基于正交试验法的铁皮石斛原球茎生长和多糖合成研究
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铁皮石斛原胚体高效诱导、增殖及多糖含量累积的研究张宇斌; 乙引; 陈训; 罗天霞【期刊名称】《《吉林农业C版》》【年(卷),期】2012(000)008【总页数】2页(P46-47)【关键词】铁皮石斛; 愈伤组织; 原球茎; 悬浮培养【作者】张宇斌; 乙引; 陈训; 罗天霞【作者单位】贵州师范大学生命科学学院贵州贵阳 550001; 贵州省科技厅贵州贵阳 550001; 贵州师范大学生命科学学院2010级生物技术贵州贵阳 550001【正文语种】中文【中图分类】S567.239铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)珍稀濒危植物,传统名贵中药材,是石斛中的上品,具有抗衰老、抗肿瘤、滋阴清热、滋阴养胃、清热生津、润肺止咳之功效,扩张血管及抗血小板凝集等作用[3-5]。
主要分布于我国云南、贵州、广西、台湾等地。
铁皮石斛生长在年平均气温12℃~18℃、相对湿度60%~75%、林间透光度60%、无霜多雾、年降雨1100~1500mm的常绿阔叶林的树干上以及少数石灰岩上[1-2]。
自然条件下,野生铁皮石斛种子通过风媒和虫媒传播,其成活率极低,从种子萌发到进入商品阶段要经过5~7年时间,生长缓慢,而且人们过度采挖,导致铁皮石斛资源日益枯竭[7]。
铁皮石斛是珍稀名贵的中草药,由于市场需求过大,人们对野生石斛的过度采挖,致使我国的野生石斛资源遭到严重的破坏,野生石斛属植物资源已近濒危,为加强石斛的资源保护,建立无性系快速繁殖系统,提高培养材料的繁殖系数,实现大力发展药用石斛产业,从试管苗到大田栽培的中间环节成为制约铁皮石斛大面积人工栽培的主要障碍[8],铁皮石斛已被列为濒危物种[4] 。
为了缓解供求矛盾,研究者开始探索人工繁殖的方法。
目前,铁皮石斛的繁殖方法大多为常规的固体培养[6],有播种量小、周期长、劳动力消耗大、成本高等缺点,而液体悬浮培养可有效地解决这一问题,试验将对影响铁皮石斛种子液体培养的营养因子进行研究,以期为铁皮石斛的繁殖开发利用提供理论依据。
铁皮石斛原球茎多糖的诱导、提纯、理化性质及生物活性研究多糖是石斛的主要药用成分。
现代药理学研究表明,石斛多糖具有延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤、降血糖等多种药理活性。
铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl)是石斛中的极品,具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳的功效。
近年来,由于过度消耗,石斛野生资源已濒临绝迹。
由此,提出铁皮石斛胚性组织原球茎(protocorm)替代其原植株成为药源的可能性。
但迄今有关铁皮石斛原球茎多糖的研究尚未见报道。
本研究旨在优化铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的培养条件,了解铁皮石斛原球茎多糖的理化性质和生物活性。
研究结果如下:1.铁皮石斛原球茎悬浮培养诱导高含量多糖的研究(1)铁皮石斛原球茎生长、多糖积累以及营养物消耗的动态变化为筛选适合铁皮石斛原球茎的最佳培养方式,对比了固体培养和液体悬浮培养这两种培养方式,并研究了液体悬浮培养基质的营养消耗趋势,同时分析了液体培养液中pH值和电导率的变化。
结果表明:原球茎在固体培养条件下,培养60d后干重达到最大为13.40g /L,多糖产量最大值为2412.5mg/L,在液体悬浮培养条件下,干重需要50d 达到最大为17.64g/L,多糖产量最大值为3081.2mg/L,液体悬浮培养在干重量、多糖含量和多糖产量等方面优于固体培养。
在70d的周期内,悬浮培养原球茎以近“S”型曲线生长;原球茎在培养初期生长较缓慢,培养10d后原球茎生长进入快速生长期,原球茎干重量在第50d有最大值(17.64g/L),随后下降,60d后原球茎开始衰亡。
多糖的积累与原球茎生长有一定的相关性,多糖含量从10d起开始逐步增长,30d达到最大(213.5mg/g·DW),而后迅速降低。
在悬浮培养过程中,糖和磷的消耗速度较快,铵态氮优于硝态氮被吸收利用;pH值在培养前10d快速下降,随后又逐渐回升;在指数生长期,培养基中电导率降低与原球茎干重量增加之间有线性负相关性。
基于正交设计的铁皮石斛组织培养和耐盐性研究才真;刘海学;王绪【摘要】利用正交设计法研究不同浓度的蔗糖及不同浓度NAA、6-BA、KT等激素对铁皮石斛组织培养的影响,并对铁皮石斛愈伤组织、分化组织、生根苗的耐盐性进行了分析.结果表明:铁皮石斛愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+NAA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+蔗糖15g/L,分化组织增殖的最佳培养基为MS+NAA 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+蔗糖15g/L,分化苗生根最适培养基为MS+活性炭1.0g/L+NAA0.4mg/L+蔗糖30g/L.铁皮石斛愈伤组织耐盐临界浓度为0.6%,分化组织耐盐临界浓度在0.3%~0.6%之间,生根苗耐盐临界浓度在0.6%~0.9%之间.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2018(037)007【总页数】4页(P64-67)【关键词】铁皮石斛;组织培养;耐盐性;正交设计【作者】才真;刘海学;王绪【作者单位】天津农学院农学与资源环境学院,天津300384;天津农学院农学与资源环境学院,天津300384;天津农学院农学与资源环境学院,天津300384【正文语种】中文【中图分类】S682.31;S567.23+9铁皮石斛是观赏价值较高的花卉,在国际花卉市场中占有重要地位。
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)又名黑节草、云南铁皮,属于兰科多年生草本植物,是珍稀的药用植物和园艺植物,其含有石斛碱、石斛次碱和石斛宁等多种生物碱,具有滋阴清热、生津益胃、抗肿瘤、抗衰老和扩张血管的作用。
主要分布于中国安徽、浙江、福建等地区。
其茎可以入药,属补益药中的补阴药。
野生铁皮石斛多生长在高山岩石阴面或森林树干上,开花结果少,繁殖能力低,自然条件下发芽率不足5%,最终导致野生铁皮石斛濒临绝迹。
目前,生产上多用组培苗大棚栽培提供铁皮石斛产品,因大棚环境相对密闭,室内温度高、土壤水分蒸发量大,浇水追肥频繁,导致肥料中的盐分容易随水分上升到土壤耕层产生盐害,影响铁皮石斛的栽培效益[1]。
铁皮石斛多糖的研究进展作者:胡贤春郭永兵向劲松等来源:《安徽农业科学》2015年第15期摘要铁皮石斛是我国传统的名贵中药,为兰科石斛属植物铁皮石斛(D. officinale Kimura et Migo)的新鲜或干燥茎,其主要化学成分有多糖类、生物碱类和多酚类物质等,石斛多糖是主要成分之一。
在此概述近年来国内外在铁皮石斛多糖的含量、分离提取、结构分析及生物活性等领域的研究进展,为铁皮石斛多糖的进一步研究及其产业化应用提供理论依据。
关键词铁皮石斛;多糖;含量;提取方法;结构;生物活性中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2015)15-078-03Research Advances in Polysaccharides of Dendrobium officinaleHU Xianchun1, GUO Yongbing2*, XIANG Jinsong2 et al(1. College of Horticulture and Gardening, Yangtze University, Jingzhou, Hubei 434025; 2. Shennongjia Forestry Research Institute, Shennongjia, Hubei 442400)Abstract Dendrobium officinale Kimura et Migo, is widely used in tradional Chinese herbal medicine, contains a variety of chemical constituents, such as polysaccharides, alkaloids,polyphenols and so on. In this paper, the recent progresses of polysaccharide from D. officinale on content, separation and extraction, structure analysis, and biological activity were summarized,which will benefit for the further study and industrial applications of D. officinale polysaccharides.Key words Dendrobium officinale; Polysaccharides; Content; Extraction method;Structure; Biological activity铁皮石斛为兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium SW.)植物铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)的新鲜或干燥茎[1],干品称为铁皮枫斗,是石斛中的极品。
液体悬浮培养促进铁皮石斛原球茎高效诱导、增殖的研究
液体悬浮培养促进铁皮石斛原球茎高效诱导、增殖的研究
用正交设计方法对铁皮石斛原球茎具有高效增殖影响的激素(BA,NAA,KT,马铃薯汁)以及配比进行研究,结果表明:以茎段为外植体在培养基MS+BA2.0 mg/L+NAA2.0 mg/L+马铃薯汁10%+糖3%,具有很好的原球茎诱导作用,50 d后诱导率达95.20%;原球茎在1/2MS+BA2.0 mg/L+NAA1.0 mg/L+KT0.5 mg/L+糖3%的培养基上,以液体悬浮培养,原球茎增殖达49.032 g/50d.
作者:苏钛张晓南 Su Tai Zhang Xiaonan 作者单位:云南省药物研究所,云南,昆明,650111 刊名:中国野生植物资源英文刊名:CHINESE WILD PLANT RESOURCES 年,卷(期):2009 28(4) 分类号:Q943.1 关键词:铁皮石斛原球茎悬浮培养。
科研报道铁皮石斛试管苗快速生长与栽培研究及多糖含量测定上海市中药研究所(200127) 顾慧芬 忻晓君 周文婷 赵 辉铁皮石斛(D endr obium candidum Wall.ex L indl)是一种名贵的中草药,具有润喉消毒、生律益胃、清热养阴等功效,其主要成分石斛多糖具有增加机体免疫力等功能,铁皮石斛被誉为石斛的上品。
由于铁皮石斛自然繁殖力很低,自然资源日趋枯竭,国内许多科研人员进行铁皮石斛试管苗的研究[1~3]。
我们对铁皮石斛进行了快速繁殖和栽培研究,并根据文献资料[4],对铁皮石斛栽培苗与原药材进行多糖含量比较。
1 材料1.1 植物激素对铁皮石斛试管苗生长的影响试验 选用原球茎分化得到的小苗,苗高约0.5cm,2张真叶,1-2条短根。
1.2 铁皮石斛试管苗栽培试验 选用苗高4-5cm 试管苗。
1.3 铁皮石斛栽培苗与原药材多糖含量比较 多糖对照液、铁皮石斛、铁皮石斛栽培苗。
2 方法2.1 植物激素对铁皮石斛试管苗生长的影响 以1/2M S为基本培养基,以植物激素吲哚乙酸IAA、吲哚丁酸IBA不同比例进行正交试验,培养温度(25 1) C。
每天光照12h,每组试验各20瓶,每瓶10株,培养6个月。
每组随机抽取5瓶,对苗高,茎粗,叶数等进行测量取其平均值,结果见表1。
2.2 铁皮石斛试管苗栽培试验 分春秋二季进行移栽,模拟野生铁皮石斛生长的生态环境,潮湿背光,通风,温度0-30 C,早晚相对湿度80-90%,每天以上午10时直射光,其余时间20-30%散射光,以腐殖质及碳砖块为基质,对铁皮石斛试管苗进行移栽,春季苗半年后,秋季苗一年后进行统计,结果见表2。
2.3 铁皮石斛栽培苗与原药材多糖含量比较2.3.1 对照液制备 取105 C干燥至恒重的葡萄糖表1 植物激素对铁皮石斛试管苗生长的影响培养基苗高(cm)茎粗(cm)叶数叶色根系1/2M S(0,0) 3.290.224-5较绿发达1/2M S(0.1,0.1) 4.780.326-7绿发达1/2M S(0.5,0.5) 3.750.255-6较绿发达1/2M S(1,1) 3.270.234-5较绿发达1/2M S(2,2) 3.20.244较绿发达1/2M S(0.1,0) 3.50.345-6绿发达1/2M S(0.5,0) 3.250.284较绿发达1/2M S(1,0) 3.090.224较绿发达1/2M S(2,0) 3.040.23-4较绿不发达1/2M S(0,0.1) 2.870.183-4较绿发达1/2M S(0,0.5) 2.930.173-4较绿发达1/2M S(0,1) 3.020.184-5较绿发达1/2M S(0,2) 3.220.214-5较绿发达 注:上表括号内第一个数字为IAA(mg/l)浓度,第二个数字为IBA(mg/l)浓度。
一••琴••零••零••琴••琴■■琴丨••琴丨■■琴••琴丨■■琴••琴••零••琴••琴丨■■琴••琴丨■■琴••琴••零••琴••琴••琴••琴••零••零■•零■•零■•零■•琴■•琴■•琴f文章编号:1002-0659 (2018) 02-0036-05I|铁皮石斛原球茎组织培养研究进展i专题综述t张鑫!(天津创世生态景观建设股份有限公司,天津南开300000)摘要:铁皮石斛是我国传统的名贵中药材,具有很高的药用价值,其所含的主要成分为石斛多糖和生 物碱。
由于长期的采挖,自然资源日益枯竭,现阶段铁皮石斛的种苗主要通过组织培养方法获得,但 在培养过程中存在诸多问题如出苗的成本过高,幼苗移栽成活率低,工厂化生产效率低等。
鉴于以上 问题,对于铁皮石斛原球茎的研究日益广泛,原球茎中含有同石斛苗相同的药用成分,通过大规模培 养来提取,同样可以满足药材市场对石斛的需求。
本文通过对相关文献的查阅,阐述了有关铁皮石斛 原球茎的组织培养方面的研究概况。
关键词:铁皮石斛;原球组织培养;多糖中图分类号:S682.1+9 文献标识码:A铁皮石斛(■O e/zdraW M m q^dna/e Kimura et Migo)是兰科(Orchidaceae)石斜属(Dendrobium)多年生附生草本植物,因其老基外呈黑色,又名为黑节草,是名贵中药,居“中华九大仙草”之首,所含的主要成分为石斛多糖及生物碱,另外,还 有酚类、菲类、芪类、倍半萜类及香豆素等。
现 代药理研究证明石斛多糖具有抗肿瘤、增强免疫 力的功能。
但由于铁皮石斛生长环境特殊,以及 长期采挖,自然资源日趋枯竭,已被国家列为重 点保护的野生药材。
从20世纪中期开始就有关 于铁皮石斛的研究,主要涉及组织培养方法、有 效成分含量和药理作用方面的研究。
随着研究的 深人,发现铁皮石斛在组织快繁过程中存在一些 问题,例如通过组培生产出苗的成本过高,幼苗 移栽成活率低,工厂化生产效率低。
铁皮石斛原球茎悬浮培养及其多糖积累的研究
王增利;史昊;张宗申
【期刊名称】《河南农业科学》
【年(卷),期】2012(041)002
【摘要】将利用铁皮石斛种子诱导的原球茎在液体条件下培养,研究植物激素和有机添加物对原球茎增殖以及多糖积累的影响.结果表明,在N6液体培养基中附加1.0 mg/L NAA+1.0 mg/LKT+5%香蕉汁提取物+5%土豆汁提取物,最有利于铁皮石斛原球茎增殖和多糖积累,培养30 d时,原球茎鲜质量达到122.9 g/L,多糖含量在25 d时达到24.2%.结果提示,利用液体培养规模化生产铁皮石斛原球茎是可行的,是铁皮石斛大田传统栽培方式的重要替代途径.
【总页数】3页(P129-131)
【作者】王增利;史昊;张宗申
【作者单位】大连工业大学辽宁省发酵工程重点实验室,辽宁大连116034;河南省财鑫集团,河南郸城477150;大连工业大学辽宁省发酵工程重点实验室,辽宁大连116034
【正文语种】中文
【中图分类】S567.23
【相关文献】
1.中途添加不同浓度蔗糖对铁皮石斛原球茎多糖积累的影响 [J], 苏江;岑忠用;何铁光
2.蔗糖对铁皮石斛原球茎生长与多糖积累的影响 [J], 何铁光;杨丽涛;李杨瑞;王灿琴;苏江
3.几种因素对铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的影响 [J], 韦晓新;苏江;何铁光
4.外源一氧化氮(NO)对铁皮石斛类原球茎生长及多糖积累的影响 [J], 蒋天仪;卓宇;唐敏;王波
5.外源一氧化氮对铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的影响 [J], 李巧自;高素萍;张科燕;陈锋;段晶晶;蔡心怡
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