黑灵芝中三萜及其皂苷类化合物总量的光度测定

— 70 —现代中药研究与实践2010年第24卷第5期Chin Med J Res Prac,2010 Sept.,Vol.24 No.5灵芝是一种名贵的药用真菌，属于担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝和紫芝的总称，始载于«神农本草经»，具有补中益气、滋阴强壮、扶正固本、延年益寿等功效。

灵芝主要成分为多糖类和三萜类。

三萜类成分复杂，曾祥丽等[1]报道灵芝含有122种三萜类成分，其中最主要是灵芝酸37种。

林志彬等研究认为灵芝三萜具有抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、保肝、抗肿瘤和抗艾滋病毒等药理活性[2-5]。

本文对灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定作以下报道。

1 仪器、试剂旋转蒸发仪（日本生产，EYELA ROTORYEVAPOPATOR N-1000）；GB204电子天平（瑞典）；751型紫外-可见分光光度计（上海分析仪器灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定侯敏娜1，刘剑 2（1.陕西国际商贸学院，陕西咸阳 712046；2. 陕西香菊药业集团责任公司，陕西商洛 726000）摘要：目的研究灵芝三萜的最佳提取方法，并测定其总三萜的含量。

方法采用正交实验方法，用硅胶柱进行总三萜分离，通过紫外-可见分光光度法测定总三萜含量。

结果最佳提取方法为用5倍量95%乙醇回流提取3次，每次1.5 h ；用 30倍量硅胶装柱，以石油醚-乙酸乙酯（9：1和7：3）进行洗脱；经分离得到针状晶体Ⅰ和Ⅱ，测定该品种中灵芝总三萜含量为9.07%。

结论本提取方法稳定可行，可作为灵芝三萜工业化生产的参考。

关键词：灵芝三萜; 提取分离 ; 含量测定中图分类号：S567.3+1 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(201005-0070-02 Ganoderma Triterpenoids Extraction and Determination of the Total TriterpenoidHOU Min- na1 , LIU Jan2(1.Shan’anxi Institute of International Trade & Commerce, Xianyang 712046, China ;2. Shan’anxi Xiangju Pharmaceutical Group Co., Shangluo 726000,ChinaAbstract: Objective To design the best out of Ganoderma triterpenoids extract programs and separation methods, and measured the total content of triterpenoid. Methods Filter through the orthogonal extraction method, using silica gel column for the total separation of triterpenoids by ultraviolet - visible spectrophotometry triterpenoid content. Results The optimum extraction method is to use fi ve times the amount of 95% ethanol was extracted three times for 1.5 hours each time; loaded with 30 times the amount of silica gel column with petroleum ether - ethyl acetate (9:1 and 7:3 for elution; by ultraviolet - visible spectrophotometry in order to ursolic acid as a reference substance, the total triterpene content of Ganoderma lucidum were determined. Conclusion The extraction method is stable and feasible, and Ganoderma triterpene content was to 9.07%.Key words: Ganoderma lucidum Triterpenes; extraction and separation; content determination厂）；硅胶G （青岛高能达化工有限公司）；薄层层析硅胶板HSGF254（烟台江友硅胶开发有限公司）、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、甲醇等试剂均为分析纯，熊果酸对照品（中国药品生物制品检定所）。

不同产地灵芝孢子粉中多糖＼总三萜皂苷含量测定目的建立灵芝孢子粉中灵芝多糖、总三萜皂苷的含量测定方法。

方法采用紫外分光光度法，苯酚-浓硫酸比色法于波长492nm处测定灵芝多糖吸光度；以香草醛∶高氯酸∶冰乙酸（2∶8∶50）为显色剂，于波长555nm处测定总三萜皂苷的吸光度。

结果多糖、总三萜皂苷的标准曲线的线性范围分别为0.0100~0.0300mg（r=0.9982）；0.025~0.125mg（r=0.9996），多糖、總三萜皂苷的平均加样回收率分别为101.17%、100.74%，RSD分别为1.84%、1.29%。

结论该方法简便、快速、准确，可用于灵芝孢子粉中多糖、总三萜皂苷的含量测定。

Abstract：Objective To establish a method for content determination of total polysaccharides and triterpenoid saponin in the GLS.Methods UV Spectrophotometry,phenol-sulfuric acid;vanillin-glacial acetic acid-sulphuric acid-perchloric acid mixture at the wavelength of 492nm and 555nm absorbance.Results The linear range of total ginseng polysaccharides was 0.0100~0.0300mg(r=0.9982);0.025~0.125mg(r=0.9996).The recovery rate of the study was 101.17%、100.74%,RSD=1.84%、1.29%.Conclusion The results of simulation indicate that this method was accurate,reliable and reproducible.It was suggested that this method can be used to determine the content of total polysaccharides and triterpenoid saponin in the GLS.Key words：GLS;Polysaccharides;Triterpenoid saponin;Determination;Ultraviolet spectrophotometry灵芝，为担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝（Ganoderma lucidum（Leyss.ex Fr.）Karst）、紫芝（Ganoderma sinense Zhao，Xu et Zhang）的干燥子实体。

保健食品功效成份灵芝三萜的检验方法1 原理将样品溶于乙酸乙酯中并于100℃水浴上蒸干后，加入5%香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸，于60℃水浴加热，再加入冰醋酸。

在一定浓度范围内其吸光度与三萜类化合物的含量成正比，以此进行比色定量。

2 仪器和试剂2.1仪器2.1.1紫外可见分光光度计2.1.2超声波清洗器2.1.3电热恒温水浴锅2.2试剂2.2.1熊果酸标准品2.2.2高氯酸（分析纯）2.2.3冰醋酸（分析纯），香草醛（分析纯）2.2.4乙酸乙酯（分析纯）2.2.5熊果酸对照品溶液：精密称取经五氧化二磷减压干燥12小时的熊果酸对照品一定量，置容量瓶中，用乙酸乙酯溶解，超声15min,并稀释至刻度，摇匀，制成0.1mg/ml的对照品溶液。

3 分析步骤3.1标准曲线的绘制分别精密吸取0.00ml、0.10ml、0.30ml、0.50ml、0.70ml、0.90ml对照品溶液于10ml试管中，于100℃水浴上蒸干后，加入0.20ml 5%香草醛-冰醋酸和1.0ml高氯酸，摇均，在60℃水浴中加热20min并移入冰水浴中冷却3min，再加入5.00ml冰醋酸, 摇匀并置于室温。

15min后用用分光光度计于548nm波长下测定对照品溶液的吸光度。

分别以熊果酸质量为横坐标和吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。

3.2样品溶液的制备与测定取混合均匀的固体样品0.1g，精密称定，置100ml容量瓶中，用乙酸乙酯溶解，超声30min,并稀释至刻度，摇匀，过滤。

精密吸取1.0ml滤液于10ml的试管中，于100℃水浴上蒸干后，加入0.20ml 5%香草醛-冰醋酸和1.0ml高氯酸，摇均，在60℃水浴中加热20min并移入冰水浴中冷却3min，再加入5.00ml冰醋酸, 摇匀并置于室温。

15min后用用分光光度计于548nm波长下测定样品溶液的吸光度。

4 含量计算样品相当于对照品的量（mg）灵芝三萜（以熊果酸计，）= ×100%样品重（mg）。

紫外分光光度法测定破壁灵芝孢子粉中总三萜含量摘要】探讨灵芝孢子粉中紫外分光光度法检测总三萜的优化条件。

采用紫外分光光度法，以熊果酸作为标准品，用无水乙醇超声提取总三萜，吸取提取液进行减压蒸干后，加入显色剂，水浴，测定。

实验表明，在548nm波长下，标准品在10～100ug范围内，吸光度与含量呈良好的线性关系，回收率在97.64%～102.31%之间，说明该方法操作简便，准确性高，能对破壁灵芝孢子粉的质量起到控制作用。

【关键词】灵芝孢子粉总三萜提取溶剂超声提取【中图分类号】R932 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）15-0030-02灵芝孢子为灵芝的生殖细胞，在抑制肿瘤、增强免疫力方面作用强于灵芝子实体，破壁后的灵芝孢子粉中的有效成分三萜类化合物如灵芝多糖，核苷腺吟，蛋白质，氨基酸，维生素等更容易被人体吸收。

总三萜物质含量高低已成为破壁灵芝孢子粉质量控制的重要指标。

总三萜物质的检测多以熊果酸或齐墩果酸为对照品，采用分光光度法[1-4]，应用香草醛-高氯酸显色法，测定其含量。

本实验以破壁灵芝孢子粉为样品，从提取溶剂，提取方式和提取条件三方面着手；进一步确定[1]试验中主要检测因素：香草醛-冰醋酸用量，高氯酸用量，水浴温度，水浴加热时间进行单因素考察后进行正交试验，选出最佳的试验条件，最后进行线性关系，稳定性，回收率的验证。

确定一种应用于灵芝孢子粉三萜类含量的高效，快速，科学，安全的检测方法。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 样品与试剂破壁灵芝孢子粉(福建仙芝楼生物科技有限公司)；熊果酸标准品(中国药品生物制品检定所，含量为100%)；高氯酸、冰醋酸、香草醛、无水无水乙醇、无水甲醇、乙酸乙酯、三氯甲烷均为分析纯。

1.1.2 主要仪器与设备 UV-2450紫外分光光度计(日本岛津)；MS 304/S 电子天平(梅特勒-托利多)；恒温水浴锅(苏州金坛市中大仪器厂)；旋转蒸发仪(上海申胜生物技术有限公司)；KQ-500E 超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

灵芝中三萜类化合物的研究进展周晓;王成忠;李双;唐晓璇;王晓华【摘要】灵芝作为我国历史悠久的传统珍贵药材，有着极其不菲的药用价值。

其中，三萜类化合物，作为灵芝中的主要活性物质之一，在抗HIV、抗炎、保肝护肝、抗肿瘤等方面发挥了其特有的生物活性；同时，灵芝三萜类化合物也是鉴定灵芝相关商品质量及品质的重要指标和保证，其应用前景非常可观。

本文主要就近年来灵芝中三萜类化合物的提取、检测分析和药理活性等方面的研究现状及进展进行归纳总结。

【期刊名称】《齐鲁工业大学学报：自然科学版》【年(卷),期】2014(028)004【总页数】4页(P47-50)【关键词】灵芝三萜;提取方法;检测分析;生物活性【作者】周晓;王成忠;李双;唐晓璇;王晓华【作者单位】齐鲁工业大学食品与生物工程学院,山东济南250353;;;;;【正文语种】中文【中图分类】TS201.2灵芝(Ganoderma lucidum)又名灵芝草、仙草、瑞草，始载于《神农本草经》，属灵芝属，多孔菌科真菌，包括赤芝Ganoderma lucidum(leyss.ex.Fr)和紫芝Ganoderma sinense的干燥子实体。

灵芝自古就被人们视为一种滋补强壮、扶正固本的名贵中药,主要分布在中国、朝鲜、韩国等亚洲国家，2000年版的中国药典首次承认了灵芝的药用价值。

科学研究表明,灵芝中含有多糖、三萜、生物碱、核苷、呋喃类衍生物、多肽氨基酸、甾醇类、油脂类、有机锗等化学成分[1]。

目前，已被开发的灵芝产品主要有灵芝孢子粉、灵芝孢子油、灵芝多糖等，而灵芝三萜相关产品却在市面上较为罕见。

萜类化合物作为灵芝的苦味成分,其广泛的药理活性越来越受到研究者的青睐。

因此具有极为广阔的开发前景。

1 灵芝中三萜类化合物的结构三萜类化合物的基本母核是由30个碳原子组成(图1)，其结构由六个异戊二烯单位聚合而成。

三萜类化合物多为四环三萜和五环三萜，少数为链状、单环、双环和三环三萜。

灵芝孢子是灵芝在生长成熟期从灵芝菌褶中弹射出来的卵形生殖细胞，它的主要成分包含三萜类、多糖类、氨基酸多肽类、核苷酸与生物碱类等，具有抗肿瘤、抗氧化、调节血糖血脂和增强免疫调节等作用[1-3]。

灵芝孢子为双层细胞壁结构，由几丁质和葡聚糖构成，质地坚韧，极难氧化分解，因此破壁处理后的灵芝孢子粉更有利于机体对孢内有效物质的消化吸收[4]。

快速测定灵芝孢子粉中所含有效活性成分具有重要意义，本文采用紫外-可见分光光度法测定破壁灵芝孢子粉中的总三萜及多糖含量，并对测定方法的精密度、重复性及检出限进行验证。

1　材料1.1　主要试剂无水乙醇、冰乙酸、高氯酸、乙酸乙酯、香草醛、硫酸、苯酚、氢氧化钠、硫酸铜、无水硫酸钠统一枸橼酸钠；标准品：齐墩果酸（1339），购于NATURE STANDARD公司；葡聚糖（S14110-100 g，Mw：1×105 g/mol），购于上海源叶生物科技有限公司。

1.2　仪器Cary50紫外-可见分光光度计（美国瓦里安），EL204分析天平（上海菁海有限公司），KQ-400KDE高功率数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），MTN-2800W氮吹浓缩装置（天津奥特赛恩斯仪器），SC-3610低速离心机（安徽中科中佳）。

2　实验方法2.1　总三萜含量测定称取破壁灵芝孢子粉颗粒约0.2 g，置于100 mL容量瓶中，加入60 mL 无水乙醇，水浴超声提取（功率400 W，频率40 kHz）45 min后，冷却至室温后，用无水乙醇定容，摇匀后过滤，吸取过滤液0.20 mL于10 mL具塞比色管中，氮吹使溶剂完全挥发。

加入新配置的5%香草醛-冰乙酸溶液0.20 mL和高氯酸0.80 mL，摇匀。

置于70 ℃水浴加热15 min，取出，冰水冷却5 min。

加乙酸乙酯4.00 mL稀释，摇匀，在546 nm波长下测定吸光度。

2.2　多糖含量测定称取破壁灵芝孢子粉颗粒5.0 g，置于100 mL圆底烧瓶中，加水80 mL左右，搅拌加热回流1 h，冷却至室温后转移至100 mL容量瓶中，定容至刻度，混匀后过滤。

— 70 —现代中药研究与实践2010年第24卷第5期Chin Med J Res Prac,2010 Sept.,Vol.24 No.5灵芝是一种名贵的药用真菌，属于担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝和紫芝的总称，始载于«神农本草经»，具有补中益气、滋阴强壮、扶正固本、延年益寿等功效。

灵芝主要成分为多糖类和三萜类。

三萜类成分复杂，曾祥丽等[1]报道灵芝含有122种三萜类成分，其中最主要是灵芝酸37种。

林志彬等研究认为灵芝三萜具有抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、保肝、抗肿瘤和抗艾滋病毒等药理活性[2-5]。

本文对灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定作以下报道。

1 仪器、试剂旋转蒸发仪（日本生产，EYELA ROTORYEVAPOPATOR N-1000）；GB204电子天平（瑞典）；751型紫外-可见分光光度计（上海分析仪器灵芝三萜的提取分离及总三萜的含量测定侯敏娜1，刘剑 2（1.陕西国际商贸学院，陕西咸阳 712046；2. 陕西香菊药业集团责任公司，陕西商洛 726000）摘要：目的研究灵芝三萜的最佳提取方法，并测定其总三萜的含量。

方法采用正交实验方法，用硅胶柱进行总三萜分离，通过紫外-可见分光光度法测定总三萜含量。

结果最佳提取方法为用5倍量95%乙醇回流提取3次，每次1.5 h ；用 30倍量硅胶装柱，以石油醚-乙酸乙酯（9：1和7：3）进行洗脱；经分离得到针状晶体Ⅰ和Ⅱ，测定该品种中灵芝总三萜含量为9.07%。

结论本提取方法稳定可行，可作为灵芝三萜工业化生产的参考。

关键词：灵芝三萜; 提取分离 ; 含量测定中图分类号：S567.3+1 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(201005-0070-02 Ganoderma Triterpenoids Extraction and Determination of the Total TriterpenoidHOU Min- na1 , LIU Jan2(1.Shan’anxi Institute of International Trade & Commerce, Xianyang 712046, China ;2. Shan’anxi Xiangju Pharmaceutical Group Co., Shangluo 726000,ChinaAbstract: Objective To design the best out of Ganoderma triterpenoids extract programs and separation methods, and measured the total content of triterpenoid. Methods Filter through the orthogonal extraction method, using silica gel column for the total separation of triterpenoids by ultraviolet - visible spectrophotometry triterpenoid content. Results The optimum extraction method is to use fi ve times the amount of 95% ethanol was extracted three times for 1.5 hours each time; loaded with 30 times the amount of silica gel column with petroleum ether - ethyl acetate (9:1 and 7:3 for elution; by ultraviolet - visible spectrophotometry in order to ursolic acid as a reference substance, the total triterpene content of Ganoderma lucidum were determined. Conclusion The extraction method is stable and feasible, and Ganoderma triterpene content was to 9.07%.Key words: Ganoderma lucidum Triterpenes; extraction and separation; content determination厂）；硅胶G （青岛高能达化工有限公司）；薄层层析硅胶板HSGF254（烟台江友硅胶开发有限公司）、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、甲醇等试剂均为分析纯，熊果酸对照品（中国药品生物制品检定所）。

紫外分光光度法测定灵芝孢子油中总三萜含量宋福江;王玉乐;闫寒;范斌;孙健【期刊名称】《中国医药导刊》【年(卷),期】2017(19)9【摘要】目的:建立紫外分光光度法测定灵芝孢子油中总三萜含量.方法:以齐墩果酸为对照品,与5％香草醛-冰乙酸反应,在高氯酸环境下显色,在545 nm处测定样品吸光度.结果:齐墩果酸在0.02 ～0.12 mg范围内线性关系良好,y=11.033X-0.0441,r=0.9998.重复性实验,RSD为2.84％(n=6).平均回收率78.43％,RSD为3.5％(n=6).结论:经过线性、重复性、精密度、回收率实验,确认本方法适用于灵芝孢子油总三萜的含量测定.%Objective:To establish a method for determining the content of total triterpenoids in the ganoderma lucidum spores oil by ultraviolet spectrophotometry.Methods:Ultraviolet spectrophotometry determination was performed on oleanolic acid (as a control) and with 5％vanillin-glacial acetic acid solution and perchloricacid ascolor-developing agent.The absorbance of sample was determined at 545nm.Results:There was a good linear relationship between the concentration and absorbance of oleanolic acid within the range of 0.02-0.12 mg(A =11.033c-0.0441,r=0.9998).The repeat test,RSD =2.84％ (n =6),the average recovery rate was 78.43 ％,RSD =3.5％ (n =6).Conclusion:After the linearity,the repeatability,the precision,the recovery of the test,the method can be used for measuring the content of total triterpenoid in the ganoderma lucidum spores oil.【总页数】3页(P940-942)【作者】宋福江;王玉乐;闫寒;范斌;孙健【作者单位】中国中医科学院医学实验中心,道地药材国家重点实验室培育基地,北京100700;中科乐仁(北京)科技发展有限公司,北京100700;中国中医科学院医学实验中心,道地药材国家重点实验室培育基地,北京100700;中国中医科学院医学实验中心,道地药材国家重点实验室培育基地,北京100700;中国中医科学院医学实验中心,道地药材国家重点实验室培育基地,北京100700【正文语种】中文【中图分类】R927.2;R917【相关文献】1.分光光度法测定灵芝孢子油中的总三萜含量 [J], 王彩云;郝晓宏;谷日旭;韩琼2.分光光度法测定灵芝孢子油中的总三萜含量 [J], 王彩云;郝晓宏;谷日旭;韩琼3.紫外分光光度法测定破壁灵芝孢子粉提取物总三萜含量 [J], 陈冠州;梁慧敏;谢意珍4.分光光度法测定灵芝孢子油中总三萜的含量 [J], 李维嘉; 王志强; 许泽群; 梁洁怡; 林晨5.紫外-可见分光光度法测定破壁灵芝孢子粉中总三萜及多糖含量 [J], 朱莉;徐晓萍;黄婷因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

灵芝发酵粉中三萜化合物提取与测定胡琼方;董建生;高文庚【摘要】试验采用超声波辅助提取灵芝发酵粉中三萜类化合物,运用分光光度法测定其得率.通过单因素和Box-Benhnken设计研究乙醇浓度、浸泡时间、料液比、超声时间、超声功率、超声温度对灵芝三萜类化合物得率的影响.研究结果表明,灵芝三萜化合物提取的最佳工艺参数为:料液比为1:42(g/mL),95 %乙醇溶液中浸泡100 min后,超声功率为210 W下43℃超声提取17 min.在最优工艺条件下进行3次验证试验,测得三萜化合物平均得率为0.6128 mg/g.研究结果为灵芝发酵类产品的在线监测提供理论依据.%Triterpene compounds in Ganoderma lucidum powder were extracted by ultrasonic wave and the yield was determined by spectrophotometry. The effects of ethanol concentration, soaking time, solid-liquid ratio, ultrasonic time, ultrasonic power and ultrasonic temperature on the yield of Ganoderma lucidum triterpenoids were studied respectively.Based on the single-factor experiments,and ultrasonic power as significant factors,according to the design principle of Box-benhnken,the response surface of the experiment optimization design.The optimal process parameters were as follows:the ratio of solid to liquid was 1:42(g/mL),immersed in 95 % ethanol for 100 min,the temperature of ultrasound was 43℃,and the ultrasonic power was 210 W for17min.validation experiments were carried out at these optimum conditions,the average yield of triterpenoids measured was 0.612 8 mg/g.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)010【总页数】6页(P104-109)【关键词】灵芝;三萜类化合物;超声波提取;响应面【作者】胡琼方;董建生;高文庚【作者单位】山西农业大学食品科学与工程学院,山西太谷030801;山西瑞芝生物科技有限公司,山西运城044000;运城学院生命科学系,山西运城044000【正文语种】中文灵芝（Ganoderma lucidum）别名赤芝、丹芝，灵芝属真菌，其作为药用已有两千多年历史，在《本草纲目》和《神农本草经》中均有记载。

三萜类化合物的提取分离及测定方法研究【摘要】目的：研究总结三萜类化合物的提取分离方法及测定方法。

方法：三萜类成分提取分离方法一般根据其溶解性采用不同的有机溶剂进行提取分离。

结果：该方法需要消耗大量的有机溶剂易造成医药污染，且提取的选择不高，使制得药物剂型单一，多为汤剂或者丸、散等剂型，服用量大且携带不便，不利于中药的现代化。

结论：由于色谱等分离技术、波谱测定技术等分析手段的迅速发展，使三萜类化合物的提取分离及测定方法取得了可喜的研究进展。

【关键词】三萜类化合物；提取分离；测定方法1 三萜类化合物的提取分离1.1 传统的三萜类成分提取分离方法一般根据其溶解性采用不同的有机溶剂进行提取分离，如：将药材用乙醇浸提3次，提取液浓缩得到的浸膏溶于适量水中，然后用氯仿萃取3次，合并氯仿层，减压浓缩到原体积的1/3，用饱和NaHCO3溶液碱化，取氯仿层部分浓缩，得到棕色浸膏将所得浸膏用硅胶柱层析分离等。

该方法需要消耗大量的有机溶剂易造成医药污染，且提取的选择不高，使制得药物剂型单一，多为汤剂或者丸、散等剂型，服用量大且携带不便，不利于中药的现代化。

1.2 超临界流体萃取法(SFE)由于SFE在萃取过程中几乎不用有机溶剂，萃取物中无有机溶剂残留，对环境无污染，且提取效率高，节约能耗等特点，在中药化学成分的萃取分离领域得到了蓬勃发展。

崔星明等［3］采用SFE得到的芦笋提取物，用甲醇溶解，采用液相色谱-质谱联用仪检测得到了56个组分。

发现有保留时间和熊果酸基本一致的峰，其质谱分子离子峰和特征碎片峰都与熊果酸的一致。

雒廷亮等［4］采用SFE 对山茱萸中熊果酸提取方法的研究，结果表明，在熊果酸提取率基本相同的前提下，SFE不仅可以实现清洁生产，而且易于实现工业化。

1.3 半仿生提取该法模拟口服给药，为经消化道给药的中药制剂设计了一种新的提取工艺，即将药材先用一定pH值的酸水提取，继以一定pH 值的碱水提取，提取液分别滤过、浓缩、制成制剂，据报道此种方法经济实用，可保证疗效［5］。

三萜类化合物的提取分离及测定方法研究辛　国,王恩鹏,张　辉3(长春中医药大学药学院,吉林长春130117) 摘　要:目的:研究总结三萜类化合物的提取分离方法及测定方法。

方法:三萜类成分提取分离方法一般根据其溶解性采用不同的有机溶剂进行提取分离。

结果:该方法需要消耗大量的有机溶剂易造成医药污染,且提取的选择不高,使制得药物剂型单一,多为汤剂或者丸、散等剂型,服用量大且携带不便,不利于中药的现代化。

结论:由于色谱等分离技术、波谱测定技术等分析手段的迅速发展,使三萜类化合物的提取分离及测定方法取得了可喜的研究进展。

关键词:三萜类化合物;提取分离;测定方法 中图分类号:R285 文献标识码:A 文章编号:1007-4813(2008)04-0378-02　基金项目:吉林省中医药管理局资助项目(课题号:06ZY 01)　作者简介:辛　国(1971-),男,硕士研究生。

研究方向:中药有效成分提取及应用开发研究。

3通讯作者:张　辉,男,教授,博士研究生导师　E 2mail :zhrxr @ T el :(0431)86172080 三萜类化合物(triterpeno ,ds )是由30个碳原子构成的萜类化合物,由6个异戊二烯单位连接而成,是类异戊二烯代谢途径的重要产物之一[122]。

近年来,由于色谱等分离技术、波谱测定技术等分析手段的迅速发展,使三萜类化合物的提取分离及测定方法取得了可喜的研究进展。

1　三萜类化合物的提取分离111　传统的三萜类成分提取分离方法　一般根据其溶解性采用不同的有机溶剂进行提取分离,如:将药材用乙醇浸提3次,提取液浓缩得到的浸膏溶于适量水中,然后用氯仿萃取3次,合并氯仿层,减压浓缩到原体积的1/3,用饱和NaHC O 3溶液碱化,取氯仿层部分浓缩,得到棕色浸膏将所得浸膏用硅胶柱层析分离等。

该方法需要消耗大量的有机溶剂易造成医药污技术等。

纳米技术在中药制剂中的应用,将极大地丰富中药的剂型。

黑灵芝中性提取物三萜含量测定及抗氧化作用研究刘晓珍;聂少平;李文娟;陈奕;谢明勇【摘要】采用分光光度法在550 nm波长下以齐墩果酸为对照品测定黑灵芝中性提取物中总三萜含量,测得黑灵芝中性组分中三萜含量为40.92％,RSD为3.28％,平均加标回收率为103.9％.通过对DPPH自由基清除作用、总还原能力、对β-胡萝卜素-亚油酸的抑制作用和对亚铁离子螯合能力的测定,评估了黑灵芝中性组分的抗氧化性.结果表明:它具有较强的抗氧化性.另外,用Folin-Ciocalteu酚方法测得黑灵芝中性组分的总酚含量为31 mg/g中性组分.据此,为黑灵芝质量评价及其中性组分开发应用提供一定的理论指导.%Triterpenoids content of neutral components extracted from Ganoderma atrum was determined by spectrophotometry at 550 nm. The triterpenoids content of the neutral components was 40. 92% with RSD =3. 32% , and its recovery was 103. 9% . The antioxidant capacity of the extract was assessed by scavenging effects on 2,2-di-phenyl-1-picrylhydrazyl radicals ( DPPH), reducing power assay, f$-carotene bleaching assay and metal chelating activity on ferrous ions. The results indicated that the neutral components isolated from Ganoderma atrum had significant antioxidant activity. Total phenols content determined by Folin-Ciocalteu colorimetric method was 0. 31mg/g neutral components. It will provide certain theoretical guidance for the quality evaluation and application of Ganoderma atrum.【期刊名称】《南昌大学学报（工科版）》【年(卷),期】2011(033)004【总页数】6页(P332-337)【关键词】黑灵芝;中性组分;三萜;分光光度法;抗氧化性【作者】刘晓珍;聂少平;李文娟;陈奕;谢明勇【作者单位】南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047【正文语种】中文【中图分类】TQ460.6灵芝为担子菌纲、多孔菌科、灵芝属真菌，作为中国传统珍贵药材，具有很高的药用价值，在我国的应用已有2 000多年的历史［1］。

紫外-可见分光光度法测定灵芝片中多糖、三萜及甾醇含量姜玮;周桂生;陈骁鹏;叶慧;乔正;白钢钢;赵金龙【摘要】目的建立测定灵芝片中多糖、三萜及甾醇含量的紫外-可见分光光度(UV)法.方法采用硫酸蒽酮显色法和香草醛冰醋酸显色法,分别测定灵芝片中的多糖、三萜及甾醇含量.结果 5批灵芝片多糖含量为0.94%~1.70%,平均1.38%;三萜及甾醇含量为0.58%~0.99%,平均0.73%.结论该方法简单、可行,可用于测定灵芝片中多糖、三萜及甾醇含量,对于提高灵芝片的质量标准有一定意义.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2018(027)014【总页数】4页(P9-12)【关键词】灵芝片;多糖;三萜;甾醇;紫外-可见分光光度法;含量测定【作者】姜玮;周桂生;陈骁鹏;叶慧;乔正;白钢钢;赵金龙【作者单位】江苏省泰州市食品药品检验所,江苏泰州 225300;南京中医药大学,江苏南京 210046;江苏省泰州市食品药品检验所,江苏泰州 225300;江苏省泰州市食品药品检验所,江苏泰州 225300;中国药科大学,江苏南京 210046;江苏省泰州市食品药品检验所,江苏泰州 225300;江苏省泰州市食品药品检验所,江苏泰州 225300【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0灵芝为多孔菌科真菌赤芝 Ganoderma lucidum（Leyss.ex Fr.）Karst. 或紫芝Ganoderma sinense Zhao，Xu et Zhang的干燥子实体，是传统的大型药用真菌，多糖、三萜及甾醇类化合物是其主要药理活性成分[1-2]。

多糖类化合物具有提高机体免疫力、耐缺氧能力等作用，三萜及甾醇类化合物具有抗炎、抗肿瘤、抗病毒(如艾滋病毒)等作用，因此，多糖类、三萜及甾醇类化合物的含量是判断灵芝品质的重要指标[3-12]。

为方便药材调剂、制剂与有效成分的溶出，药材市场上的灵芝以灵芝片（由灵芝切片而来）较多见，但2015年版《中国药典(一部)》灵芝项下并未收录灵芝片的质量标准[13]。

专利名称：一种灵芝孢子粉及其产品中三萜类成分的HPLC测定方法
专利类型：发明专利
发明人：王金艳,唐庆九,杨志空,冯娜,周帅,张劲松
申请号：CN202010076495.1
申请日：20200123
公开号：CN111307966A
公开日：
20200619
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明运用高效液相色谱仪建立了灵芝孢子粉及其产品中主要三萜类成分的分析测定方法。

涉及样品前处理条件的优化、色谱柱的选择和色谱条件的优化，同时对建立的方法进行了方法学验证。

本发明建立的灵芝孢子粉及其产品中三萜类成分的HPLC测定方法，排除了脂肪酸、甾醇等弱极性脂溶性成分的干扰，突破了分光光度法用于测定孢子粉及其产品中三萜类成分的局限性，方法准确度高、特异性强。

申请人：上海市农业科学院
地址：201106 上海市闵行区北翟路2901号
国籍：CN
代理机构：北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：汤东凤
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分光光度法测定灵芝孢子油中总三萜的含量李维嘉; 王志强; 许泽群; 梁洁怡; 林晨【期刊名称】《《食品研究与开发》》【年(卷),期】2019(040)017【总页数】6页(P165-170)【关键词】灵芝孢子油; 总三萜; 齐墩果酸; 紫外分光光度法; 含量测定【作者】李维嘉; 王志强; 许泽群; 梁洁怡; 林晨【作者单位】中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室广东广州510070【正文语种】中文灵芝为多孔菌科真菌赤芝（Ganoderma lucidum Karst），或紫芝（Ganoderma sinense）的干燥子实体[1]。

外形呈伞状，菌盖肾形、半圆形或近圆形，为多孔菌科真菌灵芝的子实体。

具有补气安神、止咳平喘的功效，用于治疗眩晕不眠、心悸气短、虚劳咳喘。

主要分布于浙江、黑龙江、吉林、安徽、江西、湖南、贵州、广东、福建等地[2-4]。

灵芝具有双向调节人体机能的作用，能过双向调节人体机能平衡，使人的免疫系统得到快速的提升，恢复人体的内脏和细胞达到正常化[5-6]。

因此灵芝具有很高的天然药用价值和食用价值，为人们的生活提供更健康的保障[7-8]。

灵芝孢子油是通过超临界二氧化碳流体萃取技术从破壁的灵芝孢子中提取的疏水性油状脂质物，具有抗肿瘤、提高免疫、抗病毒等多种作用[9-10]。

其中丰富的灵芝总三萜是评价灵芝孢子油保健功效的重要指标。

灵芝三萜酸具有强烈的药理活性，有护肝、解毒、杀灭癌细胞和止痛等功能。

如灵芝酸具有抑制细胞组织胺的释放、抑制血管紧张素酶的活性、抗病毒等功效[11-14]。

目前测定灵芝孢子油中总三萜含量的方法尚未统一，测定方法大多采用香草醛乙酸溶液和高氯酸显色比色法，但显色条件各有不同，总三萜含量也无法真实比较[15-19]。

本文通过5%香草醛-乙酸溶液和高氯酸显色方法，分析各因素影响，建立了简单、方便、准确、重复性好的灵芝孢子油总三萜含量测定的方法，以适用于灵芝孢子油中总三萜含量的对比分析。

分光光度法测定灵芝孢子油中的总三萜含量
王彩云;郝晓宏;谷日旭;韩琼
【期刊名称】《实用医技杂志》
【年(卷),期】2005(12)11B
【摘要】采用硅胶层析柱将灵芝孢子油中的甘油三酯及溶于其中的可能对总三萜含量测定造成干扰的组分分离除去，然后再用分光光度法测定灵芝孢子油中的总三萜含量。

该方法简单快速，得到了满意的结果，可用于质量控制。

【总页数】1页(P3326)
【作者】王彩云;郝晓宏;谷日旭;韩琼
【作者单位】山西省疾病预防控制中心,山西太原030012
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.分光光度法测定灵芝孢子油中的总三萜含量 [J], 王彩云;郝晓宏;谷日旭;韩琼
2.紫外分光光度法测定灵芝孢子油中总三萜含量 [J], 宋福江;王玉乐;闫寒;范斌;孙健
3.分光光度法测定灵芝孢子油中总三萜的含量 [J], 李维嘉; 王志强; 许泽群; 梁洁怡; 林晨
4.紫外-可见分光光度法测定破壁灵芝孢子粉中总三萜及多糖含量 [J], 朱莉;徐晓萍;黄婷
5.分光光度法测定灵芝孢子粉中总三萜含量 [J], 林麒;吕华东
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