果蝇唾液腺染色体的观察

【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。

其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。

双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。

但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。

经多次复制后，形成约1000~4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100~500倍），因此又称为多线染色体。

黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。

各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。

（如右图）染色体Ⅰ为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一端游离；Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。

因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。

在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。

这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。

果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对—体细胞联会，染色体呈单倍数。

整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。

这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。

黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。

染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。

在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。

果蝇唾液腺染色体观察实验报告果蝇（Drosophila melanogaster）是一种常见的模式生物，在遗传学研究中有着重要的应用价值。

果蝇唾液腺染色体观察实验是一种常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化，为遗传学研究提供重要的数据支持。

本实验旨在通过对果蝇唾液腺细胞进行染色体观察，掌握染色体的基本结构和形态特征，为今后的遗传学研究奠定基础。

实验材料和方法。

1. 实验材料，成年果蝇、盐酸乙醇、醋酸乙酯、苏木精、酒精、冰醋酸、苏木素、甲醛、石蜡等。

2. 实验方法：（1）取一只成年果蝇，用镊子夹住果蝇的头部，将果蝇的身体用另一只镊子拔去。

（2）将果蝇头部置于盐酸乙醇中，浸泡5分钟，然后用镊子将头部转移到醋酸乙酯中，浸泡5分钟。

（3）将处理后的果蝇头部转移到苏木精中，浸泡5分钟，然后用酒精逐级脱水，最后转移到冰醋酸中浸泡5分钟。

（4）将果蝇头部转移到甲醛中，固定30分钟，然后用苏木素染色，再经过酒精逐级脱水，最后转移到石蜡中浸泡。

（5）将处理后的果蝇头部置于石蜡中，浸泡30分钟，然后取出制作切片，用显微镜观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构。

实验结果和分析。

经过实验操作，观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以看到染色体呈现出条状的形态，其中可以清晰地看到染色体的着丝粒和染色单体。

染色体的数量在观察的过程中也得到了初步的统计，一般情况下，果蝇唾液腺细胞的染色体数量为8条。

结论。

通过本次实验，我们成功观察了果蝇唾液腺细胞的染色体结构，了解了染色体的基本形态特征和数量变化。

这为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。

总结。

果蝇唾液腺染色体观察实验是遗传学研究中常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化。

本次实验的成功进行，为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。

果蝇唾液腺染色体标本的制备与观察一.实验目的通过实验掌握果蝇唾腺染色体的制片方法，了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点并练习解剖果蝇幼虫的技术。

二.实验原理唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫的幼虫唾液腺内的巨大染色体。

果蝇的唾腺染色体是典型的巨大染色体，它的巨大性的成因是核内有丝分裂造成的。

由于其染色体DNA经过多次复制（可达210～215次），但并未发生细胞核分裂，同时唾腺细胞中的染色体总是处在配对状态即体细胞联会，重复复制后的染色体聚集在一起，所以在显微镜下看到唾腺染色体要比一般的染色体大得多，又称多线染色体。

三.实验用品1.实验材料：普通果蝇的三龄幼虫、生理盐水2.实验器材和试剂：双筒解剖镜、显微镜、解剖针、改良苯酚品红溶液、HCI四.实验方法和步骤1. 幼虫的培养为了在解剖镜下便于操作，使用的幼虫应发育充分而且个体较大。

在实验中，人们通常采用两个措施控制幼虫的生长。

A.良好的培养基提供了果蝇生长发育的必需营养，因此在培养瓶内放置的亲本不易过多，否则将产生过多的卵而造成养分不足。

B.培养果蝇的环境温度应比正常培养时略低一些，一般可控制在16～20℃范围内，低温下生长的果蝇个体较大。

果蝇属于完全变态的昆虫，成虫交尾后将卵产在培养基内。

在适宜的温度下，卵发育为幼虫并经过一、二龄幼虫的发育后，三龄幼虫要爬到瓶壁上化蛹，为了能够在实验时获得较多的幼虫，可以分批将亲本放入培养瓶。

实验时从培养瓶的瓶壁上挑选那些发育良好的、个体较大的幼虫。

2. 剖取唾腺用解剖针从培养瓶内挑取1只三龄幼虫置于载片上，并滴加1滴生理盐水。

将载片放在载物台上，用解剖镜进行观察。

首先将幼虫的头尾分清，果蝇的头部有一黑点（口器），头部不断作伸缩状。

解剖时，双手各持一个解剖针，一支针先压在幼虫身体的前1/3处，另一支针压住果蝇头部并向前轻轻移动，即可将头部与身体拉开，仔细观察可看见一对透明做白的囊状体即为唾腺。

在唾腺前端各伸出一条细管在前面汇合成一总管。

果蝇唾液腺染色体的制片与观察张茜111070094一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、掌握唾液腺染色体的制片技术3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验原理1、双翅目昆虫（果蝇）幼虫期的唾液腺细胞很大，其中的染色体称唾液腺染色体，相当于一般普通染色体的100－150倍，又称巨大染色体。

2、在幼虫发育过程中，唾液腺染色体仍进行复制，但细胞只生长不分裂，从而产生多线染色体。

多线染色体经染色后，出现深浅不一、宽窄不同的横纹，这些横纹的数目和位置是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。

如果染色体缺失、重复、倒位、易位等结构变异时，很容易在唾腺染色体上识别出来。

3、多线染色体的特征：a 巨大；b体细胞配对，所以染色体只有半数（n=4）；c 各染色体的异染色质多份额着丝粒部分相互靠拢形成染色中心；d 横纹有深浅、疏密的不同，各自相应排列，这意味着基因的排列。

三、实验材料和用品实验材料：黑腹果蝇的三龄幼虫实验用品：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸。

生理盐水、1％醋酸洋红。

四、实验步骤1、载玻片置于显微镜下，上面滴加一滴生理盐水，放上果蝇幼虫（有一钝尾和带黑色口器的尖头，可根据其在盐水中爬行方向确定头部），两手各拿一枚解剖针，左手解剖针按住幼虫的后端1/3, 右手解剖针按住头部(尽量靠近口器)用力后拉，把头部从身体拉出，唾液腺随之而出。

（一对双叉形透明的囊状腺体）。

2、除去幼虫其他组织部分，把唾液腺周围脂肪组织（不透明）剥离干净，然后将多余生理盐水吸走，滴一滴醋酸洋红在载玻片上。

3、染色10 分钟，盖上盖玻片，用滤纸轻压一下吸去多余的染色液，然后平放在桌子上，用大拇指适当均匀用力压住，并横向揉几次（勿使盖玻片移动，用力和揉动是一个方向，不能来回揉！）。

4、显微镜观察，先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。

用显微镜可以看到四对染色体，第一对染色体（X-）组成一个长条，第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对，它们都以中部的着丝区聚集，而第四对染色体很小，分布在着丝区呈点状或盘状。

果蝇唾液腺染色体的观察一、实验目的1)练习剖取果蝇三龄幼虫唾液腺的方法。

2)掌握制作果蝇唾液腺染色体标本的技术3)观察果蝇唾液腺染色体的形态特征。

二、实验原理1）果蝇三龄幼虫的唾液腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂。

复制后的染色单体DNA不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。

加之唾液腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般体细胞中的染色体粗1000—2000倍，长100－200倍。

2）唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。

如图。

3）由于在唾液腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心和同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。

在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称做明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。

不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。

因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。

在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区和巴尔比尼氏环，其富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。

在个体发育的不同阶段，疏松区或巴尔比尼氏环在染色体上出现的部位不同，据此研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。

三、器具和生物实验生物：果蝇的三龄幼虫；器具：双筒解剖镜、显微镜、镊子、解剖针，载玻片、盖玻片实验试剂：醋酸洋红染液、蒸馏水、lNHCI。

四、实验步骤1）准备发育充足、肥大的三龄幼虫（选择在低温下（16°C-18°C培养下，充分发育但尚未化蛹但活动十分活跃的幼虫）；2）剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴蒸馏水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，置于载玻片上。

果蝇唾腺染色体的标本制备和观察果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中常见的模式生物之一，其唾腺染色体是生物学中经常使用的标本之一。

本文将介绍如何制备果蝇唾腺染色体标本，并展示如何观察这些标本。

制备标本材料制备果蝇唾腺染色体标本需要的材料如下：•果蝇成虫•酒精•醋酸•乙醇•0.5% 的乙酸-洋红溶液•1% 的氧化铬酸钾溶液•100% 的甘油•盖片•显微镜步骤1.将成虫放入酒精中，浸泡5分钟至失去活性。

2.用镊子将成虫头部部分取下，然后将其剪开，将唾液腺取出。

3.将唾液腺置于醋酸中浸泡2分钟，然后转移到乙醇中浸泡2分钟，最后放入1%的氧化铬酸钾溶液中浸泡1-2分钟。

4.从氧化铬酸钾溶液中将唾液腺转移到100%的甘油中浸泡1-2分钟，以使其变色，然后将其取出，并放入盖片上。

5.加入0.5%的乙酸-洋红溶液，然后用另一个盖片覆盖，压扁唾液腺。

6.将盖片放入显微镜，用40倍或100倍放大倍数观察。

观察标本染色体结构果蝇唾腺染色体呈现为极细线状，可根据其结构分为两类：•染色体较长的一端为钩状，称为钩端。

•另一端较短，称为非钩端。

染色体数量成虫染色体数目为8条，如下：•一对#1染色体•一对#2染色体•一对#3染色体•两对#4染色体染色体组成果蝇唾腺染色体由DNA和蛋白质组成，其中蛋白质主要为组蛋白和非组蛋白。

通过以上步骤，我们可以轻松制备果蝇唾腺染色体标本，并通过显微镜观察其结构和数量。

这对于生物学研究和遗传学研究具有重要意义。

果蝇唾腺染色体的压片及其观察一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、学会制作唾腺染色体压片3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验材料黑腹果蝇的三龄幼虫，活跃的，雌性幼虫。

盖玻片、载玻片、解剖针、解剖镜、45%醋酸溶液、卡宝—品红染液、盐酸、乳酸醋酸溶液三、实验原理唾腺染色体的特点：大、粗。

唾腺细胞是一个处于间期的细胞，染色体处于一个伸展的状态，所以特别长，因为这个唾腺细胞是一个多倍体的细胞，每条染色体的话有1000到4000条核蛋白纤维丝（包括DNA和蛋白质）。

唾腺染色体的所有的着丝粒聚在一起形成了一个染色中心，伸开五条臂。

X染色体体联会在一起。

果蝇染色体分区：果蝇染色体一共分为120个区，从端部开始1-20为x染色体，21-40在第二染色体的左臂，61-80在第三染色体的左臂，101—102位于点状染色体。

右臂是从基部开始分区，41-60在第二染色体的右臂， 81-100位于第三染色体的右臂。

每一个分区里边又分成段这个段，用A、B、C、D来表示。

四、实验步骤唾液腺制片：1、取一张载玻片，擦干净表面的酒精，放在解剖镜的载物台上。

2、打开解剖镜，使用上光源。

并在载玻片上滴一滴生理盐水。

3、用解剖针取一只黑腹果蝇的三龄幼虫。

4、用一支解剖针固定幼虫头部，另外一支解剖针压入口沟的位置，将其拉断。

找到口沟附近的一对透明的唾液腺，将唾液腺留在中间，用吸水纸将其他的部分擦去。

5、加入45%的醋酸溶液固定，时间为 5—7秒。

让唾液腺离开原来的位置，时间到了之后将多余的液体吸掉。

6、加一滴盐酸起软化作用，再加一滴蒸馏水洗去多余的盐酸，时间大概1—2秒。

让唾液腺离开原来的位置。

7、滴加染液，染色三十分钟。

8、重新做一张制片9、吸掉多余的染液，加一滴乳酸醋酸溶液，将唾液腺充分的洗涤。

吸去多余的溶液。

10、盖上盖玻片，用两层滤纸，中间打折压住盖玻片手点住盖玻片的两个角轻轻的按抚，吸去多余的溶液。

11、压片显微镜观察：先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。

实验报告课程名称遗传学实验实验名称果蝇唾液腺染色体制片和观察一、实验原理果蝇唾腺染色体是永久间期染色体，只发生DNA复制，不发生有丝分裂。

在幼虫唾腺细胞内，每条染色体进行了10次左右的复制，形成了约210=1024条染色体拷贝，再结合同源染色体的配对，共用约2048条同源染色体拷贝进行体细胞联会，形成比正常有丝分裂中期的染色体大200倍的、巨大的多线染色体。

这些染色体的着丝点聚集在一起，形成染色中心，同源染色体的两臂向外伸展。

经过染色，唾腺染色体的显示出独具本染色体特色的带和间带模式。

这个模式是恒定的，可用用于基因的定位，如果发生染色体的结构变异，则可以通过模式的改变而发现出来。

不同的染色体，其端部不同，可以用于鉴别染色体。

在观察唾腺染色体时，会发现膨胀泡结构，这是强烈的基因转录迹象。

二、实验结果图一：果蝇幼虫解剖针分离后效果图图二：剥离的腺体一共分离了3条果蝇幼虫才分离出较清晰的唾液腺体，在分离出带腺管的2侧腺体时，上面还有其他东西，因为想剥离的干净一点，所以没急着拍照，结果分离到一半时，一条腺体丢失，所以照片仅显示剥离中期时剩的一条腺体。

图三：唾腺染色体（借用）图四：唾腺染色体——图片放大（借用）带与间带、染色中心、膨胀泡、3R端部（僧帽）特点如上图标示。

三、总结反思从挑取果蝇幼虫，到幼虫的头身分离和剥离腺体，再到染色，这些操作的较为顺畅，并没有出现大的失误。

虽然刚开始分离的两条幼虫因为手法生疏，并没有分离出完整的腺体，但是第三次尝试时就分离出带腺管的2侧腺体，剥离后还剩一条较为完整的腺体。

染色时操作也较为小心，并未让腺体随水流被滤纸吸走。

就剥离腺体这个操作而言，我觉得这是一个需要耐心、眼力和方向感的事情，可以在剥离的时候将载玻片放在显微镜下，同时2根解剖针也进入显微镜的视野内的两侧，用解剖针判断该划掉哪个方向的一部分，一点点去掉不要的东西，最后就可以留下需要的腺体了。

但是操作一定要细心，腺体特别小，划的时候如果一不小心粘到解剖针上也弄不下来，那条腺体也就没用了。

姓名系年级学号日期科目遗传学实验题目果蝇唾腺染色体的标本制作及观察果蝇唾腺染色体的标本制作及观察摘要：多线染色体，又称作唾腺染色体，是果蝇三龄幼虫的唾腺发育到一定阶段后，细胞的有丝分裂停留在间期，唾腺细胞数目不增加，但体积增大，每条染色体的常染色质区的核蛋白纤维（染色质纤维）不断复制，其复制产物不分开，成千上万条染色质纤维平行而精巧地排列形成一大束宽而长的带状物。

本次实验意在了解并掌握果蝇三龄幼虫唾腺的剥离技术，掌握唾腺染色体标本的制备方法，以及了解唾腺染色体的形态结构特点。

本次实验以果蝇三龄幼虫为实验材料，经过剥离唾腺、解离、水洗、染色、压片和镜检六个步骤，在显微镜下找了果蝇唾腺染色体，使我们对果蝇唾腺染色体的大小和形态特征有了更加直观的了解。

引言1881年，意大利的细胞学家巴尔比尼（Balbiani）在双翅目昆虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了一种巨大的染色体，由于存在于唾腺细胞中，所以又称为唾腺染色体。

通过切出的片子很难推测整体结构，人们误认为这种结构是一条具有很多横纹特征的线状结构缠绕而成，故命名为“spireme”。

1930年，Kostoff提出遗传物质可能位于spireme横纹上的假设。

1932年，Emil Heitz与Hans Bauer通过压片法，发现“spireme”是由多个独立的小体连结在一个中心形成的，并证明它的本质上是染色体。

1933年，美国学者贝恩特（Painter）等在果蝇和其它双翅目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了巨大染色体（giant chromosome）。

目前，对于唾腺染色体的研究还在进行中，并且有了越来越多的发现：已经有人对唾腺染色体进行了详细的分区研究，将整个唾腺染色体分为102个区，每个区分为6个段，每个段又分为若干条横纹。

横纹可以作为基因定位的依据，横纹数目和排列的变化可以作为染色体结构改变的依据。

1935年遗传学家Bridges 就是用基因定位的方法绘制了第一张唾腺染色体细胞学图。