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RP-HPLC法测定盐酸头孢替安酯的含量及有关物质任凤英;李强;杨晨;黎鹏;秦川蓉【期刊名称】《国外医药（抗生素分册）》【年(卷),期】2012(033)006【摘要】目的建立反相高效液相色谱法测定盐酸头孢替安酯的含量和有关物质.方法采用Inertsil ODS-SP C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈-冰醋酸(72:28:1)为含量测定的流动相；检测波长为254nm;柱温为35℃.结果盐酸头孢替安酯含量测定浓度在0.5μg/mL～500μg/mL范围内线性关系好,线性方程为A=20209C+7646.7,相关系数r=0.9999,定量限为1.0ng,最低检测限为0.5ng.采用所建立的有关物质检查方法,盐酸头孢替安酯主峰能与相邻的杂质峰基线分离.结论该法简便、准确、灵敏度高,专属性强,可用于盐酸头孢替安酯含量测定和有关物质检查.【总页数】5页(P253-257)【作者】任凤英;李强;杨晨;黎鹏;秦川蓉【作者单位】中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所,成都610052;中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所,成都610052;中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所,成都610052;成都樵枫科技发展有限公司,成都 610041;中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所,成都610052【正文语种】中文【中图分类】R978.1+1【相关文献】1.RP-HPLC法测定盐酸贝尼地平片的含量及有关物质 [J], 张亚飞;徐炳欣;汪建生;陈万胜;兰丙欣2.RP-HPLC法测定注射用甲砜霉素甘氨酸酯盐酸盐的含量和有关物质 [J], 张蓓;王东凯;宋涛;杨秀丽;王海凤3.RP-HPLC法测定盐酸阿莫地喹片的含量及有关物质 [J], 兰文;朱迎军;黄莉;石笑弋;王晓菲4.RP-HPLC法测定注射用盐酸头孢替安的含量 [J], 史春东;李占谋5.RP-HPLC法测定布洛芬丁香酚酯微乳中布洛芬丁香酚酯及有关物质含量 [J], 赵秀丽;陈大为;李可欣;王丹蕾;罗轶凡因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
４７２０１２年１０月第１９卷第１４期反相高效液相色谱法测定人血浆中盐酸头孢替安的浓度南志成盐酸头孢替安对革兰阴性菌和阳性菌都有广泛的抗菌作用，尤其对大肠杆菌、克雷伯杆菌属、奇异变形杆菌、流感杆菌等，对肠道菌属、枸橼酸杆菌属等具有良好的抗菌活性[1]。
我们检索了相关文献，未见一种简单、快速地检测人血浆中盐酸头孢替安的方法，在参考了国内外研究[2-3]的基础上，运用有机溶剂沉淀法进行血浆样品的去蛋白处理，建立了RP-HPLC 技术测定人体盐酸头孢替安的血药浓度，为临床盐酸头孢替安的血药浓度测定和药动学研究提供了科学的分析方法。
报道如下：1 材料和方法1.1 仪器 Ag ile n t 1100高效液相色谱仪(Ag ilen t 公司生产);X W-80A 型旋涡混合器(上海医科大学仪器厂生产);T D L 80-2B 型离心机(上海安亭科学仪器厂生产)。
1.2 试药 盐酸头孢替安对照品（中国药品生物制品检定所,批号:100001-200909，纯度>99%）；注射用盐酸头孢替安(锋替新，上海新先锋药业有限公司，规格：1.0g)。
乙腈为色谱纯，磷酸二氢钾为分析纯，水为重蒸水；实验在室温下进行。
1.3 标准溶液的配制1.3.1 盐酸头孢替安储备液的配制 精密称取盐酸头孢替安对照品150.8mg ，置100m l 容量瓶中，用水溶解并稀释，定容至刻度，其浓度为1508μg/ml ，于冰箱中冷藏保存，待用。
1.3.2 标准储备溶液的配制 精密量取盐酸头孢替安储备溶液适量，用水定量稀释成4.0、10.1、20.2、50.3、202.1、502.7和1508.0μg/ml 的标准储备溶液，于冰箱冷藏中保存，待用。
1.4 色谱条件 色谱柱:Ag i le n t E c li p s e X D B C 18(250mm ×4.6mm ，5μm)。
流动相:乙腈:20mM 的KH 2PO 4缓冲液=19∶81；流速1.0ml/min ；紫外检测波长：254nm;进样量:20μl ；柱温:室温。
－185－顶空［１］气相色谱法测定盐酸头孢替安中残留溶剂———丙酮、二氯甲烷、乙酸甲酯李朝庆林萍陈妍（哈药集团制药总厂，黑龙江哈尔滨１５００８６）前言盐酸头孢替安为新一代头孢类抗菌素，对革兰氏阴性菌和阳性菌都有广泛的抗菌作用。
尤其对大肠杆菌、克雷白杆菌属、奇异变形杆菌等，显示了更强的抗菌活性。
对肠道菌属、枸橼酸杆菌属、吲哚阳性的普通变形杆菌、摩根氏变形杆菌也显示了良好的抗菌活性。
本品的抗菌机理是阻碍细菌细胞壁的合成。
本品对革兰阴性菌有较强的抗菌活性是因为它对细菌细胞壁的外膜有良好的通透性和对β－内酰胺酶比较稳定以及对青霉素结合蛋白１Ｂ和３亲和性高，从而增强了对细胞壁粘肽交叉联结的抑制所致。
本品在生产过程中使用了丙酮、二氯甲烷和乙酸甲酯等残留溶剂。
药品中的残留溶剂［２］是指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。
残留溶剂对人体有害，所以在生产过程中应控制其含量。
气相色谱法是检测有机溶剂含量的常用手段，作者采用顶空气相色谱法控制本品中的有机溶剂残留量，快速准确，对控制药品的质量起到关键的作用。
１实验仪器及条件１．１仪器及试剂：岛津ＧＣ－２０１０气相色谱仪，氢火焰离子化检测器（ＦＩＤ），ＧＨ－５００Ｂ型氢气发生器（北京中兴汇利科技发展有限公司），ＧＮ－５００Ａ型高纯氮气发生器（北京中兴汇利科技发展有限公司），ＧＡ５００Ａ型低噪音空气泵（北京中兴汇利科技发展有限公司），Ｇ１８８８Ａ型顶空自动进样装置。
丙酮（色谱纯）上海化学试剂研究所；二氯甲烷（色谱纯）上海化学试剂研究所；乙酸甲酯（色谱纯）上海化学试剂研究所；色谱柱：ＤＢ－１（３０ｍ×０．５３ｍｍ×５μｍ）毛细管柱。
１．２气相色谱条件：柱温：８０℃，流速：４．０ｍｌ／ｍｉｎ，进样口温度１５０℃，检测器温度２５０℃。
顶空瓶的平衡温度：８０℃顶空瓶的平衡时间：４０分钟。
２样品的测定２．１对照品溶液的配制精密称取乙醇适量，加纯化水溶解制成每１ｍｌ中约含乙醇１００μｇ的溶液作为内标液。
HPLC检验头孢克洛颗粒的有关物质分析摘要：目的：构建完善的头孢克洛颗粒有关物质检验体系。
方法：通过HPLC高效液相色谱法测定物质浓度，并结合色谱柱条件分析，确定流动相和监测波长等数据后，再落实线性梯度洗脱措施，以便检验工作具备参照。
结果：试验精密度、稳定性、回收率、专属性、检出限等条件均满足精准需求，且可以针对性测定颗粒物质状况。
结论：方法检测精密度高，稳定性好，并且浓度检测效果明显，能够为后续头孢克洛颗粒有关物质的分析提供深入检测平台。
关键词：HPLC高效液相色谱法；头孢克洛颗粒；有关物质；试验分析头孢克洛颗粒在当前医药市场环境中具备较为广泛的受众，并且在临床疗效和销售方面具备优势，但基于内部元素成分的复杂性，在实际药品生产工程中，并未具备相对完善的检测流程，所以在药品销售过程中，也不可避免的存在了风险。
所以，在分析头孢克洛颗粒安全性和有效性时，应当从有关物质的药性展开分析，并针对内部浓度和检出方法深入分析，才能确保药品制备工作具备保障。
一、试验仪器与试剂高效液相色谱仪、电子分析天平、头孢克洛颗粒、头孢克洛δ-3-异构体对照品、头孢克洛对照品、蔗糖、桔子香精、羧甲基淀粉钠、聚乙烯吡咯烷酮。
磷酸二氢钠作为分析纯、乙腈作为色谱纯。
二、试验方法分析1. 色谱条件分析色谱柱选用C18（4.5X250mm，5μm）；流动相分为A、B两种，其中流动相A为磷酸二氢钾，PH值为4.0。
流动相B为磷酸二氢钾-乙腈混合溶液，混合比例55：45，流速1.0ml/min，检测波长215nm，进样标准体积为20μL，线性梯度洗脱表详见表1。
表1 梯度洗脱表2. 溶液配制分析（1）对照品溶液制备取单位计量的头孢克洛对照品置于精准量瓶内，并通过PH2.5的磷酸二氢钾溶液进行溶解，制备成500μg/ml的溶液，如此制备成头孢克洛对照品溶液。
其次，取单位计量的头孢克洛δ-3-异构体对照品置于精准量瓶内，通过PH2.5的磷酸二氢钾溶液进行溶解，制备成1000μg/ml的溶液，制备成头孢克洛δ-3-异构体对照溶液。
盐酸头孢替安酯盐酸头孢替安酯每毫克含量不得少于615ug（效价），不得多于690ug（效价），无水条件下计算。
盐酸头孢替安酯的效价是用头孢替安的质量换算的（C18H23N9O5S3:525.63）性状盐酸头孢替安酯是白色至明黄色粉末。
它极易溶于水、甲醇和乙醇（95），不溶于二甲亚砜，微溶于乙腈。
它溶于0.1mol/L 盐酸TS。
它具有吸湿性。
鉴别（1）测定溶解于0.1mol/L 盐酸TS的盐酸头孢替安酯（1 in125000）的紫外吸收吸收峰<2.24>，与用同样的方法制备的盐酸头孢替安酯标准品溶液的峰比较：在同一波长下，都表现出相似的吸收强度。
（2）比较在D-二甲亚砜中的核磁图谱（1 in 20）<2.21>（1H）。
用四甲基硅作为内标物质：有两个单峰，A和B，化学位移在2.8ppm和6.6ppm，一个多重峰C，化学位移在6.9ppm。
峰A、B、C的强度比大约为6:1:1。
（3）在盐酸头孢替安酯溶液（1 in 200）中加入2ml稀硝酸和1ml硝酸银TS，混合后，有白色沉淀产生。
旋光<2.49> [α]20D：+52-+60（无水重量0.1g，0.1mol/L盐酸TS，10ml，100mm）纯度（1）重金属<1.07>-将2.0g盐酸头孢替安酯按照方法2制备溶液，空白溶液中含有2.0ml标准铅溶液和2ml稀醋酸。
（不能大于10ppm）（2）砷<1.11>-将2.0g盐酸头孢替安酯按照方法3制备溶液，用六水合硝酸镁乙醇（95）溶液（1 in5），砷含量不能超过2ppm。
（3）相关物质1-精确称量50mg盐酸头孢替安酯，溶解在稀磷酸（1 in 100）和乙腈（4:1）混合溶液，定容到50ml。
吸取10ml此溶液，加入稀磷酸（1 in 100）和乙腈（4:1）混合溶液，定容到25ml，将此溶液作为样品溶液。
另外，精确称量50mg盐酸头孢替安酯标准品，溶解在稀磷酸（1 in 100）和乙腈（4:1）混合溶液，定容到50ml。
葡聚糖凝胶色谱法测定盐酸头孢替安中聚合物作者：张立娟来源：《科学与财富》2016年第35期摘要：本文采用高效液相测定了盐酸头孢替安中聚合物的含量，固定相为葡聚糖凝胶Sephadex G-10柱（300mm×15mm），流动相A为pH7.0的0.05mol/L磷酸盐缓冲液[0.05mol/L 磷酸氢二钠溶液：0.05mol/L磷酸二氢钠溶液（60：40）]，流动相B为水；流速为1.0mL/min，柱温为30℃，检测波长为254nm。
头孢替唑钠质量浓度在10.0～320.0mg/mL范围内与聚合物峰面积之间线性关系良好。
盐酸头孢替安样品溶液的质量浓度在10.0～40.0mg/mL范围内与聚合物峰面积之间线性关系良好。
此方法简便、准确、重现性好，可用于盐酸头孢替安中聚合物的含量测定。
关键词：盐酸头孢替安；含量；高效液相盐酸头孢替安适应症为主要用于对本品敏感的普通变形杆菌，葡萄球菌属、流感杆菌、克雷白杆菌属、肠道菌属、大肠杆菌、肺炎球菌、枸橼酸杆菌属、奇异变形杆菌，雷特格氏变形杆菌，摩根氏变形杆菌等所致下列感染：脓胸，胆管炎，烧伤感染，骨髓炎，胆囊炎，膀胱炎，败血症，化脓性关节炎，支气管炎，术后感染，肺化脓症，尿路炎，前列腺炎，脑脊膜炎，子宫内膜炎，前庭大腺炎、中耳炎、副鼻窦炎等[1]。
高分子化合物是由千百个原子彼此以共价键结合形成相对分子质量特别大、具有重复结构单元的有机化合物，也称为高分子、大分子等。
由于高分子多是由小分子通过聚合反应而制得的，因此也常被称为聚合物或高聚物。
样品相对分子质量的差异进行分离的凝胶色谱法具有明显的优势。
因此本文采用高效液相法对制剂中聚合物进行含量测定，为盐酸头孢替安的质量控制提供依据。
1 仪器与试药ULABO 实验室温度控制器（优莱博技术（北京）有限公司）；实验室用高纯水制备器（北京科誉兴业科技发展有限公司）；SCQ？-8201B全不锈钢数控加热超声波清洗机（上海声彦超声波仪器有限公司）；EX1700S-HPLC超高效液相色谱仪（上海伍丰科学仪器有限公司）；PA225型DCPA卓越电子分析天平（上海金鹏分析仪器有限公司）；R-1001-VN旋转蒸发仪（郑州长城科工贸有限公司）；UV2800双光束紫外可见分光光度计（四川汇巨仪器设备有限公司）。
注射用盐酸头孢替安有关物质测定方法研究周冉;常明;刘司婕;王文丽;李杰浩【摘要】目的建立测定注射用头孢替安有关物质的高效液相色谱法.方法参照国家食品药品监督管理局发布的盐酸头孢替安碳酸钠混合粉标准,采用COSMOSIL C18(25cm×4.6mm,5μm),以0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH值7.6～7.8-乙腈(88∶12)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为254nm,柱温25℃.结果采用所建立的有关物质检查方法,盐酸头孢替安的主峰及其杂质和各杂质之间能取得较好分离效果,最低检测限为5.028ng/mL.结论该法简单、准确、灵敏度高,专属性强,可用于盐酸头孢替安有关物质检查.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2014(039)008【总页数】4页(P604-607)【关键词】注射用盐酸头孢替安;有关物质;高效液相色谱【作者】周冉;常明;刘司婕;王文丽;李杰浩【作者单位】石家庄学院化工学院,石家庄050035;石家庄学院化工学院,石家庄050035;石家庄学院化工学院,石家庄050035;石家庄学院化工学院,石家庄050035;石家庄学院化工学院,石家庄050035【正文语种】中文【中图分类】R978.1+1注射用盐酸头孢替安为第二代头孢菌素类抗生素，其抗菌作用机理是阻碍细菌细胞壁的合成。
它对革兰阴性菌和阳性菌均具有广泛的抗菌作用[1-2]。
头孢类产品的有关物质检测是关系到产品质量、临床副作用、甚至患者生命安全的主要质控项目。
为确保临床用药安全、有效，需要建立适当的方法测定药品有关物质。
2010年版《中华人民共和国药典》未收载盐酸头孢替安原料及制剂质量标准，日本药典JP15中虽收载了盐酸头孢替安原料和制剂品种，但并未对有关物质有明确规定，故本实验参照国家食品药品监督管理局发布的注射用盐酸头孢替安标准(JX20050205)及盐酸头孢替安碳酸钠混合粉标准(JX20050202)，建立注射用头孢替安有关物质检查方法，并进行了一系列有针对性的方法学研究，同时结合稳定性研究结果及标准JX20050205[3-5]，制定了本品有关物质的最大单一杂质和总杂质的检测限度，从而为注射用盐酸头孢替安质量标准的制订和提高提供参考和依据。
注射用盐酸头孢替安配伍溶液中降解产物的测定于佳;杨利红;刘丽娜;张鑫【摘要】测定注射用盐酸头孢替安与0.9％ NaCl注射液配伍后的降解产物.采用LC-MS,RP-HPLC法,分别以0.02mol· L-1 NH4Ac水溶液-乙腈及磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相,对溶液配伍后的降解产物进行定性、定量分析.两个主要降解产物确定为DMMT和去四唑头孢替安内酯;配伍后室温放置8h,DMMT的量增加明显,百分含量由约0.03％增加至约0.15％,去四唑头孢替安内酯的量由约0.1％增加至约0.3％,杂质总量由0.03％增加至约0.15％.注射用盐酸头孢替安与0.9％氯化钠注射液配伍后不稳定,应临用新制,以确保临床用药安全.【期刊名称】《化学工程师》【年(卷),期】2015(029)004【总页数】3页(P32-33,64)【关键词】LC-MS;注射用盐酸头孢替安;配伍;降解产物【作者】于佳;杨利红;刘丽娜;张鑫【作者单位】黑龙江省食品药品检验检测所,黑龙江哈尔滨150088;黑龙江省食品药品检验检测所,黑龙江哈尔滨150088;黑龙江工程学院,黑龙江哈尔滨150050;黑龙江工程学院,黑龙江哈尔滨150050【正文语种】中文【中图分类】O657.7注射用盐酸头孢替安为第二代半合成头孢菌素，主要用于治疗敏感菌所致的感染，如肺炎、支气管炎、胆道感染、腹膜炎、尿路感染以及手术和外伤所致的感染和败血症等，临床应用广泛，是目前临床上最常用的抗生素之一[1]。
然而，在实验过程中我们发现：盐酸头孢替安原料极易吸潮变色，注射剂与氯化钠溶液配伍后2h内溶液颜色变化明显。
本文采用LC-MS、RP-HPLC法，对注射用盐酸头孢替安与0.9%NaCl注射液配伍后产生主要降解杂质进行定性定量分析：确定了主要降解杂质的结构，并采用外标法测定了主要降解杂质含量随溶液放置时间延长的变化情况。
1.1 仪器与试剂Agilent1100型高效液相色谱仪；ThermoFisher TSQ QuntumDiscoveryMAX型质谱仪，配有ESI离子源及Xcalliber数据处理系统。
华西药学杂志W C J ·P S2013，28（5）∶512 513作者简介：杨明，副主任药师，从事药品检验及临床药学工作。
Email ：1282090117@qq．comHPLC 测定盐酸头孢替安中的有关物质杨明（沈阳医学院附属沈州医院，辽宁沈阳110002）摘要：目的采用HPLC 法测定盐酸头孢替安中的有关物质。
方法采用C 18色谱柱，流动相为磷酸盐缓冲液（pH7.7）－乙腈（88∶12），检测波长254nm ，流速1．0mL ·min －1。
结果经专属性、检测限与定量限、耐用性、溶液稳定性考察，所用方法可行。
结论所用方法灵敏、准确、可靠，可用于盐酸头孢替安中有关物质的检测。
关键词：高效液相色谱法；盐酸头孢替安；有关物质中图分类号：R917文献标志码：A文章编号：1006－0103（2013）05－0512－02Determination of related substances of Cefotiam hydrochloride by HPLCYANG Ming（Subsidiary Shenzhou Hospital of Shenyang Medical College ，Shenyang ，Liaoning ，110002P．R．China ）Abstract ：OBJECTIVE To establish an HPLC method for determination of related substances of Cefotiam hydrochloride．METH-ODSAn HPLC method with gradient elution was applied ，equipped with ODS C 18column ，and the mobile phase was phosphate buffersolvent （adjusted to pH7．7）－acetonitrile （88∶12）．The detective wavelength was 254nm ，and the flow rate was 1．0mL ·min －1．RESULTSAfter specificity experiment ，quantitative limits experiment ，durability experiment and liquid stability experiment ，the meth-od was proved to be feasible．CONCLUSION The methods is accurate and sensitive．It can be used for the determination of relatedsubstances of Cefotiam hydrochloride．Key words ：HPLC ；Cefotiam hydrochloride ；Related substances CLC number ：R917Document code ：AArticle ID ：1006－0103（2013）05－0512－02盐酸头孢替安为第二代头孢菌素类抗生素，用于治疗敏感菌所致的肺炎、支气管炎、胆道感染、腹膜炎、尿路感染及手术和外伤所致的感染及败血症等。
文献采用HPLC 法测定盐酸头孢替安的含量［1－2］，为有效控制其产品质量，现采用HPLC 法测定盐酸头孢替安中的有关物质。
1实验部分1．1仪器与试药1200型高效液相色谱仪（美国Agilent ）。
头孢替安对照品（中国食品药品检定研究院，批号：130565－200902，纯度80．7%）；盐酸头孢替安（市售）；乙腈为色谱纯；水为纯净水；其余试剂为分析纯。
1．2方法与结果1．2．1色谱条件与系统适用性试验采用CapcellPak C 18色谱柱（250mm ˑ4．6mm ，5μm ），流动相为磷酸盐缓冲液（取0．05mol ·L －1磷酸氢二钠溶液800mL ，加0．05moL ·L －1磷酸二氢钾溶液200mL ，使pH7．7）－乙腈（88∶12），流速1．0mL ·min －1，柱温25ħ，检测波长254nm ，进样量10μL 。
取10μL 对照品溶液进样，记录色谱图（图1），主峰与各杂质峰的分离度应符合2010年版《中国药典》的规定［3］。
在此色谱条件下，记录供试品溶液的色谱图至主成分峰保留时间的3倍，以自身对照法测定有关物质的量。
102030405070t /min图1盐酸头孢替安有关物质的色谱图Fig 1Chromatograms of related substances of Cefotiam hydro-chloride1．2．2溶液的制备称取样品约25mg ，置25mL量瓶中，加水溶解并定容，作为供试品贮备液。
精密量取该贮备液1mL ，置100mL 量瓶中，用水定容，得供试品溶液。
称取头孢替安对照品约25mg ，置25mL量瓶中，加少量流动相溶解，加0．1mol·L－1氢氧化钠溶液1mL，于80ħ水浴中放置1min，放冷，加0．1mol·L－1盐酸溶液1mL中和，加流动相定容，得对照品溶液。
1．2．3专属性试验取盐酸头孢替安样品5份，每份25mg，置25mL量瓶中，第1份加少量流动相溶解，加0．1mol·L－1盐酸1mL，于80ħ水浴5min，加0．1mol·L－1氢氧化钠溶液1mL中和，加流动相定容，作为酸破坏样品；第2份加0．1mol·L－1氢氧化钠溶液1mL，于80ħ水浴5min，加0．1mol·L－1盐酸1mL中和，加流动相定容，作为碱破坏样品；第3份加30%过氧化氢溶液1mL，放置片刻，加流动相定容，作为氧化破坏样品；第4份于80ħ放置6 h，加流动相定容，作为高温破坏样品；第5份于强光（4.5ˑ103Lx）下照射24h，加流动相定容，作为光照破坏样品。
分别取上述溶液各10μL进样，记录色谱图。
图2结果表明：主峰与其相邻峰均得到有效分离，溶剂对测定无干扰。
样品经破坏后，降解程度大，破坏所产生的杂质与主峰分离良好，不影响主成分的检测，说明色谱条件满足该样品的分析。
样品在酸性条件下不稳定，降解产物12个；碱性条件下较酸性稳定，降解产物12个；高温下极不稳定，降解产物16个；强光下较稳定，降解产物11个；氧化条件下极不稳定，降解产物12个。
020406080100020406080100020406080100020406080100020406080100A B C D Et/min图2样品经酸破坏（A）、碱破坏（B）、氧化破坏（C）、热破坏（D）及光照破坏（E）试验的色谱图Fig2Chromatograms of Cefotiam hydrochloride treated by acid damage（A），base damage（B），oxidize damage（C），thermal collapse（D）and light damage（E）1．2．4耐用性试验分别采用3种常用品牌的色谱柱进行杂质的含量测定，其余条件同“1．2．1”项下色谱条件。
用资生堂MG－C18柱（250mmˑ4．6 mm，5μm）检出杂质9个，总杂质量为1．4%；用安捷伦ZORBAX SB－C18柱（250mmˑ4．6mm，5μm）检出杂质9个，总杂质量为1．4%；用瑞典KromasiL 100－5C18柱（250mmˑ4．6mm，5μm）检出杂质10个，总杂质量为1．4%。
各条件下主峰与杂质峰的峰形均良好，头孢替安理论板数均＞4.5ˑ103，分离度均符合2010年版《中国药典》［3］要求，表明方法耐用性较好。
1．2．5稳定性试验取盐酸头孢替安适量，精密称定，加水溶解并稀释成1mg·mL－1供试品溶液，分别于0、1.7、3．4、5．1、6．8h进样，考察其稳定性。
结果单一杂质从0．4%（0h）升至1．9%（6．8h）；总杂质从1.4%（0h）升至4．1%（6．8h），表明样品溶液不稳定，需临用新配。
1．2．6样品的测定按“1．2．1”项色谱条件对3批供试品进行了有关物质的测定。
计算3批样品中单一杂质分别为0．4%、0．4%、0．3%，总杂质分别为1．4%、1．4%、1．3%。
2讨论曾采用不同比例硫酸胺－乙腈、乙腈－1．5%乙酸溶液等流动相系统进行比较，最后确定以磷酸盐缓冲液（pH7．7）－乙腈（88∶12）为流动相。
为加快反应或者提高降解强度，必要时可以加热或提高浓度。
破坏性试验需结合具体药物的特点，选择合适的条件，使药物有一定量的降解，以主成分计算，一般降解10%左右。
文中所用HPLC法简便，干扰少，准确度及灵敏度高，可用于测定盐酸头孢替安中的有关物质。
参考文献：［1］颜冬梅，郑晓亮，屠凌岚．HPLC测定注射用盐酸头孢替安含量［J］．中国现代应用药学杂志，2009，26（13）：1163－1164．［2］梁佳辉，刘显峰．HPLC测盐酸头孢替安中头孢替安的含量［J］．黑龙江医药，2008，21（1）：9－10．［3］中华人民共和国国家药典委员会．中国药典［S］．二部．北京：中国医药科技出版社，2010：29－30，194－195．收稿日期：2013－03－04315第5期杨明。
HPLC测定盐酸头孢替安中的有关物质。
