显微分析结构思考题

合金钢、铸铁、有色金属的显微组织观察与分析实验目的实验说明实验内容及方法指导实验报告要求思考题一：实验目的(1)观察各种常用合金钢、有色金属和铸铁的显微组织.（2)分析这些金属材料的组织和性能的关系及应用。

二:实验说明1．几种常用合金钢的显微组织一般合金结构钢、低合金工具钢都是低合金钢。

即合金元素总量小于5％的钢,由于加入了合金元素，使相图发生了一些变动，但其平衡状态的显微组织与碳钢没有质的区别。

热处理后的显微组织仍然可借助C曲线来分析，除了Co元素之外，合金元素都使C曲线右移，所以低合金钢用较低的冷却速度即可获得马氏体组织。

例如，除作滚动轴承外，还广泛用作切削工具、冷冲模具、冷轧辊及柴油机喷嘴的GCrl5钢，经过球化退火、840～C油淬和低温回火，得到的组织为隐针或细针回火马氏体和细颗粒状均匀分布的碳化物以及少量残余奥氏体.高速钢是一种常用的高合金工具钢.如W18Cr4V高速钢，因为含有大量合金元素，使Fe-Fe3C相图中点E 大大向左移动,所以它虽然只含有w（C）=0．7%~0．8％碳，但已经含有莱氏体组织。

在高速钢的铸态组织中可看到鱼骨状共晶碳化物，如图1所示。

这些粗大的碳化物，不能用热处理方法去除，只能用锻造的方法将其打碎.锻造退火后高速钢的显微组织是由索氏体和分布均匀的碳化物组成（图2)。

大颗粒碳化物是打碎了的共晶碳化物。

高速钢淬火加热时，有一部分碳化物未溶解,淬火后得到的组织是马氏体、碳化物和残余奥氏体(图3）。

碳化物呈颗粒状,马氏体和残余奥氏体都是过饱和的固溶体,腐蚀后都呈白色，无法分辨，但可看到明显的奥氏体晶界。

为了消除残余奥氏体，需要进行三次回火，回火后的显微组织为暗灰色回火马氏体、白亮小颗粒状碳化物和少量残余奥氏体，如图4所示。

图1 W18Cr4V钢铸态组织图2 W18Cr4V钢锻后退火组织图3 W18Cr4V钢的淬火组织图4 W18CNV钢的淬火回火组织2．铸铁的显微组织依铸铁在结晶过程中石墨化程度不同，可分为白口铸铁、灰口铸铁、麻口铸铁.白口铸铁具有莱氏体组织而没有石墨，碳几乎全部以碳化物形式(Fe3C)存在；灰口铸铁没有莱氏体，而有石墨,即碳部分或全部以自由碳、石墨的形式存在。

专题04 显微镜的结构和使用考向1 显微镜的结构和功能【母题来源】2021年中考黑龙江卷【母题题文】用显微镜观察洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片时，如果物像不清晰应调节（）A．转换器B．遮光器C．粗准焦螺旋D．细准焦螺旋【答案】D【试题解析】A．转动转换器能调换物镜，A不符合题意。

B．遮光器上的每个光圈都可以对正通光孔，通过大小不等的光圈来调节光线的强弱，B不符合题意。

C．粗准焦螺旋能粗略地调节物像的清晰程度，C不符合题意。

D．细准焦螺旋能精细地调节物像的清晰程度，D符合题意。

故选D。

【命题意图】本题的重点是了解显微镜的结构及其功能。

【命题方向】本考点为必考点，多以选择题的形式考查显微镜某一结构的功能，建议掌握。

【得分要点】1．结构2．功能①目镜和物镜：放大物像；②反光镜和遮光器：调节光线强弱；③粗、细准焦螺旋：调节镜筒升降；④载物台：放置玻片标本；⑤压片夹：固定玻片标本；⑥转换器：更换物镜。

考向2 练习使用显微镜【母题来源】2021年中考陕西卷【母题题文】小秦惯用右手写字，下面是其利用显微镜观察细胞的几个环节，其中符合要求的是（）A．取镜B．对光C．观察D．辨认细胞核【答案】C【试题解析】A．取显微镜时，应该右手握住镜臂，左手托住镜座，A错误。

B．对光步骤：首先转动转换器，使低倍物镜（10×）对准通光孔，而不是图中的高倍物镜（40×），B错误。

C．小秦惯用右手写字，故要用左眼观察显微镜视野，右眼睁开，方便绘图，C正确。

D．辨认细胞的细胞核时，为了方面观察，应对细胞染色并把被观察的细胞移动到视野中央，D错误。

故选C。

【命题意图】正确识记并理解显微镜的结构、功能和使用方法是解题的关键。

【命题方向】操作顺序、符合要求、使用显微镜的步骤。

【得分要点】光学显微镜的使用步骤：1．取镜和安放。

①右手握住镜臂，左手托住镜座。

②②把显微镜放在实验台上，略偏左，安装好目镜和物镜。

2．对光。

(三转动)①转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。

备战中考生物专项练习题（全国通用）显微镜的结构与使用1.用显微镜进行观察时，所用的材料应该是( )A.薄而透明B.厚实的C.干燥的D.完整的2.显微镜属于何种探究器具( )A.观察器具B.计量器具C.加热器具D.解剖器具3.在载玻片上面画一个“↗”符号，用低倍镜观察时，在视野内所见的图像是( )A、↘B、↖C、↙D、→4.使用显微镜观察植物细胞的临时装片时，若是在光线很强的条件下，为了控制进光量，应选用的光圈和反光镜依次是( )A、较大的光圈、平面镜B、较大的光圈、凹面镜C、较小的光圈、平面镜D、较小的光圈、凹面镜5.用显微镜观察洋葱表皮细胞，能在视野中看到细胞数目最少和视野最亮的镜头组合是( )①目镜15× 物镜10× ②目镜10× 物镜10× ③目镜15× 物镜25× ④目镜10×物镜25×A.①②B.④①C.③②D.③④1．（2021·湛江）某同学使用显微镜对光时，无论怎么调节遮光器和反光镜，视野始终漆黑一片，其原因可能是（）A．反光镜上有个污点B．目镜的放大倍数太大C．镜筒离载物台太远D．物镜没有对准通光孔2．（2021·重庆）小邱用同一台显微镜观察同一标本三次，每次仅调节物镜和准焦螺旋，结果如图所示图像。

以下说法正确的是（）A．视野最暗的是②B．正确观察顺序是③②①C．观察图③时不能调节粗准焦螺旋D．要使视野亮度增加，可将显微镜移至明亮处3．（2021·重庆）用显微镜观察细胞时，在视野中出现了一个污点，初步断定这个污点可能在目镜上，也可能在玻片上。

判断其位置的最简单操作是（）A．更换目镜B．转动目镜C．转换物镜D．调节反光镜4．（2021·眉山）在使用显微镜进行观察时，如果将物镜由低倍转换为高倍，则视野中的细胞数量变化和视野亮度变化分别是（）A．细胞数量增加、视野变亮B．细胞数量减少、视野变暗C．细胞数量增加、视野变暗D．细胞数量减少、视野变亮5．（2021·云南）观察洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片时，若视野中有许多气泡，原因最可能是制片过程中A．没有擦拭载玻片和盖玻片B．滴水过多C．盖盖玻片时操作不当D．染色时间过短1．用显微镜观察细胞时，以下四种镜头组合中放大倍数最大的是（）A．目镜10×，物镜10×B．目镜5×，物镜4×C．目镜10×，物镜40×D．目镜5×，物镜10×2．探索微观世界离不开显微镜。

【思考题】1、讨论并比较电子显微镜与光学显微镜的优点与缺点。

对下列目标你用什么方法观察为最佳：（1）一个活的皮肤细胞；（2）一个酵母线粒体；（3）一个细菌；（4）一条微管。

答：当要观察任何结构细节，如微管、线粒体和细菌时，需要电子显微镜并加以分析，不过也可以用特殊染料先给它们染色，再用光学显微镜确定它们在胞内的位置。

2、辨认下图细胞结构和细胞器，判断此图中标尺的长度：10μm，相当于细胞核的宽度。

3、磷脂分子为什么要形成脂双层？答：①同时具有亲水和疏水两种性质的分子称为两亲性。

②同时具有亲水和疏水两种性质在驱使脂质分子在水相环境中装配成双层膜这一过程中起着决定性作用。

③像磷脂这样的两亲分子，受制于两种对抗力量：亲水头部吸引水；疏水尾部避开水分子，且企图与其他疏水分子聚集。

脂双层的形成完美解决了这种对抗，满足所有组分的要求且在能量方面最有利的一种排列。

在脂双层的两个表面亲水头部都面向水；而疏水尾部像三明治一样都在夹层内彼此紧挨着以避开水。

④驱使两亲分子形成双层的同一个力量使脂双层能够自我愈合。

4、为什么大多数膜蛋白的多肽链主要以α螺旋的方式穿过脂双层？答：在α螺旋中，多肽主链的极性肽键都能被疏水的氨基酸侧链挡住而完全避开脂双层的疏水环境，肽键间的内在氢键稳定了α螺旋的结构。

5、以下三种由单字母氨基酸符号表示的20个氨基酸序列中，那个序列最有可能形成一个跨膜蛋白的跨膜区（α螺旋）？解释你的答案。

A.I T L I Y E G N M S S V T Q T I L L I SB.L L L I F F G V M A L V I V V I L L I AC.L L K K F F R D M A A V H E T I L E E S答：序列B最容易形成跨膜螺旋。

它主要由疏水氨基酸组成，因此能够稳定地整合进脂双层。

相反，序列A含有许多极性氨基酸（S、T、N、Q），序列C含有许多带电荷的氨基酸（K、R、H、E、D），它们在疏水的脂双层的内部在能量方面是不利的。

显微形态学试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 显微镜的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。

（）A. 正确B. 错误2. 细胞的显微结构主要包括细胞膜、细胞质和细胞核。

（）A. 正确B. 错误3. 细胞膜的主要功能是控制物质的进出。

（）A. 正确B. 错误4. 细胞质中的线粒体是细胞的能量工厂。

（）A. 正确B. 错误5. 细胞核内含有遗传物质DNA。

（）A. 正确B. 错误6. 细胞分裂是细胞生命周期中的一个重要过程。

（）A. 正确B. 错误7. 细胞凋亡是一种程序性细胞死亡。

（）A. 正确B. 错误8. 细胞骨架是细胞内的一种支撑结构。

（）A. 正确B. 错误9. 细胞周期包括间期和分裂期。

（）A. 正确B. 错误10. 细胞分化是指细胞在发育过程中形态和功能逐渐变得不同的一个过程。

（）A. 正确B. 错误二、填空题（每题2分，共20分）1. 显微镜的发明者是__________。

2. 细胞膜的流动性主要依赖于其组成成分中的__________。

3. 细胞核的主要功能是__________。

4. 细胞质中的内质网主要负责__________。

5. 细胞分裂过程中，染色体的变化包括__________和__________。

6. 细胞凋亡与__________有关。

7. 细胞骨架的主要组成成分是__________。

8. 细胞周期的间期包括__________、__________和__________。

9. 细胞分化的结果是形成__________。

10. 细胞的全能性是指一个细胞具有发育成__________的能力。

三、简答题（每题10分，共40分）1. 描述细胞膜的结构特点及其功能。

2. 解释细胞质中高尔基体的主要作用。

3. 阐述细胞周期的各个阶段及其特点。

4. 讨论细胞分化的机制及其在生物体发育中的重要性。

四、论述题（20分）1. 结合实例，论述细胞凋亡在生物体发育和疾病中的作用。

碳钢热处理后的显微组织观察与分析实验目的实验说明实验内容实验方法指导实验报告要求思考题一：实验目的(1)观察和研究碳钢经不同形式热处理后显微组织的特点。

(2)了解热处理工艺对碳钢硬度的影响。

二：实验说明碳钢经热处理后的组织可以是接近平衡状态(如退火、正火)的组织，也可以是不平衡组织(如淬火组织)。

因此在研究热处理后的组织时，不但要用铁碳相图，还要用钢的C曲线来分析。

图1为共析碳钢的C曲线，图2为45钢连续冷却的CCT曲线。

图1 共析碳钢的c曲线图2 45钢的CCT曲线C曲线能说明在不同冷却条件下过冷奥氏体在不同温度范围内发生不同类型的转变过程及能得到哪些组织。

1．碳钢的退火和正火组织亚共析碳钢(如40、45钢等)一般采用完全退火，经退火后可得接近于平衡状态的组织，其组织形态特征已在实验l中加以分析和观察(图3)过共析碳素工具钢(如T10、T12钢等)则采用球化退火，T12钢经球化退火后，组织中的二次渗碳体和珠光体中的渗碳体都呈球状(或粒状)，图中均匀分散的细小粒状组织就是粒状渗碳体。

2．钢的淬火组织含碳质量分数相当于亚共析成分的奥氏体淬火后得到马氏体。

马氏体组织为板条状或针状，20钢经淬火后将得到板条状马氏体。

在光学显微镜下，其形态呈现为一束束相互平行的细条状马氏体群。

在一个奥氏体晶粒内可有几束不同取向的马氏体群，每束条与条之间以小角度晶界分开，束与束之间具有较大的位向差，如图4所示。

图3 T12 钢球化退火组织图4 低碳马氏体组织45钢经正常淬火后将得到细针状马氏体和板条状马氏体的混合组织，如图5所示。

由于马氏体针非常细小，故在显微镜下不易分清。

45钢加热至860℃后油淬，得到的组织将是马氏体和部分托氏体(或混有少量的上贝氏体)，如图6所示。

碳质量分数相当于共析成分的奥氏体等温淬火后得到贝氏体，如T8钢在550~350℃及350℃~ Ms温度范围内等温淬火，过冷奥氏体将分别转变为上贝氏体和下贝氏体。

微生物实验思考题参考答案及知识要点---------------------------------- 二.细菌的简单染色和革兰氏染色1.革兰氏染色中那一步是关键？为什么？你是如何操作的？革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）。

如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。

脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s）。

2.固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同？自然死亡的菌体本身已经部分自溶，结构已经改变。

固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。

3.不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？能。

在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G+）,被酒精脱色为革兰氏阴性菌。

最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。

4.涂片为什么要固定，固定适应注意什么问题？a杀死细菌并使菌体黏附与玻片上；b增加其对染料的亲和力。

固定时应注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜），固定时应尽可能维持细胞原有形态，防止细胞膨胀或收缩。

三.霉菌、放线菌的形态观察1.镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到横隔膜，继而断裂成球状或杆状小体。

2.显微镜下细菌放线菌酵母菌和霉菌的主要区别是什么？放线菌与细菌需要在油镜下才能观察清楚，而霉菌和酵母菌在低倍镜下即可看到。

细菌：为细而短的单细胞微生物（个体微小），主要形态有：球、杆、螺旋状等。

（部分杆菌还可形成芽抱）放线菌：存在分枝丝状体和菌丝体，革兰氏阳性菌，有抱子丝和抱子（球形、椭圆形、杆状、柱状）。

酵母菌：单细胞，菌体呈圆球、卵形或椭圆形，少数呈柠檬形、尖形等。

细菌的形态结构观察实验报告思考题细菌的形态结构观察实验报告引言：细菌是一种微生物，它们广泛存在于自然界中。

了解细菌的形态结构对于研究微生物学和医学等领域具有重要意义。

本实验旨在通过显微镜观察不同种类细菌的形态结构，深入了解它们的特征和分类。

材料与方法：1. 细菌样本：大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌。

2. 显微镜、载玻片、染色剂（甲基蓝）。

3. 操作步骤：（1）将载玻片用火焰消毒并晾干。

（2）用无菌棉签将细菌样本涂抹在载玻片上。

（3）将涂有细菌样本的载玻片放入甲基蓝溶液中染色，静置2分钟。

（4）用滴水器滴少量水在载玻片上，并用纸巾轻轻吸干水分。

（5）将载玻片放到显微镜下进行观察。

结果与讨论：1. 大肠杆菌大肠杆菌是一种革兰阴性杆菌，通常生长在肠道中。

观察其形态结构可发现，其细胞为长杆状，约2-3微米长，0.5微米宽。

在染色后可见其细胞质为深蓝色，周围有一层较浅的薄壳。

2. 葡萄球菌葡萄球菌是一种革兰阳性球菌，常见于皮肤和黏膜表面。

观察其形态结构可发现，其细胞为球形或卵圆形，直径约1微米。

在染色后可见其细胞呈紫色。

3. 链球菌链球菌是一种革兰阳性链状细菌，常见于喉咙和皮肤表面。

观察其形态结构可发现，其细胞为链状排列的小球体，直径约0.5微米。

在染色后可见其细胞呈紫色。

4. 变形杆菌变形杆菌是一种革兰阴性弯曲杆菌，在水中广泛分布。

观察其形态结构可发现，其细胞为弯曲的杆状体，长度约1-5微米，宽度约0.2微米。

在染色后可见其细胞呈深蓝色。

结论：通过本实验观察，我们可以了解到不同种类细菌的形态结构特征。

大肠杆菌为长杆状，葡萄球菌为球形或卵圆形，链球菌为链状排列的小球体，变形杆菌为弯曲的杆状体。

这些特征对于细菌的分类和鉴定具有重要意义。

思考题：1. 什么是革兰染色？为什么要进行革兰染色？革兰染色是一种常用的细菌染色方法，用于区分细菌的壁层结构。

其原理是将细胞在紫晶中着色后，在碘液中固定着色物质，然后用酒精洗去多余着色物质，在红粉中再次着色。

微生物思考题及参考答案The document was prepared on January 2, 2021微生物思考题及参考答案1.用油镜观察时应注意哪些问题在载玻片和镜头之间加滴什么油起什么作用答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.油的折光率和分辨率成反比有公式,同时与波长成正比.2.什么是物镜的同焦现象它在显微镜观察中有什么意义答：在一般情况下,当物像在一种物镜中已清晰聚焦后,转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时,物像将保持基本准焦的状态,这种现象称为物镜的同焦.利用这种同焦现象,可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦,从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片.3.影响显微镜分辨率的因素有哪些答：物镜的NA值物镜的数值孔径与照明光源的波长.4.美蓝染色液作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响,试分析原因答：会造成更多的死细胞,在显微镜下观察,活的是透明无色,衰老的是淡蓝色,死亡的是蓝色,如果美蓝染色液作用时间过长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液,影响实验结果.5.镜检时如何区分放线菌基内菌丝,气生菌丝以及孢子丝一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体.6.在进行细菌涂片时应注意哪些环节1、载玻片应该冷却后再涂片.2、如果是涂布液体,可以用毛细管或接种环滴一小滴,然后轻轻抹开,一圈足够. 3、如果是涂布菌落或菌苔,应该在载玻片上先滴一滴水,再将菌落或菌苔涂布上去,接种环的尖蘸一点点即可. 4、为了节省时间,可以将干燥和热固定合并成一步.但是应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形. 5、染色时间视染色液种类而定.如结晶紫只需几十秒,亚甲基蓝则需一到两分钟. 6、冲洗时,水流不能太大,而且尽量避免水流直接冲在涂片上. 7、冲洗后干燥,可以用酒精灯加热以节省时间,同样的,应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形.7.进行细菌制片时为什么要进行加热固定在加热固定时应注意什么固定的目的有三个：1杀死微生物,固定细胞结构.2保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉.3改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色.固定时应注意：手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次手指触摸玻片反面,不烫手为宜,固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩.8.为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察1.因为用油镜观察时,镜头离玻片会很近.如果未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头.镜头非常精密,被污染后不利于下次观察.2、若未完全干燥,水滴会影响油与玻璃之间折光率,造成视野不够清晰.9.哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性其中最关键的环节是什么答：涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最关键的环节是脱色环节.10.进行革兰氏染色时,为什么特别强调菌龄不能太老,用老龄细菌染色会出现什么问题答：菌龄太老,细胞壁通透性改变.着色不均,染色效果不好.阴性阳性不明显分不太清楚,问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌.11.革兰氏染色中那一步是关键为什么你是如何操作的革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色是脱色时间.如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌.脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s.12.革兰氏染色中,哪个步骤可以省略在什么情况下采用媒染目的是在所有的内形成了不溶于水的与碘的复合物. 脱色后使变为无色. 复染使革兰氏阴性菌染成红色. 所以鉴别细菌的革兰氏阴阳性只须媒染,复染的目的是为了看清革兰氏阴性菌.13.你主要根据哪些形态特征来区分四种不同的霉菌曲霉:具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗,顶端膨大成球状顶囊,表面辐射出一层或两层小梗,小梗上着生成串的球形分生孢子.分生孢子梗生于足细胞上,并通过足细胞与营养菌丝相连.根霉:菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝和假根.在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗,其顶端膨大成球形孢子囊.囊的基部有囊托,中间有球形或半球形囊轴.毛霉:菌丝无隔、多核、分枝状,无假根或匍匐菌丝.菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗.各分枝顶端着生球形孢子囊,无囊托.青霉:菌丝有横隔,分生孢子梗亦有横隔,光滑或粗糙.基部无足细胞,顶端不形成膨大的顶囊,其分生孢子梗经过多次分枝,产生几轮对称或不对称的小梗,形如扫帚,称为帚状体.孢子颜色：黑曲霉是黑色,青霉是青色,根霉是白菌丝黑孢子,毛霉则是淡黄色.以上为实验室观察1菌丝特征：青菌与曲霉菌丝与膈；毛霉与根霉则无；2菌丝的特化结构：曲霉有足细胞,其它霉菌无；根霉有假根与匍匐枝,其它霉菌无；3孢子头特征：青霉的孢子头为扫帚状；根霉与毛霉的孢子头为囊状；曲霉为菊花状孢子头.14.为什么更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正目镜测微尺中每小格代表的实际长度是不固定的,它是随所使用目镜和物镜的放大率的不同而改变的,故在测量前必须先用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正,以得出在显微镜的特定放大倍率下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度.15.在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,其测定结果是否相同为什么答:相同;目镜测微尺是一块圆形玻片,其中央刻有精确等分的刻度,有把毫米刻成为50 等分或把10 毫米长度刻成100 等分.测量时,将其放在接目镜中的隔板上来测量经显微镜放大后的细胞物象.由于在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一细菌的大小时,物象的放大倍数与每小格目镜测微尺所代表的长度在变化比例上是同步的,故而测定结果相同.16.哪些因素会造成血细胞计数板的计数误差,应如何避免操作时没有先盖盖玻片再滴加悬液,导致体积不准确.避免：先盖盖玻片再滴加悬液.细胞密度太高.避免：稀释溶液.溶液不均匀.避免：滴加溶液前混匀悬液.1、仪器误差：所用器材均应清洁干净,并且计数板计数区不应该有擦痕.2、计数室内可能有气泡.因为酵母细胞并没有染色,看起来是透明的,有气泡很容易被计入,使数值偏高；并且,气泡会影响菌悬液的随机分布.改进：若产生气泡,则用吸水纸吸出.3、菌体在计数板上分布不均,当用选取5格计数时,会造成很大误差.改进：应使菌液自然流入并混匀,进行观察时尽可能多数几个格子.4、配制稀释液时吸取的浓度过高或过低,导致稀释液浓度和原液不成正确比例,计算时产生误差.应将原液摇晃均匀后取中部的液体进行稀释.5、由于数菌体数目时视觉疲劳而导致的视觉误差.应多人观察,取记录平均数.6、计数时可能将格四周的菌都计算在内了,使数值偏高.改进：谨遵一个规则,计上不计下,计左不计右,不可以重复计数.7、可能出现有出芽的酵母菌,将出芽的酵母菌按两个计数了,使数值偏高.改进：计数时,只有当芽体于母细胞一样大的时候,才能计为两个.17.培养基配好后,为什么必须立即灭菌如何检查灭菌后的培养基是否无菌为什么要倒置培养答：由于配制培养基的各类营养物质和容器等含有各种微生物,因此,已配制好的培养基必须立即灭菌,如果来不及灭菌,应暂存冰箱内,以防止其中的微生物生长系列而消耗养分和改变培养基的酸碱度所带来的不利影响.将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h,无菌生长即可证明灭菌后的培养基无菌.倒置培养的主要目的：1由于重力的作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需的营养物质,利于微生物生长；2防止空气中微生物的污染培养基及培养物：倒置时平板内的空气是不流动的,杂菌不会沉降到培养基表面,如果不倒置,很快平板周边会长起杂菌.3倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去,而充分的保持琼脂的弹性与细菌容易繁殖和生存的环境.如果不倒置,大概3天左右培养基就会出现龟裂等水分散失的情况.而一些落菌等试验,需验证培养基无菌,就要先倒置培养48小时才可作为模板做落菌,水分散失是很重要的.19.在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题为什么答：一般而言,培养基的配置要注意如下几点原则：1营养成分的配比：碳源和氮源的比例C/N要适当；2适宜的酸碱度pH值：配制培养基时pH的调节；3渗透压：营养物质要有适合的浓度；4培养基不能反复高温灭菌.5 称不溶性固形物时,应单独称,若量少的可以与无机盐一起称,但一定要混匀再分装；6一般情况下培养基用自来水配制.操作细节上则要注意：1称药品用的牛角匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖2调pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度3分装时注意不要污染棉塞、试管口,以免染菌.4及时灭菌,以免培养基及容器里的微生物生长繁殖消耗养分、改变酸碱度.1、当然是注意浓度配比不要搞错2、很多培养基的加料顺序有讲究,否则会有沉淀产生3、有些培养基会有不溶物质,分装前应摇匀4、不要忘了调节pH值一般细菌都需要,酵母可能自然pH就行,不过不一定5、加热溶解时尽量不要煮沸,会损失营养物质20.高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽灭菌完毕后,为什么待压力降低“0”时才能打开排气阀,开盖取物.答：1在使用高压蒸汽灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度.2压力未降至“0”便开盖取物的可能后果：压力锅内压力骤然降低,引起容器中的溶液喷出容器口导致污染或导致人员的烫伤.21.干热灭菌操作过程中应注意哪些问题为什么1、物品不要摆放太挤,以免妨碍空气流通2、灭菌物品不要接触干燥箱内壁的铁板,以防包装纸烤焦起火3、灭菌时人不能离开4、灭菌结束后不能忘记关掉电源5、待温度降到70度以下再打开,否则冷热空气交替,玻璃器皿容易炸裂或发生烫伤事故22.为什么干热灭菌比湿热灭菌所需温度高时间长在湿热条件下,有水蒸汽的作用：a高温水蒸汽导热比干空气要快；b高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程；c高温水蒸汽能穿透细菌的细胞膜,直接进入细胞内破坏细胞；d高温水蒸汽能水解一部分细胞结构,加速导热.湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低；湿热的穿透力比干热大；湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2．26kJ千焦的热量.这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力.23.设计实验方案,比较干热灭菌和湿热灭菌的效果.以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件和等量原则.一实验材料试管镊子酒精灯嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC7053菌片纸片与菌片同大小同材料溴甲酚紫蛋白冻水培养基已灭菌等实验材料材料有余.二对照组取9支洁净试管,分为A1B1C1三组每3支一组,将A1组中放入菌片,B1组中放入纸片,C1组中什么也不加；不经灭菌,直接加入溴甲酚紫蛋白冻水培养基等量.三恒为培养将上述所有试管按分组在56℃恒温条件下培养48小时.24.如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养请写出实验的主要步骤纯培养的确定除观察其菌落特征外,还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定,有些微生物的纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到.25.配制牛肉膏蛋白胨培养基,有哪些操作步骤那几步易出错,如何防止称取药品—加热溶化—分装—加棉塞—包扎—灭菌—搁置斜面易出错的步骤有：a称取药品称取时钥匙专用,瓶盖不要错盖,易吸水的药品要快速称取；b加热溶化加入药品后要用玻璃棒不停搅拌,以免糊底在琼脂熔化过程中,应控制火力,以免培养基因沸腾而溢出容器,同时,需不断搅拌,以防琼脂糊底烧焦.；c分装分装时培养基不能粘在三角瓶或试管口,以免接种时染菌；d搁置斜面斜面长度约试管长度一半为宜.26.平板菌落计数法的原理是什么它适用于那些微生物的计数平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微生物充分分散为单个细胞,取一定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞.统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数.但是,由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞.因此平板菌落计数的结果往往偏低.现在常使用菌落形成单位.平板计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个微生物繁殖而形成的现象进行的,也就是一个菌落可代表一种微生物并不绝对.通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量.8、微量移液器的最小量程太大,在加样时,容易加多,使盖玻片鼓起,血球计数板所技术的体积变大,最终结果偏大.改进：用量程的小的微量移液器并少加一些.27.如果一项科学研究内容需从自然界中筛选到能产生高温蛋白酶的菌株,你将如何完成写出实验方案产蛋白酶菌株在酪素平板上能形成降解酪素透明圈.以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件一材料准备 1 土壤有机质特别是蛋白质含量丰富的土壤2 灭菌生理盐水%NaCl3 灭菌移液管4 添加酪素的B—4牛肉膏蛋白胨完全培养基经灭菌5 B—4斜面经灭菌6 其他材料：接种环酒精灯等二操作方法1在盛有10ml灭菌生理盐水的烧杯中添加1g土壤,配成悬浮液；2 稍静止后,用灭菌移液管移取部分上清液,将其制成10^4—10^6倍的稀释液；3 用灭菌移液管吸取各稀释液用稀释倒平板法或涂布平板法将其接入添加酪素的B—4平板上；4 在55—65℃下培养1—2天；5 挑取形成降解酪素透明圈的菌落透明圈直径D与菌落直径d之比较大者,转接入B—4斜面上培养；若无特定菌落形成,则需另取土样从开始重复试验6 将B—4斜面上的菌落再用平板纯培养,依次重复2—3次后即可得到纯培养镜检；7 纯培养细菌中蛋白酶的提取及活性鉴定摇瓶培养若提取蛋白酶及其活性正常,则纯培养成功,否则,重取土样重复以上实验.28.为什么熔化后的培养基要冷却至45℃左右才能倒平板低于这个温度琼脂会凝固,温度过高,如果是做倾倒琼脂做菌落计数,会杀死一部分细菌,如果只是只是制备琼脂平板,那么温度太高就进行倾倒会导致琼脂凝固后偏软,水汽过多.29.要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键为什么1 无菌操作2 稀释良好,不会太浓或太稀.3 菌落生长时间控制好,不会长的太大不便区分,也不至于太小影响计数.30.当你的平板上长出的菌落不是均匀分散的而是集中在一起时,你认为问题出在哪里1.太浓2.没涂匀31.用倾注法和涂布法计数,其平板上长出的菌落有何不同为什么要培养较长时间48h后观察结果倾注法是在培养皿中接种好样品之后,倾注琼脂并培养；而涂布法则是在琼脂表面接种并使用L型棒涂布.因此,倾注法的菌落将出现在琼脂的各个部位,包括底层和中层,但涂布法培养后形成的菌落只出现在琼脂表面.32.你如何解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶答：①淀粉是大分子物质,进入细胞十分困难,甚至需要高耗能的胞吞作用.因而通过胞外酶的作用,将淀粉水解为葡萄糖后运入细胞,较方便高效.②试验中出现透明圈,说明培养基内淀粉被水解,可推测是细菌产生的胞外的淀粉酶起的作用.33.不利用碘液,你能否证明淀粉水解的存在答：由于淀粉水解生成葡萄糖,即多羟基醛,因此可利用醛的性质进行检验,如银镜试验,斐林试验等.呈阳性者,说明产生了葡萄糖,淀粉被水解；阴性者说明淀粉未被水解.34.假如某些微生物可以有氧代谢葡萄糖,发酵试验应该出现什么结果答微生物有氧代谢葡萄糖产气不产酸,因此发酵结果是小管中生气泡但是溶液不变黄.35.解释在细菌培养中吲哚检测的化学原理,为什么在这个试验中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂,而不用丙酮酸答：化学原理：有些细菌产生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸,产生吲哚和丙酮酸.吲哚与对二甲基氨基甲醛结合,形成红色的玫瑰吲哚.但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力,因此吲哚试验可以作为一个生物化学检测的指标.因为丙酮酸是生物体呼吸作用的产物,无论是有氧还是无氧,都会产生丙酮酸,因而无法作为色氨酸酶活性的指示剂进行区分.同时吲哚能通过有明显颜色变化的化学反应观测到,而丙酮酸不能,所以试验中用吲哚的存在作为色氨酸酶活性的指示剂,而不用丙酮酸.36.为什么大肠杆菌是甲基红反应阳性,而产气杆菌为阴性答：当细菌代谢糖产生酸时,培养基就会变酸,使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色转变为红色,即甲基红反应.而大肠杆菌和产气肠杆菌在培养的早期均产生有机酸,但大肠杆菌在培养的后期仍能维持酸性PH4,而产气肠杆菌则转化有机酸为非酸性末端产物,如乙醇、丙酮酸等,使PH升至大约6.因此,大肠杆菌为阳性,产气肠杆菌为阴性.37.用紫外线进行诱变时,为什么要打开皿盖为什么要在红光灯下操作紫外线不容易穿透玻璃,所以打开盖,自然光下容易光复活,红光下不会所以在红光下操作。

考点04显微镜的结构和使用中考频度：★★★★☆难易程度：★★★★☆倉考点解读一、显微镜的构造二、显微镜的使用方法和步骤1右手握住镜臂，左手托住镜座。

2.把显微镜放在实验台距边缘7厘米左右处，略偏左。

安装好目镜和物镜。

3 •转动转换器，使低倍镜对准通光孔。

4•把较大的光圈对准通光孔。

一只眼睛注视目镜内，另一只眼睛睁开。

转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。

通过目镜可以看到白亮的圆形视野。

5•把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。

6•转动粗准焦螺旋，使物镜缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（此时眼睛一定要看着物镜）。

7•—只眼向目镜内看，同时逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升直到看清物像为止。

再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。

三、镜头的区别和使用1.目镜：上端扁平，没有螺纹，长度和放大倍数成反比。

2 .物镜：上端有螺纹，一般有3~4个物镜，长度和放大倍数成正比。

四、对光和亮度的调节显微镜下视野亮度的调节主要与反光镜、遮光器有关。

光圈和反光镜配合使用，以确保所需要的最佳光线。

五、关于物像的放大倍数与视野中细胞数量的变化1.显微镜物像放大倍数的计算物像放大倍数=目镜的放大倍数幽镜的放大倍数。

2•视野中细胞数目的变化(1)一行细胞数量的变化，可根据放大倍数与视野成反比的规律计算。

(2)圆形视野范围内细胞数量的变化，可根据看到的实物范围与放大倍数的平方成反比的规律计算。

六、关于视野成像的特点与玻片的移动1.显微镜成像的特点是：成倒立、放大的像。

2•将显微镜视野中较偏的物象移动到视野中央的方法：物像偏向哪一方，装片就应向哪一方移动。

物像左下方七、视野中污点的判断(污点可能存在于目镜、物镜和玻片标本)1移动目镜，污点移动的则污点在目镜上，不动则不在目镜上。

2.移动玻片，污点移动的则污点在玻片上，不动则不在玻片上。

3.不在目镜、玻片上则在物镜上。

学！科网点考向一考向一显微镜的结构典例引领料_ __ __ 1•如图是显微镜的部分结构示意图。