人民医院输血科ABO血型鉴定
1、测定原理
根据红细胞上有或无 A 抗原或／和 B 抗原，将血型分为 A 型、B 型、AB 型及O 型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗—A 和抗—B 分型血清来测定红细胞上有无相应的 A 抗原或／和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A
或／和抗—B。
2、标本种类及收集要求
2.1 受检者血清；
2.2 枸缘酸钠抗凝血或未稍取血，受检者血液制成5 ％红细胞盐水悬液使用，制备方法见本节附注。
2.3 标本出现中度溶血者，为不合格标本，不能用于检测。
3、仪器、试剂、校准品、质控品、培养基、以及其他所需物品 抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）：
4、操作步骤
4.1、试管法
4.1.1 取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A十 B，用滴管分别加抗—A、抗—B 和抗—A 十 B 分型血清各 l 滴（约 50 ul）于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。
4.1.2 另取洁净小试管(内径 10mm×60mm)3 支，分别标明
A、B 和 O 细胞。用滴管分别加入受检者血清 l 滴于试管底部，再分别以滴管加入 A、B和O型33％试剂红细胞悬 液l滴，混和。
4.1.3 立即以1000r／min离心 3 min。
4.1.4 将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。
4.1.5 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。 4.1.6 凝集强度判断标准
4+ 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。
3+ 红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。
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. word可编辑 . 疑难血型鉴定流程
结合病情，参考血站实验结果分析评估记录在案
ABO血型鉴定、（卡式法）
正反定相符和空白对照阴性 正反定不相符和空白对照阳性
出据试验报告 重抽两份血样用卡式法和试管法同时复检，另一份送血站
正反定相符和空白对照阴性
正反定不相符或空白对照阳性 出据试验报告
待检红细胞（洗涤三次）分别加抗A﹑抗B和抗AB（3人份O型血血浆）观察结果 正反定试管放置4℃冰箱15分钟观察结果
吸收放散试验检测唾液中血型物质 直系亲属血型遗传规律分析
待检血清或血浆做不规则抗体检查
疑难血型鉴定流程
结合病情，参考血站实验结果分析评估记录在案
ABO血型鉴定、（卡式法）
正反定相符和空白对照阴性 正反定不相符和空白对照阳性
出据试验报告 重抽两份血样用卡式法和试管法同时复检，另一份送血站
正反定相符和空白对照阴性
正反定不相符或空白对照阳性 出据试验报告
待检红细胞（洗涤三次）分别加抗A﹑抗B和抗AB（3人份O型血血浆）观察结果 正反定试管放置4℃冰箱15分钟观察结果
吸收放散试验检测唾液中血型物质 直系亲属血型遗传规律分析
待检血清或血浆做不规则抗体检查
疑难血型的实验室及临床处理
血型定义：血液系统遗传多太性。但是一般来说，血型指红细胞ABO及Rh血型。
目前，血型主要由红细胞凝集来判断。有时由于疾病引起红细胞血型抗原表达发生改变或血清中抗体改变，致使血型判断困难或判断错误。和其他红细胞血型系统相比，ABO系统有其特殊性，即正常人红细胞上缺乏A或B抗原时，其血浆中会出现相应抗体。因此，检查ABO血型，必须做正反定型，如正反定型吻合，则血型检测无误。如正反定型不符合，多系技术错误造成，应症先重复试验，再找其原因。
常见的技术错误包括：
1）标本、试剂、试管或玻片弄错。
2）红细胞悬液太浓或太淡。
3）记录错误。
4）标本混淆。
5）溶血。
6）未加试剂。
7）未按试剂供应商的要求进行操作。
8）离心机有问题。
9）试剂污染。
10）离心时加热。
某些疾病状态可能使红细胞抗原减弱或产生假抗原，如白血病，何杰金病，10号染色体转位，红细胞系统极度增生如海洋性贫血。可能出现如下反应格局：
正定型 反定型
表现型 抗-A 抗-B 抗AB A1细胞 B细胞
A +mf — ++mf — +++
B — ± + ++++ —
红细胞ABO抗原减弱与病程有关，病情缓解时抗原性会增强。
此外，血液中凝集素效价可由于低丙种球蛋白血病而降低，如慢淋、淋巴瘤、免疫缺陷性疾病如先天性低丙种球蛋白血病。老年人及婴儿凝集素效价也低。
肠梗阻、结肠、直肠癌或其他下消化道疾病时肠壁通盘性啬，细菌多糖入血，使A节型患者出现获性B现象。胃或胰腺恶性肿瘤患者血清中可能含有过多的可溶性血型物质，这些物质中和抗血清从而影响正定型结果。
如出现ABO正反定型不符，不能轻易发血。首先应重复试验，如仍不符合，应再抽标本并进一步了解病人情况，如诊断、年龄、妊娠史、输血史、用药史、免疫球蛋白平等。
