疑难血型鉴定及配性[1]

・３５１４　现代医药卫生　２０１４年ｌ１月３０日　第３０卷第２２期　Ｊ　Ｍｏｄ　Ｍｅｄ　Ｈｅａｌｔｈ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　３０，２０１４，Ｖｏ１．３０，Ｎｏ．２２　

血型鉴定及交叉配血困难１例报道　徐晓玲，黄琳珊（自贡市第三人民医院输血科，四川６４３０２０）　・短篇与个案・　

【关键词】ＡＢＯ血型系统；　红细胞；　凝集素类；　血型鉴定及交叉配血；　输血；　病例报告　ｄｏｉ：１０．３９６９６．ｉｓｓｎ．１００９－５５１９．２０１４．２２．０８３　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００９—５５１９（２０１４）２２－３５１４－０１　准确的交叉配血是临床安全输血的重要保障，但是由于疾病　的影响，血清学抗原抗体的复杂性，冷凝集素、自身抗体、同种抗　体的存在，给交叉配血、血型鉴定带来困扰，导致输血困难【】１。自身　免疫性溶血性贫血（ＡＩＨＡ）患者体内可能产生的温抗体、冷抗体、　兼有温冷抗体的情况可影响血型鉴定，交叉配血困难嘲。因此输血　实验室要根据临床资料，补充试验、检测结果并进行正确分析，确　保输血的安全。　１临床资料　１．１病例介绍　患者，女，８５岁，因咳嗽、发热２　ｄ人院，咳少量　白色黏液痰，无痰中带血及咯血，伴头昏、乏力、心累、气促。人院　诊断：老年性肺炎、极重度贫血原因待查（营养不良性贫血？）、冠　状动脉粥样硬化性心脏病。辅助检查：血红蛋白２８　ｄＥ．红细胞计　数０．６０ｘ１０　Ｌ－　，白细胞计数１０．９９ｘｌ０９Ｌ－’，总胆红素１３２．１　ｔｘｍｏｌ／Ｌ，　直接胆红素１３．４　Ｉｘｍｏｌ／Ｌ，间接胆红素１１８．７　Ｉｘｍｏｌ／Ｌ，Ｃ反应蛋白　１１９．１　ｍｇ／Ｌ。尿液分析：红细胞计数升高，隐血阳性。血气分析：　ｐＨ＝７．４９６，乳酸浓度４．２　ｍｍｏｌ／Ｌ，标准碱剩余一４．６　ｍｍｏｌ／Ｌ。头颅及　胸部ＣＴ：轻度脑萎缩，双肺间质性改变。血型：鉴定不出来，Ｒｈ血　型阳性。因血红蛋白水平低，临床申请交叉配血４Ｕ，采集患者当　天的血液进行血型鉴定、交叉配血。２次不同时间的标本检测发现：　血型鉴定正反定型不相符，正定型ＡＢ型，反定型Ｂ型，采用库存　Ｂ型红细胞和０型红细胞进行交叉配血均发现主侧次凝集　（４＋）。进一步试验：３７℃和室温的盐水配血法及凝集胺配血法均　为阳性；直接及间接抗人球蛋白试验阳性；不规则抗体筛查Ｉ、　Ⅱ、Ⅲ均阳性　１．２临床分析及输血处理试验结果：第１次采集的患者样本．　血清经２一ＭＥ　３７℃灭活ＩｇＭ抗体（６０　ｍｉｎ），灭活后血清经卡式法　及试管法检测，用正反定型卡反定型中性胶孔检测加０型红细胞　为阴性（３７℃孵育１５ｍｉｎ为阳性，室温为阴性），而灭活前检测为　阳性，证实血清中自身抗体性质为ＩｇＭ型；将样本红细胞进行　４５℃热放散，检测放散后细胞（洗涤）及放散液，放散后细胞正定　型（卡式法及试管法）与抗Ａ抗体反应减弱．直抗反应减弱（抗　ＩｇＧ），放散后红细胞与放散液３７℃在中性胶孔做自身对照检测阳　性（强于放散后红细胞在卡中对照孔阳性的强度）：放散液与０型　红细胞在中性胶孔反应，３７℃孵育１５　ｍｉｎ时为弱阳性．室温孵育　时为阴性；初步断定患者为ＩｇＭ性质温抗体型ＡＩＨＡ。第２次采　集的患者样本，将样本红细胞６次洗涤后进行５６℃热放散．卡法　及试管法检测放散后细胞（洗涤３次）及放散液，放散后红细胞　与放散液３７℃在孵育做自身间抗试验阳性（４＋）：放散液与Ｏ型　红细胞在３７℃孵育１５　ｍｉｎ做间抗试验阳性（３＋Ｗ）。将样本血清与　３次洗涤Ｏ型直抗阴性健康人红细胞至３７℃孵育３０　ｍｉｎ做吸收　试验，吸收后０型红细胞直抗阳性为３＋；反复吸收３次后（直至　ＩｇＭ温抗体在反定型中阴性）样本血清，与筛检细胞反应，间抗试　验均阴性，证明吸收后血清无ＩｇＧ类不规则抗体。初步断定患者为　ＩｇＭ性质温抗体型ＡＩＨＡ。放散液中含有ＩｇＭ性质自身温抗体，血　清无ＩｇＧ类不规则抗体。　鉴于上述的检测情况，与临床医生沟通，与患者家属特别交　代以下内容：患者存在自身温抗体，应尽量避免输血；输血可能诱　发严重的输血反应，输血的风险大；需请示医院领导，全市专家会　诊指导输血。患者知情后，签署了输血同意书，在专家的指导下，　同时考虑患者在半年前曾住院，输入２　Ｕ的Ｂ型洗涤红细胞，借助　此次的反定型结果，给予患者Ｂ型悬浮红细胞２Ｕ，进行缓慢输注，　医生及护士床边观察输血，输血过程及输血后无不良反应。　２讨　论　ＡＩＨＡ最主要的特点是含有识别并能破坏自身红细胞的抗　体，甚至合并有同种抗体。根据已有的公开资料表明，ＡＩＨＡ的发　病率在１／２５０，成人多于小孩，女性多于男性，且多数为中老人，　７Ｏ％的人发病年龄在４０岁以上１３１。ＡＩＨＡ根据是否存在基础疾病或　相关疾病分为原发性和继发性；根据抗体的性质分为温抗体型、　冷抗体型、温冷混合抗体型和药物诱导型。其中．温冷混合抗体型　ＡＩＨＡ的输血前实验检测是难中之难。主要体现在：患者ＡＢＯ正　反定型不一致、Ｒｈ血型抗原分型全阳性；抗体筛查和抗体鉴定全　凝集：交叉配血实验主、次侧凝集等。因此。对于ｆ临床输血工作者　而言。要掌握这类ＡＩＨＡ的实验室诊断要点和输血前实验的处　理，显得尤为重要朔。　ＡＩＨＡ患者的输血问题较为复杂并有输血的免疫学风险．血　型定型和抗体鉴定是其中比较棘手的问题［５１。本院遇到的此患者　的情况．经过试验室反复试验结合临床表现、血气分析及其他的　检测结果，充分考虑为温抗体型ＡＩＨＡ，在保障紧急抢救的条件　下，给患者输注了悬浮红细胞。患者的临床症状得到了改善，输血　后２４ｈ内血红蛋白升高了约２０　ｇ／Ｌ，但随着时间的延长血红蛋白　又在下降，遗憾的是患者自动出院不能进行进一步追踪。　参考文献　【１］李琴春，李琼秀．不规则抗体与临床输血［Ｊ］．世界新医学信息　文摘．２０１４（６）：１８６—１８７．　【２］马晓璐，魏莉．１名自身免疫性溶血性贫血患者的输血及护　理『Ｊ１．中国输血杂志，２０１３，２６（３）：１８７．１８８．　ｆ３１　Ｐｅｔｚ　Ｄ，Ｇａｒｒａｔｔｖ　Ｇ．Ｉｍｍｕｎｅ　ｈｅｍｏｌｖｔｉｃ　ａｎｅｍｉｓａ［Ｍ］．２ｎｄ，Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：　ｈｕｒｅｈｉｌｌ　Ｌｉｖｉｎｇｓｔｉｎｅ，２００４：６１—６３．　『４］骆宏，张润青，罗广平，等．混合抗体型自身免疫性溶血性贫　血的血型定型和抗体鉴定ｆＪ］．中山大学学报：医学科学版，　２０１３，３４（３）：４３４－４３７．　【５】兰炯采．加强对自身免疫性溶血性贫血输血前试验的研究［ＪＪ．　中国输血杂志，２０１２，２５（４）：２９５—２９６．　（收稿日期：２０１４—０５—１８修回Ｅｔ期：２０１４—０７—２０）　作者简介：徐晓玲（１９６６一），女，四川富顺人，副主任技师，主要从事检验医学、输血工作；Ｅ—ｍａｉｌ：Ｘｘｌｌ１０２００７＠ａｌｉｙｕｎ．ｃｏｒｎ。

江西医学检验2007年12月第25卷第6期。655。󰀀个案报道󰀀多发性骨髓瘤高效价冷凝集血型鉴定及配血困难1例王松云中图分类号R457.1'3文献标识码B文章编号1008-0023(2007)06-0655-01血型鉴定及配血困难的原因很多，某些结缔组织病、自L,IgA1.52叭;经骨髓涂片检查诊断为多发性骨髓瘤。于4月身免疫性疾病及肿瘤患者的自身抗体与红细胞抗原结合，造24日申请输血，血型鉴定正定为AB型，反定为0型，正反定成血型鉴定、交叉配血的困难，现将1例报告如下。型不符。进一步血清学检查证实为B型，威(D)阳性，患者血1临床资料清中存在高效价冷抗体，无既往输血史。患者，女，46岁，因头晕，乏力10余天，紫斑2天，于2血清学检查(试剂均由上海血液中心生产)2007年4月22日入院。血常规显示:WBC7.8x109/L,RBC2.1患者的ABO血型鉴定见表to2,67x10`2/L,Hb64妙,PLT93xlO9/L,IgG50.2g/L,IgM9.85岁2.2患者血清与5名B型供血者标本在不同温度下交叉表1患者ABO血型鉴定结果患者BBC与标准试剂反应抗一A抗一B患者血清与试剂RBC反应温度(℃)抗一ABAcBeOc自体血清+自体RBC自身对照3+2+3+2+土3+2+十-+十++4傀j内、，、++++422飞~+十++4内、~凡、伪、3+2+士4℃室温37℃45℃配血见表20表2患者与5名B型供血者标本在不同温度下的配血结果2.5自身冷抗体效价测定冷抗体效价为10240讨论室温45℃供血者主侧次侧主侧次侧B,4+3+一一+++++22八j内、今jBZ2+B33+B,4+。B,3+对照实验4+注:对照试验主侧用患者血清和相对应A型试剂红细胞，次侧用抗-B血清和患者红细胞。2.3吸收放散试验m2.3.1患者红细胞与抗一B血清吸收后的血清抗体效价较吸收前显著降低，效价为4;与抗一血清吸收前后血清抗体效价无变化，效价为128，显示患者红细胞上有B抗原。2.3.2分别在患者血清中加人试剂A细胞和B细胞，置4℃冰箱12小时，分离上清液。A细胞管上清液效价为0，与A型细胞不凝集，B细胞管上清液与B型细胞凝集仍为3+,表明患者血清中存在抗一Ao2.3.3经患者血清吸收后的A细胞、B细胞用生理盐水洗涤5次后加等量盐水混匀后置56℃水浴中放散10分钟，立即分离上清液，分别用分离液与相应A细胞和B细胞作用，A细胞管凝集2+,B细胞管无凝集，表明放散出抗一A，无抗-Ba2.4抗体鉴定患者血清与5份0型红细胞和自身红细胞反应，在4℃和室温30分钟均凝集4+;置37cC30分钟仍出现凝集士，而置45℃未发现凝集。间抗试验为阴性，表明有非特异性冷抗体存在。作者单位:34100()江西省赣州市中心血站3.1本例患者患多发性骨髓瘤，体内产生了高效价病理性自身冷凝集素，给血型鉴定及交叉配血造成困难。经加温正反定型和吸收放散试验，证明患者红细胞上有B抗原，血清中存在抗一A抗体，ABO定型确认为B型。3.2患者血清与自身红细胞、B型及0型红细胞在室温均发生较强凝集，经递增式加温到4590凝集全部消失，抗体鉴定表明为非特异性冷抗体。3.3患者血标本与5名B型供血者交叉配血在室温下主、次侧均发生凝集，增温至450C凝集完全消失。对照试验均呈凝集反应，表明不会因温度变化而改变抗原抗体的特异性结合。避免了配血假阴性结果的发生，患者输注“B'>型红细胞2U，无不良反应。3.4冷凝集素几乎均为Igm，当高效价的冷凝集素与同种异型抗体共同存在时，极易遮盖后者，给临床血型鉴定和交叉配血带来困难，可通过37℃盐水洗涤法或硫醇试剂处理法消除，使红细胞抗原及结合在红细胞上的IgG和补体均不受影响。3.5当临床上遇到高效价冷凝集素致血型鉴定和交叉配血困难时，应通过临床病历分析，红细胞ABO血型鉴定、复查血型与家系调查、吸收放散试验、血清抗体筛选、抗体鉴定、冷凝集素效价等试验结果进行综合判断。对于冷凝集素综合征患者应尽量避免输血，必须输血时，可输同型洗涤红细胞，缓慢输注。参考文献[1]李勇主编人类红细胞血型学实用理论与实验技术[M].中国科学技术出版社，1999,282-283.

国际检验医学杂志２００８年１月第２９卷第１期Ｉｎｔ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｍｅｄ，Ｊａｎｕａｒｙ　２００８，Ｖｏ１．２９，Ｎｏ，１　高效价抗一Ｉ影响血型鉴定及配血１例分析　林清浩谢敬文　阮丽芬　袁竹青　麦艳梅谢进进　王超　【关键词】血型鉴定和交叉配血；　血清学试验　中图分类号：Ｒ４５７．１１　文献标识码：Ｂ　文章编号：１６７３—４１３０（２００８）０１—９５—０２　临床资料　患者男，８４岁，因下肢浮肿３周伴呕血１次人院。Ｂ超检　查结果为（１）肝硬化、脾大。（２）门静脉增宽。（３）腹水。（４）胆　囊壁增厚。临床诊断为肝硬化；失代偿期并腹水；上消化道出　血。血型正定型“ＡＢ”，需输血治疗。配血前反定型与之不相　符，Ａ、Ｂ、０试剂红细胞均凝集，作进一步处理。　血型血清学检测　１．试剂与材料：抗一Ａ、抗一Ｂ血清，批号２００５１２１６；抗一ＡＢ血　清，批号：２００５１２１６；ＡＢＯ标准红细胞，批号：２００６１１０８；谱细胞　（１０人份），批号：２００６０９１８；多特异性抗人球蛋白，批号　２００５１２１６；抗一ＩｇＧ、一ＩｇＭ球蛋白，批号：２００５０３１６。所有试剂均　由上海血液中心提供，并都在有效期内。多人份０型脐血由　番禺区人民医院产科提供。　２．血型鉴定：正定型为ＡＢ型，反定型与正定型不符，患者　血清与Ａ、Ｂ、０试剂红细胞及自身红细胞均出现凝集，３７。Ｃ水　浴１　ｍｉｎ观察，０细胞管及自身管凝集消失；用３７℃生理盐水　洗涤患者红细胞３次再检测正定型为０型，患者血清经自身　・　９５　・　・短篇与个案・　

红细胞（用３７。Ｃ生理盐水洗３次）吸收５次后作反定型为０　型，与正定型相符合。具体反应格局见表１。　３．抗体鉴定及效价测定：患者血清用谱细胞进行鉴定，发　现在室温和４。Ｃ时均凝集全部细胞，真接抗球蛋白试验多抗呈　阳性，抗一ＩｇＧ呈阴性，间接抗球蛋白试验均为阴性，患者血清　与多人份混合０型脐血细胞在室温４。Ｃ和３７。Ｃ条件下均不　凝集，抗体鉴定反应格局见表２；用混合（）型成人红细胞（１０　人份）测定患者血清抗一Ｉ效价，室温为１：１２８，４℃为　１：１６　３８４　表１患者ＡＢ０血型定型反应格局　

ABO疑难血型三步分析法

在血型分类中没有疑难血型,迄今为止在文献中也查不到“疑难血型”的定义，因为“疑难血型”是1种血型难以检定或判定的“现象”,而不是1种型别。检定1份标本是否属“疑难血型”，除了标本本身的特殊性外，还与实验室的设备、技术人员的水平、经验等多种因素有关，例如1份ABO亚型标本,在基层医院血库可能因为正定型与反定型不一致而分析不出原因被认为是“疑难血型”,但在血液中心血型参比实验室该问题可能就易于迎刃而解。在检定血型时,标本如果受多种因素干扰使结果难以判定,便呈现“疑难血型”现象。

一、干扰ABO血型正确判定的因素

（一）生理性因素

1.年龄老年人(ABO抗原或ABO抗体减弱),6个月前的婴儿(ABO抗原或ABO抗体不成熟),可能导致ABO血型误定。

2.ABO亚型包括A(B)型、B(A)型,ABO抗原减弱导致细胞定型(正定型)受干扰,或血清中出现不规则抗体干扰血清定型(反定型)。

3.冷凝集素有些健康人血清中含有冷凝集素,且在<4℃才有活性,不干扰ABO血型检定,如果冷凝集素效价升高,或在室温以上反应,致敏自身红细胞可能干扰ABO正定型,存在于血清可能干扰ABO反定型。

4.“先天性”无ABO抗体近年有“先天性”无ABO抗体的个案报告,原因有待研究。

5.双精子授精红细胞呈嵌合体。

6.个体特异性个别人血清中ABO可溶性血型物质过高,ABO正定型红细胞凝集减弱。

（二）实验技术原因

1.标本混淆

如采错被检者,红细胞和血清非同一人,记录结果与标本编号不对应。

2.静脉输液处采样

ABO抗体被输液稀释,干扰ABO反定型。

3.采样不规范

用凝血块洗下红细胞检定血型，其中混有凝集程度不一的红细胞；用血浆做ABO反定型,操作过程中纤维蛋白析出凝集试剂红细胞。

4.试剂质量问题或漏加试剂

定型试剂过期失效，未达标准，被污染。操作中未遵循“先加血清后加细胞”的原则，大批量样本试验时漏加试剂血清或试剂红细胞。