紫外分光光度计测试项目

依据：《GMP》与药品生产质量检验的要求目的：建立紫外分光度法检验标准操作规程范围：用于成品、原辅料鉴别、检查和含量测定1．仪器：紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。

为了满足紫外可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区2．检定2.1波长准确定2.1.1波长准确度的允差范围：双光束光栅型紫外一可见分光光度计波长准确度允许误差为±0.5mm。

单元束棱镜型350mm处±0.7nm，500nm处±2.0nm，700nm±4.8nm2.2吸收度准确度：精密称取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，置1000ml量瓶中，用硫酸液（0.005mol/l）为空白，在235、257、313、350nm分别测定吸收度，然后换算成E1%1cm，测得值应符合下表中规定的允差范围（±1%），国际药典规定的允差亦为±1%。

分光光度法允差范围波长（nm）吸收强度吸收系数（E1%/1cm）允差范围235最小124.5123.3－125.7257最大144.0142.6－145.4313最小48.6248.3－49.11350最大106.6105.5－107.7分辨率、杂散光、基线平直度、稳定度、绝缘电阻等项检定，按中华人民共和国国家计量检定规程JJ6682～90(双光束紫外可见分光光度计检定规程)执行，并应符合有关项下的规定。

日常常规测定主要是对以上两项时常检查。

3．样品测定操作法3.1 吸收系数测定(性状项下)按各该品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的波长(参见4.8项)测定其吸收度，并计算吸收系数，应符合规定的范围。

3,2鉴别及检查：按各该品种项下的规定，测定供试品溶液在有关波长处的最小及最大吸收，有的并须测定其各最大吸收峰值或最大吸收与最小吸收的比值，均应符合规定。

紫外分光光度计检测项目紫外分光光度计是一种常用的实验仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域的分析和检测工作中。

它通过测量样品在紫外光区域的吸收特性，来确定样品的组成、浓度以及其他相关信息。

紫外分光光度计的工作原理是基于光的吸收特性。

当紫外光通过样品时，样品中的分子会吸收特定波长的光，产生吸收峰。

通过测量吸收峰的强度，可以得到样品的吸光度值。

吸光度与样品中溶质的浓度成正比关系，因此可以通过测量吸光度来确定溶质的浓度。

紫外分光光度计通常由光源、单色器、样品室、光电二极管和信号处理器等组成。

光源发出紫外光，经过单色器选择特定波长的光线，然后通过样品室，样品室中的样品吸收部分光线，其余光线被光电二极管接收并转化为电信号，最后由信号处理器进行信号放大和数据处理。

在使用紫外分光光度计进行检测时，首先需要校准仪器。

校准过程包括调节单色器、调节光源强度和零点校准等步骤，以确保仪器的准确性和稳定性。

校准完成后，可以进行样品的测量。

在测量过程中，需要注意选择合适的波长范围和波长值，以确保测量结果的准确性。

同时，还需要选择合适的样品室和样品池，以适应不同类型和形态的样品。

在放置样品时，应注意避免气泡和杂质的干扰，以保证测量结果的可靠性。

紫外分光光度计的应用非常广泛。

在化学领域，它可以用于分析有机物和无机物的浓度、反应动力学等；在生物领域，可以用于蛋白质、核酸等生物大分子的测定；在环境领域，可以用于水质、大气污染物等的监测。

此外，紫外分光光度计还可以用于药物研发、食品安全等领域的分析和检测工作。

紫外分光光度计是一种重要的实验仪器，具有广泛的应用前景。

通过测量样品在紫外光区域的吸收特性，可以得到样品的吸光度值，从而确定样品的组成、浓度等相关信息。

在实际应用中，需要注意仪器的校准和样品的处理，以确保测量结果的准确性和可靠性。

紫外分光光度计在化学、生物、环境等领域的分析和检测工作中发挥着重要的作用，为科学研究和工程实践提供了有力的支持。

紫外分光光度计测定固体或粉末中的游离甲醛摘要：本文建立了一种采用紫外可见分光光度计测试易溶于水的固体或粉末样品中甲醛含量的方法。

通过样品蒸馏，馏出液中的甲醛与乙酰丙酮反应生成黄色化合物溶液，用紫外分光光度计在412nm波长下测定黄色溶液的吸光度值，通过标准曲线换算得到游离甲醛的含量。

结果表明，甲醛在0.04µg/mL~1.6µg/mL范围内线性良好（r2>0.999），回收率为98~99%，相对标准偏差<10%，方法定量限可低至5mg/kg，可用于测定固体或粉末样品中游离甲醛的含量。

关键词：固体；粉末；甲醛；蒸馏法；紫外可见分光光度计Determination of Formaldehyde in Solid or Powder by UVYanfen Huang Yufa MiaoAbstract: A method was established for testing the formaldehyde content in solid or powder samples that are easily soluble in water using a UV spectrophotometer.Through distillation, formaldehyde in the distillate reacts with acetylacetone to form a yellow compounds. The absorbance value of the yellow solution is measured using a UV spectrophotometer at a wavelength of 412nm, and the content of free formaldehyde is obtained through standard curve conversion. Theresults showed that formaldehyde have good linearity in the range of 0.04µg/mL~1.6µg/mL (r2>0.999), values of recovery in the range of98%~99%, the RSDs were less than 10%, and the quantitative limit of the method can be as low as 5mg/kg. It can be used to determine the content of free formaldehyde in solid or powder samples.Keywords: solid; powder; formaldehyde；distillation；UV spectrophotometer引言甲醛又称蚁醛，是一种无色、刺激性气体，化学式CH2O，易溶于水和乙醇。

紫外可见分光光度计（UV-Vis分光光度计）是一种用途广泛的光学仪器，可用于测量物质对紫外和可见光的吸收和反射率。

在材料科学和化学领域，紫外可见分光光度计被广泛应用于测试薄膜的反射率。

本文将探讨紫外可见分光光度计测试薄膜反射率的原理。

1. 紫外可见分光光度计紫外可见分光光度计是一种利用分光仪原理，测量材料吸收或透射光的仪器。

它可以在紫外、可见光范围内测量样品对特定波长光的吸收或反射率。

2. 薄膜反射率测试薄膜反射率是指薄膜表面对入射光的反射能力。

通常使用紫外可见分光光度计来测试薄膜在不同波长下的反射率，以评估薄膜的光学性能。

3. 反射率测试原理在使用紫外可见分光光度计测试薄膜反射率时，通常会将薄膜样品固定在样品舱中，然后利用分光光度计发出特定波长的光，经过样品后被探测器检测。

根据探测器接收到的光强，计算出薄膜在该波长下的反射率。

4. 正弦光束法一种常用的测试薄膜反射率的方法是正弦光束法。

该方法通过调节入射角度和光路长度，使得探测器能够测量薄膜在不同入射角度下的反射率。

这样可以得到薄膜在不同波长和入射角度下的反射率曲线。

5. 测量注意事项在进行薄膜反射率测试时，需要注意样品的制备和处理，确保样品表面平整、无气泡和杂质。

另外，还需要校准仪器，选择合适的波长范围和入射角度，以获得准确的反射率数据。

6. 应用领域薄膜反射率测试在光学材料、太阳能电池、涂料、光学薄膜等领域都有广泛应用。

通过测试薄膜的反射率，可以评估其光学性能，为材料研发和生产提供重要的数据支持。

在紫外可见分光光度计测试薄膜的反射率原理中，正弦光束法是一种常用的测试方法，通过调节入射角度和光路长度，测量薄膜在不同入射角度下的反射率，得到反射率曲线。

在进行测试时，需要注意样品制备和处理，以及仪器的校准和参数选择，以获得准确的反射率数据。

薄膜反射率测试在光学材料、太阳能电池、涂料等领域的应用价值巨大，为材料研发和生产提供重要的数据支持。

紫外可见分光光度计在测试薄膜反射率时，除了使用正弦光束法外，还可以采用其他方法进行测试，例如准直束法、全反射法、矢量法等。

紫外分光光度计检测范围
嘿，朋友！您知道紫外分光光度计不？这玩意儿可神奇啦，能帮咱检测好多东西呢！
咱先来说说它能检测的物质类别。

就像一个超级侦探，能发现各种“神秘分子”。

比如说有机化合物，那些复杂的分子结构，在紫外分光光度计的“法眼”下可藏不住。

像氨基酸、蛋白质，这些可是生命活动中的重要角色，紫外分光光度计能把它们的“行踪”摸得透透的。

还有核酸，这可是遗传信息的携带者，它也能检测得明明白白。

再看看它在环境监测中的大作用。

您想想，咱生活的环境里，是不是有各种各样的污染物？紫外分光光度计就像一个勇敢的卫士，能检测出水中的有机物污染，比如说农药残留、工业废水里的有害物质。

这就好比在黑暗中为我们点亮了一盏明灯，让那些隐藏的“环境杀手”无处遁形，您说厉害不厉害？
在医药领域，它更是大显身手。

药物的纯度和含量，那可是关乎咱们健康的大事。

紫外分光光度计能精确地检测出来，确保我们吃进去的每一片药都是有效的、安全的。

这难道不像是给我们的健康上了一道保险锁吗？
还有食品行业，您吃的那些美味食物，它能检测出其中的添加剂是否超标。

是不是就像给我们的餐桌加了一道“安检门”？
说到检测范围的具体数值，那也是相当广泛。

从低浓度的微量物质到高浓度的大量物质，它都能应对自如。

就好比一个大力士，不管是轻如鸿毛还是重如泰山，都能稳稳地扛起来。

您说，如果没有紫外分光光度计，我们在很多领域岂不是像盲人摸象，摸不清状况？所以啊，这紫外分光光度计的检测范围可真是太重要啦，为我们的生活、健康、环境等方方面面都提供了有力的保障和支持！。

紫外-可见分光光度法紫外分光光度：紫外光区特定波长内的吸收度，被测物质或杂质的定性和定量紫外-可见分光光度计的工作波长：190-900nm近紫外区（氘灯）200-400nm 可见光区（碘钨灯）400-850nm定量分析:①最大吸收波长处测出吸收度②对照品或百分吸收系数算出被测物或杂质的含量双光束光栅型紫外-可见分光光度计波长准确度误差±0.5nm一、样品测定：⑴吸收系数测定:①按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法配制供试液②在规定的波长测定其吸收度③计算吸收系数，应符合规定范围⑵鉴别与检查：按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定测定供试品在有关波长处的最大或最小吸收，或最大吸收峰值或最大或最小吸收的比值，应符合规定⑶含量测定：①对照品比较法㈠按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法分别配制对照品和供试品溶液注：对照品中所测成分的量应在供试品中所测成分标示量的(100±100)%以内㈡用同一溶剂，在规定的波长处测定供试品和对照品的吸收度②吸收系数法㈠按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法配制供试品溶液㈡在规定波长（±1nm）处测定其吸收度㈢按食品药品监督管理局标准的该药品在规定的条件下给出的吸收系数计算含量具体过程对照品比较法①调节波长测吸光度（吸光度最大波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内）②A样品的吸光度:A对照品的吸光度= C样品:C对照品(C为浓度，mg/ml)C样品=A样品的吸光度×C对照品/A对照品的吸光度C样品×A对照品的吸光度= A样品的吸光度×C对照品P﹪（所含物质占标示量的百分比）= C供试品-稀释后的对照品×A对照品的吸光度/ A 样品的吸光度×C对照品×供试品的标示含量例1奥硝唑含量（紫外分光光度计）：⑴对照品①取0.0113g奥硝唑溶于100ml的容量瓶中稀释至100ml②从容量瓶中取出5ml③再用蒸馏水稀释至50 ml在319nm处测得对照品A（吸光度）=0.465⑵供试品①取5ml供试品于100lml的容量瓶中稀释至100ml②从容量瓶中取出5ml③用蒸馏水稀释至25ml319nm处供试品A1=0.413 供试品A2=0.417⑶①P﹪（所含物质占标示量的百分比）=0.413供试品的吸光度ⅹ(0.0113g/100ml)对照品浓度ⅹ(5/50) / 0.465对照品的吸光度ⅹ(5ml/100ml) ⅹ(1/25ml)ⅹ0.5g﹪ml标示含量供试品浓度ⅹ 100﹪=100.36﹪注：0.5﹪（供试品的标示含量）表示100ml 0.5g②P﹪= P1﹪+ P2﹪ /2。

UV 530紫外-可见分光光度计验证方案Qualificati on Protocol for UV/VIS Spectrophotometer**** UV 530F/QC/EQP-010-01本文件须经过XXXX药业股份有限公司授权方能复印！This document cannot be duplicated without a xxxx Pharm.Co.Ltd. AuthorizationREVIEW AND APPROVAL PAGE OF VALIDATION PROTOCOLREVIEW AND APPROVAL PAGE OF VALIDATION PROTOCOL6.1 安装确认 (Installation Qualification, IQ)6.1.1 仪器的组成信息( Composition of the Equipment ) 6.1.2 紫外 -可见分光光度计的性能描述( Description of the Specifications of the Equipment ) (8)....................................................................................................................................................................1. 验证目的( Purpose )2. 3. 4. 5. 6. 目录TABLE OF CONTENTS引用标准( Reference Documentation ) 系统描述( System Description ) 职责( Responsibilities )4.1 检查者( Operator ) 4.2 审核者( Reviewer ) 4.3 负责人( Manager )验证的管理( Qualification Management )5.1 人员( Personnel )5.2 记录和数据( Data Assembly )5.3 文件要求( Documentation Requirements ) 5.4 偏差处理( Deviations ) 5.5 再验证( Requalification )验证检查和测试( Qualification & Tests )5.. .5.. .5. .6.. .6.. .6.. .6. .7. .7. .7. .7.. 7.. .7.. .8. .8. 8..6.1.3 售后服务( Service)............................................................................................................... 8 ............6.1.4 文件的确认和保管( Documents Verification & Storage )..................................................... 8.6.1.5 安装环境确认( Verification of Installation Environment ).................................................... 9.6.1.6 设备信息( Equipment Information )9..6.1.8 安装确认的结果及结论( Result & Conclusion of installation Qualification ) ................. 1..06.2 运行确认( Operation Qualification, OQ ).1.1..6.2.1 测试项目和认可标准( Test items and Acceptance Criteria).1.1..6.2.2备件与材料( Materials & Reagents) 1..1.6.2.3 软件系统安全性确认( Verification of the Safety of Software ).1..1.6.2.4 波长准确度（Wavelength accuracy) 1..1.6.2.5吸收度准确度Absorption accuracy) 1..2..6.2.6 杂散光检查（Stray Light ) 1..2..6.2.7 吸收度线性（Absorption Linearity ).1..2.6.2.8吸收池配对试验( Absorption cell match ).1.3..6.2.9 运行确认的结果及结论( Result & Conclusion of Operation Qualification ).1.3.6.3 性能确认(Performance Qualification, PQ) .1..4.6.3.1 目的 1..4.6.3.2 图谱扫描.1..4.6.3.3 吸收度测定和绘制标准曲线 1..4..6.3.4评价标准.1..4.6.3.5 性能确认的结果及结论( Result & Conclusion of Performance Qualification ).1.4 7. 验证执行的评价和概要( Qualification Executive Summary) 1..5.. 附件A - Q 1..6..1. 验证目的（Purpose）日本JASCO Corporation V-530 型双光束紫外-可见分光光度计主要用于样品的定量分析如含量测定和定性分析如紫外吸收图谱的扫描等分析测试。

分子光谱实训报告班级：----------------学号：_______________________ 姓名：______________________指导教师：_______________2015年10月紫外■可见分光光度计的检测实训日期______ 年_____ 月 ____ 日教师评定：________________【仪器概况】仪器名称：紫外-可见分光型号：UV1801厂家：北京瑞利编号：090953、【仪器结构】三、【实验项目】波长准确度检查仪器零点稳定性检查光电流稳定度检查吸光度准确度检查紫外区透色比检查杂散光合格性检查吸收池配套性检查皿差四、【仪器及试剂准备单】1、试剂清单（以1个小组6人为例）H2SO3、K2Cr3O7、HCI04、碘化钠、蒸馏水、亚硝酸钠、无水乙醇、苯、硫酸铜。

2、仪器清单（以1个小组6人为例）UV1801紫外分光光度计、烧杯14个、容量瓶9个、玻璃棒、滤纸、洗瓶、错钕滤光片、比色皿、胶头滴管、洗耳球、移液管、表面皿、移液管架。

五、【检测步骤】开机自检（5个ok）（一）、波长准确度可见分光光度（空气）1 、按1、波长扫描；按F1,参数设置（E、波长范围460--680nm、间隔0.1nm、换灯点800nm）按返回键。

2 、按F2,根据显示屏提醒，确定键；出现两个峰，分别记录两个峰值的波长和吸光值。

（重复3次；参比和样品都是空气）。

错钕滤光片1 、按F1,参数设置（A、波长范围500--540nm、间隔1nm换灯点360nm）按返回键。

2 、把错钕滤光片放在第二格，关盖；按F2,根据显示屏提醒，拉入参比，确定键；再拉入样品，确定键；出现一个峰，记录读数。

紫外分光光度1 、按F1,参数设置（A、波长范围200--270nm、间隔0.1nm、换灯点360nm）按返回键。

2 、力口3滴苯在石英比色皿中，盖上比色皿盖，放在第二格，关盖；按F2,根据显示屏提醒，拉入参比，确定键；再拉入样品，确定键；出现五指峰，分别记录五个不同峰的波长和吸光值。

紫外分光光度法测细菌OD值
注意事项：
1.一般测菌体密度的OD的波长范围是580nm-660nm，波长在紫外范围内才能够
测量
2.如用水做空白，需要离心洗涤菌体（不会做）；如用不接种的培养基做空白
就不需要洗涤,不接种的培养基要和接种的同时培养,以求条件一致
3.OD值最好控制在0.1-0.4内，在这个区间得到的值很可靠，最好不要超过
1.0；如果大于
2.0，要稀释后再测，OD太大时，分光光度计的灵敏度会显
著降低
4.测吸光值的整个实验过程中，要保持发酵液或菌体的稀释倍数一致，可保证
整个实验点有可比性（吸光值与稀释倍数不一定成正比）；取值的时候要连续读数，重复3次的数最好
5.进行OD值测定时，分光光度计上显示的数值为每毫升溶液中的OD值。

当测
定200 ml溶液中的OD值为1.5时，溶液整体的OD量应该为1.5OD/ml ×
0.2L = 0.3OD
测菌体密度的OD的波长可以自己摸出来，看看用哪个波长有最大吸收就可以了。