土壤中蛔虫卵的检查及活力测定法25页PPT
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土壤中蛔虫卵检测一、背景卫生部于2006 年在全国设立了22个土源性线虫病监测点开展监测工作 ,监测方案中要求对每个监测点进行人群土源性线虫病监测的同时, 还需监测土壤中人蛔虫卵的污染情况。
2006~2010年的监测数据显示,土源性线虫病监测点土壤中人蛔虫卵检出率分别为37.1%,29.5%,25.9%,31.3%和24.4%,统计分析表明,土壤人蛔虫卵检出率与人群蛔虫感染率呈正相关,因此土壤中蛔虫卵的污染情况是评价环境卫生状况的一项重要指标。
二、原理先用碱性溶液与土壤样品充分混合以分离蛔虫卵与土壤颗粒,再加入比重较大的液体使得比重较轻的蛔虫卵漂浮在溶液表面,收集后镜检计数。
三、采样要求1分别从表面及2~3厘米深处采取土样,因为虫卵存活时间与土层深度有关;2在用人粪施肥的农场和菜地可分别在陇上和犁沟中取土样,同时还应取20厘米深处的土样,以确定虫卵附着在根块植物上的可能;3为了测定不同局部气候条件下虫卵存活率,要从有日光照射和荫蔽区采取土样;4厕所、庭院、厨房取表层土;5每份土样约100g。
四、步骤1土样处理:剔除菜叶、树皮等大杂物,压碎土样中的大颗粒;然后用孔径3mm的铜筛和孔径为2mm的铜筛过筛,收集过筛后的土样。
2分离:取50ml大离心管,放入过筛后的土样10g,加5%氢氧化钠溶液至40或45ml刻度线。
用橡皮塞紧塞管口,在振荡器上振荡15分钟,可反复3~4次,待充分混合后,以2000rpm,离心4min。
3漂浮:弃去上部的氢氧化钠,加入饱和硝酸钠溶液充分搅拌混匀,2000rpm离心4min,再加饱和硝酸钠溶液满至管口,覆上18mm ×18mm盖玻片。
4 计数:静臵15min后,将盖玻片迅速翻转取下,臵于载玻片上镜检,同时再覆上第二张盖玻片,如此反复,共计数3~4张盖玻片。
五、影响土壤蛔虫检出率的因素1 漂浮液的比重:漂浮液的比重是影响蛔虫卵检出率的重要因素,用比重大的溶液作为漂浮液效果较为理想,与饱和硫酸锌、硫酸镁、氯化钠等盐溶液相比,饱和硝酸钠的比重最高,用作漂浮液蛔虫卵的检出率最高。