发霉、虫蛀及变质的药品可直接判为不合格品，无须再抽样检验。

4.5.4.供试品在检验之前，保存于阴凉干燥处，勿冷藏或冷冻。

4.5.5.供试品在检验之前，保持原包装状态，严禁开启，并保存在阴凉干燥处（勿冷藏或冷冻）。

已开启样品不得作为供试品。

4.6. 主要仪器及器具恒温培养箱、生化培养箱、恒温水浴锅、电冰箱、超净工作台、生物显微镜、放大镜、电热恒温干燥箱、电热压力消毒器、药物天平、锥形瓶、研钵、培养皿（9cm）、量筒（100ml）、试管（18×180mm）、吸管（1ml）、棉塞、接种针、记号笔。

实验室生活饮用水微生物检测SOP（一）引言概述：实验室生活饮用水微生物检测SOP是为了确保实验室饮用水的安全与卫生，检测水中的微生物污染情况，并采取相应的措施进行处理。

本文将详细介绍实验室生活饮用水微生物检测的步骤和要点。

正文：一、实验室生活饮用水微生物检测前的准备工作1. 准备所需的检测设备和试剂，包括培养基、平板计数器、显微镜等。

2. 清洗和消毒检测设备，确保设备的洁净和无菌。

3. 确保实验室供水管道的安全和干净，避免水源污染。

二、水样采集和处理1. 选择合适的水样采集器具，如钢质水样容器或无菌采样瓶。

2. 在采集水样前进行必要的洗手和佩戴消毒手套，以避免污染水样。

3. 选取水源合适的位置采集水样，尽量避免水源受到外界污染。

4. 采集水样后立即送至实验室进行处理，避免样品在运输过程中受到污染。

三、水样预处理1. 对水样进行过滤，以去除大颗粒物质和悬浮物。

2. 进行稀释处理，确保微生物数量在检测范围内。

3. 根据需要进行pH调节或添加抑菌剂，以保证后续检测的准确性和可靠性。

四、微生物检测方法1. 采用培养法进行微生物定量分析，包括总菌落计数和特定菌群检测。

2. 根据需求选择合适的培养基和培养条件，如温度、pH值等。

3. 加入样品到培养基中，进行平板计数或液体培养，并进行恰当的菌落计数。

4. 进行特定菌群的检测，如大肠杆菌、沙门氏菌等，采用相应的培养基和检测方法。

5. 采用显微镜观察法进行微生物形态和特征的检测，确保检测结果的准确性。

五、结果分析和处理1. 根据检测结果进行微生物数量统计和分析，比较检测结果与相关标准的符合情况。

2. 如发现微生物污染超过标准限值，及时采取措施进行处理和消毒。

3. 记录检测结果，并保留相关文件和数据，以备日后参考和审查。

总结：实验室生活饮用水微生物检测SOP的实施可以确保实验室饮用水的卫生安全。

通过准备工作、水样采集和处理、微生物检测方法的选择和结果分析处理，可有效地监测和控制实验室饮用水中的微生物污染，保障实验室工作人员的身体健康和实验室环境的卫生安全。

一、目的：避免人为因素污染药品，保证检验结果的准确性。

二、范围：适用于微生物室洁净区操作人员手部和工作服的微生物检测。

三、职责：微生物室负责人：监督检查检验员执行本操作规程 微生物室检验员：负责对本规程的实施。

四、内容：1、测试方法：接触平皿法。

1.1器具及培养基：培养箱、营养琼脂培养基、培养皿 1.2取样点的选择1.2.1手套取样时，包括双手的手指和手掌 1.2.2工作服表面取样包括前臂的袖管和前胸。

1.3测试步骤1.3.1取样人员取样前检查接触琼脂平皿，不能使用被微生物污染、水汽过多、过于干燥或分装不均匀的平皿。

1.3.2取样时打开碟盖，无菌培养基表面与取样面直接接触，取样面积一般为25cm 2，均匀按压接触碟底板，确保全部琼脂表面与取样点表面均匀充分接触，接触约5秒钟，再盖上碟盖。

并同时做阴性对照。

1.3.3 将所有培养皿在20～25℃培养72小时，再转至30～35℃培养48小时。

1.3.4 培养结束时，对每个培养皿进行计数并统计最终结果。

1.3.5人员微生物监测频率和限度按表1表12、注意事项2.1取样前不得对手套进行消毒。

2.2取样后，应立即用75%酒精喷洒被取样表面，以除去残留琼脂。

2.3取样后必须对手部进行彻底消毒。

2.4污染的平皿经121℃高压灭菌后方可销毁。

3、偏差纠正3.1出现异常情况，立即查找污染源，并进行彻底的清洁消毒。

3.2每年对人员监测的微生物数据进行趋势分析，如果发现表面微生物有增加的趋势，应立即展开调查，根据调查结果采取措施对系统进行纠正。

五、参考文献：药品生产质量管理规范（2010年修订）六、相关文件：N/A七、相关记录：EK/REC-QC076洁净区操作人员微生物监测记录八、变更记录及原因：。