柱前衍生化高效液相色谱法测定细胞培养液中的前列腺素E2

第44卷第5期2019年10月广州化学Guangzhou ChemistryV ol. 44 No. 5Oct. 2019文章编号：1009-220X(2019)05-0047-05 DOI:10.16560/ki.gzhx.20190512柱前衍生-高效液相色谱法检测水中二甲基二硫代氨基甲酸钠马倩1,2，迟臣华3，黄晓晖3，代荣逵3，陈武帅3，唐毅1*（1. 重庆中科检测技术服务有限公司，重庆400700；2. 广州中科检测技术服务有限公司，广东广州510650；3. 湛江中科检测技术服务有限公司，广东湛江524043）摘要：建立了柱前衍生-高效液相法测定水中二甲基二硫代氨基甲酸钠（DTC）含量的方法。

水样中的DTC和钴离子柱前衍生为稳定的络合物，用乙腈复溶解后采用C18色谱柱，以乙腈/水（60/40）为流动相等度洗脱，在257 nm波长下进行检测。

结果表明，在0～100.0 mg/L范围内，DTC的质量浓度与对应的峰面积线性关系良好，方法的检出限为0.07 mg/L，DTC在水样中的平均回收率为99.3%，精密度（RSD）为2.5%。

该方法准确、可靠，操作简便，可应用于快速检测水中DTC的含量。

关键词：二甲基二硫代氨基甲酸钠；柱前衍生；高效液相色谱中图分类号：O 657.7 文献标识码：A二甲基二硫代氨基甲酸钠（DTC）是一种重要的化工产品和有机合成中间体，广泛用于橡胶硫化促进剂、杀菌剂和农药，是农药福美双、福美锌的中间体[1]。

二甲基二硫代氨基甲酸钠也是一种性能优良的重金属离子螯合剂，分子所含有N-CS2基团具有很强的配位能力，几乎能与环境中所有的过渡金属形成配合物[2-5]，二硫代氨基甲酸基的强络合力可直接沉淀化合或络合重金属离子，其络合物的强稳定性避免了重金属污染控制过程中的二次污染，在稳定或钝化环境中的重金属污染物方面，具有较为广泛的应用前景[6-8]。

国内外文献报道二硫代氨基甲酸酯（盐）类的检测方法中有GC法、GC-MS法、原子吸收法及HPLC-MS 法等[9-11]，多使用检测二硫代氨基甲酸酯（盐）的水解产物CS2，即通过酸性水解使二硫代氨基甲酸酯（盐）分解为CS2，从而检测其含量。

柱前衍生-反相高效液相色谱法1.引言1.1 概述概述部分的内容可以介绍柱前衍生-反相高效液相色谱法的背景和意义。

下面是一个概述的范例：正如我们所知，液相色谱法是一种常用的分离和检测分析技术，在化学、药学、环境科学等领域具有广泛的应用。

然而，传统的液相色谱法在某些情况下可能面临一些挑战，如分离效果不理想、分析时间较长等。

为了克服这些问题，柱前衍生-反相高效液相色谱法被提出并逐渐受到关注。

柱前衍生是指在样品处理中，在样品中引入适当的衍生试剂，通过与目标分析物发生化学反应，使其在色谱分析中具有更好的分离性能和检测灵敏度。

反相高效液相色谱法是基于分离样品中不同化学性质的分子在反相色谱柱上的亲水作用，达到分离和定量分析的目的。

柱前衍生-反相高效液相色谱法不仅可以提高色谱分析的分离效果，还能够提高检测灵敏度和减少分析时间。

这对于复杂样品的分析具有重要意义，例如药物代谢产物、环境污染物等。

通过引入适当的衍生试剂，可以有效地改善样品的分离性能，同时提高对目标分析物的响应，从而实现快速、灵敏的定量分析。

本文将对柱前衍生-反相高效液相色谱法的原理、方法和应用进行详细介绍。

首先，我们将阐述柱前衍生的基本原理和常用的衍生试剂。

然后，重点介绍反相高效液相色谱法的步骤和关键参数。

最后，我们将通过实例和应用案例来阐述柱前衍生-反相高效液相色谱法在药物分析、环境监测等领域的应用前景。

通过本文的阅读，读者将能够全面了解柱前衍生-反相高效液相色谱法的原理和实践，为他们的研究和实验工作提供参考和指导。

文章结构部分应包括以下内容：本文主要分为三个部分，即引言、正文和结论。

具体结构如下：1. 引言1.1 概述本部分将简要介绍柱前衍生-反相高效液相色谱法的研究背景和意义。

首先，说明柱前衍生技术在分析化学领域的重要性，该技术可以通过将样品与特定试剂反应生成易于分析的化合物，从而提高液相色谱分析的敏感性和选择性。

其次，介绍反相高效液相色谱法在分析化学中的广泛应用，包括药物分析、环境监测和食品安全等领域。

HPLC法测定前列腺素E_2凝胶剂的含量
佟爱东;李薇;邓兆勇
【期刊名称】《药物分析杂志》
【年(卷),期】1999(19)2
【摘要】前列腺素Ｅ２凝胶剂，商品名ＰｒｏｓｔｉｎＥＴＭ２，是比利时普强
药厂生产的阴道剂，其有效成分前列腺素Ｅ２（ＰｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎＥ２，简称ＰＧＥ２）具有引起子宫平滑肌收缩，调节子宫、阴道对其它激素刺激的反应等一系列药理作用，临床上用于引产［１，２］...
【总页数】3页(P137-139)
【关键词】前列腺素E2;凝胶剂;测定;高效液相色谱
【作者】佟爱东;李薇;邓兆勇
【作者单位】广州市药品检验所生化室
【正文语种】中文
【中图分类】R977.6;R927.2
【相关文献】
1.HPLC法测定百仙妇炎清凝胶剂中苦参碱的含量 [J], 韩忠耀;鲁利民;陆锦锐
2.RP-HPLC法测定加替沙星眼用凝胶剂含量 [J], 邓小凡;韦叶生
3.HPLC法测定复方维生素 B6凝胶剂中维生素 B6与醋酸氟轻松的含量 [J], 纪万里;要辉;沈定文
4.HPLC法测定地西泮直肠凝胶剂的药物含量及有关物质 [J], 刘燕;李蒙;高静;张慧;
郑爱萍;高秀丽
5.植物中前列腺素的研究Ⅱ.HPLC法测定薤白和分蘖葱头中前列腺素A1的含量[J], 孙启良;张雪香;谷月卿
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柱前衍生高效液相色谱法测定人血浆中尿囊素浓度刘蕾;付逸龙;殷琦;李可欣;孙春华【期刊名称】《中国新药杂志》【年(卷),期】2004(13)5【摘要】目的:建立血浆中尿囊素的浓度测定方法.方法:采用柱前衍生反相高效液相色谱法,尿囊素与2,4-二硝基苯肼(DNPH)反应生成2,4-二硝基苯腙,色谱柱为Phenomene Jx,D Luna C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),柱温为室温.流动相A为0.2%冰醋酸(用三乙胺调pH至5.0),流动相B为乙腈.梯度洗脱程序:A与B的体积比变化为0～3min 85∶15～65∶35(曲线系数为7),3～5min 65∶35～15∶85 (曲线系数为7),5～9min 15∶85～15∶85 (曲线系数为6),9～10min 15∶85～85∶15(曲线系数为6),10～15min 85∶15(曲线系数为6).PAD检测波长:340nm,流速1.0mL·min-1.内标为加替沙星.结果:在此色谱条件下,尿囊素衍生物与血浆中其他成分的分离完全,线性检测范围为2.5～40mg·L-1,最低检测浓度为2.5mg·L-1,相对回收率在99.35%～103.14%之间,日内及日间精密度RSD小于2.1%.结论:柱前衍生反相高效液相色谱法稳定、灵敏、可靠,可用于人体血浆中尿囊素浓度的测定.【总页数】4页(P435-438)【作者】刘蕾;付逸龙;殷琦;李可欣;孙春华【作者单位】卫生部北京医院临床药理基地,北京,100730;卫生部北京医院临床药理基地,北京,100730;卫生部北京医院临床药理基地,北京,100730;卫生部北京医院临床药理基地,北京,100730;卫生部北京医院临床药理基地,北京,100730【正文语种】中文【中图分类】R927.2;R641【相关文献】1.柱前衍生-高效液相色谱荧光法测定人血浆中乙酰半胱氨酸及其生物等效性研究[J], 张乐;胡岚岚;周世文;汤建林2.柱前衍生超高效液相色谱法测定人血浆中丙戊酸钠的含量 [J], 吴雪艳;庄奕筠;罗晓梅3.柱前衍生高效液相色谱法测定人血浆中17种氨基酸的含量 [J], 陈蓉;周莉;董吉;张华;缪丽燕4.柱前衍生化高效液相色谱法测定人血浆中花生四烯酸乙醇胺浓度 [J], 李晶;董志;唐柏彬;乐乐乐5.异硫氰酸苯酯柱前衍生化RP-HPLC法测定人血浆中10种氨基酸的浓度 [J], 杨智;阳利龙;祝文兵;曹靖;何周康因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

柱前衍生化高效液相色谱法测定乳酸的光学纯度
1. 前言：柱前衍生化高效液相色谱法是一种用于测定有机化合物光学纯度的分析方法，通常结合手性色谱柱使用，能够对不对称分子进行高效、准确的分离。

2. 实验原理：该方法采用柱前衍生化反应，将测试物转化为对映异构体的对应衍生体，在手性色谱柱上进行分离，最终通过高效液相色谱分析获得测试物的光学纯度。

3. 实验步骤：
（1）样品制备：将测试物加入反应溶剂中，加入反应试剂进行柱前衍生化反应。

（2）检测系统设置：使用手性色谱柱进行分离，常用的手性色谱柱包括Chiralpak AD、Chiralcel OD等。

检测设备为高效液相色谱仪，通常需要进行优化和校准。

（3）操作流程：样品注入手性色谱柱后，固定相将对映异构体分离，流经检测器进行检测，通过峰面积比值计算样品的光学纯度。

4. 实验注意事项：
（1）反应条件要严格控制，如反应试剂用量、反应时间等均需要优化。

（2）手性色谱柱的选择需根据分析物的分子结构进行选择。

（3）实验过程中应尽量避免杂质的干扰，以保证准确性和可靠性。

5. 结论：柱前衍生化高效液相色谱法是一种有效的测定有机化合物光学纯度的方法，能够实现高效、准确的分离和检测，在化学合成和制药行业等领域得到广泛应用。

柱前衍生高效液相色谱法测定二乙醇胺脱氢产物r亚氨基二乙酸和甘氨酸张蕾;段正康;朱宏文;尹科【摘要】An analytical method was developed for the determination of iminodiacetic acid ( IDA) and glycine ( Gly) , the dehydrogenation products of diethanolamine, by high performance liquid chromatography ( HPLC ) coupled with pre-column derivatization using p-toluenesulfonyl chloride ( PTSC) as the derivatization reagent. IDA and Gly reacted with PTSC in the alkaline environment ( pH 11) under 45℃ for 15 min. Then the derivatization products were analyzed by HPLC-MS. The separation was carried out on a high performance liquid chromatograph equipped with an ultraviolet detector. A VP-ODS column ( 200 mm × 4. 6 mm, 5 μm ) was employed using 0. 03 mol/L ammonium acetate (pH 5. 5)-acetonitrile (87:13, v/v) as mobile phases for isocratic elution at a flow rate of 1mL/min and detection wavelength of 235 nm. The results showed good linearities for iminodiacetic acid of 900-2100 mg/L, and for glycine of 20-100 mg/L, respectively. The linear correlation coefficients ( R2 ) were both greater than 0. 999. The limits of detection ( LODs) of IDA and Gly were 0. 0897 mg/L and 0. 0262 mg/L and the recoveries were in the range of 98. 7%-99. 3% and 98. 0%-99. 5%, respectively. The relative standard deviations ( RSDs) of IDA and Gly were in the range of 0. 89%-1. 23% and 0. 95%-1. 11% ( n=3) . The method has the characteristics of mild reaction conditions and high accuracy,and is well suitable for the determination ofIDA and Gly in industrial production.%以对甲苯磺酰氯(PTSC)为衍生剂,建立了柱前衍生高效液相色谱(HPLC)测定二乙醇胺脱氢产物中亚氨基二乙酸(IDA)和甘氨酸(Gly)含量的分析方法.IDA和Gly与衍生剂在碱性(pH 11)条件下于45℃反应15 min,进行柱前衍生,并利用高效液相色谱-质谱对衍生产物进行定性分析.衍生化产物采用VP-ODS色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,以0.03 mol/L醋酸铵溶液(pH 5.5)为流动相A、乙腈为流动相B(体积比为87:13),进行等度洗脱,流速为1 mL/min,并采用配有紫外检测器的高效液相色谱仪测定,检测波长为235 nm.该法在IDA质量浓度为900~2100 mg/L、Gly质量浓度为20~100 mg/L的范围内线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.999.IDA和Gly的检出限(LOD)分别为0.0897 mg/L和0.0262 mg/L,加标回收率分别为98.7%~99.3%和98.0%~99.5%,相对标准偏差(RSD)分别为0.89%~1.23%和0.95%~1.11%(n=3).该法具有反应条件温和、准确性高的特点,可用于工艺生产中IDA和Gly含量的测定.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2017(035)011【总页数】6页(P1165-1170)【关键词】高效液相色谱;柱前衍生;亚氨基二乙酸;甘氨酸;对甲苯磺酰氯【作者】张蕾;段正康;朱宏文;尹科【作者单位】湘潭大学化工学院,湖南湘潭411105;湘潭大学化工学院,湖南湘潭411105;湘潭大学化工学院,湖南湘潭411105;湘潭大学化工学院,湖南湘潭411105【正文语种】中文【中图分类】O658亚氨基二乙酸(IDA)和甘氨酸(Gly)是重要的化工中间体,广泛用于农药、化工、医药等领域。

2022年修订第一版（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!）产品货号：E-EL-0034c产品规格：96T/48T/24T/96T*5Elabscience 前列腺素E2(PGE2)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。

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Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测 血清、血浆或其他相关生物液体中PGE2浓度。

高效液相柱前衍生化法和高效液相荧光法测定栀子厚朴汤4种生物碱的比较庄波阳;冯芳;周娟【期刊名称】《海峡药学》【年(卷),期】2010(22)7【摘要】目的建立高效液相柱前衍生化法和高效液相荧光法测定栀子厚朴汤中4个生物碱,并比较两种方法优缺点.方法①高效液相柱前衍生化法:采用色谱柱Lichrospher C18(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(57:43)为流动相;流速:1.0mL·min-1;紫外检测器:257nm.②高效液相荧光法:采用色谱柱Lichrospher C18(250mm×4.6mm,5μm),以[10mM己烷磺酸钠用磷酸调节pH至2.5]-甲醇(85:15)为流动相;流速为1.0mL·min-1;荧光检测器:激发波长为281nm;发射波长为302nm.结果①高效液相柱前衍生化法:4个生物碱的线性范围为0.05～5μg·mL-1(r≥0.9994),平均回收率在96.2%～98.8%之间(RSD≤3.4%).②高效液相荧光法:4个生物碱的线性范围为0.025～1μg·mL-1(r≥0.9998),平均回收率在100.0%～101.4%之间(RSD≤3.0%).两种方法比较:从方法准确性、专属性、系统适应性、样品处理、峰面积的响应、检测限和定量限、流动相和色谱分离角度进行全面评价.结论两种方法准确、专属、灵敏,可用于栀子厚朴汤中4个生物碱的含量测定.与高效液相柱前衍生化法相比,高效液相荧光法更简单,灵敏度更高.【总页数】4页(P98-101)【作者】庄波阳;冯芳;周娟【作者单位】中国药科大学药物分析教研室,南京,210009;福建省药品检验所,福州,350001;中国药科大学药物分析教研室,南京,210009;福建省药品检验所,福州,350001;中国药科大学药物分析教研室,南京,210009;福建省药品检验所,福州,350001【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.柱前衍生化高效液相检测法测定桑叶中的1-脱氧野尻霉素 [J], 张旻;吴联;周乐2.高效液相柱前衍生法测定板蓝根胶囊中精氨酸的含量 [J], 王国振;王焕;陆欣3.高效液相-柱前衍生化法测定顺铂泛影葡胺微球的含量 [J], 刘永红;丁红4.OPA-FMOC柱前衍生反相高效液相测定糯米香茶叶片中的氨基酸 [J], 徐飞;谭乐和;陈鹏;朱红英;胡荣锁;张翠玲5.新型柱前衍生-高效液相荧光检测法检测水产品中河豚毒素 [J], 辛少平;岑剑伟;李来好;杨贤庆;郝淑贤;魏涯;周婉君;王子怀因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

柱前衍生高效液相色谱法（Pre-column derivatization HPLC）是一种色谱分析方法，主要用于对样品中的化合物进行衍生化处理，以提高其在色谱柱上的分离效果和检测灵敏度。

在柱前衍生高效液相色谱法中，样品首先与衍生化试剂反应，生成易于色谱柱上分离和检测的衍生物。

衍生化反应通常涉及样品中的官能团（如羟基、羧基、氨基等）与衍生化试剂的反应。

反应后的衍生物再通过色谱柱进行分离，最后用检测器（如紫外检测器、荧光检测器等）进行检测。

柱前衍生高效液相色谱法的优点包括：
1. 提高分离效果：衍生化处理可以改变样品中化合物的性质，使其在色谱柱上分离得更完全。

2. 提高检测灵敏度：衍生化处理可以增加化合物在检测器上的响应信号，从而提高检测灵敏度。

3. 增加选择性：通过选择合适的衍生化试剂，可以使某些难以分离的化合物产生不同的衍生物，从而实现选择性检测。

4. 扩大应用范围：柱前衍生高效液相色谱法适用于许多不同类型的样品，包括生物样品、食品、环境样品等。

柱前衍生高效液相色谱法在药物分析、生物分析、环境监测等领域得到了广泛应用。

然而，这种方法也存在一定的局限性，如衍生化反应可能受到反应条件、试剂纯度等因素的影响，因此需要仔细优化实验条件以确保分析结果的准确性。