水稻叶片离体保鲜技术探索

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乙烯在离体水稻叶片衰老中的作用

乙烯在离体水稻叶片衰老中的作用
聂先舟;刘道宏;徐竹生
【期刊名称】《华中农业大学学报》
【年(卷),期】1989(8)3
【摘要】离体水稻叶片衰老过程中,乙烯的生成速率在叶片离体后12小时达到最高峰。

该峰出现在叶绿素和蛋白质快速下降之前。

外源ACC(氨基环丙烷羧酸)和外源乙烯加速离体叶片的叶绿素和蛋白质量的下降,内源乙烯合成抑制剂Ni^(++)和Co^(++)则延缓两者的下降。

光照抑制乙烯生成,同时延缓叶片衰老。

【总页数】5页(P218-222)
【关键词】乙烯;水稻;叶片;衰老
【作者】聂先舟;刘道宏;徐竹生
【作者单位】华中农业大学农学系
【正文语种】中文
【中图分类】S511.101
【相关文献】
1.三唑酮对离体水稻叶片衰老的延缓作用 [J], 卢少云;郭振飞;李宝盛;李明启
2.乙烯诱导短季棉叶片衰老中抗氧化物酶及基因的变化 [J], 孟艳艳;冯常辉;庞朝友;宋美珍;蓝家样;张胜昔;范术丽
3.镍对水稻离体叶片脂质过氧化作用的影响 [J], 石贵玉;周巧劲
4.NR和NOS在CTK延缓离体小麦叶片衰老中的作用 [J], 张凤云;贺军民
5.PP_(333)对大麦离体叶片衰者生理的影响 [J], 游树鹏;王良江;钱水苗;徐礼根因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

水稻离体叶抗稻瘟病鉴定方法研究

ｅｅｔｏｈＧｒｅ－ｉｔｉｉｇＡｇｎｎｔｅｉｉｏｌａｏｏｎｔｅｇｒｎｔｏａｅｏｏｅａｄｔｅｅｅｔｆｔｅｄｆｒｎｎｃｌｔｎｍｅｈｄｎｄｓｆｃｆｔｅｅｎｍａｎａｎｎｅｔｏｈｎｖｔｅｆｃｌｒａｄｈｅｍｉａｉｎｒｔｆｓｒｎｈｆｃｈｉｅｅｔｉｏｕａｉｒｐｏｏｔｏｓｏｉ．
安徽农业科学，ｏｒａｏｎｕＡ．ｃ．０９３（３：０７—６３ＪｕｎｌｆＡｂｉＳｉ２０，７１｝６３０９
责任编辑
张杨林
责任校对
张士敏
水稻离体叶抗稻瘟病鉴定方法研究
韩美陆荣霍秀梁志强广农科院物护究，西宁３７丽，生，娟，（西业学植保研所广南５０）ｏｏ
较好，片几乎全部保绿。接种方法以喷雾法与液滴法较好，叶孢子萌发率较高，分别达到了８．％、６５，泡法不适合叶片离体鉴４７８．％浸定。温度为２ ℃ 时，种用孢子悬浮液的浓度１１５２０个／ｌ为合适。叶片发病期间温度低于２ ℃，８接 × ０～ ×１５ｍ较８潜育期有所延长。［结论］得到了行之有效的水稻抗瘟性叶片离体鉴定方法。
ＡｓａｔｌｂｃｖＪｔｆｏｐｔｉｎｆｔｎｅｏｔｓｔｃｅ铆ｓｉ）ｅｆｎｉａｔａｓｅｅ．Ｍｔｄ１ｅｂｔｃｒＯｊｔｅｓｍｌｅｄｔｃｉｔｄｆｈｒｉａｅｆｉ（ｅｉＡｅｏｃｅｅｉｏｍｈｏｅｅｓｎｏｒｉａｃａｖｌｉｖｒｔｂｓｗｓｃｅｄ［ｅｏ］ｈｔａａｔｏｌｒｎｏｈ

不同甲基紫精诱导离体水稻叶片氧化胁迫方法的研究

作者简介周玮（１９８２－），男，江苏如东人，硕士研究生，研究方向：光合作用。

收稿日期２００７!０６!２０植物叶绿体的类囊体膜上的电子传递链是产生活性氧较活跃的部位，在光合电子传递的过程中，ＰＳＩ在ＮＡＤＰ＋接受电子能力降低时能将电子直接传递给Ｏ２分子，产生超氧阴离子。

超氧阴离子在超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的作用下生成Ｈ２Ｏ２［１］。

Ｈ２Ｏ２在植物体内会继续转化成其他危害更大的活性氧如羟基自由基等［２］，从而对植物产生伤害。

联吡啶类衍生物甲基紫精（ＭｅｔｈｙｌＶｉｏｌｏｇｅｎ，ＭＶ）是触杀灭生性除草剂百草枯的主要成分，其作用机理是由于甲基紫精易于发生单电子还原反应产生具有较低氧化还原电势的甲基紫精自由基，而最终在温和的条件下诱导其他底物的还原［３］。

目前，国内外大量关于植物氧化胁迫的研究都以甲基紫精作为内源诱导物。

但大量该类研究缺乏较为统一的处理方法，尤其对水稻这种高等植物叶片。

笔者希望建立一种甲基紫精诱导完整叶片产生氧化胁迫对叶片无损伤的处理方法即叶鞘引入法。

为了将这种处理方法与已有的其他方法进行比较，该试验测定了不同方法处理后叶片的叶绿素荧光和植物蛋白（Ｒｕｂｉｓｃｏ）含量，来反映不同处理方法对叶片光合特性的影响。

１材料与方法１．１植物材料水稻粤优９３８（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ，ｃｖ．ｙｕｅｙｏｕ９３８），２００６年５￣６月分批盆播于南京农业大学温室，上午９：００将５叶全展期植株连根拔下取回。

１．２处理方法以幼苗叶片浸泡在去离子水中为对照，处理后在８００μｍｏｌ／（ｍ２・ｓ）光强下照射１ｈ，再将叶片用湿纱布包裹后暗适应３０ｍｉｎ，测定叶绿素荧光参数或立刻磨样提取Ｒｕｂｉｓｃｏ。

１．２．１浸根引入法。

将幼苗连根泡入ＭＶ处理液（１００μｍｏｌ／Ｌ，下同）中［４－５］１ｈ。

１．２．２叶鞘引入法。

第５叶在ＭＶ处理液中连１ｃｍ左右叶鞘剪下，浸泡［６］１ｈ。

１．２．３涂抹引入法。

用含有浓度１％Ｔｗｅｅｎ!２０的ＭＶ处理液涂抹剪下浸泡在蒸馏水中的第５叶。

一种水稻叶片保绿防冻剂、其使用方法及应用[发明专利]

专利名称：一种水稻叶片保绿防冻剂、其使用方法及应用专利类型：发明专利
发明人：陶龙兴,符冠富,陈婷婷,杨永杰,张彩霞,杨雪芹
申请号：CN201410322659.9
申请日：20140708
公开号：CN104054707A
公开日：
20140924
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种水稻叶片保绿防冻剂、其使用方法及应用，所述叶片保绿防冻剂包括赤霉素、芸苔素内酯，按重量配比计算，赤霉素∶芸苔素内酯为50～200∶0.025～0.10，还可包括一定配比的壳寡糖；使用时，采用水溶液，其中，赤霉素为50mg/L～200mg/L，芸苔素内酯为
0.025mg/L～0.10mg/L，壳寡糖100mg/L～300mg/L，于水稻齐穗期～乳熟期喷施水稻叶面，用量每亩30～45升。

本发明可应用于防御晚稻灌浆后寒露风的危害，除具有叶片防冻保绿效果外，同时具有促进水稻光合速率，延缓叶片衰老的功效，增产效果明显，是水稻高产稳产稻作新技术，适于推广应用。

申请人：中国水稻研究所
地址：311400 浙江省杭州市富阳水稻所路28号
国籍：CN
代理机构：北京方韬法业专利代理事务所
代理人：马丽莲
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水稻叶片姿态对光抑制及衰老进程调节效应的研究的开题报告

水稻叶片姿态对光抑制及衰老进程调节效应的研究的开题报告一、研究背景随着全球气候变化和人口增长，粮食生产面临着严峻的挑战。

水稻是世界上最重要的粮食作物之一，对全球粮食安全具有重要意义。

然而，水稻生长过程中遇到的光抑制和衰老问题影响了产量和质量，影响甚至更大。

因此，在探究水稻衰老和光抑制调节效应方面的研究具有重要意义。

二、研究目的本研究旨在探究水稻叶片姿态对光抑制和衰老进程的调节效应，并研究水稻叶片姿态的调节机制，为水稻生产提供理论依据和实践指导。

三、研究内容（一）收集水稻叶片姿态数据本研究将收集不同的水稻品种叶片姿态数据，包括叶片旋转、倾斜、夹角度等。

（二）研究水稻叶片姿态对光抑制和衰老的调节效应本研究将探究水稻叶片姿态对光抑制和衰老进程的调节效应，包括叶片展开和叶绿素含量等指标的变化。

（三）深入研究水稻叶片姿态的调节机制本研究将通过生理生化实验等手段深入研究水稻叶片姿态的调节机制，包括激素合成、基因表达等方面的探究，并进一步研究调节机制分子水平的作用机制。

四、研究意义本研究将为水稻光抑制和衰老进程调节效应的研究提供重要的理论基础和实践指导，同时对水稻生产具有重要的应用价值，可以提高水稻产量和品质。

五、研究方法本研究将采用田间和室内实验相结合的方法，通过收集不同品种水稻叶片姿态数据、生理生化实验等手段深入研究水稻叶片姿态的调节机制。

通过实验数据的分析，找出水稻叶片姿态对光抑制和衰老进程的调节效应机制。

六、预期结果本研究预期可以发现不同品种水稻叶片姿态对光抑制和衰老进程的调节效应差异，揭示水稻叶片姿态调节机制的基本原理，并为水稻生产提供理论依据和实践指导，提高水稻产量和品质。

植物离体培养技术的高效操作指南

植物离体培养技术的高效操作指南植物离体培养技术是一种重要的植物繁殖和遗传改良方法，通过将植物的组织或器官（如种子、叶片、茎尖、花器官等）分离、培养在营养基上，并在一定条件下诱导其再生或胚胎发生，以实现新植株的繁殖。

离体培养技术具有多种优点，如操作简便、繁殖快速、生长周期可控等，因此被广泛应用于作物种质资源保存、快速繁殖、品种改良等领域。

下面将介绍离体培养技术的操作指南，以帮助读者高效地进行植物离体培养实验。

一、材料准备：1. 植物材料的选择选择健康、无病虫害的母本植株作为培养材料，确保离体培养基质的质量和成功率。

2. 器具消毒将使用到的培养器皿、工具、介质等物品进行高温高压消毒或酒精消毒，以防止外源性病原体的污染对培养产生影响。

二、培养基的制备：1. 基本营养盐的配制按照已有的文献方法或标准配方，准确称取所需的盐类等营养成分，注意不同植物种类的养分需求差异。

2. 植物生长调节剂的添加根据培养目的的不同，添加适量的生长调节剂，如激素、细胞分裂素等，以促进植物组织的再生或胚胎发生。

三、植物材料的处理：1. 植物材料的消毒处理将取自植物体上的材料进行外表消毒，以杀灭表面的细菌和病原体。

消毒方法可以选择酒精浸泡、漂白粉处理等。

2. 材料的分离和处理将消毒后的植物材料进行分离，如分离种子、茎尖、花器官等，并根据需要对材料进行切割、切片、剥离等操作，以提高培养效果。

四、培养条件的控制：1. 温度和光照根据植物种类的不同，选定适合其生长的温度和光照条件。

一般来说，20-25摄氏度和12小时光照周期是较为适宜的条件。

2. 孔板的封闭和通气除非特殊需要，离体培养器皿应封闭避光，并保持一定的通气性，以维持适宜的氧气水平和二氧化碳浓度。

五、培养过程的观察和管理：1. 营养基的补充和调整根据培养过程中培养基的使用情况，定期补充或调整培养基中的营养物质，以维持良好的生长环境。

2. 对植物材料进行转移和分化根据培养目的的不同，对植物组织进行分化和培养继代，以实现新植株的再生和繁殖。

我国科学家找到延缓水稻叶片衰老新方法

我国科学家找到延缓水稻叶片衰老新方法近期，中国水稻研究所水稻基因组模块创新团队研究发现，水稻体内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD：Nicotinamide Adenine Dinucleotide）合成途径受阻能够导致其叶部提前衰老，而对这一途径中的关键限速基因的克隆和功能解析有利于探究一种新的延缓水稻叶片衰老的方法，进而为水稻增产提供新思路。

该研究成果4月6日在线发表于《植物生理学（Plant Physiology）》杂志。

图：水稻叶片NAD在水稻细胞氧化还原反应和维持细胞的发育进程中起着重要的调控作用。

虽然导致叶片衰老的因素很多，但是与植物体内NAD合成途径相关的因素却鲜有报道。

研究人员利用一个水稻叶片早衰相关的突变体叶尖枯1号（lts1：leaf tip senescence 1），借助图位克隆的手段分离了LTS1基因，该基因编码NAD补偿合成途径中的一个关键限速酶————烟酸磷酸核糖转移酶（OsNaPRT1: Oryza sativa Nicotinate Phosphoribosyltransferase 1）。

LTS1基因的突变会扰乱水稻叶片中的NAD补偿合成途径，从而影响其一系列中间代谢产物的合成，其中包括烟酸（Na: Nicotinate）和烟酰胺（Nam: Nicotinamide）的含量显著增多、NAD含量减少。

而烟酰胺含量的激增会严重抑制沉默信号调控因子（一种组蛋白去乙酰化酶）（OsSRTs：Oryza sativa Silent Information Regulator2）基因的表达；同时，诱导OsSRTs基因，启动了特异修饰组蛋白H3K9衰老调控基因，提高了乙酰化修饰水平，从而激活了这些衰老相关基因的转录、导致水稻叶片的早衰。

该研究得到了国家自然科学基金委、国家973项目、博士后科学基金和深圳科技项目的资助。

吴立文博士、任德勇博士、胡时开博士和李赓觅博士为共同第一作者，郭龙彪研究员和钱前研究员为共同通讯作者。

【CN109892225A】一种白掌种质资源离体保存的方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910171661.3(22)申请日 2019.03.07(71)申请人三明市农业科学研究院地址 365509 福建省三明市沙县琅口镇柱元村(72)发明人周辉明　林辉锋　莫智龙　陈昌铭　郭芸玮　夏朝水　林发壮　姚凤琴　陈玮婷　曹奕鸯　(74)专利代理机构泉州市博一专利事务所35213代理人方传榜　蔡俊旭(51)Int.Cl.A01H 4/00(2006.01)A01N 3/00(2006.01)(54)发明名称一种白掌种质资源离体保存的方法(57)摘要一种白掌种质资源离体保存的方法，以去除叶片后的白掌粗壮吸芽作为外植体，在自来水下冲洗干净，用72～75%酒精消毒45～60秒，用无菌水冲洗1次，用0.1%升汞处理该外植体，用无菌水冲洗3次，无菌滤纸吸干；将外植体切割成带节的茎段接种到芽诱导培养基中培养30天，之后将萌发的腋芽转接到增殖培养基上进行扩繁40天获得丛生苗；将丛生苗分切成单株并转入离体保存培养基中进行保存；离体保存培养基：3g/L花宝1号+1～3g/L NH 4NO 3+0.5～1.0 g/L善存成人男女综合矿物质复合维生素片+30g/L蔗糖+4g/L琼脂粉。

本发明方法保存16个月的白掌试管苗，其后代植物学性状和ISSR扩增谱带无差异，保存材料稳定，不会发生遗传变异，可防止种性退化和病害感染，保证种质优良特性。

权利要求书1页说明书4页附图4页CN 109892225 A 2019.06.18C N 109892225A权　利　要　求　书1/1页CN 109892225 A1.一种白掌种质资源离体保存的方法，其特征在于，包括以下步骤：1) 外植体选择和消毒：以去除叶片后的白掌粗壮吸芽作为外植体，先在自来水下冲洗干净，之后用72～75%酒精对该外植体表面进行消毒45～60秒，再用无菌水冲洗1次，然后用0.1%升汞处理该外植体10～12分钟，再用无菌水冲洗3次，无菌滤纸吸干备用；2) 试管苗繁殖：将步骤1处理后的外植体切割成带节的茎段接种到酸碱度为5.8～6.0的芽诱导培养基中以温度27～29℃、光照强度1200～1500lux、光照时间12小时/天的条件培养30天，之后将萌发的腋芽转接到酸碱度为5.8～6.0的增殖培养基上以温度27～29℃、光照强度1200～1500lux、光照时间12小时/天的条件进行扩繁40天获得丛生苗；其中，芽诱导培养基：4g/L花宝1号+30 g/L蔗糖+0.1～0.3mg/LTDZ+0.05～0.1mg/LNAA +5g/L琼脂粉；增殖培养基：3g/L花宝1号+1～3g/L NH4NO3+0.05～0.15mg/LTDZ+0.05～0.1mg/LNAA+30g/L 蔗糖+5g/L琼脂粉；3) 试管苗保存：将步骤2中获得的丛生苗分切成单株并转入酸碱度为6.1～6.5的离体保存培养基中以温度20～25℃、光照强度1000～1200lux、光照时间8小时/天的条件进行保存；其中，离体保存培养基：3g/L花宝1号+1～3g/L NH4NO3 + 0.5～1.0 g/L善存成人男女综合矿物质复合维生素片+30g/L蔗糖+4g/L琼脂粉。

水稻白叶枯病的离体鉴定方法[发明专利]

专利名称：水稻白叶枯病的离体鉴定方法
专利类型：发明专利
发明人：朱永生,许惠滨,郑燕梅,郑菲艳,蔡秋华,谢鸿光,何炜,连玲,吴方喜,罗曦,陈丽萍,张建福,谢华安
申请号：CN201610853418.6
申请日：20160927
公开号：CN106212142A
公开日：
20161214
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种水稻白叶枯病的离体鉴定方法，属于水稻白叶枯病的鉴定方法技术领域。

该水稻白叶枯病的离体鉴定方法包括如下步骤：步骤一，待鉴定水稻材料的准备；步骤二，水稻白叶枯病菌的活化和培养；步骤三，离体叶片营养液的配制和准备；步骤四，待鉴定水稻品种离体叶片的采集；步骤五，水稻白叶枯病菌的接种菌液制备；步骤六，水稻叶片离体剪叶法接种；步骤七，接种后的离体叶片保湿培养；步骤八，病情的调查与记载。

本发明方法采用在室内离体条件下接种水稻白叶枯病，可以保证发病需要的温度、湿度等条件的一致性，充分保障感病品种发病，保证鉴定结果的真实、可靠。

申请人：福建省农业科学院水稻研究所
地址：350005 福建省福州市五四路247号
国籍：CN
代理机构：长沙星耀专利事务所
代理人：许伯严
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浅谈水稻栽培与保鲜技术

浅谈水稻栽培与保鲜技术作者：尹百翠来源：《中国科技博览》2013年第05期[摘要]提高水稻的栽培与保鲜技术，有助于提高水稻的产量，增加经济效益。

[关键词]栽培机插秧保鲜生态防虫中图分类号：S2 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2013）05-0141-01随着新技术的广泛应用，全球生物资源的基因争夺已成为21世纪的热点之一。

我国是稻种资源大国，有各类稻种资源六万多份。

这对保护我国生物资源安全，开发拥有自主产权的基因资源具有十分重要的现实意义。

黑龙江省水稻进入一个新的高速发展时期。

目前，黑龙江省水稻栽培技术主要有“手稻秧”和“机插秧”，还有“机械直播种”和“抛秧”四种类型，由于插秧和抛秧技术还衍生出“两段育秧栽培”、“超稀植栽培”和“抛摆栽培”等。

各类型技术特点不同，生产成本、产量和品质，以及生产效益也有区别。

黑龙江省气候特点是作物生育期短，夏季温度低，年际问活动积温变化幅度大。

水稻属于喜温作物，低湿冷害是水稻生产的最重要气象灾害。

直播种稻因为没有保护地育苗阶段，直播稻种苗期又正处于我省春季温度波动幅度最大的时期，为此，直播水稻生育期受低温影响延迟程度明显大于育苗插秧栽培，直播种稻的稳产性明显小于插秧种植。

抛秧种稻是针对手插秧移栽效率低和劳动强度大问题提出来的。

与一般手插秧相比较，抛秧在用秧钵育秧提高秧苗素质、抛栽提高移栽效率和减轻劳动强度上有突出的优点。

但大面积生产中抛秧种稻也有难以克服的缺点。

主要是对整地质量要求过高，如稻田的平整程度，稻田泥浆松软程度等，这些条件在大面积生产中很难达到的。

第二，抛秧要求条件过严，如大风时不能抛，风大抛秧易造成漂秧；整地后泥浆沉降时间不适宜不能抛，水多不能抛和水少能抛等。

第三，稻根部入土深度不一致，主要是入土深度过浅，产生浮根，影响水稻分蘖生长和加重倒伏。

第四，秧苗分布不均匀，秧苗入土深度不一致，导致水稻生育整齐度差，由此影响稻米的产量和品质。

第五，秧苗分布不均匀，也不便于除草和收获等。

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水稻叶片离体保鲜技术探索
摘要:用由蔗糖､柠檬酸､硫酸铝､8-羟基喹啉按不同比例配制成3种不同的保鲜剂,处理水稻的离体叶片,分别在处理当天､第二､四､六､八､十天测定其叶片色素含量｡结果表明,较低浓度的保鲜剂有利于水稻叶片离体培养,但当超过一定浓度后,反而会促进叶片离体后的衰老;不同水稻品种在处理前期随着叶绿素含量的下降,类胡萝卜素含量有上升趋势,品种银梭､丽江新团黑谷和绵恢2009表现最明显,这可能与类胡萝卜素具有保护叶绿素的功能密切相关;不同水稻品种对保鲜剂敏感浓度的剂量不同,在水稻叶片离体培养时,应根据实际情况来最终确定保鲜剂的种类与浓度,才能达到预期的目标｡
关键词:水稻;叶绿素;类胡萝卜素;保鲜
Exploration of Fresh-keeping Technology for Rice Leaf Blade
Abstract: Three kinds of antistaling agents were prepared with different propotion of sucrose, 8-HQ, citric acid and Aluminum Sulfate, and then used to dispose rice leaves of three-leaf period in vitro. And the leaf blade pigment contents were tested on the same day, 2nd,4th,6th,8th,10th day of the treatment. Results indicated that lower concentration of antistaling agents was good for leaf blade culture in vitro, but it would promote the senility of leaf blade in vitro when the concentration was too high. As the chlorophyll content of different paddy rice variety decreased at the beginning stage of treatments, carotenoid content increased, with Yinsuo, LTH and Mianhui 2009 as good example. This may be because of the protection function of carotenoid to chlorophyll. Different rice variety had different sensitive concentration of antistaling agents, therefore the kind and concentration of antistaling agents should be carefully determined when conducting paddy rice leaf blade culture in vitro.
Key words: rice(Oryza Sativa L.); chlorophyll; carotenoid;antistaling
水稻的主要病虫害有稻瘟病､纹枯病､螟虫､稻飞虱等,无论哪种病害的大规模流行都会对水稻生产带来毁灭性的打击｡实践证明,选育和种植高产且抗病虫害的品种是减轻病害损失的重要措施,而水稻病虫害的抗性基本属于数量性状,现在生产上大规模种植的很少有高抗品种｡因此,准确评价现有资源中的抗性种质,以及鉴定其中的数量性状抗病基因并将其应用于育种实践,显得极为重要[1]｡
有关水稻抗病虫害的鉴定前人做过较多研究[2-4]｡实践证明,离体接种鉴定水稻抗性具有方法简单､准确可靠､易于控制温度和湿度等外界环境因素,故在植物抗性鉴定中应用价值较大｡
水稻稻瘟病､纹枯病等主要病害的离体接种鉴定主要通过离体叶片接种来鉴定抗病等级,且接种菌种后,菌种的感染生长又需要一定的时间间隔｡在接种后菌种感染､生长的这段时间应尽可能减少非接种致病菌引起的水稻叶片衰老,使其保持采摘时的生理活性,这对于离体接种鉴定的准确性是至关重要的｡叶绿素含量是叶片衰老的显著特征之一,叶绿素含量下降,叶色退绿发黄,叶绿素含量降低越快,表明叶片衰老越快｡
1材料与方法
1.1供试材料
水稻品种银梭､丽江新团黑谷(高感稻瘟病品种),泸恢99-14(高抗稻瘟病品种),绵恢725(四川省水稻区试对照品种冈优725的父本),明恢63(国家水稻区试对照品种汕优63的父本),绵恢2009(西南科技大学自选高配合力抗病恢复系),均由西南科技大学水稻研究所提供｡
1.2材料处理
取不同品种水稻种子各500粒,用10%浸种灵500倍液浸种48 h后,再用70%(V/V)的乙醇浸种30 s,用无菌水冲洗,最后用0.1%(V/V)的升汞消毒15 min,用无菌水冲洗3~4次｡将消毒后的水稻种子放入盛有营养液(根据国际水稻营养液配方配制)的培养皿中,在(28±2)℃､相对湿度80%~90%条件下培养｡每隔2 d更换营养液1次,直到3叶1心时,剪取长约50 mm､宽≥5 mm的叶片,放入盛有不同保鲜剂(表1)的培养皿中,在(30±2)℃､相对湿度80%~90%､光照强度11 400 lx条件下培养｡分别在处理当天､第二､四､六､八､十天取样,用95%(V/V)乙醇浸提法[5]测定叶绿素a+b及类胡萝卜素的含量｡
1.3保鲜剂配制
用不同种类和浓度配比的化学试剂配制保鲜剂(表1)｡
1.4数据处理
所有试验数据均为3次重复的平均值,并采用Execl 2003软件进行统计学处理｡
2结果与分析
2.1不同保鲜剂处理对水稻离体叶片叶绿素含量的影响
2.1.1不同处理对水稻离体叶片叶绿素含量动态变化的影响[5]由图1可以看出,绝大部分处理中,不同水稻品种叶片的叶绿素含量基本随时间的延长呈下降趋势｡绵恢725在处理的前4 d,叶绿素下降速度较快,之后下降速度逐渐减缓;在B处理下,银梭的叶绿素含量在第六天出现低谷,而在第十天再次下降,这可能与离体叶片后期内部抗衰老调节机制失去作用相关;绵恢2009的叶绿素含量在前4d下降
不明显,之后才逐渐开始下降,且有波动;而丽江新团黑谷的叶绿素含量到第八天才开始快速下降,这种现象可能与水稻品种的基因型相关,有待进一步探讨｡
2.1.2不同品种最佳处理的叶绿素含量变化间的差异由表2可以看出,不同水稻品种之间在最适保鲜剂处理下,其叶绿素含量下降率存在显著差异｡绵恢725和银梭在第十天叶绿素含量的下降率高达47.42%､40.83%;明恢63和泸恢99-14在第十天下降率为32.39%､3
3.25%;丽江新团黑谷在第十天的叶绿素含量下降率高达47.84%;而绵恢2009在第十天叶绿素含量的下降率仅为3.88%｡由此可以看出,供试用的保鲜剂配方A对品种绵恢2009的保鲜效果非常好,而对泸恢99-14也可以提供一定的保鲜条件;保鲜剂配方B在前八天也能为丽江新团黑谷提供很好的保鲜条件,绵恢725离体叶片在供试用的保鲜剂配方处理条件下衰老非常快,有必要进一步探索其原因及更加合适的保鲜条件｡
2.2不同保鲜剂处理对水稻离体叶片类胡萝卜素含量的影响
由图2可知,所有处理,不同水稻品种叶片的类胡萝卜素含量基本随时间的推移呈先上升后逐渐下降的趋势｡在处理的前期,绵恢2009､明恢63､银梭和丽江新团黑谷的类胡萝卜素上升速度较快,之后逐渐呈下降趋势｡将图2与图1在同等条件下的叶绿素与类胡萝卜素含量变化进行对比,推测图2中类胡萝卜素含量变化的趋势,可能与类胡萝卜素能清除引起叶绿素降解的超氧阴离子自由基和单线态氧而保护叶绿素的功能密切相关[6]｡
在B处理下,绵恢725类胡萝卜素含量的变化趋势为先下降､后上升,基本上呈波浪型的变化趋势｡在观测开始时,绵恢725的类胡萝卜素含量最高,银梭的含量最低,而到第十天的时候,丽江新团黑谷的类胡萝卜素含量与绵恢725的持平,银梭最低,并且在整个观测期中绵恢725的类胡萝卜素含量变化最不规则,波动最大,而丽江新团黑谷却较规则,并出现了类胡萝卜素含量的峰值｡
3讨论
1)试验用各个配方处理水稻品种后,品种间和叶绿素测定时间之间的差异明显,绵恢2009､银梭在A处理下保鲜效果较佳,且绵恢2009在第十天的叶绿素下降率仅为3.88%;明恢63､绵恢725､丽江新团黑谷在B处理下保鲜效果较佳;C处理的保鲜效果较差,甚至在处理品种绵恢2009､绵恢725､泸恢99-14､丽江新团黑谷时,其叶绿素下降速度大于对照;且处理品种丽江新团黑谷时,其叶绿素含量在整个观测时期都低于对照｡
2)不同品种在同一保鲜剂处理下,其叶绿素､类胡萝卜素含量明显不同,叶绿素含量整体呈下降趋势,而类胡萝卜素含量有的呈上升趋势,这可能与类胡萝卜素能清除超氧阴离子自由基和单线态氧密切相关[6]｡
3)较低浓度的保鲜剂有利于水稻叶片离体培养,而当浓度过高时,反而会促进叶片离体后的衰老;不同水稻品种对保鲜剂敏感浓度的剂量不同,因此,在水稻叶片离体培养时,应根据实际情况来最终确定保鲜剂的种类与浓度,这样才能达到预期
的目标｡
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