浙江农业新品种选育重大专项方案-浙江大学动物科学学院

浙江省农业新品种选育科技专题方案（2011－2015年）（征求意见稿）一、现状与形势（一）国内外发展现状和形势1．国内外现状。

一是常规育种技术仍然是育种的重要技术手段。

目前，水稻、油菜、番茄等作物的杂交种已广泛用于生产，实现了作物品种矮化和杂种优势利用两次重大突破，良种覆盖率已达80%。

在林果与花草品种选育方面，近20多年来我国选育出300余个新品种，在生产量、观赏性状、抗逆性等方面得到改良。

在畜禽品种选育方面，杂交育种仍是主要的品种改良手段。

目前，我国猪及部分家禽品种都存在专门化品系较少的问题，产业化发展受到很大制约。

在水产品种选育方面，前苏联、德国、以色列和日本等都普遍采用的是不同地理品系间和家养系与野生种间的杂交选育。

二是常规育种技术的改造升级成为提高动植物育种效率的有效措施。

经过几十年的努力，植物细胞培养、组织培养、体细胞杂交、分子育种等技术，已在禾本科、茄科、十字花科等50多种植物上得到应用。

通过品种的杂交，肉、蛋、奶产量得到显著提高，用人工授精、超排等技术，实现跨国使用最优秀种公牛；在水产品种改良方面，国际上自20世纪80年代中期开始进行大规模的鱼类基因转移研究。

三是优质专用新品种选育成为动植物育种的重要方向。

日本、泰国、美国一直重视稻米品质研究。

多数油菜主产国开展了双低油菜品种选育。

蔬菜、花卉和花生育种研究的趋势仍然是进一步提高产品质量。

在林果与花草方面，选育专用型优质品种非常重要。

我国在梅花、牡丹等名花培育上有很大的优势。

在水产方面，选育的“松浦鲤”，具有抗寒能力强、生长快和耐高密度养殖的特点，极大地扩展了鲤鱼养殖的区域，“黄海一号”中国对虾提高生长速度近20%。

四是超级品种选育成为进一步提高农产品产量的重要途径。

菲律宾国际水稻研究所启动了“新株型育种”项目，但其超级稻品种结实率低、充实度差而难以在生产上应用。

我国先后提出了三系和两系超级稻育种技术，育成了亩产超800kg的超级稻新品种，如“协优9308”、“两培优九”等。

㊀㊀2024年第65卷第4期903收稿日期:2024-02-21基金项目:浙江省农业(旱粮)新品种选育重大科技专项(2021C02064-3-2);浙江省自然科学基金(Q23C130010);国家大麦青稞产业技术体系(CARS-05-01A-06)作者简介:宋林光(1999 ),男,浙江海宁人,专科,从事粮油种植生产工作,E-mail:2374008501@㊂通信作者:蔡康锋(1992 ),男,浙江东阳人,助理研究员,博士,从事麦类遗传育种工作,E-mail:caikf@㊂文献著录格式:宋林光,刘银萍,李育,等.浙江省大麦新品种比较分析[J].浙江农业科学,2024,65(4):903-907.DOI:10.16178/j.issn.0528-9017.20240133浙江省大麦新品种比较分析宋林光1,2,3,刘银萍4,李育4,宋剑松2,汪军妹1,5,岳文浩1,5,刘磊1,5,蔡康锋1,5∗(1.浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所,浙江杭州㊀310021;2.海宁市剑禾农业科技有限公司,浙江嘉兴㊀314416;3.浙江农艺师学院,浙江杭州㊀310021;4.海宁市农作物技术服务站,浙江嘉兴㊀314400;5.国家大麦改良中心,浙江杭州㊀310021)㊀㊀摘㊀要:以近年育成的11个大麦新品种为材料,在浙江省海宁㊁秀洲㊁嘉善㊁平湖㊁慈溪和温州等地开展品种比较试验㊂结果表明,新品种浙皮25号㊁19-39和秀20-11在温州试点的生育期短于130d,适合麦-稻-稻三熟制种植㊂新品种浙皮23号㊁浙皮28号和浙皮37号的平均产量超过5500kg㊃hm -2,株高较矮且生育期较短,在浙北地区有较为良好的推广种植前景㊂关键词:大麦;农艺性状;产量;生育期中图分类号:S512.3㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:0528-9017(2024)04-0903-05Comparative analysis of new barley varieties in Zhejiang ProvinceSONG Linguang 1,2,3,LIU Yinping 4,LI Yu 4,SONG Jiansong 2,WANG Junmei 1,5,YUE Wenhao 1,5,LIU Lei 1,5,CAI Kangfeng 1,5∗(1.Institute of Crop and Nuclear Technology Utilization,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,Hangzhou310021,Zhejiang;2.Haining Jianhe Agricultural Science &Technology Co.,Ltd.,Jiaxing 314416,Zhejiang;3.Zhejiang Agronomist College,Hangzhou 310021,Zhejiang;4.Haining Crop Technical Service Station,Jiaxing314400,Zhejiang;5.National Barley Improvement Center,Hangzhou 310021,Zhejiang)㊀㊀Abstract :Comparative analysis of 11new barley varieties was conducted in Haining,Xiuzhou,Jiaxing,Pinghu,Cixiand Wenzhou within Zhejiang Province.The growth duration of Zhepi 25,19-39and Xiu 20-11in Wenzhou was less than130d,so these varieties are suitable for local barley-early rice-late rice triple cropping system.The yield of Zhepi 23,Zhepi 28and Zhepi 37exceeded 5500kg㊃hm-2while maintaining relatively low plant height and short growth period,soit is promising to promote these varieties in the north of Zhejiang Province.Keywords :barley;agronomic traits;yield;growth period㊀㊀大麦(Hordeum vulgare L.)是仅次于玉米㊁小麦和水稻的全球第四大禾谷类作物,2022年全球产量1.55亿t (FAO 数据库)㊂大麦籽粒蛋白质和赖氨酸含量较高㊁钙和磷含量适中㊁维生素和微量元素丰富,是优质的饲料原料[1-3]㊂全球范围内,大麦总产的70%左右用于饲料,16%左右用于酿造,14%左右用于食用[4]㊂在国家大力推行玉米豆粕减量替代的背景下,大麦的饲用价值越来越受到关注与重视㊂同时,随着粮食安全已上升至关系国家安全的战略高度,多熟制粮食生产模式受到推崇[5-6]㊂大麦因其生育期短㊁早熟㊁耐迟播等特点,在轮作倒茬上有独特的优势,因而能在多熟制生产和粮食保供中发挥重要作用㊂本研究收集了11个浙江省选育的大麦新品种,在海宁㊁秀洲㊁嘉善㊁平湖㊁慈溪和温州等地开展品种比较试验,旨在客观㊁公正地评价各新品种的特征特性,为大麦新品种推广种植提供依据㊂1㊀材料与方法1.1㊀供试材料904㊀㊀2024年第65卷第4期供试材料为浙江省近年来育成的大麦新品种(表1),均为二棱春性皮大麦,种子分别由浙江省农业科学院㊁嘉兴市农业科学研究院和浙江大学提供㊂表1㊀11个大麦新品种及来源Table1㊀Eleven new barley varieties and their origin 品种来源浙皮25号浙江省农业科学院浙皮23号浙江省农业科学院浙皮37号浙江省农业科学院浙皮28号浙江省农业科学院19-34浙江大学19-39浙江大学秀20-11嘉兴市农业科学研究院秀1271嘉兴市农业科学研究院秀0324嘉兴市农业科学研究院花30浙江省农业科学院浙皮11号浙江省农业科学院1.2㊀试验设计㊀㊀所有材料于2022 2023年在海宁㊁秀洲㊁嘉善㊁平湖㊁慈溪和温州等地种植,施肥㊁除虫及除草参照当地种植习惯㊂区域试验采用随机区组排列,重复3次;小区长方形,面积13.3m2,播种量按当地习惯(一般180kg㊃hm-2左右),确保基本苗300万㊃hm-2左右㊂试验田要求土地平整,排灌方便,肥力中等,四周设保护行且无荫蔽㊂1.3㊀统计指标㊀㊀田间观察记载物候期,各小区定点适时调查基本苗㊁最高苗㊁有效穗㊂随机取10个代表性单株测量株高和穗长,成熟后取10个代表性穗统计穗总粒数和穗实粒数㊂小区混合收获,晒干后统计产量和千粒重㊂2　结果与分析2.1㊀生育期㊀㊀11个大麦品种的生育期在161~166d(表2)㊂浙皮25号和19-39生育期最短,为161d㊂其次为秀20-11,生育期为162d㊂浙皮28号㊁秀0324和浙皮37号的生育期分别为164d㊁164d和165d㊂秀1271生育期最长,为166d㊂从试点上看,所有参试大麦品种的平均生育期在132~175d㊂温州平均生育期最短,为132d,其次为海宁和平湖,为166d,慈溪和秀洲的生育期分别为170d和171d,嘉善最长,为175d㊂表2㊀11个大麦新品种的物候期Table2㊀Phenophase of eleven barley varieties品种物候期海宁秀洲嘉善平湖慈溪温州平均/d 浙皮25号播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05161出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-142022-12-10抽穗期2023-03-182023-03-222023-03-132023-03-182023-03-102023-03-10成熟期2023-04-292023-05-072023-05-032023-05-062023-04-302023-04-14生育期/d162170174165167125浙皮23号播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05163出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-142022-12-10抽穗期2023-03-212023-03-262023-03-182023-03-242023-03-122023-03-12成熟期2023-05-022023-05-092023-05-032023-05-092023-05-012023-04-19生育期/d165172174168168130浙皮37号播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05165出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-142022-12-10抽穗期2023-03-212023-03-272023-03-152023-03-232023-03-122023-03-10成熟期2023-05-062023-05-082023-05-102023-05-062023-05-032023-04-23生育期/d169171181165170134浙皮28号播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05164出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-142022-12-10抽穗期2023-03-202023-03-232023-03-132023-03-192023-03-112023-03-16成熟期2023-05-052023-05-082023-05-032023-05-062023-05-032023-04-24生育期/d16817117416517013519-34播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05163出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-142022-12-10抽穗期2023-03-182023-03-212023-03-132023-03-182023-03-1120230-3-10成熟期2023-04-292023-05-042023-05-032023-05-062023-05-052023-04-23生育期/d162167174165172134表2(续)品种物候期海宁秀洲嘉善平湖慈溪温州平均/d 19-39播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05161出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-152022-12-10抽穗期2023-03-192023-03-232023-03-152023-03-202023-03-112023-03-10成熟期2023-04-292023-05-092023-05-012023-05-062023-05-012023-04-15生育期/d162172172165167126秀20-11播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05162出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-142022-12-10抽穗期2023-03-222023-03-262023-03-152023-03-232023-03-162023-03-11成熟期2023-05-012023-05-082023-05-032023-05-062023-05-032023-04-15生育期/d164171174165170126秀1271播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05166出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-142022-12-10抽穗期2023-03-252023-03-302023-03-222023-03-292023-03-152023-03-17成熟期2023-05-102023-05-092023-05-042023-05-082023-05-032023-04-24生育期/d173172175167170135秀0324播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05164出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-142022-12-10抽穗期2023-03-232023-03-282023-03-202023-03-282023-03-162023-03-17成熟期2023-05-062023-05-082023-05-042023-05-062023-05-012023-04-25生育期/d169171175165168136花30播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05163出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-152022-12-10抽穗期2023-03-192023-03-222023-03-132023-03-212023-03-142023-03-14成熟期2023-04-292023-05-072023-05-012023-05-062023-05-072023-04-23生育期/d162170172165173134浙皮11号播种期2022-11-082022-11-052022-11-042022-11-122022-11-022022-12-05163出苗期2022-11-182022-11-182022-11-102022-11-222022-11-142022-12-10抽穗期2023-03-202023-03-242023-03-172023-03-222023-03-142023-03-11成熟期2023-05-052023-05-082023-05-032023-05-062023-05-012023-04-19生育期/d168171174165168130平均/d1661711751661701322.2㊀农艺性状㊀㊀参试大麦品种的有效穗为583.5~654.0万㊃hm-2(表3),其中浙皮11号的有效穗居参试品种第一位,为654.0万㊃hm-2,浙皮25号㊁秀1271和浙皮37号的有效穗低于600万㊃hm-2,分别为598.5万㊃hm-2㊁588.0万㊃hm-2和583.5万㊃hm-2㊂成穗率变幅64.9%~70.5%(表3),19-39成穗率最高(70.5%),其次为浙皮37号(70.4%),其余品种的成穗率均低于70%㊂各品种株高变幅83.9~92.7cm(表3)㊂秀0324㊁19-39㊁浙皮25号和浙皮11号的株高高于90cm,分别为92.7cm㊁92.7cm㊁91.5cm和90.4cm㊂浙皮23号的株高最矮,仅83.9cm㊂各品种穗长以浙皮11号㊁浙皮37号和浙皮23号最长,为7.5cm,19-34最短,为6.8cm,其余品种穗长介于7.0~7.2cm㊂各品种结实率变幅87.0%~ 96.1%,浙皮25号㊁浙皮37号㊁浙皮23号㊁19-39㊁浙皮28号和浙皮11号的结实率均高于95.0%,而秀1271是唯一一个结实率低于90.0%的品系,其余品系的结实率在91.5%~94.6%㊂各品种千粒重变幅42.1~46.3g(表3),浙皮37号㊁浙皮28号和浙皮25号的千粒重均高于45.0g,分别为46.3g㊁46.1g和45.4g,花30千粒重最低,为42.1g,其余品种千粒重介于42.4~44.1g㊂2.3㊀产量㊀㊀各参试大麦品种的平均产量变幅为5348.6~ 5671.9kg㊃hm-2(表4)㊂浙皮23号平均产量最高,为5671.9kg㊃hm-2,随后是浙皮28号㊁浙皮37号㊁秀0324㊁19-39和浙皮11号,其平均产量均超过5500kg㊃hm-2㊂花30产量最低,为5348.6kg㊃hm-2㊂其余品种产量介于5377.8~ 5494.4kg㊃hm-2㊂3　讨论大麦因其生育期短㊁早熟的特点,相较于油菜㊁小麦等冬季作物在茬口衔接上有独特的优势㊂906㊀㊀2024年第65卷第4期㊀㊀表3㊀11个大麦新品种的农艺性状Table 3㊀Agronomic traits of eleven barley varieties品种基本苗/(万㊃hm-2)最高苗/(万㊃hm-2)有效穗/(万㊃hm -2)成穗率/%株高/cm 穗长/cm 每穗总粒数每穗实粒数结实率/%千粒重/g 浙皮25号351.0871.5598.568.691.57.128.427.396.145.4浙皮23号342.0960.0640.566.783.97.530.128.895.743.8浙皮37号261.0828.0583.570.486.67.530.929.695.746.3浙皮28号315.0954.0624.065.487.97.229.428.195.546.119-34390.0952.5631.566.389.7 6.828.926.691.943.319-39391.5897.0633.070.592.77.230.429.195.543.8秀20-11355.5978.0645.065.988.07.130.729.094.642.4秀1271282.0901.5588.065.385.57.232.828.587.043.1秀0324355.5952.5618.064.992.77.230.027.591.543.0花30366.0927.0619.566.988.87.029.727.492.342.1浙皮11号312.0997.5654.065.590.47.531.029.695.344.1表4㊀11个大麦新品种的产量Table 4㊀Yields of eleven barley varieties品种产量/(kg㊃hm-2)海宁秀洲嘉善平湖慈溪温州平均浙皮25号5175.05745.05325.06677.64864.24480.15377.8浙皮23号5550.06653.35737.57002.54905.84182.55671.9浙皮37号5175.06248.74950.07702.55036.44582.55615.9浙皮28号5662.56269.65550.07277.64853.04107.55620.019-345287.56289.85025.07327.54686.34255.15478.519-394687.56213.65475.07752.54611.34510.15541.7秀20-115662.56419.65512.57677.53519.64175.05494.4秀12715100.06608.94725.07602.54578.03657.55378.6秀03245437.56180.04725.07927.54825.24400.05582.5花305163.86402.85587.57052.63972.53912.55348.6浙皮11号5501.36284.64500.07802.64639.14330.15509.6大麦与其它作物轮作的多熟制尤其是三熟制种植模式方兴未艾,如 大麦-早稻-晚稻 [7-8]㊁ 大麦-中稻-再生稻 [9]㊁ 烤烟-花椰菜-大麦 [10]等㊂本试验中,所有参试大麦品种生育期均在166d 内㊂在温州试点,浙皮25号㊁19-39和秀20-11的生育期更是分别短至125d㊁126d 和126d,可为当地麦-稻-稻 三熟制种植留出充足的茬口衔接时间㊂高产是育种者追求的永恒目标,也是农户最关注的性状之一㊂在生产成本和售价稳定的情况下,只有提高产量才能增加种植效益㊂本试验中,所有参试品种的平均产量均在5300kg㊃hm-2以上,其中,浙皮23号㊁浙皮28号㊁浙皮37号㊁秀0324㊁19-39和浙皮11号的产量更是突破5500kg ㊃hm -2㊂综合生育期㊁株高及产量表现,浙皮23号㊁浙皮28号和浙皮37号在浙北地区有较好的推广种植前景㊂大食物观是粮食安全观在新时代的发展,而保障饲料粮供给安全是大食物观下保障肉蛋奶等畜产品供给安全的基础[11]㊂大麦作为优质饲料原料,可在保障饲料粮安全方面发挥重要作用㊂随着玉米价格的快速攀升,用大麦替代玉米进行饲料加工越来越被饲料企业接受[12-13]㊂然而目前我省大麦 生产-销售-饲料加工 产业链尚不通畅,表现在(1)大麦销路完全依赖市场,农户怯于扩大种植规模;(2)饲料加工企业若加大大麦使用比例,目前我省大麦产能尚不足以满足其需求㊂因此,需政府部门加强引导与扶持,消除大麦 生产-销售-饲料加工 产业链的堵点与难点,促进大麦产业发展,进而助力粮食安全㊂参考文献:[1]㊀付霞杰,段涛,王思宇,等.云南半细毛羊7种常用能量饲料可消化粗蛋白质和有效能的评价[J].动物营养学报,2019,31(1):205-213.[2]㊀顾颖慧,杨青.大麦的饲用价值与处理方法及其在饲料生产中应用的研究进展[J].饲料研究,2022,45(17):151-155.[3]㊀巫小建,俞慧明,曾凡荣,等.二棱大麦浙皮10号青贮饲用营养品质分析[J].浙江农业科学,2020,61(9):1906-1907,1914.[4]㊀ZHOU M X.Barley production and consumption[M]//ZHANG G,LI C.Genetics and improvement of barley maltquality.Berlin,Heidelberg:Springer,2009:1-17. [5]㊀闫琰,王秀东,王济民,等. 双循环 背景下国家粮食安全战略研究[J].中国工程科学,2023,25(4):14-25.[6]㊀叶天承,陈惠哲,向镜,等.粮油多熟制种植模式研究进展[J].中国稻米,2023,29(5):17-22,27.[7]㊀倪日群,蔡康锋,岳文浩,等.温州三熟制模式下大麦品种比较试验[J].浙江农业科学,2022,63(9):1944-1946,1951.[8]㊀张帆,杨茜.大麦-双季稻轮作体系有机物料与化肥配施对大麦资源利用效率及产量的影响[J].作物学报,2021,47(12):2522-2531.[9]㊀韩秀秀,王军民,张文珍,等.中稻-再生稻-饲用大麦一年三熟栽培技术[J].耕作与栽培,2023,43(2):130-131.[10]㊀林萍.中海拔地区烤烟/花椰菜/大麦一年三熟高效栽培模式[J].云南农业科技,2016(3):50-51. [11]㊀刘长全,韩磊,李婷婷,等.大食物观下中国饲料粮供给安全问题研究[J].中国农村经济,2023(1):33-57. [12]㊀梁停停,任凤芸,刘则学.提高皮大麦在猪饲粮中饲用价值的研究进展[J].养猪,2022(2):19-22. [13]㊀曹彦宗,赵文钧,崔璐,等.大麦粉替代不同比例玉米对奶牛生产性能的影响[J].中国奶牛,2021(4):5-9.(责任编辑:张韵)。

国家重点研发种质创新及新品种选育指南1. 引言1.1 概述种质创新是指通过各种手段和技术对种子进行改良和优化，以培育出具有更强抗病性、适应性和产量的新品种。

随着农业科技的飞速发展，国家对于种质创新及新品种选育的重视程度也在不断加大。

本文将深入探讨国家重点研发项目关于种质创新及新品种选育的指南。

1.2 文章结构本文共分为五个部分，包括引言、种质创新的重要性、新品种选育流程与关键环节、技术手段在新品种选育中的应用以及结论与展望。

通过这些内容来系统地介绍国家重点研发项目关于种质创新及新品种选育的相关指南。

1.3 目的本文旨在全面了解国家对于种质创新及新品种选育工作的支持政策以及相关科学方法和技术。

同时，通过对不同环节和流程进行详细阐述，希望能够提供一个指导性参考，促进我国农业领域科学研究水平和生产效率的提升。

以上是“1. 引言”部分的内容。

2. 种质创新的重要性2.1 定义与概念种质创新是指通过收集、保育和利用种质资源，通过遗传改良方法和技术来培育出具有优异性状、抗逆性强或者其他特殊特点的新品种。

种质创新是现代农业发展中不可或缺的环节，对于提高农作物产量、品质和抗病虫害能力具有极大的意义。

2.2 种质创新对农业发展的意义种质创新在农业发展中起着至关重要的作用。

首先，种质创新可以提高农作物的产量和品质。

通过选取具有良好遗传基础的优良材料进行交配与育种，可以获得更好的后代并且增加了植物个体间的遗传多样性，从而提高了农作物的适应力和生产潜力。

其次，种质创新可以提高农作物对环境变化及病虫害等逆境的抵抗能力。

随着全球气候变暖以及各种疾病和害虫问题日益严重化，培育具有抗逆性强的新品种将成为保障农作物生产稳定性和可持续发展的重要手段。

此外，种质创新对于实现农业可持续发展也有着重要影响。

通过优化植物基因组，可以降低农药和化肥的使用量，减少对环境的污染，提高农作物品质和安全性，推动绿色农业的发展。

2.3 国家对种质创新的支持政策为了促进种质创新的发展并推动现代农业的进步，国家制定了一系列支持政策。

浙江省农业新品种选育重大科技专项总体实施方案（征求意见稿）为加快提升我省农业科技创新水平，增强农业生物种业竞争力，满足现代农业发展的需要，根据《国务院关于加快推进现代农作物种业发展的意见》和《中共浙江省委浙江省人民政府关于加快推进农业科技创新的若干意见》（浙委〔2011〕97号）精神，经研究，启动实施浙江省农业新品种选育重大科技专项（以下简称“重大专项”）。

为推动重大专项的实施，特制定本方案。

一、总体思路和主要目标（一）总体思路按照产学研融合、育繁推一体的要求，以增强育种能力为核心，以技术优势领域和特色主导产业为重点，通过体制和机制创新，集聚整合全省的育种科研力量和资源，组建粮食和十大农业主导产业的多学科跨单位育种协作攻关组，建立统一规划、合理分工、资源共享、绩效挂钩、运行高效的协作攻关机制；切实加强种业基础性和公益性研究，开展种质资源搜集、保护与开发利用研究，强化核心育种材料、生物育种方法及关键技术研究；大力推进商业化育种研究，着力培育一批现代种业企业，全面提升种业发展水平，引领和支撑我省农业转型升级和发展方式转变，进一步增强农业可持续发展能力和竞争力。

1（二）发展目标通过五年努力，形成科研分工合理、产学研紧密结合、资源集中、运行高效的育种新机制，打造一支科研创新能力强、国内领先的生物育种队伍；突破一批育种前沿性应用性关键技术，育成一批具有良好应用前景、自主知识产权和核心竞争力的优良品种；扶持一批育种能力强、生产加工技术先进、市场营销网络健全、技术服务到位、育繁推一体化的现代种业集团；建设一批标准化、规模化、集约化、机械化的种子种苗生产基地；逐步构建以企业为主体、产学研融合、育繁推一体的商业化育种技术创新体系；显著提高我省优良品种自主研发能力和覆盖率，我省生物种业科技水平总体上达到全国领先，部分领域居世界先进。

到2016年，实现以下目标：（一）建成各类动植物（畜禽、水产、竹木、花卉、茶树、果品）种质资源圃、资源库、原种保育中心等15-17个，其中国家级8-9个，发掘创制种质12000份以上，生物多样性得到有效保护，种质资源利用率明显提高。

早籼稻新品种浙1702及其栽培技术要点俞法明1　陶才生2　朱国富1　翟荣荣1　陆艳婷1（1浙江省农业科学院，杭州310021；2绍兴市舜达种业有限公司，绍兴312300）摘要：浙1702系浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所和绍兴市舜达种业有限公司以浙农82为母本、G09-38为父本杂交育成的常规早籼稻新品种，具有熟期早、株高适中、丰产性好、中抗稻瘟病、稻米适宜加工和储备等特点，2020年通过浙江省农作物品种审定委员会审定。

对品种的来源、特征特性与栽培技术要点等进行了总结。

关键词：早籼稻；浙1702；选育；特征特性；栽培技术早稻是水稻生产的重要组成部分[1]，2020年我国早稻播种面积约475万hm2，总产量约2729万t[2]。

早稻生产对提升复种指数、确保粮食面积、提高粮食总产发挥着重要的作用。

目前，早籼稻谷一般用于粮食储备，另外用于加工米粉、味精、饲料及酿酒发酵等工业，少量直接作口粮[3]。

由于早稻种植区主要分布于长江中下游双季稻生产区，该区域光温资源有限，双季稻生长衔接紧张，早稻生产受制于晚稻，生产中对早稻生育期的要求一般相对较高，因此熟期早兼具适宜加工特性的早籼稻品种备受种植大户青睐。

为选育出熟期早和适宜加工的早籼稻，浙江省农科院以浙江大学育成的浙农82为母本，以浙江省嘉兴市农业科学院育成的G09-38为父本进行杂交，选育出浙1702，2020年5月通过浙江省农作物品种审定委员会审定，审定编号：浙审稻2020006。

1　品种特征特性1.1　农艺性状　全生育期110.0d，比对照品种中早39短2.5d，在浙江省一般作双季早稻种植。

植株较矮，分蘖力中等，剑叶挺直，叶色绿，结实率高，熟期转色好，后期青秆黄熟，谷粒椭圆型，谷壳黄亮，稃尖秆黄色，无芒，平均有效穗319.5万/hm2，株高83.4cm，穗粒数121.1粒，实粒数106.4粒，结实率88.0%，千粒重25.6g。

1.2　抗性　2018-2019年经浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所进行多点抗性鉴定，叶瘟病1.4级，穗瘟病5.5级，穗瘟损失率2.0级，白叶枯病8.0级。

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畜牧兽医学报 2023,54(6):2320-2329A c t a V e t e r i n a r i a e t Z o o t e c h n i c a S i n i c ad o i :10.11843/j.i s s n .0366-6964.2023.06.012开放科学(资源服务)标识码(O S I D ):基于转录组和蛋白组筛选乌骨鸡肤色性状候选基因刘 航,王欢欢,葛 莹,张 雷,张伟武,魏莹晖,李庆海,范京辉,章学东*(杭州市农业科学研究院,杭州310024)摘 要:旨在基于转录组和蛋白组的联合分析,筛选影响乌骨鸡肤色性状的候选基因㊂本研究在HW 1系黑羽乌骨鸡群体中选取150日龄的6只白肤个体和6只乌肤个体分为两组(w h i t e s k i n ,W S 和b l a c k s k i n ,B S)作为试验样本,采集胸部皮肤组织,提取R N A 和蛋白,进行高通量转录组测序(R N A -S e q )和蛋白组定量分析,筛选差异表达基因(d i f f e r e n t i a l l y e x p r e s s e d g e n e s ,D E G s )和差异表达蛋白(d i f f e r e n t i a l l y e x pr e s s e d p r o t e i n s ,D E P s ),并对其进行实时荧光定量P C R (R T -q P C R )验证㊁功能富集分析和蛋白互作网络的构建与分析,进一步筛选与乌骨鸡肤色性状相关的候选基因㊂结果显示,转录组共鉴定到293个D E G s ,蛋白组共鉴定到4个D E P s ,其中重叠的基因有C R P ㊁D C T ㊁G P NM B ㊂随机选择5个DE G s 进行R T -q P C R 验证,表达趋势与测序结果一致㊂富集分析表明,D E G s 和D E P s 显著富集在71个G O 条目和4个K E G G 通路中,包括黑素细胞分化㊁黑素体㊁黑素体膜和黑素原生成通路㊂接下来,通过C y t o s c a p e 软件的c y t o H u b b a 插件捕获到来自D E G s 和D E P s 构建的蛋白互作网络里的10个H u b 基因,这些基因主要显著富集在免疫相关G O 条目和通路中㊂进一步发现H u b 基因与黑色素相关基因可构成两个子网络,这两个子网络可通过P T P R C ㊁S O X 10㊁G P NM B ㊁C R P 基因连接在一起㊂本研究最终筛选到11个乌骨鸡肤色性状相关的候选基因(S O X 10㊁E D N 3㊁E D N R B 2㊁M L A N A ㊁O C A 2㊁D C T ㊁G P NM B ㊁A S I P ㊁R A B 38㊁P T P R C ㊁C R P ),其可能在黑色素合成中起关键作用㊂总之,该研究可为今后探究乌骨鸡肤色性状的分子调控机制和分子育种改良提供理论依据㊂关键词:乌骨鸡;肤色;转录组;蛋白组;黑色素;蛋白互作网络中图分类号:S 831.2 文献标志码:A 文章编号:0366-6964(2023)06-2320-10收稿日期:2022-11-04基金项目:杭州市农业科研重点项目(202003A 02);浙江省新品种选育重大专项(2021C 02068-9)作者简介:刘 航(1996-),男,浙江金华人,初级畜牧师,硕士,主要从事动物遗传育种工作,E -m a i l :l h o mm e @126.c o m*通信作者:章学东,主要从事畜禽遗传资源开发利用,E -m a i l :b i g z h e n g l i a n g@h o t m a i l .c o m S c r e e n i n g of C a n d i d a t e G e n e s o f S k i n C o l o r o f B l a c k -B o n e C h i c k e n B a s e d o n T r a n s c r i pt o m e a n d P r o t e o m e L I U H a n g ,WA N G H u a n h u a n ,G E Y i n g,Z H A N G L e i ,Z HA N G W e i w u ,W E I Y i n g h u i ,L I Q i n g h a i ,F A N J i n g h u i ,Z H A N G X u e d o n g*(H a n g z h o u A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s ,H a n gz h o u 310024,C h i n a )A b s t r a c t :T h i s s t u d y a i m e d t o s c r e e n t h e c a n d i d a t e g e n e s a f f e c t i n g sk i n c o l o r o f B l a c k -b o n e c h i c k e n b a s e d o n t h e c o m b i n a t i o n o f t r a n s c r i p t o m e a n d p r o t e o m e a n a l ys i s .S i x w h i t e s k i n (W S )c h i c k e n s a n d s i x b l a c k s k i n (B S )c h i c k e n s a t 150d a y s o f a ge w e r e s e l e c t e df r o m HW 1B l a c k -f e a t h e r B l a c k -b o n e c h i c k e n p o p u l a t i o n i n t h i s s t u d y.T o t a l R N A a n d p r o t e i n w e r e e x t r a c t e d f r o m b r e a s t s k i n t i s s u e ,h i g h -t h r o u g h p u t t r a n s c r i p t o m e s e q u e n c i n g (R N A -S e q )an d p r o t e o m i c s q u a n t i f i c a t i o n a n a l y s i s w e r e p e r f o r m e d .N e x t ,t h e d i f f e r e n t i a l l y e x p r e s s e d g e n e s (D E G s )a n d d i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e d p r o t e i n s (D E P s )a s s o c i a t e d w i t h t h e s k i n c o l o r of B l a c k -b o n e c h i c k e n w e r e i d e n t i f i e d ,a n d s e v e r a l D E G s w e r e f u r t h e r v e r i f i e d b y r e a l -t i m e f l u o r e s c e n t q u a n t i t a t i v e P C R (R T -qP C R ).6期刘航等:基于转录组和蛋白组筛选乌骨鸡肤色性状候选基因F i n a l l y,t h e c a n d i d a t e g e n e s r e l a t e d t o s k i n c o l o r t r a i t o f B l a c k-b o n e c h i c k e n w e r e f u r t h e r s c r e e n e d b y c o m b i n i n g f u n c t i o n a l e n r i c h m e n t a n a l y s i s a n d p r o t e i n-p r o t e i n i n t e r a c t i o n n e t w o r k (P P I)a n a l y s i s.T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t293D EG s w e r e i d e n t i f i e d i n t h e t r a n s c r i p t o m e a n d4 D E P s w e r e i d e n t i f i e d i n t h e p r o t e o m e,a m o n g w h i c h t h e o v e r l a p p i n g g e n e s w e r e C R P,D C T a n d G P NM B.W e t h e n r a n d o m l y v a l i d a t e d5D E G s u s i n g R T-q P C R,w h i c h s h o w e d t h a t R T-q P C R g e n e e x p r e s s i o n r e s u l t s w e r e c o n s i s t e n t w i t h R N A-s e q r e s u l t s.E n r i c h m e n t a n a l y s i s i n d i c a t e d t h a t t h e s e D E G s a n d D E P s w e r e s i g n i f i c a n t l y e n r i c h e d i n71G O t e r m s a n d4K E G G p a t h w a y s,i n c l u d i n g m e l a n o c y t e d i f-f e r e n t i a t i o n,m e l a n o s o m e,m e l a n o s o m e m e m b r a n e,a n d m e l a n o g e n e s i s p a t h w a y s.S u b s e q u e n t l y, 10H u b g e n e s w e r e c a p t u r e d b y t h e c y t o H u b b a p l u g-i n o f C y t o s c a p e s o f t w a r e f r o m t h e P PI n e t-w o r k c o n s t r u c t e d b y D E G s a n d D E P s,a n d t h e s e g e n e s w e r e m a i n l y e n r i c h e d i n i mm u n e-r e l a t e d G O t e r m s a n d p a t h w a y s.I t w a s f u r t h e r f o u n d t h a t H u b g e n e s a n d m e l a n i n-r e l a t e d g e n e s c o n s t i-t u t e d t w o s u b-n e t w o r k s,a m o n g w h i c h P T P R C,S O X10,G P NM B a n d C R P g e n e s c o n n e c t e d t h e t w o s u b-n e t w o r k s.I n a l l,11c a n d i d a t e g e n e s r e l a t e d t o s k i n c o l o r t r a i t o f B l a c k-b o n e c h i c k e n w e r e s c r e e n e d,i n c l u d i n g S O X10,E DN3,E DN R B2,M L A N A,O C A2,D C T,G P NM B, A S I P,R A B38,P T P R C,C R P,w h i c h m a y p l a y a n i m p o r t a n t r o l e i n m e l a n i n s y n t h e s i s p r o c e s s.I n s u m m a r y,t h i s s t u d y p r o v i d e s a t h e o r e t i c a l b a s i s f o r t h e f u t u r e e x p l o r a t i o n o f t h e m o l e c u l a r r e g u l a t i o n m e c h a n i s m a n d t h e i m p r o v e m e n t o f m o l e c u l a r b r e e d i n g i n B l a c k-b o n e c h i c k e n s k i n c o l o r t r a i t s.K e y w o r d s:B l a c k-b o n e c h i c k e n;s k i n c o l o r;t r a n s c r i p t o m e;p r o t e o m e;m e l a n i n;p r o t e i n-p r o t e i n i n t e r a c t i o n n e t w o r k*C o r r e s p o n d i n g a u t h o r:Z H A N G X u e d o n g,E-m a i l:b i g z h e n g l i a n g@h o t m a i l.c o m肤色性状是鸡的重要经济性状㊂鸡的肤色主要分为白色㊁黄色和黑色3种颜色,其中白色和黄色是市场上鸡的主要肤色类型,而黑肤性状是乌骨鸡的重要特征之一[1]㊂乌骨鸡作为我国宝贵禽类品种资源,其富含蛋白质㊁氨基酸㊁矿物质㊁乌鸡肽和微量元素等有益成分,具有丰富的营养价值及药用价值,深受消费者青睐[2]㊂乌骨鸡的肤色深浅与皮肤组织内黑色素沉积程度有关,且黑色素含量的高低直接影响其药用价值㊂相比于浅色皮肤,具有深色皮肤的乌骨鸡有更好的营养价值和药用价值[3]㊂因此,对鸡的肤色性状进行选育和改良,提高乌骨鸡皮肤组织中的黑色素含量对于乌骨鸡产业具有重要的经济价值㊂黑色素是皮肤组织中的天然色素分子,其生物合成发生在黑色素细胞的特殊细胞器黑素体中[4]㊂黑色素在机体内具有多种生理功能,包括延缓机体衰老,抗氧化和提高机体免疫力等,同时也是乌骨鸡体现其药用价值的最关键成分[5-6]㊂黑色素由酪氨酸经过一系列生化反应而生成,首先由酪氨酸酶(T Y R)催化酪氨酸生成多巴(D O P A),再进一步氧化为多巴醌(D Q),D Q可通过转变为半胱氨酰多巴,进而生成伪黑色素,也可转变为多巴色素被多巴色素异构酶(D C T)催化,最终生成真黑色素[7]㊂黑色素的复杂生成过程受到许多调控因子(小眼畸形相关转录因子(M I T F)㊁酪氨酸酶(T Y R)㊁酪氨酸酶相关蛋白-1(T Y R P1)等)以及信号通路(黑皮质素受体1(M C1R)/α-黑素细胞刺激激素(α-M S H)信号通路㊁丝裂原活化蛋白激酶(MA P K)/细胞外信号调节激酶(E R K)信号通路㊁环磷酸腺苷(c AM P)/蛋白激酶A(P K A)信号通路等)的相互调控[8-11]㊂尽管对黑色素合成的主要调控机制已经有一些认识,但仍然存在很多问题有待阐明,如正常和疾病条件下黑色素产生的不同调控机制,黑色素与免疫间的调控关系等㊂本研究通过转录组和蛋白组联合分析来筛选调控乌骨鸡肤色性状相关的候选基因,为进一步研究黑色素调控机制提供理论依据㊂1材料与方法1.1试验动物及样本采集本试验动物采用杭州市农业科学研究院自主培育的HW1系黑羽乌骨鸡,该试验群体是由江西省地方品种东乡绿壳蛋鸡和浙江省地方品种江山乌骨鸡培育而成㊂具体选育路线如下:东乡绿壳蛋鸡(公)和江山乌骨鸡(母)以1ʒ6比例配种产生F1代个体,随后F1代自交产生F2代分离群体,经过连1232畜 牧 兽 医 学 报54卷续加代扩群,稳定建系,逐步剔除杂羽个体,并开展生长性状和产蛋性能选育,最终育成HW 1系黑羽乌骨鸡群体㊂在相同的遗传背景下,HW 1系黑羽乌骨鸡群体中存在乌肤和白肤两种肤色,其中乌肤率约为70%㊂HW 1群体饲养于杭州市农业科学研究院双江实验基地,饲养期间按程序接种疫苗,允许自由采食和饮水㊂本研究从HW 1群体中选择体重等其他生产性状基本一致的6只白肤和6只乌肤健康个体分为两组作为试验样本㊂试验个体于150日龄屠宰,屠宰前12h 内禁食㊁自由饮水㊂屠宰后,剔除试验个体胸部羽毛,用75%酒精消毒,采集胸部皮肤组织样,R N a s e -f r e e水冲洗干净后于液氮中保存㊂随后,将每组中两个个体的皮肤组织等量混合为一个混合样本,共6个混合样本,即3个白肤组混合样本(w h i t e s k i n ,W S )㊁3个乌肤组混合样本(b l a c k s k i n ,B S),送至北京百迈客生物科技有限公司,进行转录组测序和蛋白组检测㊂1.2 转录组测序和蛋白组检测使用T r i z o l 法提取样本的总R N A ,通过N a n o -D r o p N D -2000(A g i l e n t )对总R N A 的纯度及浓度进行检测㊂将合格的R N A 样品进行c D N A 文库的构建,并在I l l u m i n a N o v a s e q 6000平台上进行双端测序㊂利用S e q P r e p [12]软件对ra w r e a d s 进行质控,T o pH a t 2[13]软件将质控后的c l e a n r e a d s 比对到鸡(G a l l u s g a l l u s )的参考基因组上,C u f f l i n k s [14]软件完成转录本的拼接㊁表达定量,获得原始的基因表达量数据㊂使用总蛋白提取试剂盒和B r a d f o r d 蛋白浓度测定试剂盒对样本进行蛋白的提取和浓度定量㊂利用同位素标记和绝对定量(i s o b a r i c t a gs f o r r e l a t i v e a n d a b s o l u t e q u a n t i f i c a t i o n ,i T R A Q )技术标记肽段,在质谱仪中进行L C -M S /M S 分析㊂1.3 D E G s 、D E P s 筛选及功能富集分析使用R 语言(v e r s i o n 4.1.2),通过R 包D E S e q2[15]对基因表达量数据进行标准化和差异分析,差异表达基因(d i f f e r e n t i a l l y e x pr e s s e d g e n e s ,D E G s )筛选的阈值为矫正的P 值(P _a d ju s t )<0.05和|l o g 2F o l d -C h a n g e |ȡ0.58㊂利用t 检验对两组样本间蛋白表达量进行检验,差异表达蛋白(d i f f e r e n t i a l l y e x p r e s s e d p r o t e i n s ,D E P s )筛选的阈值为P <0.05和|l o g 2F o l d -C h a n g e |ȡ0.58㊂合并D EG s 和D E P s ,并通过在线网站D A V I D [16]进行G O 功能富集和K E G G 信号通路分析,P <0.05为显著富集的阈值㊂1.4 荧光定量P C R 验证随机选择出5个D E G s (C R P ㊁E DN 3㊁G P NM B ㊁P R DM 10㊁S P O U T 1),使用G A P DH 作为内参基因进行实时荧光定量P C R (R T -qP C R )的验证㊂利用N C B I P r i m e r -B L A S T (h t t ps :ʊw w w.n c b i .n l m.n i h .g o v /t o o l s /pr i m e r -b l a s t /)在线工具设计引物(表1),引物由北京擎科生物科技有限公司合成㊂荧光定量P C R 反应体系如下:上㊁下游引物各0.4μL ,c D N A 模板4μL ,酶M i x 10μL ,d d H 2O 5.2μL ;反应程序为:95ħ预变性30s ;95ħ变性10s ,60ħ退火30s ,72ħ延伸30s,40个循环㊂采用2-ΔΔC t方法计算D E G s 的相对m R N A 表达量,并通过t 检验进行统计分析㊂表1 R T -qP C R 引物信息T a b l e 1 T h e R T -q P C R p r i m e r s i n f o r m a t i o n 基因G e n e引物序列(5'➝3')P r i m e r s e qu e n c e 扩增长度/b pA m p l i f i c a t i o n l e n gt h C R PF :C CG A G T T C T G G C T C A A C G GR :C C C C C G T G A A C G A G T T G T A G 144E D N 3F :A C A A A G A C A A G G A G T G C G T C T R :G C C C G T A G A T C T C T T G C C T C125G P NM B F :C G G T G C C A C T A C A T C T C A C A R :C A G C G A C G A A G T G G G T G T T A 112P R DM 10F :G A G C T A C C T C C A A G C A T C C G R :C A G A C T G G A G G G G T G G C T A T110S P O U T 1F :G G T G T T A G A T C G G C C A A G C AR :A C A C C A C A G T G C C T T T T C G T A 164G A P DHF :TG A T G C C C C C A T G T T T G T G A R :T G G C A T G G A C A G T G G T C A T A13622326期刘航等:基于转录组和蛋白组筛选乌骨鸡肤色性状候选基因1.5D E G s㊁D E P s蛋白互作网络构建及可视化利用在线数据库S T R I N G[17]构建D E G s和D E P s的蛋白互作网络(p r o t e i n-p r o t e i n i n t e r a c t i o n n e t w o r k,P P I),并通过C y t o s c a p e软件可视化,同时也对黑色素相关G O条目和通路中的候选基因构建P P I网络,进一步筛选黑色素相关的候选基因㊂利用c y t o H u b b a[18]插件的10种算法(M C C㊁D M N C㊁M N C㊁D e g r e e㊁E P C㊁B o t t l e N e c k㊁E c C e n t r i c i t y㊁C l o s e-n e s s㊁R a d i a l i t y㊁B e t w e e n n e s s)计算出各算法中排名前30的基因,并将重叠次数排名前10的基因作为网络的H u b基因,最后将黑色素相关的候选基因和网络H u b基因合并构建P P I网络,并进行可视化与分析㊂2结果2.1D E G s㊁D E P s筛选原始转录组测序数据经过质控㊁比对和定量后,平均获得2.75ˑ107条c l e a n r e a d s,平均注释效率为92.15%,最终获得19272个基因的m R N A表达量㊂样本蛋白的质谱分析结果经过定量后获得3253个基因的蛋白表达量㊂利用D E S e q2包进行基因表达量差异分析,共鉴定出293个D E G s,其中有238个基因表达量上调,55个基因表达量下调㊂对两组样本的蛋白表达量进行t检验得到4个D E P s,其中3个基因的蛋白表达量上调,1个基因的蛋白表达量下调(图1)㊂在D E G s和D E P s联合分析中,有3个基因(C R P㊁D C T㊁G P NM B)是重叠的,且这3个基因的m R N A和蛋白表达趋势也相同(表2)㊂2.2荧光定量P C R验证对随机选择的5个D E G s进行R T-q P C R验证,如图2所示,4个基因(C R P㊁E D N3㊁G P NM B㊁P R D M10)在B S组表达量上调,1个基因(S P O U T1)在B S组表达量下调,其表达量变化趋势与转录组测序结果一致㊂表2D E G s和D E P s重叠的基因T a b l e2O v e r l a p g e n e s b e t w e e n D E G s a n d D E P s基因G e n e 基因差异倍数l o g2F C校正后P值P_a d j u s t调控R e g u l a t i o n蛋白差异倍数l o g2F CP值P_v a l u e调控R e g u l a t i o nC R P4.857.63ˑ10-26u p1.530.021u pD C T5.842.39ˑ10-5u p0.790.009u p G P NM B1.887.60ˑ10-14u p1.190.022u pA.差异表达基因的火山图;B.差异表达蛋白的火山图A.V o l c a n i c m a p o f d i f f e r e n t i a l l y e x p r e s s e d g e n e s;B.V o l c a n i c m a p o f d i f f e r e n t i a l l y e x p r e s s e d p r o t e i n s图1B S组和W S组的差异表达基因和差异表达蛋白火山图F i g.1V o l c a n i c m a p s o f d i f f e r e n t i a l l y e x p r e s s e d g e n e s a n d d i f f e r e n t i a l l y e x p r e s s e d p r o t e i n s b e t w e e n B S a n d W S g r o u p s3232畜牧兽医学报54卷*.表示差异显著(P<0.05);**.表示差异极显著(P<0.01) *.I n d i c a t e s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s(P<0.05);**.I n d i c a t e e x-t r e m e l y s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s(P<0.01)图2D E G s在B S组和W S组中的R T-q P C R验证F i g.2R T-q P C R v e r i f i c a t i o n o f D EG s i n B S a n d W S g r o u p s2.3D E G s、D E P s的功能富集分析将D E P s和D E G s进行合并,共有294个差异表达基因㊂通过在线网站D A V I D进行G O功能富集和K E G G信号通路分析,获得71个显著的G O 条目(49个生物学过程(b i o l o g i c a l p r o c e s s,B P), 12个细胞组分(c e l l u l a r c o m p o n e n t,C C),10个分子功能(m o l e c u l a r f u n c t i o n,M F))和4个显著的K E G G通路(图3)㊂显著的G O条目和K E G G通路主要与免疫系统相关(如免疫系统过程㊁炎症反应㊁免疫反应㊁C y t o k i n e-c y t o k i n e受体相互作用等)㊂其中有4个G O条目(黑素细胞分化㊁肽基酪氨酸磷酸化的正向调节㊁黑素体和黑素体膜)和1个K E G G通路(黑素原生成通路)与黑色素生成相关,包括17个基因,分别为O C A2㊁E DN3㊁S O X10㊁P T P R C㊁H C L S1㊁P T K2B㊁C D3E㊁T F R C㊁D C T㊁M L A N A㊁R A B38㊁R A B17㊁E DN R B2㊁P R K C B㊁C R E B3L1㊁T C F7和A S I P(表3)㊂然而DE G s和D E P s重叠基因中的C R P和G P NM B未富集到黑色素相关通路中,但由于C R P和G P NM B都与黑色素合成相关,因此在后续P P I网络构建中依然加入了C R P和G P NM B㊂表3与黑色素相关的显著G O条目和K E G G通路T a b l e3S i g n i f i c a n t G O t e r m s a n d K E G G p a t h w a y s a s s o c i a t e d w i t h m e l a n i n富集类型E n r i c h m e n t t y p e条目/通路T e r m/P a t h w a yP值P_v a l u e基因G e n eB P黑素细胞分化0.029OC A2㊁ED N3㊁S O X10B P肽基酪氨酸磷酸化的正向调节0.036P T P R C㊁HC L S1㊁P T K2B㊁C D3EC C黑素体0.003T F R C㊁D C T㊁M L A N A㊁R A B38㊁R A B17 C C黑素体膜0.012O C A2㊁D C T㊁R A B38K E G G黑素原生成0.025E D N R B2㊁D C T㊁P R K C B㊁C R E B3L1㊁T C F7㊁A S I P2.4蛋白互作网络分析通过在线数据库S T R I N G构建了D E G s和D E P s的蛋白互作网络,其中与黑色素通路相关的基因位于网络外围(图4A)㊂将C R P㊁G P NM B以及黑色素相关通路中的基因一起构建P P I网络,结果显示D C T基因明显处于网络中心位置,表明D C T对乌骨鸡皮肤组织的黑色素沉积起关键作用,同时发现C R E B3L1㊁R A B17和T C F7在网络中没有互作关系(图4B),故不考虑C R E B3L1㊁R A B17和T C F7作为乌骨鸡肤色性状的候选基因㊂随后基于c y t o H u b b a插件中的10种算法,得到了P P I 网络里的10个H u b基因(P T P R C㊁M Y O1G㊁C C L I10㊁I T G B2㊁M P E G1㊁M Y O1F㊁R A C2㊁V C A M1㊁Z A P70㊁G P R174)㊂将H u b基因㊁黑色素相关基因以及G P NM B和C R P相连,发现整个P P I网络可以划分成两个子网络㊂这两个子网络可通过P T P R C㊁S O X10㊁G P NM B㊁C R P基因相联系,表明这些基因也可能在黑色素合成中扮演重要作用(图4C)㊂总之,共筛选得到11个黑色素相关的候选基因,包括S O X10㊁E D N3㊁E D N R B2㊁M L A N A㊁O C A2㊁D C T㊁G P N M B㊁A S I P㊁R A B38㊁P T P R C㊁C R P㊂3讨论HW1系黑羽乌骨鸡具有相同的遗传背景,生产性能等方面均匀度较高,群体的肤色性状保留了一定程度的表型分离,其中HW1系乌骨鸡群体的乌肤程度相比于东乡绿壳蛋鸡要深(亮度值低),比江山乌骨鸡要略浅(亮度值高)㊂本研究以此作为试验材料,旨在揭示调控乌骨鸡肤色性状的关键基因㊂本研究在W S组和B S组鉴定到了C R P㊁D C T和G P NM B基因的m R N A和蛋白均呈现显著的上调423252326期刘航等:基于转录组和蛋白组筛选乌骨鸡肤色性状候选基因图3显著富集的G O条目和K E G G通路F i g.3S i g n i f i c a n t l y e n r i c h e dG O t e r m s a n d K E G G p a t h w a y s畜 牧 兽 医 学 报54卷A.D E G s 和D E P s 的蛋白互作网络;B .黑色素相关基因的蛋白互作网络;C .网络H u b 基因与黑色素显著相关候选基因的蛋白互作网络㊂蓝色代表黑色素相关基因,红色代表H u b 基因,绿色代表其余的D E G s 和D E P s,线条粗细代表互作关系的强弱A.P P I n e t w o r k o f D E G s a n d D E P s ;B .P P I n e t w o r k o f g e n e s a s s o c i a t e d w i t h m e l a n i n ;C .P P I n e t w o r k b e t w e e n H u b g e n e sa n d c a n d i d a t e g e n e s s i g n i f i c a n t l y a s s o c i a t e d w i t h m e l a n i n .B l u e r e pr e s e n t s c a n d i d a t e g e n e s a s s o c i a t e d w i t h m e l a n i n ,r e d r e -p r e s e n t s H u b g e n e s ,g r e e n r e p r e s e n t s t h e r e m a i n i n g D E G s a n d D E P s ,a n d t h e l i n e t h i c k n e s s r e p r e s e n t s t h e s t r e n gt h o f t h e i n t e r a c t i o n r e l a t i o n s h i p图4 基因的蛋白互作网络图F i g .4 P r o t e i n -p r o t e i n i n t e r a c t i o n (P P I )n e t w o r k o f ge n e s 表达,其相同的表达模式表明C R P ㊁D C T 和G P NM B 可能是直接影响乌骨鸡肤色性状的关键基因㊂D E G s 和D E P s 功能富集分析结果主要与免疫调控相关,同时P P I 网络的10个H u b 基因也主要富集在免疫相关的G O 条目和通路中,包括负胸腺T 细胞选择㊁阳性胸腺T 细胞选择㊁先天免疫反应等生物学过程,这表明B S 组和W S 组间的差异表达基因大部分与免疫相关㊂研究表明,黑色素具有免疫调节的功能,但其潜在的调控机制尚未完全阐明[19]㊂黑色素细胞被感染性法氏囊病毒(I B D V )感染后,其免疫基因如T L R 3㊁T L R 7㊁I L 15㊁S L A 2等会呈现较高的表达量,表明黑色素细胞可以发挥重要的先天免疫调节作用[20]㊂本研究发现,P T P R C 基因既是整个蛋白互作网络的H u b 基因,又是黑色素生成相关的候选基因(图3C )㊂P T P R C 基因编码C 型蛋白酪氨酸磷酸酶受体(P T P ),是一种由成熟白细胞表达的跨膜受体,在黑色素瘤转移和调节T 细胞和B 细胞的抗原受体信号中发挥重要作用[21-22]㊂有研究在对黑色素瘤差异表达基因分析中发现,以P T P R C 基因为标准后,黑色素瘤相关的功能基因表达量上调两倍,表明P T P R C 基因在黑色素瘤形成的过程发挥重要作用[23]㊂在11个黑色素相关的候选基因中,有10个基因(S O X 10㊁E DN 3㊁E DN R B 2㊁M L A N A ㊁O C A 2㊁62326期刘航等:基于转录组和蛋白组筛选乌骨鸡肤色性状候选基因D C T㊁G P NM B㊁A S I P㊁R A B38㊁P T P R C)已报道在黑色素合成和沉积中起重要调控功能,其中S O X10为转录因子㊂S O X10(S R Y-B o x t r a n s c r i p-t i o n f a c t o r10)已被证实是在黑色素合成过程中发挥重要作用的调节因子,对多个黑色素合成相关基因(如M I T F㊁T Y R P1㊁T Y R P2)的表达起调控作用[24]㊂Z h u等[25]发现,S O X10基因附近一个7.6k b非编码缺失导致鸡的羽毛颜色从深红色变为浅黄色,而转基因小鼠中S O X10基因上游非编码区域的缺失也导致小鼠皮肤内的色素几乎完全缺失,这些结果表明S O X10在调节黑色素合成过程中起到了关键的调控作用[26]㊂本研究中,S O X10在乌骨鸡皮肤中的m R N A表达同样显著高于白皮肤组㊂研究发现,在缺少S O X10的情况下,M I T F 无法诱导酪氨酸酶的表达,从而抑制黑色素的产生[27]㊂而M I T F是被报道在黑色素合成和沉积过程中起关键作用的转录因子,其下游靶基因包括多个黑色素合成调控基因(E D N3㊁E D N R B2㊁M L A-N A㊁O C A2㊁D C T㊁G P NM B)[8,28]㊂内皮素3(E D N3)位于20号常染色体上纤维黑色素基因座(F M)的一段420k b基因序列上,其能够与内皮素受体B亚型2(E DN R B2)特异结合促进黑色素细胞增殖[29-30]㊂M L A N A基因编码黑色素A(m e l a n A)也被称为T 细胞识别的黑色素瘤抗原1(MA R T-1),是一种与黑色素生成相关的单结构域跨膜蛋白,可与黑素体特异结构蛋白P M E L17形成复合体,促进黑色素体内部基质纤维的产生以及黑素体的成熟[31]㊂O C A2基因可编码一种黑色素体特异性跨膜蛋白,该蛋白可通过细胞内的阴离子通道来调节黑色素体内的p H,影响黑色素的合成与沉积[32]㊂K l a a s s e n等[33]利用C R I S P R基因组编辑技术对O C A2基因进行编辑形成突变体,结果发现突变体的黑色素合成降低并呈现出白化病,确定了O C A2基因在鱼类黑色素合成和沉积中起着重要作用㊂在对6种不同羽毛颜色的鸡羽毛毛囊进行转录组分析时,发现O C A2㊁G P NM B㊁S O X10等基因在黑白羽毛毛囊中都显著差异表达[34]㊂G P NM B基因编码的非转移性黑色素瘤糖蛋白B(G P NM B)与P M E L17蛋白高度同源,但在黑素体发育成熟过程中具有不同的生理作用[35]㊂研究表明,抑制G P NM B基因表达会降低黑素体中P E M L17和T R P1的表达,从而影响黑色素的生成[36]㊂W a n g等[37]发现,细胞外可溶性的G P NM B(s G P NM B)可保护黑色素细胞免受细胞毒性和氧化应激所诱导产生的黑色素生成损伤㊂本研究所筛选的候选基因中只有刺豚鼠毛色基因(A S I P)表达量下调,而A S I P蛋白可以与α-促黑素(α-M S H)竞争结合M C1R,导致M C1R诱发的级联反应阻断,下调T Y P和M I T F表达量,降低真黑色素的合成[38]㊂Y u等[39]在A S I P基因启动子区域新发现一个单核苷酸多态性(c.-1826A>T)与鸡肤色显著相关,同时该突变影响启动子活性,然而该研究中黑肤个体的A S I P基因要高于白肤个体,这与本研究不同㊂R A B38为R a b蛋白家族成员之一,该蛋白家族高度保守,且对细胞膜分泌和转运的调节起着至关重要的作用[40]㊂研究表明,R A B38负责将T Y R㊁T Y R P1和D C T从反面高尔基体网络结构(t r a n-g o l g i n e t w o r k,T G N)转运至黑色素体中,从而调控黑色素的合成[41]㊂Y u等[42]也通过m R N A表达谱和长链非编码R N A的综合分析,鉴定到R A B38作为影响鸡肤色的候选基因㊂在11个候选基因中只有C R P未明确与黑色素合成或沉积直接相关,但在本研究中该基因在B S 组和W S组中的m R N A表达量和蛋白质表达量都呈现显著的差异㊂C R P(C-反应蛋白)为一种常见的炎症标记物,其参与调控炎症因子的产生,如白细胞介素-6和肿瘤坏死因子(T N Fα),而炎症因子在黑色素合成过程中也具有关键作用,C R P可能是在黑色素合成与免疫调控中起重要作用的关键基因[43]㊂周鑫[44]通过差异表达基因分析和功能分析,发现C R P和O C A2在3个日龄段时(1㊁10㊁20日龄)鸡胫组织中都显著差异表达,同时在P P I网络中C R P 的下游基因正是O C A2基因,表明C R P可能是通过O C A2来参与黑色素生成调控的㊂4结论本研究通过结合转录组和蛋白组进行联合分析,筛选到11个与黑色素合成和沉积相关的候选基因(S O X10㊁E DN3㊁E DN R B2㊁M L A N A㊁O C A2㊁D C T㊁G P NM B㊁A S I P㊁R A B38㊁P T P R C㊁C R P),为乌骨鸡肤色性状的分子育种提供参考,其中S O X10㊁P T P R C㊁G P NM B和C R P可能参与免疫系统的调控,为进一步揭示黑色素调控机制提供理论依据㊂参考文献(R e f e r e n c e s):[1]国家畜禽遗传资源委员会.中国畜禽遗传资源志7232畜牧兽医学报54卷[M].北京:中国农业出版社,2015.C h i n a N a t i o n a l C o mm i s s i o n o f A n i m a l G e n e t i cR e s o u r c e s.A n i m a l g e n e t i c r e s o u r c e s i n C h i n a[M].B e i j i n g:C h i n a A g r i c u l t u r e P r e s s,2015.(i n C h i n e s e)[2]谢明勇,田颖刚,涂勇刚.乌骨鸡活性成分及其功能研究进展[J].现代食品科技,2009,25(5):461-465.X I E M Y,T I A N Y G,T U Y G.R e v i e w o f t h eb i o ac t i v e c o m p o n e n t s o f b l a c k-b o n e s i l k y f o w l a n dt h e i r f u n c t i o n s[J].M o d e r n F o o d S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y,2009,25(5):461-465.(i n C h i n e s e) [3]韩德平,王书祥,张媛媛,等.乌骨鸡黑色素细胞体外原代培养及鉴定[J].畜牧兽医学报,2015,46(6):949-956.HA N D P,WA N G S X,Z HA N G Y Y,e t a l.C u l t u r ea n d i d 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930㊀㊀2024年第65卷第4期收稿日期:2023-05-26基金项目:浙江省农业新品种选育重大科技专项(2021C02064-2);浙江省农业农村厅2014年度农作物种质资源保护任务 大田旱作种质资源收集及开发利用 项目;国家自然科学基金青年基金项目(32201797)作者简介:李付振(1975 ),男,河南南阳人,副研究员,博士,从事花生遗传育种工作,E-mail:fuzhenli@㊂文献著录格式:李付振,张小利,陈小央,等.高油酸食用型黑花生新品种浙黑甜1号的选育[J].浙江农业科学,2024,65(4):930-933.DOI:10.16178/j.issn.0528-9017.20240091高油酸食用型黑花生新品种浙黑甜1号的选育李付振1,张小利1,陈小央2,刘波3,厉宝仙4,何爱珍5,张泉锋6,方丽1,朱灵龙1(1.浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所浙江省数字旱粮重点实验室,浙江杭州㊀310021;2.浙江省种子管理总站,浙江杭州㊀310020;3.丽水市农作物总站,浙江丽水㊀323000;4.浙江省农业技术推广中心,浙江杭州㊀310020;5.淳安县农业农村发展服务中心,浙江淳安㊀311108;6.浙江勿忘农种业股份有限公司,浙江杭州㊀311215)㊀㊀摘㊀要:浙黑甜1号是浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所以花育51号为母本㊁云南四粒黑为父本进行有性杂交,经过多年多代选育出的高油酸食用型黑花生新品种㊂该品种具有高产稳产㊁早熟性好㊁抗病性强㊁黑色种皮㊁口感微甜等突出特性㊂2020 2021年连续2a 参加浙江省区域试验,荚果平均产量为3892.95kg㊃hm -2,籽仁平均产量为2817.30kg㊃hm -2,分别比对照小京生增产30.37%和36.27%㊂浙黑甜1号蛋白质含量27.1%,粗脂肪含量45.8%,油酸含量76.9%,油亚比(O /L)12.05,抗叶斑病㊁青枯病,中抗锈病㊂该品种于2023年12月通过国家非主要农作物品种登记,适宜在长江中下游生态区浙江春播及夏播种植㊂关键词:黑花生;新品种;浙黑甜1号;高油酸中图分类号:S512㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:0528-9017(2024)04-0930-04Breeding of new edible black peanut variety Zheheitian No.1withhigh oleic acid contentLI Fuzhen 1,ZHANG Xiaoli 1,CHEN Xiaoyang 2,LIU Bo 3,LI Baoxian 4,HE Aizhen 5,ZHANG Quanfeng 6,FANG Li 1,ZHU Linglong 1(1.Institute of Crops and Nuclear Technology Utilization,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,ZhejiangKey Laboratory of Digital Dry Land Crops,Hangzhou 310021,Zhejiang;2.Zhejiang Provincial Seed ManagementStation,Hangzhou 310020,Zhejiang;3.Lishui Crop Station,Lishui 323000,Zhejiang;4.Zhejiang Agricultural Technology Extension Center,Hangzhou 310020,Zhejiang;5.Chunᶄan County Agriculture and Rural Development Service Center,Chunᶄan 311108,Zhejiang;6.Zhejiang Wuwangnong Seeds Sharcholding Co.,Ltd.,Hangzhou 311215,Zhejiang)㊀㊀Abstract :Zheheitian No.1is a new high oleic acid edible black peanut variety,which was bred by sexualhybridization with Huayu No.51as the female parent and Yunnan Silihei as the male parent in the Institute of Crop andNuclear Technology Utilization of Zhejiang Academy of Agricultural Sciences.This variety has the outstandingcharacteristics of high and stable yield,good early maturity,strong disease resistance,black seed coat and slightly sweettaste.The average yield of pod and seed was 3892.95kg ㊃hm-2and 2817.3kg ㊃hm -2,respectively,which were30.37%and 36.27%higher than that of control variety Xiaojingsheng for two consecutive years from 2020to 2021.Zheheitian No.1has protein content of 27.1%,oil content of 45.8%,of which 76.9%is oleic acid content,and the ratio of oleic acid to linoleic acid (O /L)is 12.05.Zheheitian No.1is resistant to leaf spot and bacterial wilt,and mediumresistance to rust.The variety passed the national non-major crop variety registration in December 2023,and is suitable for spring and summer planting in Zhejiang areas of the middle and lower reaches of the Yangtze River ecological zone.Keywords :black peanut;new varieties;Zheheitian No.1;high oleic acid㊀㊀花生又名落花生㊁长寿果㊁地豆等,是一种重要的食㊁油两用型经济作物㊂花生籽仁中富含油脂和蛋白质,还含有糖类㊁膳食纤维㊁维生素以及微量元素等人体所需的多种营养物质,具有较高的营养价值和保健功能,深受消费者青睐[1]㊂我国花生年产量达1800万t左右,其中约52%用于榨油,40%左右用于各种方式的食用,花生已成为我国重要的油料和经济作物[2]㊂发达国家花生以食用为主,如美国用于食品加工的花生占70%以上,欧盟各国食用花生占90%以上[3]㊂随着人们生活水平以及对食物营养认知的提高,我国花生消费逐渐向健康㊁营养和多元化方向发展,食用花生的比例逐年提高[3]㊂随着食用型花生市场规模的日益扩大,我国花生也从油用向食用方向发展,选育优质食用型花生品种已经成为当前花生育种的主要目标之一[4]㊂黑花生种皮呈紫黑色,富含原花色素㊁花青素㊁白藜芦醇等多种生理活性成分,具有较强抗氧化能力,能有效防止氧自由基引发的多种疾病[5]㊂黑花生营养丰富,适口性好,其籽仁粗蛋白㊁粗纤维以及粗脂肪均高于普通花生,且富含人体所需的多种微量元素㊁维生素和氨基酸,具有极高的营养保健价值[6-7]㊂黑花生营养丰富㊁种植效益高,深受种植户和消费者喜欢,开发前景十分广阔㊂浙江省位于我国东南沿海,常年花生种植面积2万hm2左右,生产的花生以食用为主,极少用于榨油[8]㊂目前,浙江生产种植的黑花生品种大多从北方引进而来,难以适应南方高温高湿环境,后期易早衰,产量很低㊂针对生产实际和市场需求,浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所以花育51号为母本,云南四粒黑为父本进行有性杂交,经系谱选育结合多代定向筛选,旨在培育出高产㊁高油酸㊁优质食用型黑花生新品种,为浙江特色花生产业可持续发展提供良种和技术支持㊂1㊀选育经过1.1㊀亲本来源㊀㊀母本为花育51号,花育51号是山东省花生研究所培育的一个高油酸㊁油食兼用型小花生品种,该品种春播生育期125d左右,株型直立,结果集中,具有高产㊁优质㊁抗病抗倒性强以及籽粒商品性好等突出特点㊂父本为云南四粒黑,四粒黑是云南省广泛种植的地方品种,具有多粒荚果(3~4粒偏多)㊁品质优良㊁可溶性糖含量约5.2%,早熟性优等特点㊂1.2㊀选育经过㊀㊀2015年以花育51号为母本,以云南四粒黑为父本进行有性杂交,按照系谱法选育而成㊂选育过程如图1所示㊂图1㊀浙黑甜1号选育经过Fig.1㊀Breeding process of Zheheitian No.12015年冬季海南种植F1代,去除假杂种后混收㊂2016年春季杭州种植F2代,根据田间长势情况和室内考种,选择优良单株,并按系谱法编号㊂2016年冬季海南种植F3代,经田间优选和近红外光谱测定,筛选105个高油酸株系㊂2017年杭州海南两地种植F4和F5代,去杂去劣,继续优选㊂2018年春季杭州种植F6代,经株系鉴定㊁田间调查和室内考种,筛选早熟㊁高产㊁直立㊁荚果美观㊁具有微甜口感且种皮黑色的最优株系P51YN4BF6-191-1㊂2019年春季参加浙江省花生多点品比试验,该品系比对照小京生增产显著㊂2020 2021年参加省内区域试验及生产试验,同时开展病虫害抗性鉴定,DUS测试等试验㊂2023年完成农业农村部非主要农作物品种登记,登记号为GPD花生(2023)330125㊂2㊀特征特性2.1㊀农艺性状㊀㊀浙黑甜1号属高油酸食用型花生品种,全生育期120d左右㊂疏枝直立,连续开花,主茎高52.58cm,侧枝长57.13cm,总分枝10.29个,结果枝8.03个,单株饱果数20.54个㊂叶片中等大,932㊀㊀2024年第65卷第4期淡绿色,长卵圆形㊂荚果普通型,网纹浅,百果重170.02g,饱果率80.06%,籽仁柱形,种皮深紫色,内种皮黄色,百仁重79.67g,出仁率72.36%㊂该品种苗期㊁花期长势较强,结实性好,适宜小型农机作业,适合浙江省沙土㊁沙质壤土种植㊂2.2㊀品质性状㊀㊀2021年经农业农村部农产品及加工品质量安全监督检验测试中心(杭州)对浙黑甜1号干籽仁检测,其籽仁含油量45.8%,蛋白质含量27.1%,油酸含量76.9%,亚油酸含量6.38%,油亚比(O /L)12.05㊂2.3㊀抗病鉴定㊀㊀2020年经浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所鉴定,浙黑甜1号抗叶斑病㊁青枯病,中抗锈病㊂3㊀产量表现2020 2021年参加浙江省花生新品种多点区域试验(表1),参试新品种(系)有7个,含1个对照品种小京生㊂2020年浙黑甜1号平均荚果产量3767.85kg ㊃hm -2,平均籽仁产量2715.90kg㊃hm -2,均居参试品种(系)第4位,分别比对照小京生增产30.67%和37.16%㊂2021年续试,平均荚果产量4018.05kg ㊃hm -2,平均籽仁产量2918.70kg㊃hm -2,均居参试品种(系)第4位,分别比对照小京生增产30.10%和36.33%㊂2a 区试浙黑甜1号平均荚果产量3892.95kg ㊃hm -2,平均籽仁产量2817.30kg ㊃hm -2,分别比对照小京生增产30.37%和36.27%㊂表1㊀浙黑甜1号区域试验产量Table 1㊀Regional test yield of Zhehetian No.1年份品种试验点次荚果产量/(kg㊃hm-2)籽仁产量/(kg㊃hm-2)比对照增产/%荚果产量籽仁产量2020浙黑甜1号53767.852715.9030.6737.16小京生(CK)52883.451980.0902021浙黑甜1号54018.052918.7030.1036.33小京生(CK)53088.502140.9500平均浙黑甜1号53892.952817.3030.3736.27小京生(CK)52986.052061.0000㊀㊀2021年,浙黑甜1号同步参加浙江省花生生产试验,平均荚果产量3928.05kg ㊃hm -2,平均籽仁产量2808.45kg ㊃hm -2,分别比对照小京生增产49.70%和55.12%,表现高产稳产㊁早熟㊁抗逆性强㊁适应性广等优良特性㊂4㊀栽培技术要点4.1㊀地块选择㊀㊀浙黑甜1号适宜在我国长江中下游生态区浙江地区春播或夏播季种植,作为食用型黑花生品种推广应用㊂选择地势高㊁排水好㊁弱酸性(pH 值5.5~7.2)㊁肥力中等及以上的沙土㊁砂壤土或壤土田块种植㊂花生不耐连作,应与非豆科作物合理轮作,可有效减少连作障碍对花生产量的影响,减少病虫害的发生[9]㊂4.2㊀播期和密度㊀㊀高油酸花生品种发芽期对低温敏感,以连续5d 地表温度稳定在15ħ以上时适时抢墒播种,浙江地区春播于4月下旬至5月上旬播种为宜,夏播于6月10日前根据墒情适时早播,有利于产量提高㊂春播种植密度为120000~150000穴㊃hm -2,夏播种植密度为150000~180000穴㊃hm -2,每穴2粒种子㊂4.3㊀田间管理㊀㊀种植前对土地进行整地深翻,重施基肥,可适当添加腐熟后的农家肥,保证土壤养分充足㊂为提高发芽率减少花生苗期病害发生,播种前要做好晒种㊁拌种工作,种子可使用5g㊃kg-125%多菌灵和2g㊃kg-150%辛硫磷进行拌种[10]㊂播种后及时喷施封闭型除草剂,根据出苗情况及时查苗补苗,保证出苗率㊂开花下针期所需的水分㊁养分会大量提升,适当追肥,尤其是磷肥,以促进荚果发育㊂雨季开始后花生长势旺盛,有旺长趋势时,合理化控1~2次,间隔7~10d,防止徒长㊂生育后期可喷施0.2%磷酸二氢钾和叶面肥料,养根护叶,避免脱肥㊁早衰,影响产量[11]㊂浙黑甜1号中后期易感叶片锈病,及时喷施40%氟醚㊃己唑醇(150~225mL㊃hm -2)进行防治,连续2~3次可有效防治晚期锈病的发生㊂4.4㊀适时收获㊀㊀浙黑甜1号早熟性明显㊂生产上当地上部果枝叶片开始变黄,荚果饱满㊁纹理清晰时及时收获,防止花生落果㊁老化㊁发芽,确保丰产丰收㊂参考文献:[1]㊀杨伟强,崔凤高,张建成,等.我国鲜食花生遗传育种研究进展[J].山东农业科学,2019,51(9):184-188. 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收稿日期:2023-06-05基金项目:浙江省农业新品种选育重大科技专项项目(2021C02065-6-1);浙江省科技计划项目(2022C02016-1);浙江省公益性研究计划项目(LGN21C150007,LGN21C150008);浙江省农业科学院科技新成果示范推广项目(tg2022009)作者简介:葛明初(1971 ),男,浙江海宁人,大专,主要从事豆类蔬菜栽培技术研究及推广工作,E-mail:1173701594@㊂通信作者:左亚群(1975 ),女,浙江海宁人,本科,主要从事蔬菜栽培技术研究及推广工作,E-mail:106990651@㊂文献著录格式:葛明初,张古文,刘娜,等.菜用大豆新品种浙农17号在海宁市的农艺性状及栽培技术要点[J].浙江农业科学,2023,64(10):2438-2441.DOI:10.16178/j.issn.0528-9017.20230625菜用大豆新品种浙农17号在海宁市的农艺性状及栽培技术要点葛明初1,4,张古文2,刘娜2,冯志娟2,卜远鹏2,王斌2,龚亚明2,左亚群3∗(1.海宁市民盈蔬菜有限公司,浙江海宁㊀314419;2.浙江省农业科学院蔬菜研究所,浙江杭州㊀310021;3.海宁市马桥街道农业农村办,浙江海宁㊀314499;4.浙江农艺师学院,浙江杭州㊀310021)㊀㊀摘㊀要:浙农17号是浙江省农业科学院蔬菜研究所和浙江勿忘农种业股份有限公司联合选育的早熟菜用春大豆新品种,于2022年5月通过浙江省主要农作物品种审定委员会审定㊂2022年海宁市引入试种,其成熟期早,商品性好,品质佳,产量高,具有早熟㊁优质㊁高产等优点,有较好的推广潜力㊂为促进浙农17号在海宁地区的推广种植,本文对其试种产量表现㊁农艺性状和品质等进行了介绍,并从基地选择㊁种子处理㊁适期播种㊁杂草管理㊁科学施肥㊁病虫害防治㊁适时采收等方面介绍了其优质高产栽培技术要点㊂关键词:菜用大豆;浙农17号;农艺性状;栽培技术中图分类号:S643.1㊀㊀㊀文献标志码:A㊀㊀㊀文章编号:0528-9017(2023)10-2438-04㊀㊀菜用大豆,又称鲜食大豆,俗称毛豆,是大豆在鼓粒盛期(R6)至初熟期(R7)采收作蔬菜食用的大豆总称,属大豆的专用型品种[1]㊂菜用大豆营养丰富,特别是蛋白质㊁可溶性总糖㊁矿物质元素㊁游离氨基酸和维生素等营养成分含量较高,对满足人们膳食结构改变和提升营养状况具有重要意义,深受消费者喜爱[2-4]㊂近些年,随着我国种植业产业结构的调整,全国多个省市大力发展菜用大豆产业㊂实践证明,菜用大豆产业具有较高的经济效益,具备巨大的发展潜力和国际市场竞争力,已成为应对市场挑战和振兴我国大豆产业的重要策略之一[5-6]㊂浙农17号是浙江省农业科学院蔬菜研究所和浙江勿忘农种业股份有限公司联合选育的早熟菜用春大豆新品种,2020和2021年参加浙江省鲜食春大豆区域试验,平均产量分别为11.559t㊃hm-2和11.034t㊃hm -2,分别比对照沪宁95-1增产14.7%和10.3%,均达极显著水平,各区试点增产点率分别为85.7%和87.5%㊂2021年参加浙江省鲜食春大豆生产试验,平均产量为10.674t㊃hm -2,比对照沪宁95-1增产7.3%,增产点率为83.3%㊂浙农17号于2022年5月通过浙江省主要农作物品种审定委员会审定(浙审豆2022002)㊂海宁市于2022年引入开展试种,结果表明,该品种生长整齐一致,成熟期早,商品性好,品质佳,产量高,具有早熟㊁优质㊁高产等优点,适宜春季大棚育苗移栽和大棚或露地直播栽培㊂现将浙农17号在海宁地区的农艺性状及栽培要点总结如下㊂1㊀材料与方法1.1㊀试验设计㊀㊀试验于2022年春季在海宁市马桥街道民胜村海宁市民盈蔬菜有限公司基地进行,种植方式为露地直播㊂基地土壤肥力中等,土壤pH 值6.8,有机质含量44.2g㊃kg -1,全氮含量2.3g㊃kg -1,有效磷含量6.6mg ㊃kg -1,速效钾含量136.0mg ㊃kg -1㊂小区面积360m 2,畦宽0.9m,沟宽0.3m,深0.3m,打孔穴播,每畦种植2行,每穴留苗2株,随机区组排列,3次重复,四周设保护行,对照品种为沪宁95-1㊂1.2㊀田间管理1.2.1㊀土地整地与施肥㊀㊀试验田于3月5日机械翻耕,翻耕前均匀撒施商品有机肥12000kg㊃hm-2和氮磷钾三元复合肥(N15%,P2O515%,K2O15%)300kg㊃hm-2作基肥㊂3月10日旋耕㊁开沟作畦,平整畦面后待播㊂1.2.2㊀适时播种㊀㊀3月15日播种,打孔穴播,穴深3~4cm,每穴播3~4粒种子,埋土1~2cm,播种前用多菌灵进行种子包衣,预防土传病害㊂播种完成后,用90%乙草胺9000mL㊃hm-2兑水450kg均匀喷洒畦面进行土壤封闭㊂1.2.3㊀杂草和水肥管理㊀㊀出苗后,及时查缺补苗,幼苗高5~6cm㊁第1片真叶出现时定苗,每穴留苗2株㊂日常田间杂草管理采取人工除草方式,植株3片真叶时人工中耕1次,中耕深度3cm㊂苗期不追肥,开花期追施氮磷钾三元复合肥(N15%,P2O515%,K2O 15%)225kg㊃hm-2㊂苗期不浇水,开花后天气干旱时及时浇水,田间有积水时及时排水,田间持水量保持在80%左右,避免土壤过干或过湿对豆荚鼓粒造成危害㊂1.2.4㊀病虫害防治㊀㊀整个生育期,根据田间虫害危害情况,使用吡虫啉㊁四聚乙醛㊁甲维盐㊁茚虫威等药剂防治蚜虫㊁蜗牛㊁斜纹叶蛾㊁豆荚螟等害虫;根据植株田间发病情况,选用阿米西达㊁百菌清㊁甲霜灵㊁克霉灵等药剂防治根腐病㊁立枯病㊁炭疽病㊁霜霉病等病害㊂1.3㊀测定方法参照金晖等[7-9]的方法,记载播种期㊁出苗期㊁开花期㊁结荚期㊁鼓粒期㊁成熟期等发育时期㊂在最佳采摘期,每小区随机选取100m2测产,并折算为公顷产量;同时,每小区取10株发育正常的植株测量株高㊁有效分枝数㊁主茎节数㊁单株有效荚数㊁百荚鲜重和百粒鲜重等农艺性状㊂口感品尝先将豆荚在煮沸的纯净水中煮5min,捞出后放入常温纯净水进行冷却,之后进行品尝㊂1.4㊀数据分析㊀㊀采用Excel2010和软件SPSS16.0进行统计分析㊂2㊀结果与分析2.1㊀产量比较㊀㊀测产结果表明,浙农17号平均产量为10.505 t㊃hm-2,沪宁95-1平均产量为9.433t㊃hm-2,浙农17号比沪宁95-1增产11.4%㊂2.2㊀生育期比较㊀㊀田间调查结果表明(表1),3月15日播种,两个品种均为3月24日出苗;浙农17号4月23日开花,沪宁95-14月21日开花,浙农17号比沪宁95-1晚2d;结荚期和鼓粒期,浙农17号均比沪宁95-1晚2d;采收期,浙农17号比沪宁95-1晚3d;全生育期,浙农17号为75d,沪宁95-1为72d,浙农17号比沪宁95-1晚3d;两者均属早熟品种㊂表1㊀浙农17号与沪宁95-1生育期比较品种播种期(月-日)出苗期(月-日)开花期(月-日)结荚期(月-日)鼓粒期(月-日)采收期(月-日)生育期/d浙农17号03-1503-2404-2305-0805-1806-0775沪宁95-1(CK)03-1503-2404-2105-0605-1606-04722.3㊀农艺性状比较㊀㊀由表2可知,浙农17号株高35.1cm,主茎节数10.3节,有效分枝数3.3个,单株有效荚数32.4个,百荚鲜重282.5g,百粒鲜重76.3g,标准荚长和荚宽分别为5.6cm和1.3cm,整体农艺性状优于沪宁95-1㊂表2㊀浙农17号与沪宁95-1农艺性状比较品种植株高度/cm主茎节数有效分枝数单株有效荚数百荚鲜重/g百粒鲜重/g标准荚长/cm标准荚宽/cm浙农17号35.110.3 3.332.4282.576.3 5.6 1.3沪宁95-1(CK)31.79.6 3.026.7260.272.5 5.3 1.2 2.4㊀品质与口感比较㊀㊀根据农业农村部农产品及转基因产品质量安全监督检验测试中心(杭州)2020 2021年检测结果(表3),浙农17号可溶性总糖含量2.1%,淀㊀㊀表3㊀浙农17号与沪宁95-1品质与口感比较品种年份可溶性总糖含量/%淀粉含量/%水分含量/%蛋白质含量/%脂肪/%口感品质鉴定总分浙农17号2020 2.7 4.867.611.7 4.2甜脆83.3 2021 1.4 5.969.411.1 6.2甜脆82.9平均 2.1 5.468.511.4 5.283.1沪宁95-1(CK)2020 3.0 3.575.09.1 3.9甜脆84.1 2021 2.3 5.070.29.6 4.4甜脆79.6平均 2.7 4.372.69.4 4.281.9粉含量5.4%,水分含量68.5%,蛋白质含量11.4%,脂肪含量5.2%,品尝口感为甜脆,食味评价平均得分83.1㊂除了可溶性总糖和水分含量两个指标低于沪宁95-1外,其余各项指标均高于沪宁95-1㊂2.5㊀抗病性比较㊀㊀经国家大豆改良中心2020 2021年检测(表4),浙农17号大豆病毒病SC15株系病情指数43,为中感,沪宁95-1病情指数45,为中感,两者抗性一致;浙农17号SC18株系病情指数36,为中感,沪宁95-1病情指数27,为中抗,浙农17号抗性略差于沪宁95-1㊂表4㊀浙农17号与沪宁95-1抗病性比较品种年份大豆病毒病SC15株系大豆病毒病SC18株系病情指数抗性病情指数抗性浙农17号202036中感38中感202150中感34中抗平均43中感36中感沪宁95-1(CK)202040中感29中抗202150中感25中抗平均45中感27中抗3㊀栽培技术要点3.1㊀基地选择㊀㊀菜用大豆忌雨水浸泡,海宁地区早春容易遭遇连续低温阴雨天气,因此,需选择前茬无豆科作物种植且地势较高㊁排灌方便㊁无遮阴㊁无禽畜危害㊁肥力较好的地块㊂近几年,土壤残留除草剂对菜用大豆出苗危害严重,特别是前茬为玉米㊁高粱等单子叶植物时更要注意,需详细了解除草剂的使用次数和剂量,避免土壤残留除草剂造成危害㊂另外,为防止菌核病发生,一般不选择前茬为菊科类作物如向日葵等的地块轮作[9]㊂3.2㊀种子处理㊀㊀选择符合良种标准和要求的种子,播种前精选种子,剔除小粒㊁瘪粒㊁病斑粒㊁虫食粒及杂质㊂条件允许的话可晒种1~2d,杀死种皮表面的部分病原微生物㊂同时,可选用大豆种衣剂拌种,预防土传病害或土壤害虫危害,确保出苗质量㊂3.3㊀适期播种㊀㊀播种选择日均气温15ħ以上进行,地温低于7ħ不宜播种㊂海宁地区一般3月初进行整地,深翻㊁旋耕㊁开沟㊁作畦㊁平整,达到面平垄直,保持土块细碎,满足备播需要,有条件的覆盖黑色地膜㊂3月上旬至3月下旬播种,最晚不要迟于4月10日㊂一般畦宽0.9~1.0m,沟宽0.2~0.3m,行距0.45~0.50m,穴距0.25~0.30m,每穴播3粒,留苗2株,每667m2播6000穴左右㊂播种时要求足墒播种,深浅一致,确保一次全苗㊂3.4㊀杂草管理㊀㊀播种后出苗前用乙草胺㊁金都尔等除草剂进行土壤封闭,可有效防除田间杂草,降低苗期草害㊂出苗后的杂草管理主要采取人工除草,也可使用大豆苗后除草剂除草[10]㊂菜用大豆田苗后除草剂主要选用精喹禾灵防治单子叶杂草和氟磺胺草醚防治双子叶杂草㊂在一年生单子叶杂草3~6叶期,每667m2使用40~60mL5%的精喹禾灵乳油兑水40~50kg进行喷雾,在多年生禾本科杂草4~6叶期,每667m2使用120~200mL5%的精喹禾灵乳油兑水40~50kg进行喷雾,喷雾时注意压低喷雾器罩口,不要喷到菜用大豆植株上㊂双子叶杂草防治方面,在菜用大豆植株1~3片复叶期㊁杂草1~ 3叶期时,每667m2使用60~120mL25%的氟磺胺草醚水剂兑水20~30kg进行喷雾,同样不要喷到菜用大豆植株上,以免造成药害㊂未铺地膜的地块最好进行中耕,中耕不但可以防除杂草,还能改善土壤结构,为根系生长提供良好环境,一般在菜用大豆植株3叶时中耕,一般中耕1~2次,中耕深度3cm㊂当植株田间封行后杂草危害降低,适当控制多年生杂草即可㊂3.5㊀科学施肥施足基肥:基肥是植株生育期的第一肥,决定着植株发芽后的营养生长,所以应满足植株开花前期对营养物质的需求㊂基肥分为有机肥和化肥,在肥力中等地块,一般每667m2使用600~1000kg 有机肥和25kg复合肥混拌后施用,肥力较低的地块施肥量多一些,肥力较高的地块,施肥量少一些[11-12]㊂追肥:根据基肥的施用种类㊁数量及植株田间长势而定㊂基肥不足㊁植株长势中等的地块,当植株生长至10~12cm时,每667m2追施复合肥10kg左右;植株长势弱的地块再追施尿素6~8kg;基肥充足且植株长势繁茂的地块不追肥或少量追施磷钾肥,以提高植株抗倒伏能力㊂开花结荚期植株需肥量最大,此时追肥一次,每667m2追施复合肥20kg左右;植株长势弱的地块同时再追施尿素8~10kg㊂鼓粒期植株需肥量也大,植株长势弱的地块每667m2追施复合肥10kg 左右㊂如果根部追肥困难,可采用叶片追肥的方式,喷施叶面肥㊂3.6㊀病虫害防治㊀㊀菜用大豆常见病害有病毒病㊁根腐病㊁炭疽病㊁疫病㊁细菌性斑点病㊁霜霉病㊁白粉病;虫害有地老虎㊁蜗牛㊁蛞蝓㊁蚜虫㊁蓟马㊁烟粉虱㊁各种叶蛾㊁豆荚螟等㊂病虫害防治主要采取预防为主㊁综合防治的策略,合理轮作,播种前清洁田园,采用种衣剂或根瘤菌拌种,及时监测田间病虫害发生情况,以便及时发现和采取防治措施㊂病虫害发生后,防治要对症下药,尽量使用高效低毒的绿色农药,轮换使用药剂,提高防治效果,同时注意药剂的使用安全间隔期,降低农药残留,提高产品的品质[13-14]㊂3.7㊀适时采收㊀㊀当植株进入鼓粒盛期,即可采摘上市㊂此时籽粒充实饱满,荚色呈青绿色,百荚鲜重㊁百粒鲜重㊁出仁率㊁可溶性糖含量均达到最高值,商品性最好,品质最优,产量最高㊂浙农17号在海宁市春播,一般出苗后75d左右达到采摘标准㊂采收最好在清晨进行,采收后及时放置于阴凉处或冷藏,有利于保障品质和商品性㊂参考文献:[1]㊀盖钧镒,王明军,陈长之.中国毛豆生产的历史渊源与发展[J].大豆科学,2002,21(1):7-13.[2]㊀陈华涛,陈新,顾和平,等.不同基因型菜用大豆品质构成因子的比较[J].江苏农业学报,2012,28(6):1508-1510.[3]㊀张红梅,顾和平,曹庆穗,等.大棚菜用大豆-水芹水旱轮作栽培技术[J].中国蔬菜,2014(10):82-83. 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