腺苷脱氨酶检测的临床意义培训课件

腺苷脱氨酶测定对结核性脑膜炎的诊断意义探讨目的探讨腺苷脱氨酶测定对结核性脑膜炎的诊断意义，以供临床参考。

方法选择2010年8月至2013年7月我院收治的结核性脑膜炎患者30例作为观察组，以同一时期收治的非结核性脑膜炎患者30例为对照组。

对比两组患者脑脊液腺苷脱氨酶水平的差异性。

分析观察组患者治疗前后脑脊液腺苷脱氨酶水平的变化。

结果对比两组腺苷脱氨酶水平发现，观察组明显高于对照组，差异具有统计学意义（p＜0.05）。

与治疗前比较，观察组患者治疗后腺苷脱氨酶水平明显下降，差异具有统计学意义（p＜0.05）。

结论结核性脑膜炎患者脑脊液腺苷脱氨酶水平明显高于非结核性脑膜炎患者，在今后的临床工作中可将脑脊液腺苷脱氨酶水平作为结核性脑膜炎的辅助诊断指标之一。

标签：腺苷脱氨酶；结核性脑膜炎；脑脊液；诊断意义结核性脑膜炎是一种由结核杆菌引起的中枢神经系统炎症，在临床较为常见。

由于结核性脑膜炎的临床症状不典型，诊断难度较大，因此寻找一种简单易行、特异度高的生物标记物一直是临床工作研究的重点。

腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性密切相关的核酶，在早期结核性脑膜炎患者脑脊液中的水平较高[1]。

我院探讨了脑脊液中腺苷脱氨酶活性测定对结核性脑膜炎的诊断价值，现将结果分析报告如下。

1.资料和方法1.1一般资料选择2010年8月至2013年7月我院收治的结核性脑膜炎患者30例作为观察组，年龄22～64岁，平均年龄（38.63±5.23）岁；体重47～85kg，平均体重（62.15±6.38）kg；病程1～5d，平均病程（3.02±1.14）d；其中男性患者18例，女性患者12例。

以同一时期收治的非结核性脑膜炎患者30例为对照组，年龄20～65岁，平均年龄（39.18±4.98）岁；体重48～84kg，平均体重（61.87±5.85）kg；病程1～6d，平均病程（3.13±1.08）d；其中男性患者19例，女性患者11例；化脓性脑膜炎21例、病毒性脑膜炎组9例。

脑脊液腺苷脱氨酶测定对结核性脑膜炎诊断的临床意义目的：探讨脑脊液腺苷脱氨酶测定结果对结核性脑膜炎的临床诊断意义，为提高此类患者诊断正确率提供可靠依据。

方法：指定1～2名具有专业知识及丰富经验的临床实验室检查人员完成四组患者脑脊液检查工作。

记录四组患者脑脊液中免疫球蛋白、乳酸脱氢酶、腺苷脱氨酶检测结果，给予统计学分析后得出结论。

结果：研究组结核性脑膜炎患者脑脊液中IgG、IgA、ADA检测结果较其他组显著高，比较差异均有统计学意义（P＜0.05）；对照1组化脓性脑膜炎患者脑脊液中IgM检测结果与其他组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论：结核性脑膜炎患者脑脊液中腺苷脱氨酶水平显著高于其他类型脑膜炎患者及非脑膜炎患者，临床医师根据疑似结核性脑膜炎患者腺苷脱氨酶检测结果可准确判断病情，提高患者预后及降低死亡率。

标签：腺苷脱氨酶；结核性脑膜炎；诊断结核性脑膜炎是临床常见的中枢神经系统感染性疾病，其发病原因为结核杆菌感染。

有研究表明，若结核性脑膜炎患者未得到及时诊治则病死率较高，且预后效果不良，相关后遗症将严重影响患者生活质量，提示尽早确诊并实施正确救治是保障患者生活质量及生命安全的关键因素[1]。

本文将笔者所在医院自2013年1月-12月前来就诊的28例结核性脑膜炎患者给予临床研究，从而探讨脑脊液腺苷脱氨酶测定结果对结核性脑膜炎的临床诊断意义，为提高此类患者诊断正确率提供可靠依据，现报告如下。

1 资料与方法1.1 一般资料选取28例结核性脑膜炎患者（研究组）进行本次研究，其中男11例、女17例，年龄18～79岁，平均（42.95±2.36）岁。

选取本时期前来就诊的28例化脓性脑膜炎患者（对照1组）与28例病毒性脑膜炎患者（对照2组）作对比研究。

其中对照1组男10例、女18例，年龄20～78岁，平均（43.57±2.69）岁；对照2组中男11例、女17例，年龄19～82岁，平均（42.68±2.43）岁。

结核性胸腹水与肿瘤性胸腹水的鉴识诊疗惯例方法之外观、凝结性、李凡他试验、蛋白定量及细胞计数并分类等方法进行鉴识，特异性和敏感性低，鉴识较为困难，抗酸染色查抗酸杆菌阳性率不高，结核分支杆菌的培育需时长，均影响临床诊疗和治疗。

所以本文将ADA 、LDH 和 CRP 应用于惯例胸腹水检测来鉴识结核性胸腹水和肿瘤性胸腹水拥有较高的特异性和敏感性。

ADA 是人体嘌呤核苷分解代谢过程中起重点作用的水解酶，它能催化腺嘌呤核苷降解为次黄嘌呤核苷，后经核苷磷酸化酶催化成次黄嘌呤，最后氧化成代谢终产物尿酸。

并且ADA 宽泛存在于人体各组织中，以胸腺、脾和淋巴组织中活性最高，它与T 淋巴细胞的分化和增殖亲密有关。

本文检测结果表示：结核性胸腹水中的ADA 活性明显增高，可能是结核性胸腹水中T 淋巴细胞和单核 -巨噬细胞被分支杆菌激活，进而惹起ADA 活性高升。

此外间皮细胞可主动吞噬分支杆菌，产生多种特异性细胞因子，进而可引诱产生ADA 活性高升 [1] 。

文件报导腹水 ADA>30u/L ，诊疗 TBP 的敏感性和特异性均超出90%，临床荟萃剖析显示，将ADA 值定为 36-40u/L 诊疗 TBP 的敏感性为100%，特异性为 97%[2] 。

但肿瘤性胸腹水组ADA 活性不高，可能是肿瘤性胸腹水中的T 淋巴细胞增殖受克制致使的。

LDH 是一种 H+ 传达氧化复原酶，宽泛散布于组织器官，组织中含量显然高于血清[3] 。

本文检测结果表示，肿瘤性胸腹水组LDH 活性明显高于结核性胸腹水组，两组比较有显著性差异 (P<0.01) 。

肿瘤性胸腹水中 LDH 增高，可能是因为组织损坏零落伤害和肿瘤组织中酶的无氧酵解上涨促进糖酵解重点酶使LDH 高升。

用胸腹水确诊肿瘤患者的重要依照是从胸腹中查出肿瘤细胞，但因为阳性率较低，给临床诊疗带来了必定的困难。

所以，胸腹水 LDH 活性高低能够作为肿瘤性胸腹水和结核性胸腹水鉴识诊疗的一个依照。

结核性胸膜炎患者腺苷脱氨酶检查的临床意义【摘要】目的探讨胸水腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)检查在结核性胸膜炎诊断中的临床意义及应用价值。

方法回顾确诊的50例结核性胸膜炎及32例恶性胸腔积液中胸水ADA的水平。

结果结核性胸膜炎的胸水ADA值平均为49.08±8.62，恶性胸腔积液的胸水ADA值平均为16.6±8.45，两者之间差异有统计学意义(P＜0.01)。

结论胸水腺苷脱氨酶对结核性胸膜炎有一定的特异性，可作为参考指标。

【关键词】腺苷脱氨酶(ADA)；结核性胸膜炎；胸腔积液胸腔积液是临床常见的征象，其原因多种多样，以结核性胸膜炎及恶性胸腔积液较为常见，但既往所应用的胸水细菌学及细胞学等常规方法阳性率低，且结果回报时间相对较长，不利于及早诊断，因此鉴别结核性和恶性胸腔积液有着重要的临床意义1］。

而胸水腺苷脱氨酶操作简便，已在临床广泛应用，本文对50例结核性胸膜炎及32例恶性胸腔积液胸水中ADA的结果进行分析，观察其在结核性胸腔积液诊断中的临床意义。

1 资料与方法1.1 对象选取2004年1月至2010年1月于我院呼吸科就诊的82例患者，其中结核性胸膜炎50例，诊断方法，有明显的发热、盗汗、咳嗽、乏力、消瘦等结核中毒症状，PPD强阳性，经抽胸水及抗结核治疗有效者，同时排除了其他可能的疾病，其中男29例，女21例，平均年龄(31.02±10.35)岁。

恶性胸腔积液32例，诊断方法:肺CT可见典型的肿瘤影像学表现，胸水找到瘤细胞。

其中男20例，女12例，平均年龄(68.09±14.37)岁。

1.2 方法胸腔B超定位后初步诊断有胸水者行胸腔穿刺抽液，胸水标本送检ADA检查，其测定方法是采用Giusti比色法，以ADA≥45 U/L为阳性界值。

1.3 统计学方法采用SPSS 17.统计软件，组间比较采用t检验及χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

血清腺苷脱氨酶ADA测定1.实验原理应用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)，黄嘌呤氧化酶(XOD)和过氧化物酶(POD)反应连续监测法。

ADA酶解腺苷(Adenosine)脱氨产生次黄苷(Inosine)；再通过偶联PNP的作用，生成次黄嘌呤(Hypoxanthine);后者在XOD氧化作用下生成尿酸和过氧化氢；最后在POD的作用下H2O2再与N-乙基-N-(2-羟基-3-硫丙基)-3-甲基苯胺(EHSPT)、4-氨基安替比林(4-AAP)反应(Trinder氏反应)，生成紫红色的有色醌。

通过测量有色醌550nm处吸光度上升的速度来测算ADA的活性。

ADAAdenosine + H2O Inosine + NH3PNPInosine + Pi Hypoxanthine + Ribose 1-phosphateXODHypoxanthine + 2H2O + 2O2 Uric acid + 2H2O2POD2H2O2 + 4-AA P+ EHSPT 4H2O + Quinone dy e2. 标本：2.1 病人准备：新鲜血清，采血后应及时分离，避免溶血。

2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。

3. 标本存放：血清，采血后应及时分离避免溶血，ADA在4℃稳定一个星期。

4. 标本运输：冰冻条件下保存运输。

5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血等存运输的标本。

6. 实验材料6.1 试剂：亚太ADA试剂盒（H013 090920 试剂1＋试剂2）6.1.1 试剂组成6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂有效期为12个月。

试剂必需避光保存。

试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示：试剂出现颗粒或浑浊，被视作变质，应停止使用。

6.1.5 注意事项：试剂请勿直接接触皮肤、眼睛，如有接触，请用大量清水清洗。

请勿吞服。

6.2 校准品：使用亚太提供的专用校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪项目测定参数.SOP文件。

腺苷脱氨酶ADA测定1检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2原理ADA腺苷+H2O 肌苷+NH3PNP肌苷+Pi 次黄嘌呤+1-磷酸核糖XOD次黄嘌呤+2 H2O+2O2尿酸+2 H2O2PODH2O2 +4-AAP+EHSPT 4H2O+苯醌类3标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ADA试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1试剂组成试剂1 60 ml,试剂主要成分如下:Tris—HCL缓冲液（PH8.0）50.0mmol/L XO 0.2u/ml 4-AAP 2.0mmol/L POD 0.6u/mlPNP 0.1u/ml NaN3 0.2g/L试剂2 60 ml,试剂主要成分如下:Tris—HCL缓冲液（PH4.0） 50.0mmol/L EHSPT 2.0 mmol/L 腺苷 10.0mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。

试剂1 与试剂2 启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定20天。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.2 校准品：4.2.1采用以检测用水为空白的方式进行校准。

4.2.2校准及校准频次的要求：正常情况下，应每周至少对测定进行一次校准。

当发生下列情况时（如：使用的试剂批号发生改变时、使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行更换后、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围等），应重新对测定进行校准后再对患者的样本进行检测。

腺苷脱氨酶测定检验科于2012年7月开展血液ADA检测，该试验主要用于辅助诊断肝脏疾病，指导临床治疗，取得了良好的效果。

现总结如下：1.概述腺苷脱氨酶是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于巯基酶，每分子至少含2个活性巯基，其活性能对氯汞甲酸完全抑制。

ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。

腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。

测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。

ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。

ADA广泛分布于人体各组织中，T淋巴细胞含量尤其丰富。

血清ADA活性升高见于急性肝炎、酒精性肝纤维化、慢性活动性肝炎、肝硬化、病毒性肝炎和肝细胞瘤病人，结核病渗出液中也可见ADA活性增高。

结合ALT或γ-GT，检测病人血清ADA 活性对肝脏疾病诊断更具有独特价值。

2.检测仪器与原理：检测所用仪器为日立7180全自动生化分析仪，检测原理：ADA 催化腺嘌呤核苷脱氨转变为次黄嘌呤核苷，再经嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）作用生成次黄嘌呤。

次黄嘌呤经次黄嘌呤氧化酶（XOD）作用转变为尿酸和过氧化氢（H2O2）。

H2O2在过氧化物酶（POD）存在的情况下，可与N-乙醛-N-（2-羟基-3-硫丙基）-3-甲基苯胺（EHSPT）和氨基安替比林（4-AA）生成醌染料，醌染料生成速率与ADA含量相关。

3.技术优点：该技术具有测定精密度高，抗干扰能力强，标本中胆红素≤342umol/L，血红蛋白≤200mg/dl，甘油三酯≤8.47mmol/L，抗坏血酸≤4mg/dl 及NH4+对本试剂测定无影响，适合自动化快速测定的特点，为临床常规开展ADA检测应用创造了有利条件。

4.参考范围：4-24U/L，或66-398nkat/L。

腺苷脱氨酶检测的临床意义作者：娄宏哲来源：《中国实用医药》2010年第07期【摘要】目的探讨各种类型标本腺苷脱氨酶增高的临床意义。

方法利用比色速率法检测受检者的不同标本的ADA含量。

结果检测36例肝病患者血清ADA均有不同程度增高,60例结核性胸腔积液、15例脑脊液中ADA明显高于非结核性胸腔积液和脑脊液患者。

结论血清ADA对鉴别诊断肝硬化与结核有很高的特异性;胸腔积液检测ADA可以鉴别诊断结核性胸膜炎;脑脊液检测ADA对结核性脑膜炎的诊断很有帮助意义。

【关键词】腺苷脱氨酶;血清;肝硬化;结核性胸膜炎;胸腔积液;脑脊液;结核性脑膜炎Adenosine deaminase Clinical SignificanceLOU Hong-zhe.Shenyang Chest Hospital Laboratory Medicine,Shenyang 11000,China【Abstract】 Objective To explore the various types of specimens of adenosine deaminase clinical significance of elevated.Methods Using colorimetric detection rate of the different subjects of the ADA content of samples.Results Detected 36 cases of liver disease in patients with elevated ADA in varying degrees,60 cases of tuberculous pleural effusion,15 cases of cerebrospinal fluid ADA was significantly higher than non-tuberculous pleural effusion and cerebrospinal fluid of patientswith.Conclusion The differential diagnosis serum ADA liver cirrhosis and tuberculosis have very high in the opposite sex the; chest MPF and identify diagnostic test ADA pleural tuberculosis meningitis; cerebrospinal fluid tests on ADA tuberculosis meningitis diagnosis is very helpful significance.【Key words】 Adenosine deaminase;SerumLiver cirrhosis;Tuberculous pleurisy; Pleural effusion; Cerebrospinal fluid;Tuberculous meningitis作者单位:110000沈阳市胸科医院检验科ADA是人体重要的核酸分解的代谢酶,体液中ADA活性增高对一些临床疾病的诊断具有重要意义。