高三生物二轮复习 专题二细胞工程(克隆技术) 中图版选修3

高三生物二轮复习专题二细胞工程（克隆技术）中图版选修31．(2011·潍坊模拟)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是 ( ) A．培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体B．培养中的人B细胞能够无限地增殖C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞解析：动物细胞培养目前主要的应用是制备单克隆抗体，该抗体是由杂交瘤细胞产生，T细胞不产生；人的B细胞不能无限增殖；人的成熟的红细胞无细胞核，失去了细胞的完整性，不能进行培养；将所选用的动物组织取出后，首先用胰蛋白酶等处理，使组织分散成单个细胞，然后配制成一定浓度的细胞悬浮液，再将该悬浮液放入培养瓶中，在培养箱中培养。

细胞在培养瓶中贴壁生长，随着细胞越来越多，当贴壁生长的细胞分裂生长到表面相互接触时就停止分裂增殖，这种现象叫做接触抑制。

所以，需要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，进行传代培养。

答案：D2．(2010·浙江理综，4)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养解析：由于接触抑制，动物细胞培养时只能形成单层细胞，A项错误；克隆培养法在培养时，由于所有子代细胞来自于一个亲代细胞，所以基因型一般都相同，B项错误；二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的，只有少数细胞遗传物质发生改变，才能无限增殖，C项错误；恶性细胞系的细胞具有癌变的特点，可进行传代培养，D项正确。

答案：D3．(2011·江苏模拟) 下列不属于动物细胞工程应用的是( )A．大规模生产干扰素，用于抵抗病毒引起的感染B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞C．大规模生产食品添加剂、香料等D．利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖解析：大规模生产干扰素，用取自烧伤病人皮肤的健康细胞进行培养都属于动物细胞培养技术的应用；大规模生产食品添加剂、香料等属于植物组织培养技术的应用，不属于动物细胞工程的应用。

答案：C4．(2009·浙江理综，1)用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 ( ) A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性解析：用动、植物成体的体细胞进行离体培养都必须在无菌条件下进行。

用植物成体的体细胞进行离体培养获得新个体体现的是细胞的全能性，而动物体细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物。

答案：C5．(2011·威海模拟)对细胞全能性的表达正确的是( )A．离体的植物细胞均能够表现出全能性B．动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现C．花粉可培育成单倍体植株是细胞全能性的表现D．单克隆抗体的制备依据的原理是细胞的全能性解析：离体的植物细胞要表现出全能性，需要提供合适的营养物质；动物细胞融合的结果是形成一个杂种细胞，并未形成一新个体；单克隆抗体的制备利用的是细胞膜的流动性和细胞增殖的原理。

答案：C6．利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。

下列相关叙述正确的是 ( )A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B．体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C．将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法不一定能诊断出SARS病毒感染者解析：单克隆抗体是由免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞相融合后由杂交瘤细胞产生的，其制备过程是先用SARS病毒核衣壳蛋白刺激机体产生相应的B淋巴细胞，将B淋巴细胞(不能无限增殖但能产生专一性的抗体)与骨髓瘤细胞(能无限增殖但不能产生专一性的抗体)相融合，经过筛选，去掉相同细胞的融合体，再经抗原—抗体检测，得到既能无限增殖又能产生专一性抗体的杂交瘤细胞，经体内培养或体外培养就可获得相应的单克隆抗体。

通过单克隆抗体与病毒特异性结合可诊断是否被病毒感染。

答案：C7．下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是 ( ) A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同解析：此题考查学生对植物组织培养技术的掌握。

培养基中加入蔗糖的目的一方面可以提供营养，另一方面可以调节渗透压；在整个组织培养过程中影响再分化的关键是生长素和细胞分裂素的使用比例和使用顺序；组织培养过程中的第一个关键环节是脱分化，从而形成愈伤组织；组织培养的对象既可以是体细胞也可以是生殖细胞，因此获得的愈伤组织的基因组成不一定相同。

答案：D8．要想通过体细胞杂交技术获得杂种植物，下列各套步骤中正确的是 ( ) A.分离原生质体→诱导原生质体融合→再生细胞壁→组织培养→杂种植株B.分离原生质体→原生质体自然融合→再生细胞壁→组织培养→杂种植株C.病毒诱导原生质体融合组织培养→组织培养→杂种植株D.脱分离原生质体→脱分化→再分化→杂种植株解析：体细胞杂交技术首先要获得不同生物的体细胞，用纤维素酶、果胶酶除去细胞壁得到原生质体，再通过物理或化学方法诱导原生质体融合，再生细胞壁成为杂种细胞，再经组织培养形成杂种植株。

答案：A9．(2011·青岛模拟)现在有一个婴儿在出生后医院为他保留了脐带血，在以后他生长发育过程中如果出现了某种难治疗的疾病，就可以通过血液中的干细胞来为其治病，关于这个实例说法正确的是 ( ) A．用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病，需要激发细胞的所有全能性B．用脐带血中的干细胞能够治疗这个孩子所有的疾病C．如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用到细胞培养技术D．如果要移植用他的干细胞培育出的器官，应该要长期给他使用免疫抑制药物解析：用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病，不需要激发细胞的所有全能性。

用脐带血中的干细胞只能培育出人体的许多器官，用来移植，但不是所有疾病都能治疗，如：流行性疾病。

如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用细胞培养技术，然后发育成器官，由于是自身的细胞培育成的，没有免疫排斥反应，所以不用长期给他使用免疫抑制药物。

答案：C10．(2010·广东理综，24)新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。

下列技术(或仪器)与应用匹配正确的是(双选) ( ) A．PCR技术——扩增蛋白质B．杂交瘤技术——制备单克隆抗体C．光学显微镜——观察叶绿体的基粒D．花粉离体培养——培育单倍体植物解析：本题主要考查技术(或仪器)与应用的匹配情况。

A项，PCR技术的应用是扩增基因，而不是蛋白质；B项，杂交瘤技术的应用是制备单克隆抗体，杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体；C项，叶绿体属于显微结构，可用光学显微镜观察，叶绿体中的基粒属于亚显微结构，则需电子显微镜才能观察；D项，培育单倍体植物主要包括花粉离体培养和用秋水仙素处理两大步骤。

答案：BD11．(2008·宁夏高考)回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的______。

此时，瓶壁上形成的细胞层数是________。

要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是________。

(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现__________________的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞，该种细胞的黏着性________，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量________。

(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是____________________________________。

(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。

(5)在细胞培养过程中，通常在________条件下保存细胞。

解析：在动物细胞培养过程中，细胞会表现出接触抑制现象，此时是单层细胞。

用胰蛋白酶可以使贴壁细胞从瓶壁上分离开来。

随着细胞传代培养代数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象，但极少数细胞可以连续增殖，有些细胞会因遗传物质改变而变成不死性细胞。

由于活细胞的膜具选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，而死细胞的细胞膜丧失选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色。

由于细胞分裂中期染色体形态固定、数目清晰，因此最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜观察染色体数目。

由于在冷冻或超低温、液氮下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低，通常在此条件下保存细胞。

答案：(1)相互接触接触抑制单层(或一层) 胰蛋白酶(2)衰老甚至死亡不死性降低减少(3)由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色)(4)中(5)冷冻(或超低温、液氮)12．(2010·黄山模拟)自然界中有一种含有叶绿体的原生动物——眼虫，这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活。

某同学提出问题：“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？”他尝试设计出下列具体的实验方案。

结合实验方案回答：实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。

实验步骤如下：(1)①中选的植物材料细胞中，必须有的细胞器是________。

(2)③过程所用的酶是_________________________________________________。

(3)④过程除了用电激之外，还可以用________、________等作为诱导因素。

(4)⑤过程动物细胞体外培养需要满足的条件是________、________、________、________。

(5)在整个实验过程中，要强调所用的器械的灭菌和无菌操作，原因是各种杂菌可以在培养基上面迅速生长，培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和________争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量________导致培养物迅速死亡。

(6)在⑤⑥过程中，通常要添加血清，原因是________________________。

解析：(1)根据题意知，所选植物材料中必须含有叶绿体。

(2)图中③是去除植物细胞细胞壁的过程，所运用的酶是纤维素酶和果胶酶。