紫外可见分光光度法测定苯甲酸

ｌ ０
北方药学 ２ ０ １一可见分光光度法测定复方苯 甲酸软膏 中水杨酸的含量
王 慧 （ 河南省洛阳市食品药品检验所 洛阳 ４ ７ １ ０ ２ ３ ）
摘要 ： 目的： 建立复方苯 甲酸软 膏中水杨酸含量的测 定方 法。方法： 采用 紫外一 可见分光光度法 ， 在２ ９ ７ ｎ ｍ波 长处测定 水杨 酸的 含量。结果 ： 水杨酸在 ２ ． ９ ４ ６ ～ ２ ９ ． ４ ６ ｇ ・ ｍ ｌ － － （ ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ９ ） 的浓度范 围内与吸 光度 呈 良好的线性关 系； 平均回收率为 ９ ８ 。 ２ ３ ％， Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ７ ７ ％。结 论 ： 该 方 法 简便 、 准确 、 重 现性 好 ， 可 为 该 制 剂 的 质量 评 价 提 供 依 据 。 关键词 ： 复方苯 甲酸软膏 水杨 酸 紫外一 可见分光光度 法 含量 中图分类号 ： Ｒ ９ ２ ７ ． ２ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ ２ — ８ ３ ５ １ （ ２ ０ １ ４） ０ １ — ０ ０ １ ０ — ０ １
复方苯 甲酸软膏『 批准文 号： 豫食药监 注制（ ２ ０ ０ ４ ） ０ ３ ０ ０ ０ ０ ４ ｊ ｝ 叫 １ ； ｌ ； 号１ 是我市第三人 民医院 自制 的复方制剂 ， 由水杨酸 、 苯 甲酸及 ｌ 【ｌ ｌ 基质羊毛脂 、 凡士林 组成 ， 具有软化角质 、 杀灭霉菌的作用 。制 ｌ ｌ 棚 叫 ｛ 剂质量标准仅对总酸量进行控制 ， 本 文采 用紫外一 可见分光光 ｌ 、 Ｉ ／ ｊ＼ 度法测定该 制剂 中水杨酸 的含量。 １ 仪器与试药 ｝ ０ ｝ ＼／ １ ｌ － ／ 。 １ ｌ 、 岛津 ｕ ｖ 一 ２ ４ ０ １ Ｐ Ｃ紫外一 可见分光 光度计 ； Ｐ ｒ ｅ ｅ ｉ ｓ ａ ９ ２ Ｓ Ｍ一 ｊ ２ ０ ２ Ａ — Ｄ Ｒ电子分析天平 ； Ｋ Ｈ ５ ２ ０ ０ Ｄ Ｅ型数控超 声波清洗器 。 ・ 昔 — — — — — ． 水杨酸对照 品（ 批号： １ ０ ０ １ ０ ６ — ２ ０ ０ ３ ０ ３ ， 供 含量测定用 ） ， 购 对 照品溶液 ｂ ． 供试 品溶 液 ｃ ． 阴性样品溶液 自中 国药 品 生 物 制 品检 定 所 ；复 方 苯 甲酸 乳 膏 （ 批号： 图 １ 紫外扫描光谱圈 ２ ０ １ ２ １ １ ２ ６ 、 ２ ０ １ ３ ０ １ １ ５ 、 ２ ０ １ ３ ０ ３ ２ ４ ） ， 水 杨酸含 量 ： ３ ０ ａｇ ｒ ・ ｇ ～ ， 由洛 阳市第 ＿ 一人 民医院制剂室提供。水为娃哈哈纯净水 ； 其他试剂 吸光度 ５次 ， Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ６ ７ ％， 表 明仪器精 密度 良好 。 ２ ． ７稳定性试 验 ： 取 同一供试 品溶 液 ， 在配 置后 ０ 、 ４ 、 ８ 、 １ ２ ｈ进 为分析 纯。 ２方 法 与 结 果 行测定 ， 结果其吸光度的 Ｒ Ｓ Ｄ为 Ｏ ． ９ ３ ％。 表 明供试品溶液在 阴 ２ ｈ内基本稳定 。 ２ ． １对照 品溶液 的制备 ： 取水 杨酸对 照 品约 ６ ０ ａ ｒ ｇ ， 精密 称定 ， 凉处密闭放置 １ ２ ． ８重复性试验 ： 取 同一供试 品 ６份 ， 按“ ２ － ２ ” 项下方 法进行制 置１ ０ ０ ｍ ｌ 量瓶 中 ， 加水 适量 ， 超声 ３ ０ ａ ｒ ｉ ｎ使溶解 ， 用水稀 释至 刻度 ， 摇匀 ， 作为对照 品储备液 。精密量取 ２ ｒ ｎ ｌ ， 置ｌ Ｏ Ｏ ｍ ｌ 量瓶 备并测定其吸光度 ， 结果其 Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ９ １ ％。 ２ ． ９回收率试验 ： 精密称取 已知含量（ 水杨酸含量为 ３ ０ ． １ ４ ａｇ ｒ ・ ） 中， 用水稀释至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 即得。 每份 约 ０ ． ５ ｇ ， 分 别置 １ ０ ０ ｍｌ 量瓶 中 ， 再分别精 ２ ． ２ 供试 品溶液 的制 备 ： 取本 品 ｌ ｇ 。 置小烧杯 中 ， 加水约 ５ ０ ｍ ｌ ， 的供 试 品 ６份 ， 水杨酸浓度 ０ ． ５ ８ ９ ｍ ｇ ・ ｍ ｌ ） ， 按 ８ ０ ％水浴 中加热使基质熔化并 搅拌至 固体物全部溶 解 ， 放冷， 密加入一定量 的对照 品储备液 （ 过滤 至 ｌ Ｏ Ｏ ｍ ｌ 量瓶 中， 用适 量水洗涤烧杯和滤器 ， 合并滤液并 “ ２ ． ２ ” 项下方法制备供 试品溶液 ， ｛ ９ １ ｌ ｌ 定吸光度 ， 计算 含量 ， 测 得 ８ ． ２ ３ ％， Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ７ ７ ％。 加水 至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 精密量 取续 滤液 ２ ｍ ｌ ， 置 ５ ０ ｍ ｌ 量瓶 平均加样 回收率为 ９ ２ ． １ ０样品测定 ：分 别取三批不 同批号 的复方苯 甲酸软膏各 ３ 中， 加水稀释至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 即得 。 ２ ． ３阴性样品溶液 ： 按处 方比例及 相同工艺制备不含水杨 酸的 份 ， 按“ ２ ． ２ ” 项下方法制备 供试品溶液 ， 按照紫外一 可见 分光光 度法Ｉ ” ， 以水为空 白 ， 在２ ９ ７ ｎ ｍ波长处分别测定 吸光度 ， 计算含 阴性样 品溶液 ， 按“ ２ ． ２ ” 项下方法 同法制备 。 批号 为 ２ ０ １ ２ １ １ ２ ６ 、 ２ ０ １ ３ ０ １ １ ５ 、 ２ ０ １ ３ ０ ３ ２ ４的三批样 品 ２ ． ４测定波长 的选择 ： 取 水杨酸对照品溶液 、 供试 品溶液 、 阴性 量 。结果 ， 样 品溶液 ， 分别在 ２ ３ ０ ～ ４ ０ Ｏ ｈ ｍ波长范 围内扫描 ， 测得 水杨 酸最 中水杨酸的含量分别为 ３ ０ ． ２ ３ 、 ３ ０ ． ０ ４ 、 ３ ０ ． １ ｌ ｍｇ ・ ｇ ～ 。 大波长为 ２ ９ ７ ｎ ｍ， 而苯 甲酸及基质在 ２ ９ ７ ｎ ｍ波长处无 吸收 ， 故 ３讨 论 选择 ２ ９ ７ ｎ ｍ作 为测定波长（ 见图 １ ） 。 本文 曾使 用 甲醇一 水【 提取水杨 酸 ， 但基 质在 ２ ３ ０ ～ ２ ５ ０ ｎ ｍ 考虑到水杨酸可在热水 中溶解 ， 故用热水 ２ ． ５线性关系考察 ：精密量取 对照 品储 备液 ０ ． ５ 、 １ ． ０ 、 ２ ． ０ 、 ３ ． ０ 、 范 围内有较大 吸收 ， 准确 、 重珊 性好 ， 可为该制剂的质量评价提 ５ ． Ｏ ｒ ａ ｌ ， 分别置 ｌ Ｏ Ｏ ｍｌ 量瓶 中， 用水稀 释至刻度 ， 摇匀 ， 滤过 ， 作为 提取 。该方法简便 、 标准溶液 ， 在２ ９ ７ ｎ ｍ波长处分别测定吸光度 。以标准溶液浓度 供依据 。 ｘ为横坐标 ， 吸光度 （ Ｙ ） 为纵坐标 ， 绘制标准曲线 ， 得 回归方程 ： 参考 文献 Ｙ水 杨 ＝ ３ ９ ． ８ ４ Ｘ 一 ０ ． ２ ４ ９ １ ， ｒ ＝ Ｏ ． ９ ９ ９ ９ （ ｎ ＝ ５ ） 。 『 １ ］ 顾培军． 紫外分光光度 法测定复方苯 甲酸软 膏中两组分含量 江 苏 药学 与 临床 研 究 ， ２ ０ ０ ３ ， １ １ （ １ ） ： ２ ２ — ２ ３ ． 结果表明 ： 水杨 酸在 ２ ． ９ ４ ６ — ２ ９ ． ４ ６ ｇ ・ ｍ ｌ 范 围内与 吸光度 Ⅲ． 线性关系 良好 。 『 ２ 降 爱华． 反相离子对 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法同时测定复方苯甲酸软膏中两 ２ ． ６精密度试验 ： 取水杨 酸对 照品溶液 ， 在２ ９ ７ ｎ ｍ波长处测定 组 分 的含 量ｆ Ｊ １ ． 中 国药 师 ， ２ ０ １ ２ ， １ ５ （ １ ） ： ７ ７ — ７ ８ ， ８ ５ ．

紫外分光光度法测定饮料中的苯甲酸TYYGROUP system office room 【TYYUA16H-TYY-TYYYUA8Q8-实验三紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸1 实验试剂与仪器试剂苯甲酸（AR），雪碧汽水仪器日立UV-3010紫外-可见光谱仪，1cm石英比色皿2 实验原理与方法为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。

防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。

我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。

苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。

从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。

本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。

3 实验步骤苯甲酸标准储备液配制称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。

标准曲线绘制取苯甲酸标准储备液、、、、，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。

以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax ，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度A。

样品处理和测定雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λ处测定max吸光度。

4 实验结果测得苯甲酸在227nm波长处有最大吸光值表1 标准液吸光度测定标准液（μg/ml） 0 2 4 8 12吸光度图1 苯甲酸标准溶液标准曲线测得雪碧样品的苯甲酸吸光度为=μg/ml从曲线上找出相应的苯甲酸浓度Cx: 样品定容后体积为100mlV1: 所取样品体积为 25mlV2因为雪碧的密度约等于1kg/m3,故μg/ml≈μg/g=kg根据中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用卫生标准一》对汽水类食品中苯甲酸的最大使用量做了规定：苯甲酸<=0.2g/Kg，本实验使用的雪碧样品苯甲酸浓度Kg<0.2g/Kg,即低于国家标准，符合国家标准。

紫外分光光度法测定酱油中苯甲酸含量的实验优化探究崔金娟;谢漫媛;赵丽冰【摘要】苯甲酸(钠)是酱油中的常用添加剂,国家标准对其使用量有严格限制.紫外分光光度法测定酱油中苯甲酸含量在实验影响因素探究和样品前处理方法优化方面还有很大的研究空间.实验对不同酸碱条件下苯甲酸溶液紫外吸收光谱、吸收峰波长及固定波长下的吸光度进行了实验探究,用不同前处理方法进行样品处理并进行了检测结果的对比和分析,从提高分析结果准确度和精密度的角度提出了224 nm 波长下测定的最佳酸碱性条件,以简化方法、节约资源、提高效率为目标提出了样品前处理优选方案并进行了回收率测定和精密度实验.%Benzoic acid is a commonly used additive in soy sauce.National standards have strict limits on its usage.For ultraviolet spectrophotometry determination of benzoic acid in soy sauce,the study on experimental influence factors and the optimization on pretreatment methods has a lot of research space.The ultraviolet absorption spectra and the absorption peak wavelength of benzoic acid in different add-alkaline conditions aredetermined.Absorbance at fixed wavelength is also determined.The comparison and analysis of the test results are carried out with different pretreatment methods.The optimum acid-alkaline conditions at 224 nm proposed from the purpose of improving accuracy and precision.In order to simplify the method,save resources and improve efficiency,put forward the sample pretreatment plan.The recovery test and precision experiment are carried out.【期刊名称】《中国调味品》【年(卷),期】2017(042)011【总页数】5页(P110-114)【关键词】紫外分光光度;酱油;苯甲酸【作者】崔金娟;谢漫媛;赵丽冰【作者单位】广东省城市建设技师学院,广州 510520;广东省城市建设技师学院,广州 510520;广东省城市建设技师学院,广州 510520【正文语种】中文【中图分类】TS264.21近年来，用紫外分光光度法进行酱油中苯甲酸含量的测定取得了一定的研究进展。

紫外分光光度法测定苯甲酸.doc苯甲酸是一种常见的有机化合物，广泛应用于医药、化工、染料等领域。

其中，苯甲酸的质量控制是至关重要的。

本文介绍了一种用紫外分光光度法测定苯甲酸的方法。

一、实验原理苯甲酸是一种有机酸，具有强烈的吸收紫外线的能力。

在紫外区域（200nm-400nm），苯甲酸分子可吸收215nm处的光线，吸收峰位于第二阶段。

据此，利用紫外分光光度法可对苯甲酸进行测定。

二、实验步骤1.样品的制备取适量苯甲酸样品，精确称重，用洗耳球容器将样品溶于去离子水中，制备0.1mol/L 的苯甲酸溶液。

通过调整PH值将其转化为离子型物质（苯甲酸钠）。

2.工作曲线的绘制用离子型苯甲酸制备6个不同浓度的标准溶液, 称取苯甲酸钠，精确加入去离子水中，形成6个不同浓度的溶液（0.001mol/L、0.002mol/L、0.005mol/L、0.01mol/L、0.02mol/L、0.05mol/L）。

在紫外分光光度计上逐个测量吸光度（OD值），根据吸光度与浓度间的线性关系绘制出工作曲线。

3.样品的测定将出厂的样品溶液与与标准溶液相同的工作曲线进行测量。

根据样品的OD值和工作曲线确定其浓度值。

三、实验注意事项1.样品及标准溶液需严格混合均匀，以保持同质性。

2.样品的稀释及调整PH值时应掌握好操作技巧及时间。

3.绘制工作曲线准确、精确，需保证实验条件一致，减少误差。

4.在进行测量时，应注意除去溶液中的气泡，保证测量准确。

4.样品超出工作曲线范围，需要适当调整溶液的浓度以保证测量的准确性。

四、实验结果及分析通过实验测定和计算，得到如下数据：吸光度（OD）浓度（mol/L）0.1 0.001根据标准曲线，测得样品的吸光度（OD）为0.5，可计算得到样品的浓度为0.02mol/L。

实验结果表明，本方法具有定量快速、准确、灵敏等优点，为苯甲酸在工业生产中质量控制提供了可靠的分析方法。

紫外可见分光光度计法测定食品中苯甲酸钠的含量一、实验目的1、了解和熟悉紫外-分光光度计的原理、结构和操作方法；2、掌握紫外分光光度法测定苯甲酸的吸收光谱图；3、掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。

二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。

防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一，其使用量一般在0.1%左右。

苯甲酸及苯甲酸钠具有芳香结构在近紫外光区具有较强的吸收。

通过实验证实，苯甲酸在230nm处具有最大吸收。

另一方面，它在水中具有适当的溶解度，所以，可将标样和样品处理成水溶液，采用紫外分光光度计，通过标准曲线法而实现酸性食品中苯甲酸（钠）含量的测定。

由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。

从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。

本实验测定雪碧、可口可乐、醒目等饮料中苯甲酸（钠），样品不用处理，在230nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。

3、仪器和试剂仪器：紫外可见分光光度计 TU-1810（北京普析通用仪器有限公司），1.0cm石英比色皿，50ml容量瓶11个，吸量管5mL一支、1mL两支。

试剂：苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠1.000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。

该贮备液可置于冰箱保存一段时间；0.1mol/L NaOH溶液；市售饮料。

四、实验步骤1、标准曲线的制作苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸储备液5.00mL 于50mL容量瓶中，加入蒸馏水稀释定容。

苯甲酸钠系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL于6个50mL容量瓶中，各加入0.1mol/LNaOH溶液1.00mL蒸馏水稀释定容，摇匀。

本文旨在介绍苯甲酸的测定实验，首先介绍实验的原理，然后对实验的步骤进行详细的介绍，最后总结实验结果。

一、苯甲酸的测定实验原理
苯甲酸是一种重要的有机化合物，它可以在溶液中通过紫外分光光度法来测定。

在实验中，我们使用紫外分光光度计，将比较样和测定样放入比较室和测定室，分别测定其紫外吸收率，然后通过测定的结果来计算样品中苯甲酸的浓度。

二、苯甲酸的测定实验步骤
1.准备实验仪器：首先准备好紫外分光光度计，并且准备好苯甲酸的比较样和测定样，比
较样中的浓度应该比测定样低；
2.稀释测定样：将测定样稀释至比较样浓度相当，以便于比较；
3.测定紫外吸收率：将比较样和测定样分别放入比较室和测定室，在紫外分光光度计上测
定其紫外吸收率；
4.计算苯甲酸浓度：根据测得的紫外吸收率，计算样品中苯甲酸的浓度。

三、实验结果
通过苯甲酸的测定实验，可以准确的测定出样品中的苯甲酸的浓度，从而更好的掌握苯甲
酸的特性。

正如古人所言：“知己知彼，百战不殆”，只有通过测定实验，才能更好的掌握
苯甲酸的性质，从而有效的应用苯甲酸。

的含量 取10.00ml样品液，放入50ml容量瓶中，用 0.01mol/L的NaOH溶液定容，摇匀得稀释好的样 品液X。 在上述曲线中找出最大吸收波长，以此作测定波 长。以0.01mol/L的NaOH溶液为参比液。在完全 相同的条件下测出稀释好的样品液X的吸光度值。 3、按下式计算样品液中苯甲酸的浓度：

比色皿使用注意事项
1、拿取比色皿时，只能用手指接触毛玻璃面，避免接触 光学面，注意保护，防止摔破。 2、盛装溶液时，高度为比色皿的2/3处即可，光学面如有 残液可先用滤纸轻轻吸附，然后再用擦镜纸擦拭。 3、 不可随时调换参比用的比色皿和承载样品比色皿，也 就是说参比比色皿应该固定。 4、使用比色皿时, 还应特别注意通光方向。一般比色皿 的毛玻璃面上都刻有箭头, 或在透光面上蚀刻有标记, 以供 使用者辨认通光方向。 5、不能把装有溶液的比色皿放在仪器上以防止溅湿仪器。 6、比色皿在使用后，应立即用水冲洗干净，收好。
实验报告的格式

一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、实验数据与处理 五、结果与讨论

作图统一用Excel格式并打印粘帖
Ax
Cs
Cx
五、结果与讨论

结果如何？是否符合预期？ 分析失败的原因：仪器因素？溶液因素？ 人为因素？环境因素？
紫外分光光度计的使用方法
1.打开电源，预热20分钟 2.按MODE键设为吸光度方式 显示器显示“---nm,----Abs” 3.设定波长,如220nm 显示器显示“220nm,----Abs” 4.打开样品室盖，将参比液比色皿和待测液比色皿放入样 品室盖上样品室盖 5.将参比液比色皿拉入光路中，按100%T键调零 调零完成时显示器显示“220nm,0.000Abs” 6.将待测溶液拉入光路中，直接读数 注意：每改变波长，必须重新调零 注意倒溶液时远离仪器，避免溅湿仪器

紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂—苯甲酸一、目的要求1．了解和熟悉紫外可见分光光度计。

2．掌握紫外可见分光光度法测定苯甲酸的方法和原理。

3．学习掌握用标准曲线定量分析的方法。

二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。

防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。

我国规定了苯甲酸（盐）在碳酸饮料中最大使用量为0.2g/kg。

苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有强吸收由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。

从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。

本实验测定雪碧中苯甲酸，含有人工合成色素、甜味剂等，但一般在紫外区无吸收，故不干扰测定，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225nm 处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。

三、仪器与试剂日立UV-3010紫外-可见光谱仪；1cm石英比色皿；苯甲酸（AR）；市售饮料四、操作步骤1.苯甲酸标准储备液配制：称取0.1000g苯甲酸于100mL容量瓶中，加适量蒸馏水定容，配制成1mg/mL 溶液，吸取此液5mL于50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，每毫升溶液相当于苯甲酸100ug。

2.标准曲线绘制：取苯甲酸标准储备液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用蒸馏水溶液稀释至刻度。

以水为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200~350nm），找出λmax，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度A。

3.样品处理和测定：雪碧饮料除二氧化碳后，准确移取2.5mL于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容，在λmax处测定吸光度。

五、结果与计算从曲线上找出相应的苯甲酸浓度C x，按下列公式计算样品中苯甲酸含量。

紫外分光光度法测定苯甲酸一 实验目的1. 掌握吸收曲线的测定与绘制方法2. 学习运用直接比较法求样品含量3. 掌握752型分光光度计的使用方法二 基本原理样品中的苯甲酸在碱性条件下形成苯甲酸盐。

苯甲酸及其盐对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm 左右。

用752型分光光度计可测定物质在紫外光区、可见光区的吸收光谱，并可定量测定物质含量。

三 仪器与试剂（一） 仪器752型分光光度计，1cm 石英吸收池一套，50ml 容量瓶二只，刻度吸管5ml 、10ml 各一支，滴管一支（二） 试剂L NaOH 溶液；苯甲酸标准贮备液：精确称取分析纯苯甲酸100mg （预先经105℃烘干），用LNaOH 溶液100ml 溶解后，再用蒸馏水稀释至1000ml 。

此液1ml 相当于苯甲酸。

苯甲酸标准溶液：取苯甲酸贮备液，置于50ml 容量瓶中，用LNaOH 溶液定容，摇匀。

此液1ml 相当于8μg 苯甲酸。

四 操作步骤1. 苯甲酸吸收曲线的绘制测定条件：氘灯，1cm 石英比色皿，苯甲酸标准溶液，LNaOH 为参比液测定波长（nm ）：从210nm~240nm 每隔一定波长（2nm~5nm ）测定一次吸光度，在225nm 左右隔1nm 测定一次吸光度。

用以上波长为横坐标，测得的吸光度为纵坐标绘制苯甲酸的紫外吸收曲线。

2. 直接比较法测定样品溶液中苯甲酸的含量取样品溶液，置于50ml 容量瓶中，用LNaOH 溶液定容，摇匀后备用。

在上述吸收曲线中找出最大吸收波长，用此波长作为定量分析的测定波长。

以LNaOH 溶液为参比液，在完全相同的条件下测定苯甲酸标准溶液和稀释后样品溶液的吸光度。

五 数据处理 按下式计算样品溶液中苯甲酸的浓度：58A A 1050C A A )ml /g (sx s s x x ⨯⨯=⨯⨯=μC 式中C x 是待测样品液的浓度；C s 是苯甲酸标准液的浓度；A x 是待测样品液的吸光度；A s 是苯甲酸标准液的吸光度。

标准曲线的绘制： 标准曲线的绘制：
取苯甲酸标准使用液0、1、2、4、6ml分 取苯甲酸标准使用液0 6ml分
别置于100ml容量瓶中，各加入5%NaHCO 别置于100ml容量瓶中，各加入5%NaHCO3 100ml容量瓶中 溶液2ml (1+2v)盐酸溶液 ml， 2ml， 盐酸溶液２ 溶液2ml，(1+2v)盐酸溶液２ml，加水至 刻度，摇匀。放置15min,尽量让CO 逸尽。 15min,尽量让 刻度，摇匀。放置15min,尽量让CO２逸尽。 用1cm吸收池于波长230nm处测定其吸光 1cm吸收池于波长230nm处测定其吸光 吸收池于波长230nm 以吸光度为纵坐标， 度。以吸光度为纵坐标，以浓度为横坐 标绘制标准曲线。 标品: 液体样品: 酱油、食醋、饮料取10ml于１２５ml分 酱油、食醋、饮料取10ml １２５ml 10ml于 ml分
流漏斗中，加入(1+2v)盐酸溶液２ml进 流漏斗中，加入(1+2v)盐酸溶液２ml进 (1+2v)盐酸溶液 行酸化，用无水乙醚萃取二次，每次３ 行酸化，用无水乙醚萃取二次，每次３ ml，每次振摇１min。 ０ml，每次振摇１min。 合并乙醚层于另一干净分流漏斗中，用 合并乙醚层于另一干净分流漏斗中， NaCL溶液洗涤二次 每次５ 溶液洗涤二次， ５％NaCL溶液洗涤二次，每次５～１０ ml。然后蒸馏瓶回收乙醚， ml。然后蒸馏瓶回收乙醚，用 溶液溶解，定容至１ 20ml5%NaHCO3溶液溶解，定容至１00ml 备用。 备用。
(GB2760—1996)规定： (GB2760 1996)规定： 1996)规定 苯甲酸及苯甲酸钠在碳酸饮料中的最大 使用量为0.2g kg； 0.2g／ 使用量为0.2g／kg； 低盐酱菜、酱菜、蜜饯、食醋、果酱(不 低盐酱菜、酱菜、蜜饯、食醋、果酱( 包括罐头) 最大使用量为0.5g kg(以 0.5g／ 包括罐头)、最大使用量为0.5g／kg(以 苯甲酸计)。 苯甲酸计)

2.试剂：苯甲酸标准溶液(1mg/mL)、未知液（浓度约为45～55ug/mL）。
二、实验步骤
1溶液的配制
准确吸取1mg/mL的苯甲酸标准溶液10.00mL，在100mL容量瓶中定容（此溶液的浓度为100.0ug/mL）。再分别准确移取0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL上述溶液，在100mL容量瓶中定容（浓度分别为0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ug/mL）。
实训课程名称
仪器分析
实训项目名称
紫外分光光度法测定苯甲酸含量
实训安排
实训课时
实训班级
实训
方法
实验
实训时间
实训目的
1.学习标准曲线法测定苯甲酸的方法和实验操作；
2.学习UV7504紫外可见分光光度计的使用方——标准曲线法
一、仪器与试剂
1.仪器：UV7504紫外可见分光光度计、石英吸收池；
4样品测定
准确移取10.00mL苯甲酸未知液，在100mL容量瓶中定容，于最大吸收波长处测定吸光度。从标准曲线上查得未知液的浓度。
3.结果计算
根据未知液的稀释倍数，可求出未知溶液的浓度。
三、注意事项
实验中所有溶液的测定的实验条件应保持一致。
2吸收曲线的绘制
选取6.00ug/mL的待测溶液，以蒸馏水为参比，于波长200～300nm范围内测定吸光度，作吸收曲线，从曲线上查得最大吸收波长（227nm附近）。
3标准曲线的绘制
上述一系列不同浓度的标准溶液（0～10.00ug/mL），于最大吸收波长处分别测出其吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线。

药物中的苯甲酸和水杨酸化学分析方法苯甲酸（C6H5CH2COOH）和水杨酸（C6H4(OH)COOH）都是常见药物中的成分，分别用于解热、镇痛、抗炎等临床应用。

为了确保药物质量和安全，对这两种成分的化学分析十分重要。

下面将介绍几种常见的对苯甲酸和水杨酸的化学分析方法。

1.紫外-可见分光光度法：紫外-可见分光光度法是一种常见的药物分析方法之一、对于苯甲酸和水杨酸来说，它们在200-300nm的紫外光区域都有吸收峰。

因此，可以通过测定样品在特定波长下吸光度的变化，利用比尔-朗伯定律建立浓度与吸光度之间的关系，来确定样品中苯甲酸和水杨酸的含量。

2.高效液相色谱法（HPLC）：高效液相色谱法是一种常见的分离技术，可以用于苯甲酸和水杨酸的定量分析。

该方法将样品通过高压推进，通过固定相与流动相之间的相互作用来实现不同组分的分离。

然后利用检测器（如紫外检测器）检测样品中不同组分在特定波长下的吸光度，并根据峰面积或峰高与标准曲线进行定量。

3.气相色谱法（GC）：气相色谱法是一种将样品中的成分通过气相分离的方法，常用于分析挥发性和脂溶性物质。

对于苯甲酸和水杨酸来说，可以通过将样品蒸发至气态后，通过气相色谱进行分离和定量。

在进行气相色谱分析时，可以选择适当的填料和流动相，以实现对苯甲酸和水杨酸的有效分离，并通过检测器对其进行定量测定。

4.红外光谱法（IR）：红外光谱法可以通过分析样品中吸收、透射或反射红外辐射的模式来确定样品中的化学成分。

苯甲酸和水杨酸在红外光谱中具有特定的吸收峰，可以根据这些峰的位置和强度来确认它们的存在，并可以通过比对标准物质的红外光谱图谱来定量分析。

上述几种方法都是常见的药物分析方法，可以用于对苯甲酸和水杨酸的化学分析。

在实际应用中，需要根据样品的特性、分析目的和仪器条件等因素来选择合适的分析方法。

正确选择和应用合适的方法可以提高分析结果的准确性和可靠性，从而确保药物质量和安全。

实验一紫外分光光度法测定苯甲酸一、实验目的学习、了解紫外分光光度法原理了解紫外分光光度计的结构和使用方法二、实验原理当辐射能（光）通过吸光物质时，物质的分子对辐射能选择性的吸收而得到的光谱称为分子吸收光谱。

分子吸收光谱的产生与物质的分子结构、物质所在状态、溶剂和溶液的PH等因素有关。

分子吸收光谱的强度与吸光物质的浓度有关。

表示物质对光的吸收程度，通常采用“吸光度”这一概念来量度。

根据朗伯－比尔定律，在一定的条件下，吸光物质的吸光度A 与该物质的浓度C和液层厚度成正比。

即A＝ LC因此，只要选择一定的波长测定溶液的吸光度，即可求出该溶液浓度，这就是紫外－可见分光光度计的基本原理。

在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长为225nm。

因此，采用紫外分光光度计测定苯甲酸在225nm处的吸收度就能进行定量分析。

三、仪器与主要试剂TU-1810紫外可见分光光度计1cm石英比色皿0.1M氢氧化钠溶液苯甲酸(AR)四、实验步骤1、苯甲酸标准溶液的制备称取苯甲酸(105℃烘干)100mg,用0.1M氢氧化钠溶液100ml 溶解后,转入1000ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度.此溶液1ml含0.1mg苯甲酸.2、制作苯甲酸吸收曲线,选择最大吸收波长①移取苯甲酸标准溶液4.00ml于50ml容量瓶中,用0.01M氢氧化钠溶液定容,摇匀,此溶液1ml含苯甲酸8ug.以氘灯为光源,用0.01M氢氧化钠溶液作为参比,改变测量波长(从210-240nm)测量8ug/ml苯甲酸的吸光度.②以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制苯甲酸的紫外吸收曲线, 并找出最大的吸收波长(是否是225nm).3﹑样品的测定①取10.00ml苯甲酸样品,放入50ml容量瓶中,用0.01M氢氧化钠溶液定容,摇匀.②在上述曲线中所找到的最大吸收波长作为入射光波长,以0.01M 氢氧化钠溶液作为参比,在上述相同条件下测出苯甲酸标准溶液(8ug/ml苯甲酸)和稀释好的样品的吸光度,分别记录.五、分析结果计算计算样品液中苯甲酸的浓度C样/C标=A样/A标六、思考题1、比较TU-1810与722S型分光光度计机构有何异同点?2、本实验为什么要使用石英比色皿?3、使用紫外光源(氘灯)应注意些什么?THANKS !!!致力为企业和个人提供合同协议，策划案计划书，学习课件等等打造全网一站式需求欢迎您的下载，资料仅供参考。

关键词 ： 苯甲酸利扎 曲普坦 ； 紫外分光光度法 ； 含量
中图分 类号： Ｒ ９ ２ ７ 文献标识码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ０ ０ ６ － ３ ７ ６ ５ （ ２ ０ １ ７ ） － ０ ５ ． １ １ ０ ８ ００ － ５ ４ ０２ －
Ｃｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｒｉ ｚ ａ ｔ ｒ ｉ ｐ ｔ ａ ｎ Ｂ ｅ ｎ ｚ ｏ ａ ｔ ｅ Ｔａ ｂ ｌ ｅ ｔ ｓ ｂ ｙ ＵＶ Ｓｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｐ ｈ ｏ — ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ
３ ４ ． ３ ５ ６ ｌ ｘ ｇ・ ｍＬ 。 。 ， ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ９ ９； ｒ ｅ ｔ ｕ ｒ ｎ ｓ ． ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｗ ａ ｓ １ ０ ０ ． ２ ％， Ｒ Ｓ Ｄ ＝０ ． ４ ％（ ｎ＝ ９ ） ． Ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗ ｉ ｔ ｈ ｉ ｎ ８
海峡药 学
２ ０ １ ７年
第２ ９卷 第 ５期
紫 外 分光 光 度 法测 定苯 甲酸 利 扎 曲普坦 片 的含 量
朱 静（ 南 京 中医药 大学 翰林 学 院 泰 州 ２ ２ ５ ３ ０ ０ ）
建立紫外分光光 度 法测 定苯 甲酸 利扎 曲普 坦 片舍 量。方 法 采 用紫 外分 光光度 法， 以０ ． １ ｍ ｏ １． Ｌ 一 。 盐酸 为溶 剂 ， 检测波长
该法专属性 高 ， 精 密度好 ， 线性 范围宽， ８ ｈ内溶液稳定 ， 适合苯 甲酸利扎曲普坦的含量测定。
摘要： 目的
２ ８ １ ｎ ｍ 。结 果 空白辅料无干扰 ； 线性 范围为 ５ ． ７ ２ ６ ～ ３ ４ ． ３ ５ ６ １ ＊ ｇ ・ ｍ Ｌ ～， 线性 关系 ｒ ： Ｏ ． ９ ９ ９ ９ ９ ； 回收率为 １ ０ ０ ． ２ ％， Ｒ Ｓ Ｄ＝ ０ ． ４ ％（ ｎ ： ９ ） ； ８ ｈ内溶 液吸光度 的 Ｒ Ｓ Ｄ为 １ ． Ｏ ％ 。结 论

化学工业科技创新导报 Science and Technology Innovation Herald112食品添加剂对于改善食品色、香、味,延长食品保质期具有重要作用。

苯甲酸及它们的盐在饮料中使用较为广泛,但都有一定的毒性[1],其中苯甲酸还是防腐剂中使用量最大者[2]。

监测它们在饮料中的使用量, 对于保障人们身体健康具有重要的现实意义。

目前主要有气相色谱法、液相色谱法、AOAC 法(氧化法)[3]等。

其中以气相色谱法经常使用,但仪器要求高,不便于基层实验室使用。

该文提出把苯甲酸钠用磷酸酸化后蒸馏出苯甲酸直接于紫外分光光度计上分别在两组分的最大吸收波长处测定,根据吸光度加和性的原理再分别进行定量。

1 实验部分1.1 仪器与试剂北京瑞利U V-1801紫外可见分光光度计1 c m 石英比色皿2只磷酸、氢氧化钠、苯甲酸、重铬酸钾、硫酸均为分析纯试剂苯甲酸标准储备液：称取1.000 ｇ苯甲酸，用0.01 m ol/ＬN a O H 稀释至1000 ｍＬ容量瓶中。

此溶液1 ｍＬ含有1 ｍg的苯甲酸。

苯甲酸标准操作液：移取10.00 ｍＬ苯甲酸标准储备液用0.01 m o l /ＬN a O H稀释至100 ｍＬ此溶液此溶液1ｍＬ含有0.1 ｍg的苯甲酸。

1.2 样品处理取雪碧样品溶液10.00 ｍＬ至于250 m L的蒸馏瓶中，加1 m L磷酸，70 m l 水蒸馏，用预先加有5 m L 0.1 m o l /ＬN a O H 100 m L 容量瓶接收流出液，约收集45 m L时停止蒸馏，用少量的水洗涤冷凝器，最后将容量瓶内蒸馏液稀释至刻度。

吸取20.00 m L 蒸馏液置于另一个250 m L 蒸馏瓶中，加入33 m ol/L重铬酸钾25 m L、2 m o l /Ｌ硫酸溶液6.5 m L ，加热回流10 m i n ，冷却，再加1 m L 磷酸，40 m L 水，蒸馏，收集流出液于100 m L容量瓶，用0.01 mol/ＬNaOH稀释至刻度，摇匀。

紫外分光光度法测定苯甲酸的解离常数
苯甲酸是一种天然存在的有机酸，因其具有良好的溶解性和稳定性，广泛应用于日常
生活，食品加工、农药、精细化学行业等领域。

苯甲酸的解离常数（K）作为描述该溶质
的溶解度的重要指标，受到越来越多的重视。

本文介绍了紫外分光光度法测定苯甲酸的解
离常数的原理和方法。

一、原理
紫外分光光度的原理是使用紫外可见分光光度计以一定的波长测量溶液的可见吸收度，以此来测定溶液中溶质含量的大小。

根据摩尔定律，当溶液玻璃化中溶质浓度和添加溶质（或添加离解离子）不同时，溶液对某一波长的吸收度也会有不同的变化。

紫外分光光度
法利用这一原理来测定溶液中苯甲酸的解离常数，具体流程如下：
苯甲酸溶液用紫外可见分光光度仪在一定的波长A处进行测量，得到吸收度A1。

此时，将溶液中的苯甲酸稀释至稀释因子为2的浓度，重新进行吸收度测量得到A2。

最后，可以利用如下公式：
K=2^A1* A2
来得出苯甲酸的解离常数K。

二、方法
1、准备工作
（1）取硝酸苯甲酸水溶液，纯净干燥的水，仪器清洁剂；
（2）安装紫外可见分光光度仪，校准该仪器；
（3）准备好不同浓度、不同稀释因子的苯甲酸溶液；
2、测量过程
（1）使用紫外可见分光光度计，在定量波长A处测量不同浓度的苯甲酸溶液的吸收度，得到吸收度A1；
（3）计算吸收度值，计算苯甲酸解离常数，K=2^A1* A2；
3、计算结果
三、结论
紫外分光光度法是一种简便、快速、准确的方法，可以用于测定苯甲酸的解离常数。

同时，实验过程全程遵循相关的安全措施，确保实验的安全进行。

实验名称：紫外-可见分光光度法测定苯甲酸理解常数姓名*** 学号***同组人员(小组) ***一．实验目的1．了解紫外分光光度计的基本原理、仪器结构和操作方法。

2．掌握采用紫外吸收光谱法测定苯甲酸解离常数的原理和方法。

3．熟悉用紫外-可见分光光谱分析法在研究离子平衡中的应用。

二．实验原理它是基于物质的分子状态和离子状态对某一波长光的吸收度不同的原理而建立起来的一种分析方法。

当某种物质在溶液中达到解离平衡时，该溶液中同时存在物质的分子和离子状态，而这两种状态对同一波长的光的吸收度是不同的，因此，用分光光度计测得的溶液的吸光度是溶液中分子和离子吸光度的综合表现。

在高酸性介质中，可以认为溶液中该酸只以HL形体存在，在碱性介质中，可以认为溶液中该酸只以L-形体存在。

苯甲酸在水中存在以下平衡C6H5COOH + H2O C6H5COO- + H3O+（简写为HL H+ + L-）pKa=pH+lg [HL]/[L-]由朗伯比尔定律知，稀溶液中吸光度与浓度成正比，考虑高酸性介质中，可近似认为该酸只以HL形体存在，在碱性介质中，同理认为溶液中该酸只以L-形体存在，在缓冲体系中HL与L-共存，可得Ka = [H+][L-]/[HL]= [H+](A HL – A)/(A– A L-)即pKa=pH+lg(A– A L-)/(A HL – A)三．仪器和试剂仪器：紫外-可见光谱仪（TU-1901），pH计，分析天平，二面通石英比色皿试剂：1.00mmol/L苯甲酸溶液，pH=3.6缓冲溶液，pH=4.5缓冲溶液四．实验步骤1．按照下表配制溶液*在50mL容量瓶定容2．用pH计分别测量以上四种溶液pH值并记录。

3．依次取四种苯甲酸溶液于比色皿中，以各自相应的溶剂做参比，在波长为230~300nm之间扫描得吸收曲线，记录最大吸收波长及最大吸光度值。

五．实验数据的记录与处理六．结果与讨论1.结论 pH=3.6时pKa=3.9619，pH=4.5时，pKa=5.5680，pKa平均值为4.7650 。