果蝇唾腺染色体的观察

实验四果蝇唾腺染色体的观察引言：果蝇(Drosophila melanogaster)是一个常用的模式生物，被广泛应用于遗传学和发育生物学的研究中。

果蝇的唾腺细胞具有巨大的染色体，可用于观察染色体形态和结构的变化。

本实验旨在通过对果蝇唾腺细胞的染色体观察，探索其染色体变化的特点及遗传机制。

材料与方法：1. 实验动物：野生型果蝇(Drosophila melanogaster)。

2.实验材料：1%醋酸溶液、甘油、果蝇镜片、果蝇剪刀、显微镜、染色液（甘油涂片+1%吡溴染色液）。

3.实验步骤：a.选择成熟的果蝇，并用果蝇剪刀将头部剪下。

b.将剪下的头部放到1%醋酸溶液中，浸泡10分钟以松软组织。

c.将浸泡过的头部放在果蝇镜片上。

d.用果蝇剪刀将头部中的唾腺组织剪下，放在干净的果蝇镜片上。

e.在唾腺组织上滴加适量的甘油，并用另一块果蝇镜片横向刮过组织，将唾腺细胞均匀涂布在镜片上。

f.将涂片放入1%吡溴染色液中浸泡20分钟。

g.取出染色液，用流动自来水将镜片冲洗干净，待其自然干燥。

h.将染色后的涂片放在显微镜中观察，记录染色体的形态和数量。

结果：经过观察，果蝇唾腺细胞的染色体呈现为一串串黑色颗粒，称为染色体棒。

每一串染色体棒包含多个染色体。

染色体棒的形态呈螺旋状，长度不一，通常较短，且中间较粗，两端较细。

染色体棒之间相互平行排列，呈重叠状态。

讨论：果蝇的唾腺细胞染色体观察结果表明，果蝇染色体的形态和结构是高度有序的。

在染色体棒中，每个染色体是由DNA和蛋白质组成的，它们通过蛋白质复合物连接在一起。

染色体的形态和结构主要由蛋白质的排列和DNA的紧密程度决定。

果蝇染色体的结构与其他生物染色体的结构具有相似性。

在果蝇唾腺细胞染色体的观察中，可以看到每一串染色体棒中的染色体数量是相同的。

这是由于果蝇的染色体在有丝分裂前已经复制，每一条染色体通过同源染色单体连接在一起，形成染色体棒。

这种染色体的组织方式称为染色体粘接。

果蝇唾液腺染色体观察实验报告果蝇（Drosophila melanogaster）是一种常见的模式生物，在遗传学研究中有着重要的应用价值。

果蝇唾液腺染色体观察实验是一种常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化，为遗传学研究提供重要的数据支持。

本实验旨在通过对果蝇唾液腺细胞进行染色体观察，掌握染色体的基本结构和形态特征，为今后的遗传学研究奠定基础。

实验材料和方法。

1. 实验材料，成年果蝇、盐酸乙醇、醋酸乙酯、苏木精、酒精、冰醋酸、苏木素、甲醛、石蜡等。

2. 实验方法：（1）取一只成年果蝇，用镊子夹住果蝇的头部，将果蝇的身体用另一只镊子拔去。

（2）将果蝇头部置于盐酸乙醇中，浸泡5分钟，然后用镊子将头部转移到醋酸乙酯中，浸泡5分钟。

（3）将处理后的果蝇头部转移到苏木精中，浸泡5分钟，然后用酒精逐级脱水，最后转移到冰醋酸中浸泡5分钟。

（4）将果蝇头部转移到甲醛中，固定30分钟，然后用苏木素染色，再经过酒精逐级脱水，最后转移到石蜡中浸泡。

（5）将处理后的果蝇头部置于石蜡中，浸泡30分钟，然后取出制作切片，用显微镜观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构。

实验结果和分析。

经过实验操作，观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以看到染色体呈现出条状的形态，其中可以清晰地看到染色体的着丝粒和染色单体。

染色体的数量在观察的过程中也得到了初步的统计，一般情况下，果蝇唾液腺细胞的染色体数量为8条。

结论。

通过本次实验，我们成功观察了果蝇唾液腺细胞的染色体结构，了解了染色体的基本形态特征和数量变化。

这为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。

总结。

果蝇唾液腺染色体观察实验是遗传学研究中常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化。

本次实验的成功进行，为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。

【实验项目二】果蝇唾腺染色体的观察实验八果蝇唾腺染色体的观察〖目的和要求〗观察果蝇的唾腺染色体，学习唾腺染色体的制片方法。

〖实验原理〗果蝇唾腺染色体是果蝇幼虫期唾腺细胞核内染色线连续复制，但细胞核不分裂，而形成的多线染色体，又称为巨型染色体。

它比果蝇其它细胞的染色体长100－200倍，有1000－4000条染色体的拷贝。

这种染色体可以观察到由一个“中心”和五个臂组成(2n＝8)。

这是由于各染色体的着丝粒周围的异染色质部分相互结合在一起，形成一个“中心”，又由于同源染色体紧密配对，第Ⅱ、第Ⅲ中位着丝粒的染色体各有左右两条臂，Ｘ染色体是端着丝粒染色体，只能看到一条染色体臂，第Ⅳ染色体则呈点状，所以可见五条臂。

而且每条染色体臂上还呈现不同的横纹(band)。

根据果蝇的表现型和它的唾腺染色体上横纹染色的深浅、宽窄及其它特征可为基因与性状的关系提供一定的依据，并可作出基因的细胞学图。

所以，唾腺染色体是细胞遗传学研究的极好材料。

〖实验材料〗果蝇的三龄幼虫。

〖用具和药品〗双筒解剖镜、普通生物显微镜、解剖针、镊子、载玻片、盖玻片、1％醋酸地衣红或石碳酸品红、0.7％生理盐水、1mol·1-1HCl、蒸馏水等。

〖实验步骤〗1、取16－18℃条件下培养的果蝇三龄幼虫的雌体（鉴别见附录）置于载玻片上，滴加0.7％生理盐水。

2、双筒解剖镜下，用解剖针针尖掀住幼虫靠前端三分之一处，以固定幼虫，再用镊子或解剖针夹紧其口器的头部，用力把头部从身体中拉开。

位于幼虫前端食道两侧的唾腺便随之而出，弃去殊余部分，并剔除唾腺上黄色脂肪。

3、将唾液置于载玻片上，①滴1-2滴45％乙酸溶液于腺体上，5~7s后用滤纸小心地洗净剩余溶液。

②再滴1滴1mol/L HCL于于腺体上，30~40s后用滤纸小心地洗净剩余溶液。

③滴1滴蒸馏水于腺体上，1~2s后用滤纸吸干。

4.染色。

①滴1~2滴乳酸-乙酸-地衣红或石碳酸品红染色于腺体上，染色30~45 min（染色过程中要随时添加染色液）。

遗传实验报告果蝇唾腺染色体观察【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。

其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。

双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。

但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。

经多次复制后，形成约1000~4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100~500倍），因此又称为多线染色体。

黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。

各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。

（如右图）染色体Ⅰ为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一端游离；Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。

因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。

在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。

这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。

果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对—体细胞联会，染色体呈单倍数。

整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。

这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。

黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。

染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。

在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。

实验六果蝇唾液腺染⾊体的观察及制备实验五果蝇唾液腺染⾊体的观察及制备⼀．⽬的1．了解果蝇唾液腺染⾊体的形态学及遗传学特征。

2．习分离果蝇幼⾍唾液腺的技术。

3．掌握唾液腺染⾊体制⽚⽅法。

⼆、原理蝇、摇蚊幼⾍唾液腺细胞中的巨⼤染⾊体。

双翅⽬昆⾍的唾液腺细胞发育到⼀定阶段之后就不再进⾏有丝分裂，⽽永久停留在分裂间期。

但随着幼⾍的⽣长，唾液腺染⾊体仍不断地进⾏⾃我复制⽽且不分开，经过许多次的复制形成约1 000—4 000拷贝的染⾊体丝，合起来直径达5µm，长度达400µm，⽐普通细胞中期染⾊体约⼤100～150倍，所以⼜称为多线染⾊体（polytene chromosome）或巨⼤染⾊体（giant chromosome）。

唾液腺染⾊体的另⼀特点是体细胞中同源染⾊体处于紧密配对状态，这种状态称为“体细胞联会”。

在以后不断的复制中仍不分开，由此成千上万条核蛋⽩纤维丝唾液腺染⾊体（salivary gland chromosome）是⼀类存在于双翅⽬昆⾍，如果结合在⼀起，紧密盘绕。

所以细胞中染⾊体只呈单倍数。

⿊腹果蝇的染⾊体数⽬2n=8其中第Ⅱ、第Ⅲ染⾊体为中部着丝粒染⾊体，第Ⅳ染⾊体和第IX染⾊体为端着丝粒染⾊体。

唾液腺染⾊体形成时，染⾊体着丝粒和近着丝粒的异染⾊质区聚于⼀起形成⼀个染⾊中⼼（chromo-center），所以在光学显微镜下可见从染⾊中⼼处伸出6条配对的染⾊体臂，其中5条为长臂，l条为紧靠染⾊中⼼的很短的臂。

唾液腺染⾊体经染⾊后，呈现深浅不同，疏密各异的横纹（band）。

这些横纹的数⽬，位置，宽窄及排列顺序都具有物种的特异性。

研究认为这些横纹与染⾊体的基因是有⼀定关系的。

通过⼀定的实验⽅法使果蝇唾液腺染⾊体各臂分散开，并且使带纹、膨突等特征不受杂质影响清晰地显⽰出来，是进⾏果蝇遗传学研究的很重要的⼀个环节．果蝇唾液腺染⾊体在不同种间的共同点是染⾊体的着丝点位于⼀个染⾊区域，但不同的种类往往其染⾊体臂数⽬不同．每条染⾊体臂上分布着染⾊深浅不同、粗细各异的磺纹(band)，这些横纹的宽窄疏密程度以及排列顺序和数⽬⼜都有种的特异性和种内的差异．由此，果蝇唾液腺染⾊体近⼏⼗年来，已⼴泛⽤于种内系统发⽣和种间亲缘关系的研究中，因为种间及种内不同品系和近缘种中的遗传差异经常反映在唾液腺染⾊体的不联会、形成泡(puff)、缢虞(constriction)和间带区的伸缩性以及顶体(telomere)的形态等多⽅⾯的差异，⽽特别重要的是研究它的基因序列的差异(观察是否产⽣了例位以及染⾊体的断裂、融合和重排)．因此，⽆论从细胞遗传学的⾓度研究基因与突变性状之间的联系，还是从进化遗传遗传学⽅⾯研究染⾊体的系统发⽣，探讨种间以及近缘种间的遗传差异和⽣殖隔离的机制等，唾液腺染⾊体的分析研究都是⼗分重要的．从其横纹分布特征可对物种的进化特征进⾏⽐较分析，⽽⼀旦染⾊体上发⽣了缺失，重复，倒位。

果蝇唾液腺染色体的观察一、实验目的1)练习剖取果蝇三龄幼虫唾液腺的方法。

2)掌握制作果蝇唾液腺染色体标本的技术3)观察果蝇唾液腺染色体的形态特征。

二、实验原理1）果蝇三龄幼虫的唾液腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂。

复制后的染色单体DNA不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。

加之唾液腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般体细胞中的染色体粗1000—2000倍，长100－200倍。

2）唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。

如图。

3）由于在唾液腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心和同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。

在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称做明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。

不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。

因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。

在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区和巴尔比尼氏环，其富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。

在个体发育的不同阶段，疏松区或巴尔比尼氏环在染色体上出现的部位不同，据此研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。

三、器具和生物实验生物：果蝇的三龄幼虫；器具：双筒解剖镜、显微镜、镊子、解剖针，载玻片、盖玻片实验试剂：醋酸洋红染液、蒸馏水、lNHCI。

四、实验步骤1）准备发育充足、肥大的三龄幼虫（选择在低温下（16°C-18°C培养下，充分发育但尚未化蛹但活动十分活跃的幼虫）；2）剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴蒸馏水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，置于载玻片上。

果蝇唾腺染色体标本的制作和观察一、实验目的1、练习果蝇幼虫唾腺的分离技术；2、学习制作唾腺染色体标本的方法；3、观察、识别果蝇唾腺染色体的特征。

二、实验原理果蝇幼虫唾腺的细胞核非常大，唾腺染色体比其他细胞染色体大200多倍。

由于重复复制后的众多染色线没有分开，一条染色体内含有染色体线多达千条以上，是通过核内有丝分裂形成的多线染色体。

一般来说，多线染色体是处于永久性前期中的一种体细胞染色体配对形式，普遍存在于双翅目昆虫某些物种的幼虫唾腺细胞内。

唾腺染色体的特征：巨大；体细胞配对，染色体只有半数（n）；各染色体着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；有深浅不同、疏密各别的横纹。

唾腺染色体经染色后出现的横纹的数目和位置常常恒定，标志着物种的特征。

当染色体上有结构变异，如缺失、重复、倒位、易位等，很容易在唾腺染色体上鉴别。

例如：果蝇Ⅰ号染色体上16A区中有六条横纹的是正常复眼，有12条横纹的是棒状眼，有18条横纹的是加倍棒状复眼。

三、实验材料果蝇三龄幼虫；解剖镜，显微镜，镊子，解剖针，载玻片，盖玻片，吸水纸，生理盐水，醋酸洋红四、实验步骤1、幼虫培养置于16-18℃下饲养，当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前，即为三龄幼虫，此时虫体肥大，便于解剖，是制备唾腺染色体的最理想时期。

2、幼虫的解剖将载玻片置于解剖镜下，滴一滴生理盐水，将幼虫置于其中，左手持解剖针按住幼虫前端1/3处，固定幼虫。

右手持针按住幼虫头部正中，快速用力向右拉，把头部从身体拉开，腺体即随之而出。

唾腺为半透明小囊状，其上附有脂肪带，食道两侧各一个。

找到唾腺后尽可能把腺体上的脂肪剔除。

3、染色前处理清除残体，使载片上只留下唾腺。

4、酸解：把腺体放入1N HCl中浸泡2-3分钟，dH2O洗3次。

5、染色滴上几滴醋酸洋红于唾腺上，染色30分钟，染色时用镊子将唾腺稍捣碎。

6、压片在载片上加盖玻片，盖片上覆盖一吸水纸，然后以拇指适当用力压片，将唾腺细胞核压破，以染色体伸展而不破碎为好。

实验果蝇唾腺染色体的制备与观察一、实验目的1. 练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法2. 观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征二、实验原理1．果蝇是双翅目昆虫，幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的唾液腺染色体；2．唾液腺染色体不断地进行自我复制而不分开，经过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝，合起来达5mm宽，400mm长，比普通中期相染色体大得多（约100～150倍），所以又称为多线染色体；3．唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。

三、实验材料与器具•三龄幼虫•0.9%生理盐水•改良苯酚品红 1N盐酸•解剖镜解剖针吸水纸四、实验步骤(1)剥离唾腺在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。

每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。

果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，左手持解剖针按压住虫体后端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。

唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。

去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。

(2)染色：吸去生理盐水，注意操作时要边观察边吸湿，最好用解剖针轻压，防止连同唾腺一起吸走；滴加胭脂红染色液，染色20-30min(3)压片：染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。

将片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。

（注意不要使盖片移动。

）(4)观察：1、将制片置低倍镜下找到分散好的标本，移至视野中心，然后转到高倍镜下观察。

2、对分散良好、染色体臂充分伸展的片子，应仔细观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序，对照模式照片辨认出不同的染色体臂五、注意事项1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。

2. 将脂肪组织清除干净3. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃4. 染色时间不可过长，否则背景也着色5. 压片时要揉，用力要均匀6. 染色完以后，将旧的染色液吸去，加新的染色液，再压片7. 吸水时勿将唾腺一起吸走六、实验结果七、分析讨论1.请画一个有代表性的果蝇唾腺染色体图。

果蝇唾腺染色体的标本制备和观察果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中常见的模式生物之一，其唾腺染色体是生物学中经常使用的标本之一。

本文将介绍如何制备果蝇唾腺染色体标本，并展示如何观察这些标本。

制备标本材料制备果蝇唾腺染色体标本需要的材料如下：•果蝇成虫•酒精•醋酸•乙醇•0.5% 的乙酸-洋红溶液•1% 的氧化铬酸钾溶液•100% 的甘油•盖片•显微镜步骤1.将成虫放入酒精中，浸泡5分钟至失去活性。

2.用镊子将成虫头部部分取下，然后将其剪开，将唾液腺取出。

3.将唾液腺置于醋酸中浸泡2分钟，然后转移到乙醇中浸泡2分钟，最后放入1%的氧化铬酸钾溶液中浸泡1-2分钟。

4.从氧化铬酸钾溶液中将唾液腺转移到100%的甘油中浸泡1-2分钟，以使其变色，然后将其取出，并放入盖片上。

5.加入0.5%的乙酸-洋红溶液，然后用另一个盖片覆盖，压扁唾液腺。

6.将盖片放入显微镜，用40倍或100倍放大倍数观察。

观察标本染色体结构果蝇唾腺染色体呈现为极细线状，可根据其结构分为两类：•染色体较长的一端为钩状，称为钩端。

•另一端较短，称为非钩端。

染色体数量成虫染色体数目为8条，如下：•一对#1染色体•一对#2染色体•一对#3染色体•两对#4染色体染色体组成果蝇唾腺染色体由DNA和蛋白质组成，其中蛋白质主要为组蛋白和非组蛋白。

通过以上步骤，我们可以轻松制备果蝇唾腺染色体标本，并通过显微镜观察其结构和数量。

这对于生物学研究和遗传学研究具有重要意义。