腺苷脱氨酶(ADA)测定及意义
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腺苷脱氨酶(ADA)测定及意义
腺苷脱氨酶(ADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类,属于巯基酶,每分子至少含2个活性巯基,其活性能对氯汞甲酸完全抑制。
ADA广泛分布于人体各组织中,以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高,肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。
血液中ADA主要存在于红细胞、粒细胞和淋巴细胞,其活性约为血清的40~70倍,T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活性更高。
1.正常参考值:
速率法:健康成年人:0-19.6 U/L。
比色法:按ADA的习用单位计算,健康成年人为:0-25 U/L。
按国际单位计算,健康成年人为:≤30 U/L。
2.临床意义
血清ADA活性增高见于:
①肝脏疾病:急性黄疸性肝炎,肝细胞出现损伤,在黄疸尚未出现前,可见增高。
因
ADA分子量较ALT小,当肝细胞轻度受损时ADA比ALT先释入血内。
慢性肝炎活动期,慢性迁延性肝炎升高明显;肝硬化、原发性肝癌时,ADA活性也升高。
②肿瘤引起的阻塞性黄疸、前列腺癌和膀胱癌、网状细胞瘤、淋巴瘤、溶血性贫血、
风湿热、伤寒、痛风、重症地中海贫血、骨髓性白血病、结核、自身免疫性疾病、传染性单核细胞增多症和心力衰竭等均可引起此酶升高。
③结核性胸腹水ADA活性显著增高,癌性胸腹水不增高,而血清中ADA活性二者无
明显差别,故测定胸腹水中ADA活性有助于将两者鉴别。
④结核性脑膜炎ADA显著增高,而病毒性脑膜炎则不增高,颅内肿瘤及中枢神经系统
白血病稍增高。
所以脑脊液ADA检测可以作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。
腺苷脱氨酶测定检验科于2012年7月开展血液ADA检测,该试验主要用于辅助诊断肝脏疾病,指导临床治疗,取得了良好的效果。
现总结如下:1.概述腺苷脱氨酶是嘌呤核苷代谢中重要的酶类,属于巯基酶,每分子至少含2个活性巯基,其活性能对氯汞甲酸完全抑制。
ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷,再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤,其代谢缓和终产物为尿酸。
腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。
测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。
ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,可作为肝功能常规检查项目之一,与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。
ADA广泛分布于人体各组织中,T淋巴细胞含量尤其丰富。
血清ADA活性升高见于急性肝炎、酒精性肝纤维化、慢性活动性肝炎、肝硬化、病毒性肝炎和肝细胞瘤病人,结核病渗出液中也可见ADA活性增高。
结合ALT或γ-GT,检测病人血清ADA 活性对肝脏疾病诊断更具有独特价值。
2.检测仪器与原理:检测所用仪器为日立7180全自动生化分析仪,检测原理:ADA 催化腺嘌呤核苷脱氨转变为次黄嘌呤核苷,再经嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)作用生成次黄嘌呤。
次黄嘌呤经次黄嘌呤氧化酶(XOD)作用转变为尿酸和过氧化氢(H2O2)。
H2O2在过氧化物酶(POD)存在的情况下,可与N-乙醛-N-(2-羟基-3-硫丙基)-3-甲基苯胺(EHSPT)和氨基安替比林(4-AA)生成醌染料,醌染料生成速率与ADA含量相关。
3.技术优点:该技术具有测定精密度高,抗干扰能力强,标本中胆红素≤342umol/L,血红蛋白≤200mg/dl,甘油三酯≤8.47mmol/L,抗坏血酸≤4mg/dl 及NH4+对本试剂测定无影响,适合自动化快速测定的特点,为临床常规开展ADA检测应用创造了有利条件。
4.参考范围:4-24U/L,或66-398nkat/L。
腺苷脱氨酶(ADA )测定试剂盒(酶比色法) 使用说明书【产品用途】本试剂用于测定血清、胸腹水、脑脊液中的腺苷脱氨酶活性。
【临床意义】肝脏疾病时,本酶活性往往升高,有助于黄疸的鉴别诊断。
在阻塞性黄疸时,此酶活性升高很少,而在肝实质性损伤时,此酶和转氨酶往往同时升高,特别在慢性活动性肝炎和肝硬变时,转氨酶阳性率较低,增高幅度也不明显,而ADA 活性的阳性率可达90%左右,增高程度也较明显。
同时ADA 检测对白血病、伤寒、出血热也有辅助诊断作用。
测定胸腹水及脑脊液标本中的ADA 活性,有鉴别诊断价值。
结核性胸腹水中ADA 活力显著高于癌症及炎症胸腹水中ADA 活力,对早期诊断结核性胸、腹膜炎有较高的敏感性和一定的特异性。
此外,脑脊液ADA 检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标,结核性脑膜炎ADA 活性升高,病毒性脑膜炎不升高。
【适用范围】液体双试剂,即开即用,自动化分析仪用。
【产品规格】R 1 50ml ×2 R 2 50ml ×1【试剂成份】R 1Tris-HCl pH8.0 50mM4-AA 2mM PNP 0.1kU/mLXOD 0.2kU/mL POD 0.6kU/mL 稳定剂 R 2 Tris-HCl ph4.0 50mM 腺苷 10mMEHSPT 2mM【检测原理】腺苷在腺苷脱氨酶作用下脱氨基形成次黄苷,次黄苷在PNP 作用下生成次黄嘌呤,次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶(XOD )作用下转化为尿酸和过氧化氢(H 2O 2),H 2O 2与EHSPT 和4-氨基安替比林(4-AA )反应生成醌色物,显色强度与ADA 活性成正比。
腺苷−−−→−ADA次黄苷 + NH 3 次黄苷 + Pi −−→−PNP次黄嘌呤 + 核酸-1-磷酸 次黄嘌呤 + 2H 2O + 2O 2−−−→−XOD 尿酸+ 2H 2O 22H 2O 2 + 4-AA + EHSPT −−→−POD醌亚氨染料+ H 20【样本采集】新鲜非溶血血清或血浆,ADA 在4℃时可稳定1周。
腺苷脱氨酶(ADA)参考值:0-15U/L 海丰参考区间4~24U/L介绍:腺苷脱氨酶(ADA)为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶,其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。
ADA广泛存在于各组织中,以盲肠、小肠黏膜、脾脏、胸腺中含量最高,肝脏、肺、肾、心脏、骨骼肌、神经组织等处含量较低,肝脏含量约为小肠的7%~10%。
肝内ADA90%存在与细胞浆水溶性部分,其余在细胞核内。
此外,血细胞(红细胞、粒细胞、淋巴细胞)内ADA活性约为血液中40倍~70倍,因此测定ADA时应避免溶血。
血清中的ADA主要来自肝脏,所以肝细胞损伤或膜通透性增强,均可使血中酶活性增高,故可依据该酶活性增高或降低反映肝细胞损伤和恢复程度。
血清腺苷脱氨酶(ADA)正常值:(1)酶速率法(37℃):健康成年人:7.7-19.3 U/L(2)分光光度法:<25 U/L(3)比色法:健康成年人为:5~25 U/L诊断参考:肝脏疾病:ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,可作为肝功能常规检查项目之一,与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。
一.ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,可作为肝功能常规检查项目之一,与AIT或GGT等组成肝酶谱。
(1)用于判断急性肝损伤及残留病变急性肝炎时ALT明显升高。
ADA仅低度,中度升高。
但重症肝炎发生酶胆分离时,尽管ALT不高,而ADA常明显升高。
而ALT恢复正常,ADA持续升高者,常易复发或易迁延为慢性肝炎。
(2)协助诊断慢性肝病在反映慢性肝损伤时ADA较ALT为优。
慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高,因而可判断慢性肝病的程度。
另外,慢性活动性肝炎活性明显高于慢性迁延性肝炎。
故可用于二者的鉴别诊断。
(3)有助于肝纤维化的诊断ADA活性差异与肝细胞损害关系不大,与肝纤维化程度相关。
肝纤维化程度增加,ADA活性增加。
(4)有助于黄疸的鉴别据文献报道,阻塞性黄疸血清ADA活性明显低于肝细胞性黄疸及肝硬化伴黄疸。
腺苷脱氢酶(ADA)一、定义腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase)是一种参与嘌呤代谢作用的酶。
它是用作拆解食物组织中的核酸中的腺苷。
在人体中,它主要参与了免疫细胞的制造;若该酶突变,会造成T细胞、B细胞、自然杀伤细胞皆无法表现的严重复合型免疫缺乏症(SCID)二、异构体有两种ADA同种型:ADA1和ADA2。
(一)ADA1存在于大多数体细胞中,特别是淋巴细胞和巨噬细胞中,它不仅存在于胞质溶胶和细胞核中,而且还存在于与二肽基肽酶-4(aka,CD26)连接的细胞膜上的外胚层中。
ADA1主要参与细胞内活动,并且以小形式(单体)和大形式(二聚体)存在。
小型到大型的相互转换受肺中“转换因子”的调节。
(二)ADA2首次在人类脾脏中发现。
随后在包括巨噬细胞在内的其他组织中发现它与ADA1共存。
这两种同种型调节腺苷与脱氧腺苷的比例,增强了寄生虫的杀灭。
ADA2主要存在于人血浆和血清中,并且仅作为同型二聚体存在。
三、临床意义(一)、用于肝胆疾病的诊断1.急性肝炎患者ADA与ALT均显著升高。
乙型肝炎患者ALT的升高大于ADA,而非甲非乙肝炎病人ADA的升高大于ALT,非甲非乙肝炎患者ADA活性极度升高者多易转变为迁延性肝炎。
2.慢性肝炎患者ADA活性均升高,慢性活动型肝炎比非活动型升高更甚。
3.肝纤维化、肝硬化及慢性肝炎患者ADA活性显著升高而ALT 不升高,所以同时测定ALT和ADA更具有临床价值。
4.阻塞性黄疸ADA不升高,而肝细胞性黄疸ADA活性升高,因此测定血清ADA有助于黄疸类型的鉴别诊断。
(二)、用于结核性胸膜炎及结核性腹膜炎的诊断胸腹腔积液ADA活性测定,可区别胸腹腔积液的性质。
结核性胸膜炎及结核性腹膜炎病人胸腹腔积液中ADA活性明显高于癌症和心衰性胸腔积液中的ADA活性,且积液中ADA/血清ADA的比值大于1,所以测定胸腹水和血清ADA活性及比值是诊断结核性胸膜炎和结核性腹膜炎的一项可靠有效的指标。
试剂标准操作规程目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理腺苷在腺苷脱氨酶作用下脱氨基形成黄苷。
黄苷在PNP作用下生成次黄嘌呤,次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶(XOD)作用下转化为尿酸和过氧化氢(H2O2)。
H2O2与EHSPT和氨基安替比林(4-AA)反应生成有色染料,产物的颜色与ADA活性成正比。
ADA腺苷+H2O -----------------------黄苷+ 氨PNP黄苷+ 磷酸------------------------次黄嘌呤+ 核糖-1-磷酸XOD次黄嘌呤2H2O2+2O2----------------------尿酸+H2O2POD2H2O2+4-AA+EHSPT -----------------------醌式染料2.标本采集与处理2.1 受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂:血浆使用EDTANa2(1mg/mL)作为抗凝剂。
2.4 标本处理:血标本室温放置30min~45min后离心分离血清或血浆,置洁净试管加盖低温保存。
胸腹腔积液是临床常见疾病,病因诊断明确对治疗起决定作⽤。
诊断胸腹腔积液的性质有多种⽅法,除病史、症状、体征及影像资料外,积液的⽣化检查必不可少,其中腺苷脱氨酶(ADA)是⼀种简单、⽅便、可靠的指标,已被多篇⽂章报道。
⼭东省警官总医院⾃2004~2006年共收治浆膜腔积液(胸膜腔积液)30例,通过这30例的病例分析,再次评价了ADA对明确浆膜腔积液性质的指导作⽤,现报告如下。
1对象与⽅法 1.1研究对象⼭东省警官总医院2004~2006年收治的胸腹腔积液的患者30例,均为羁押⼈员。
结核组:20例,男17例,⼥3例,年龄17~48岁,平均30.3岁。
均经病史、影像检查、胸膜腔积液⽣化检查确诊,且抗结核治疗有效。
⾮结核组:10例,均为男性,年龄17~62岁,平均31岁。
其中肺癌6例,肝硬化1例,风⼼病1例,扩张性⼼肌病1例,淋巴瘤1例,均经影像,病理证实。
1.2⽅法所有患者均化验⾎沉(ESR),抽胸膜腔积液化验糖、氯化物、蛋⽩质、乳酸脱氢酶(LDH)、腺苷脱氨酶(ADA)。
⽐较结果见表1.表1两组胸腹腔积液的腺苷脱氨酶(ADA)、⾎沉(ESR)、糖、氯化物、蛋⽩质、乳酸脱氢酶(LDH)浓度⽐较 1.3统计学⽅法结果以均数±标准差(x±s)表⽰,采⽤成组设计的t检验统计学处理,P<0.05为差异有统计学意义。
2结果 结核组与⾮结核组ADA⽐较:结核组明显升⾼,均值为44.02±18.048;⾮结核组为7.8±5.1,测定结果差异有统计学意义(P<0.05)。
3讨论 腺苷脱氨酶(ADA)是⼀种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶类。
⼴泛存在于⼈体各组织中,以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量,各种细胞内ADA含量各不相同,淋巴细胞ADA活性较红细胞⾼10倍以上。
在结核时,因细胞免疫受刺激,淋巴细胞明显增多,故ADA也明显升⾼。
据报道结核性胸腔积液82例ADA均值为67.54±23.21;癌性胸腔积液71例ADA 均值为12.14±5.78;⽽漏出性胸腔积液11例ADA均值为6.84±3.72.结核性与⾮结核性胸腔积液ADA测定结果差异有统计学意义(P<0.001)[1]。
腺苷脱氨酶测定检验科于2012年7月开展血液ADA检测,该试验主要用于辅助诊断肝脏疾病,指导临床治疗,取得了良好的效果。
现总结如下:1.概述腺苷脱氨酶是嘌呤核苷代谢中重要的酶类,属于巯基酶,每分子至少含2个活性巯基,其活性能对氯汞甲酸完全抑制。
ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷,再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤,其代谢缓和终产物为尿酸。
腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。
测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。
ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,可作为肝功能常规检查项目之一,与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。
ADA广泛分布于人体各组织中,T淋巴细胞含量尤其丰富。
血清ADA活性升高见于急性肝炎、酒精性肝纤维化、慢性活动性肝炎、肝硬化、病毒性肝炎和肝细胞瘤病人,结核病渗出液中也可见ADA活性增高。
结合ALT或γ-GT,检测病人血清ADA 活性对肝脏疾病诊断更具有独特价值。
2.检测仪器与原理:检测所用仪器为日立7180全自动生化分析仪,检测原理:ADA 催化腺嘌呤核苷脱氨转变为次黄嘌呤核苷,再经嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)作用生成次黄嘌呤。
次黄嘌呤经次黄嘌呤氧化酶(XOD)作用转变为尿酸和过氧化氢(H2O2)。
H2O2在过氧化物酶(POD)存在的情况下,可与N-乙醛-N-(2-羟基-3-硫丙基)-3-甲基苯胺(EHSPT)和氨基安替比林(4-AA)生成醌染料,醌染料生成速率与ADA含量相关。
3.技术优点:该技术具有测定精密度高,抗干扰能力强,标本中胆红素≤342umol/L,血红蛋白≤200mg/dl,甘油三酯≤8.47mmol/L,抗坏血酸≤4mg/dl 及NH4+对本试剂测定无影响,适合自动化快速测定的特点,为临床常规开展ADA检测应用创造了有利条件。
4.参考范围:4-24U/L,或66-398nkat/L。
脑脊液腺苷脱氨酶测定在诊断结核性脑膜炎中的价值摘要目的:探讨腺苷脱氨酶(ADA)测定在结核性脑膜炎诊断中的意义。
方法:对2004年4月~2008年4月收治的共90例结核性脑膜炎患者,脑脊液均检测ADA,以ADA>33U/L作为阳性阈值,同时完善其他相关检查。
结果:所有患者中脑脊液ADA>33IU/L达90%(81例)。
结论:脑脊液ADA测定对结核性脑膜炎的诊断有很高的临床价值,在男、女性之间无明显差别,其检测方法简便,诊断的敏感性高于其他实验室及器械检查,值得推广做为常规检测。
关键词结核性脑膜炎脑脊液腺苷脱氨酶资料与方法病例资料:选择2004年4月~2008年4月收治的共90例符合结核性脑膜炎诊断标准[1]患者,脑脊液均检测ADA,以ADA>33U/L作为阳性阈值(我院ADA正常值为4-24IU/L),其中男44例(48.9),女46例(51.1),年龄14~70岁,平均年龄35.6±13.5岁。
患者入院时主要表现为发热、头痛、呕吐、脑膜刺激征等脑膜炎的临床症状,所有患者入院后均行肺部CT、腹部脏器B超、血沉、活动性结核抗体(TB-Ab)、PPD皮试、血清ADA、腰穿等检查,行腰穿检查时均测脑脊液压力,送检脑脊液检测蛋白、糖、氯化物、白细胞计数、TB-DNA、ADA、薄膜试验。
分析方法:分析所有患者未接受抗结核、应用激素治疗前的脑脊液压力、蛋白、糖、氯化物、白细胞计数、ADA,以及患者肺部CT、血沉、活动性结核抗体(TB-Ab)、TB-DNA、血清ADA、薄膜试验。
所有实验室检验及器械检查均在本院进行。
统计学处理:计数资料用百分比表示,应用SPSS 13.0统计软件进行Spearman 相关分析,P<0.05,为差异有显著性意义。
结果所有患者脑脊液检测ADA与其他项目对比,见表1、2。
讨论结核性脑膜炎是常见的中枢神经系统感染性疾病,是肺外结核病中重症结核病,因此早期诊断、早期治疗至关重要。
腺苷脱氨酶(ADA)在结核性浆膜炎的诊断意义发表时间:2014-07-23T14:02:39.890Z 来源:《中外健康文摘》2014年第19期供稿作者:吕毅马力王亚萍朱兴海于江[导读] 腺苷脱氨酶(ADA)是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶,测定血液。
吕毅马力王亚萍朱兴海于江(黑龙江省牡丹江市康安医院 157011)【摘要】目的:探讨腺苷脱氨酶( ADA) 活性在结核性浆膜炎的诊断价值。
方法:应用速率法对173例结核性浆膜炎患者胸水中的腺苷脱氨酶进行了检测,结果:腺苷脱氨酶诊断结核性浆膜腔积液的敏感性100%,特异性97%。
结论:浆膜腔积液ADA可作为鉴别结核性诊断的指标和治疗效果评价提供初步的实验室依据。
【关键词】结核性浆膜炎腺苷脱氨酶活性【中图分类号】R441 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2014)19-0122-02结核性浆膜炎指发生在胸膜腔、心包腔及腹腔的积液。
腺苷脱氨酶(ADA)是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶,测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视[1]。
本研究主要探讨胸腔积液ADA活性在结核性浆膜炎的诊断价值,我科在临床工作中经过长期实践总结:腺苷脱氨酶(ADA)可以帮助提高结核性浆膜炎的诊断准确率。
现将相关资料进行总结报道,以期为临床相关工作提供一定的参考信息。
1 临床资料1.1 一般资料我科于2012年01月至2014年01月期间共收治结核性浆膜炎患者约173人。
其中行胸腔穿刺处置304人次,心包腔穿刺处置36人次,腹腔穿刺处置20人次。
并每次行积液生化(腺苷脱氨酶检查)及血腺苷脱氨酶化验。
1.2 检测方法测定患者胸腔积液ADA活性并进行比较分析,采用上海森雄公司生产的试剂盒,参照试剂盒中提供的方法,用速率法检测ADA活性,正常参考值为(14.4±7.1)U/L,观察组常规抗结核治疗后、抽取胸腔积液再次测定ADA活性并与治疗前进行比较。
检验科新项目简介血清腺苷脱氨酶(ADA)活性测定简介ADA在良恶性难辨的渗出液鉴别诊断上有重要价值。
ADA对诊断结核性渗出液的特异性和敏感性明显优于活检和细菌学检查。
结核性胸腹水ADA活性显著增高,癌性胸腹水不增高,而血清ADA活性二者无显著差别。
此外,脑脊液ADA检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。
结核性脑膜炎显著增高,病毒性脑膜炎血清总胆汁酸(TBA)的测定简介血清TBA测定对肝外胆管阻塞和肝内胆汁淤积的诊断,有较高的灵敏度。
包括胆胱抑素C简介机体内胱抑素C是由肾小球滤出的,肾小球滤出液中胱抑素C被肾小管重新吸收的胱抑素C降解而不再返回到血液循环中。
当滤出液减少时显示肾脏功能减退,相应的血中的某些物质如胱抑素C水平升高,因此可以通过胱抑素C水平判断患者的肾脏功能。
胱抑素C作为肾功评价指标有许多优点。
与肌酐不同,肌肉量、性别、年龄以及种族差异对胱抑素C没有影响。
肾功正常时,血液中胱抑素C水平稳定,而当肾功退化时,血液中胱抑素C水平开始升高,甚至在CFR下降前即可被检测出来。
胱抑素C可替代肌酐和肌酐清除率对确诊或怀疑肾脏疾病患者的肾功能障碍进行筛查和监测。
对于不是很适合测定肌酐清除率的患者来讲,胱抑素C检测特别有用,如肝硬化、异常肥胖、营养不良或肌肉量减少的患者。
胱抑素C可早于其他肾功检测项目反映肾脏疾病,特别抗RF、抗链球菌溶血素“O”定量测定简介1.70-90%的RF患者抗RF阳性,抗RF测定是美国风湿学会1987年类风湿性关节炎诊断标准之一。
2.抗链球菌溶血素“O”为A族溶血性链球菌在生长过程中可见产生的毒素,检测血清中的相应抗体有利于风湿性疾病的诊断。
以上两项目均采用免疫比浊法进行全自动检测,不但灵敏度高,而且有检测速度快。
腺苷脱氨酶ADA测定1检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。
2原理ADA腺苷+H2O 肌苷+NH3PNP肌苷+Pi 次黄嘌呤+1-磷酸核糖XOD次黄嘌呤+2 H2O+2O2尿酸+2 H2O2PODH2O2 +4-AAP+EHSPT 4H2O+苯醌类3标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司ADA试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1试剂组成试剂1 60 ml,试剂主要成分如下:Tris—HCL缓冲液(PH8.0)50.0mmol/L XO 0.2u/ml 4-AAP 2.0mmol/L POD 0.6u/mlPNP 0.1u/ml NaN3 0.2g/L试剂2 60 ml,试剂主要成分如下:Tris—HCL缓冲液(PH4.0) 50.0mmol/L EHSPT 2.0 mmol/L 腺苷 10.0mmol/L4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:2~8℃避光、密封的储存条件下,试剂(盒)自生产之日起有效期为12个月。
试剂1 与试剂2 启用后,在2~10℃避光的条件下可稳定20天。
4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。
4.2 校准品:4.2.1采用以检测用水为空白的方式进行校准。
4.2.2校准及校准频次的要求:正常情况下,应每周至少对测定进行一次校准。
当发生下列情况时(如:使用的试剂批号发生改变时、使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行更换后、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围等),应重新对测定进行校准后再对患者的样本进行检测。
血清腺苷脱氨酶ADA测定1.实验原理应用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶(PNP),黄嘌呤氧化酶(XOD)和过氧化物酶(POD)反应连续监测法。
ADA酶解腺苷(Adenosine)脱氨产生次黄苷(Inosine);再通过偶联PNP的作用,生成次黄嘌呤(Hypoxanthine);后者在XOD氧化作用下生成尿酸和过氧化氢;最后在POD的作用下H2O2再与N-乙基-N-(2-羟基-3-硫丙基)-3-甲基苯胺(EHSPT)、4-氨基安替比林(4-AAP)反应(Trinder氏反应),生成紫红色的有色醌。
通过测量有色醌550nm处吸光度上升的速度来测算ADA的活性。
ADAAdenosine + H2O Inosine + NH3PNPInosine + Pi Hypoxanthine + Ribose 1-phosphateXODHypoxanthine + 2H2O + 2O2 Uric acid + 2H2O2POD2H2O2 + 4-AA P+ EHSPT 4H2O + Quinone dy e2. 标本:2.1 病人准备:新鲜血清,采血后应及时分离,避免溶血。
2.2 类型:血清、肝素或EDTA血浆,应避光保存。
3. 标本存放:血清,采血后应及时分离避免溶血,ADA在4℃稳定一个星期。
4. 标本运输:冰冻条件下保存运输。
5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血等存运输的标本。
6. 实验材料6.1 试剂:亚太ADA试剂盒(H013 090920 试剂1+试剂2)6.1.1 试剂组成6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂有效期为12个月。
试剂必需避光保存。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示:试剂出现颗粒或浑浊,被视作变质,应停止使用。
6.1.5 注意事项:试剂请勿直接接触皮肤、眼睛,如有接触,请用大量清水清洗。
请勿吞服。
6.2 校准品:使用亚太提供的专用校准品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器:奥林巴斯AU640生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪项目测定参数.SOP文件。
腺苷脱氨酶测定临床意义
郭文杰
【期刊名称】《实用医技杂志》
【年(卷),期】2006(13)2
【摘要】腺苷脱氨酶(ADA)为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶,其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。
ADA广泛存在于各组织中,以盲肠、小肠黏膜、脾脏、胸腺中含量最高,肝脏、肺、肾、心脏、骨骼肌、神经组织等处含量较低,肝脏含量约为小肠的7%~10%。
肝内ADA90%存在与细胞浆水溶性部分,其余在细胞核内。
此外,血细胞(红细胞、粒细胞、淋巴细胞)内ADA活性约为血液中40倍~70倍,因此测定ADA时应避免溶血。
【总页数】2页(P321-322)
【作者】郭文杰
【作者单位】运城市中心医院,山西,运城,044000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.6
【相关文献】
1.肝硬化患者血清前清蛋白、总胆汁酸、腺苷脱氨酶、胆碱酯酶测定的临床意义[J], 马丽;涂斌
2.慢性肝病患者血清腺苷脱氨酶测定的临床意义 [J], 石鹏辉;李伟民;李永勤
3.糖尿病并发症患者血清腺苷脱氨酶测定的临床意义 [J], 朱征;杨敏;黄倩
4.乙肝患者血清腺苷脱氨酶活性测定的临床意义 [J], 孙福明
5.脑脊液腺苷脱氨酶测定对结核性脑膜炎诊断的临床意义 [J], 谢东玲
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腺苷脱氨酶(ADA)测定及意义
腺苷脱氨酶(ADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类,属于巯基酶,每分子至少含2个活性巯基,其活性能对氯汞甲酸完全抑制。
ADA广泛分布于人体各组织中,以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高,肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。
血液中ADA主要存在于红细胞、粒细胞和淋巴细胞,其活性约为血清的40~70倍,T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活性更高。
1.正常参考值:
速率法:健康成年人:0-19.6 U/L。
比色法:按ADA的习用单位计算,健康成年人为:0-25 U/L。
按国际单位计算,健康成年人为:≤30 U/L。
2.临床意义
血清ADA活性增高见于:
①肝脏疾病:急性黄疸性肝炎,肝细胞出现损伤,在黄疸尚未出现前,可见增高。
因
ADA分子量较ALT小,当肝细胞轻度受损时ADA比ALT先释入血内。
慢性肝炎活动期,慢性迁延性肝炎升高明显;肝硬化、原发性肝癌时,ADA活性也升高。
②肿瘤引起的阻塞性黄疸、前列腺癌和膀胱癌、网状细胞瘤、淋巴瘤、溶血性贫血、
风湿热、伤寒、痛风、重症地中海贫血、骨髓性白血病、结核、自身免疫性疾病、传染性单核细胞增多症和心力衰竭等均可引起此酶升高。
③结核性胸腹水ADA活性显著增高,癌性胸腹水不增高,而血清中ADA活性二者无
明显差别,故测定胸腹水中ADA活性有助于将两者鉴别。
④结核性脑膜炎ADA显著增高,而病毒性脑膜炎则不增高,颅内肿瘤及中枢神经系统
白血病稍增高。
所以脑脊液ADA检测可以作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。