[种子培养] 玉米浆
37℃,4~8h
种子菌种
玉米浆
37℃,6~8h
[压滤,风干]
丙酮
发酵液
干菌体
[提取] 硼酸缓冲液
pH8.3,4~8h
提取液
HAc 干粗酶 甘氨酸 酶溶液 PEG 无热原酶液
pH4.2~4.4
60℃,30min
不同pH处理
无菌分装 L-天冬酰胺酶冻干制剂
工艺过程:
①菌种培养 大肠杆菌37℃培养24h普通牛肉 培养基;
• ②中和、吸附、洗脱
提取液加氨水中和至pH7.5,在冰箱中静 止沉淀杂蛋白,吸取上层清液,每升提取液加入 10g人造沸石,搅拌吸附40min,静置倾去上层 清液。收集吸附细胞色素 C的人造沸石,用蒸 馏水和氯化钠溶液反复洗涤,然后装柱,用 25 %硫酸氨溶液洗脱,得洗脱液。
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③盐析、浓缩、透析 洗脱液加入固体硫酸镀
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1.组成性质
(1)尿激酶有多种分子量形式,主要有31300、 54700两种。尿中的尿胃蛋白酶原在酸性条件下可 以激活生成尿胃蛋白酶,后者可以把分子量54700 的天然尿激酶降解为分子量为31300尿激酶。
(2)尿激酶是专一性很强的蛋白水解酶,血纤维蛋白 溶 酶原是它唯一的天然蛋白质底物,它作用于精 氨酸-缬氨酸键使得纤溶酶原转为纤溶酶。
牛肝【 生洗 理涤 盐】 水p【H匀 7.8浆P】 【 BS离心上】清液 【65热℃变5性 m【i】 n离心上 】清液 45%、6(5% N4H)2SO4饱和度沉淀【溶解】 溶液【透析】透析液 【分 级盐析】【离心】 【柱层析】流出液【超滤【】冻干】冻干粉
DE-52
二、胃蛋白酶(Pepsin )