HPLC法测定广西产山豆根氧化苦参碱的含量
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高效液相色谱法在中药含量测定方面的应用高效液相色谱技术(HPLC)是一种重要的分离与分析技术,其具有高压、高速、高效、高灵敏度、消耗样品少、色谱柱可反复使用、测定样品量少,容易回收等优势。
近年来,高效液相色谱检测中药的研究非常多,本文就HPLC在不同药物类型的中药活性成分中的应用进行综述,以供临床参考。
1.生物碱类成分含量测定生物碱结构复杂在植物界分布较广,大多具有生理活性,为许多中草药及药用植物的有效成分。
郑丽娜等人[1]表明高效液相色谱法测定山豆根中苦参碱和氧化苦参碱的含量,此方法线性关系良好,精密度、稳定性、重现性均较好,回收率较高.2.中药甙类成分的含量测定甙类在高等植物较为普遍,其种类繁多,结构不一,生理活性具有多样性,已成为目前研究天然药物很重要的一大类成分。
黄秋妹[2]采用高效液相色谱法,以甲醇:0.1%磷酸溶液(17∶83)为流动相,检测波长为233nm,流速为1mL?min-1. 结果,线性范围为0.08445~42.225mg,r值均为0.9999;回收率为99.46%,RSD分别为1.93%,1.74%。
3 .蒽醌类成分含量测定中药中以蒽醌及其衍生物为主的蒽醌类成分较为普遍,其中何首乌及制何首乌中以蒽醌类活性成分为主。
彭贵龙等[3]人表明高效液相色谱法对大黄酸、大黄素和大黄酚分别在0.0001~12.50μg/mL、0.0002~25.00μg/mL、0.00018~22.50μg/mL 范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.9999,定性检测限(S/N=3)依次是:0.0703 ng/mL、0.0282 ng/mL、0.0871 ng/mL;样品回收率为88.39%~107.2%。
高效液相色谱法操作简单快速、定量准确、灵敏度高、成本低,为何首乌中蒽醌类化合物的检测分离及含量测定提供了一个有效的科学方法.4 .黄酮类成分含量测定酮类化合物数量之多位列天然酚性中化合物之首,植物体内其主要与糖结合成甙,小部分以甙元形式存在。
山豆根配方颗粒中苦参碱含量测定作者:谢丽莎闫守霞金钊江海燕来源:《中国保健营养·中旬刊》2012年第10期【摘要】目的:建立山豆根配方颗粒中苦参碱的含量方法。
方法:采用HPLC法,色谱柱:Phenomenex kinetex HILIC(2.6μm 100×4.6mm),流动相:乙腈:10mM乙酸铵(90:10),pH=4.1,流速1.0mL/min,柱温35℃,检测波长为215nm。
结果:苦参碱线性范围为53.6~536μg•ml-1(r=0.9997),平均加样回收率为99.16%,RSD为1.96%。
结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于山豆根配方颗粒的质量控制。
【中图分类号】R283.1 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2012)10-0035-02山豆根配方颗粒是以山豆根药材为原料经现代工艺提取、浓缩、精制而的单味产品,其性味、归经、功效与原饮片保持基本一致,保留了中医辨证施治的特色,而且携带、服用方便。
目前采用HPLC法测定原药材中苦参碱含量多多选择氨基柱、苯基柱、C18柱进行试验[1-3],本实验选择亲水柱HILIC柱,建立了HPLC法测定山豆根配方颗粒苦参碱含量测定方法。
1仪器及材料1.1仪器:Agilent 1200高效液相色谱仪(美国安捷伦公司),FA2004电子天平(上海恒平科学仪器有限公司),KQ5200DE型数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2材料:山豆根配方颗粒(广西培力(南宁)药业有限公司,批号:A061024-01、A081082-01、A090706-01),苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110805-200508),其它试剂均为分析纯。
2方法与结果2.1色谱条件:Phenomenex kinetex HILIC(2.6μm 100×4.6mm)色谱柱,流动相为乙腈:10mM乙酸铵(90:10),pH=4.1,使用用前以微孔滤膜滤过并经超声脱气处理,流速1.0mL/min,柱温35℃,检测波长为215nm。
43二○○九年·第五期研究报告HPLC 检测苦参中苦参碱和氧化苦参碱的含量黄华树 1 叶能胜 1 郝晓丽 1 刘妮 1 谷学新 1* 范国强 2(1.首都师范大学化学系北京 100048(2.北京同仁堂股份有限公司科学研究所北京 100011摘要建立 HPLC 法测定苦参中苦参碱和氧化苦参碱含量。
色谱柱采用Aichrom NH 2 (250×4.6mm,5μm ,流动相为乙腈 -乙醇 -3%磷酸溶液 (80∶ 10∶ 10 ,流速 :1.0 mL/min,检测波长 :210nm ,进样量为10μL ,柱温 :30℃。
苦参碱在0.5~10μg/mL范围内有良好的线性关系 (r=0.9998,氧化苦参碱在0.5~10μg/mL范围内有良好的线性关系 (r=0.9997。
苦参碱平均加标回收率为 100.42%(n=5, RSD 为1.91%; 氧化苦参碱平均加标回收率为 100.26%(n=5, RSD 为 2.03%。
该方法操作简单、重现性好、检测灵敏度、准确度高, 且样品分离效果好。
本方法适用于苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定。
关键词高效液相色谱法苦参苦参碱氧化苦参碱苦参是常用中药之一,具有清热燥湿、祛风杀虫、利尿之功效,为临床常用中药,用于热痢,便血,黄疸尿闭,赤白带下,阴肿阴痒,湿疹,皮肤瘙痒疥癣麻风 ; 外治滴虫性阴道炎。
苦参植物中主要含有生物碱、挥发油、黄酮类化合物和脂肪酸。
其中生物碱类的主要药效成分苦参碱和氧化苦参碱具有抗肿瘤、抗肝纤维化、抗乙肝病毒、对异常肝细胞凋亡的阻断、平喘和抑菌作用 [1,2]。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chroma-tography , HPLC 是中药质量控制研究中的常用方法[3,4],应用 HPLC 法测定苦参中苦参碱和氧化苦参碱的含量已有报道,田娟 [5]等和汪文来 [6]等分别用高效液相色谱法测定不同产地的苦参中苦参碱和氧化苦参碱的含量,灵敏度较高,操作简单,但是杂质干扰较大。
高效液相色谱法测定苦参中苦参碱的含量李明松;许青【摘要】目的:探讨苦参中苦参碱的测定方法.方法:采用高效液相色谱法(HPLC法),用Zorbax NH3 (4.6mm×1.5mm)色谱柱,以乙腈-无水乙醇-水(80:10:10)为流动相,磷酸调PH=2,流速为1.0ml/min,柱温为50℃,检测波长为210nm.结果:苦参碱在0.0141~0.0865 mg/ml之间与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9962),平均加样回收率98.15%,RSD= 1.42%.结论:HPLC法操作简便,结果准确,可用于苦参中苦参碱的含量测定.【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2013(022)005【总页数】2页(P19-20)【关键词】高效液相色谱法;苦参碱;含量测定【作者】李明松;许青【作者单位】贵州省安顺市人民医院,贵州,安顺,561000【正文语种】中文【中图分类】R284.1苦参[1]为豆科槐属(Leguminosae)植物Sophora flavescens Ait的干燥根,性寒,味苦。
具有清热燥湿,杀虫,利尿等功效,主要作用有以下几点:①用于湿热泻痢,便血,黄疸;②用于湿热带下,阴肿阴痒,疥癣;③用于湿热小便不利。
本品含20多种生物碱,主要为苦参碱、氧化苦参碱,由于苦参药材中主要含有生物碱和黄酮两大类化学成分,其中生物碱中又以苦参碱和氧化苦参碱的含量较高,多作为控制质量的有效成分[2]。
本文采用高效液相色谱法对苦参中苦参碱的含量进行测定,来检测该法对苦参药材的质量控制是否可行。
苦参碱对照品(批号:110805-200306)供含量测定用,中国药品生物制品检定所;苦参药材购于贵阳市花果园药材批发市场,经中药鉴定教研室刘芃教授鉴定为豆科槐属(Leguminosae)植物苦参Sophora flavescens Ait的干燥根;高效液相色谱仪(LC5A),日本岛津;所用试剂均为分析纯。
HPLC测定苦参配方颗粒中苦参碱与氧化苦参碱含量
王丽聪;李松
【期刊名称】《盐城工学院学报(自然科学版)》
【年(卷),期】2013(026)001
【摘要】采用高效液相色谱法,以氨基键合硅胶为填充剂,以乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(80∶10∶10)为流动相,检测波长为220 nm,建立了一种可同时测定苦参配方颗粒中苦参碱与氧化苦参碱含量的方法.结果表明:苦参碱回归方程为Y=499.412 2X-8.070 1,R=0.999 9,线性范围为0.158 ~1.580μg.氧化苦参碱回归方程为
Y=557.152 4X-15.568 8,R=0.999 9,线性范围为0.1 68 6~1.686 0μg.苦参配方颗粒中苦参碱和氧化苦参碱的总量的平均含量为4.60%,回收率在98%~103%之间,RSD为1.52%.
【总页数】4页(P48-51)
【作者】王丽聪;李松
【作者单位】江阴天江药业有限公司,江苏江阴214434
【正文语种】中文
【中图分类】TQ464.4
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RP-HPLC-UV法测定山豆根中苦参碱与氧化苦参碱张晓燕;孙文博;梁妍;郝小燕;郭治友;周威【摘要】Objective:To establish a new RP-HPLC-UV method for simultaneous determination of matrine and oxymatrine,and to study its application in quality detection of Sophorae Tonkinensis Radix Et Rhizoma.Methods:The RP-HPLC-UV method was chose,the separation was performed on a Diamonsil C18 (250 x4.6 mm,5 μm) analytical column (4.6 mm x250 mm,5 μm),and the mobile phase was Acetonitrile-25 mmol/L Potassium dihydrogen phosphate water solution(10:90,V/V) at a flow rate of 1.0 mL/min,detection wavelength of 210 nm.Results:The concentrations and peak areas of matrine and oxymatrine were in concentration ranges of 1.00 ~120.0 μg/mL (R =0.999 7) and 1.45 ~144.0 μg/mL (R =0.999 9) respectively with good linear relation.Their average sample-added recoveries were 98.69% and 102.18% respectively.The average content of matrine in Sophorae Tonkinensis Radix Et Rhizoma was 0.81 mg/g (crude drug),and that of oxymatrine was 6.98 mg/g (crude drug).Conclusion:This established method is simple,accurate,and practical,and is suitable for simultaneous determination of matrine,oxymatrine,and other relavant medicinal materials.%目的:建立一种新的反相高效液相色谱法(RP-HPLC-UV)同时测定苦参碱、氧化苦参碱及其在山豆根中的应用.方法:采用RP-HPLC-UV检测方法,Diamonsil C18(250mmx4.6mm,5μm)分析色谱柱,流动相为乙腈(A)-25 mmol/L磷酸二氢钾(KH2P04,B)水溶液(10:90,V/V),检测波长210 nm,流速1.0 mL/min.结果:苦参碱、氧化苦参碱的浓度与峰面积分别在1.00~ 120.0mg/L(R=0.999 7)、1.45 ~ 144.0 mg/L(R =0.999 9)浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.69%、102.18%;山豆根药材中苦参碱平均含量0.81mg/g(生药量),氧化苦参碱平均含量6.98 rag/g(生药量).结论:该方法简便、准确、实用,适用于同时分析测定苦参碱、氧化苦参碱及其相关药材.【期刊名称】《贵阳医学院学报》【年(卷),期】2017(042)003【总页数】6页(P269-274)【关键词】苦参碱;氧化苦参碱;山豆根;液相色谱【作者】张晓燕;孙文博;梁妍;郝小燕;郭治友;周威【作者单位】贵州医科大学基础医学院药学院,贵州贵阳550025;贵州医科大学基础医学院药学院,贵州贵阳550025;贵州医科大学基础医学院药学院,贵州贵阳550025;贵州医科大学基础医学院药学院,贵州贵阳550025;黔南民族师范学院生命科学系,贵州都匀558000;贵州医科大学基础医学院药学院,贵州贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】R927苦参碱(matrine,RN 519-02-8)、氧化苦参碱(oxymatrine,RN 16837-52-8)是最初从中草药苦参(Sophora flavescens Ait.)、越南槐(Sophora tonkinensis Gagnep.,山豆根)等豆科植物中分离得到的喹诺里西啶类生物碱,它们具有抗肿瘤、抗心律失常、镇咳、平喘、抗炎和镇痛作用,有广泛的成药性开发前景。
含量测定(高效液相色谱法)名称注意成分标准狗脊(烫狗脊)原儿茶酸不得少于0.020%。
细辛细辛脂素药材和饮片不得少于0.050%大黄大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素总量不得少于1.5%。
虎杖大黄素不得少于0.60%避光操作虎杖苷不得少于0.15%。
何首乌避光操作2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷不得少于1.0%。
制何首乌不得过0.70%结合蒽醌(大黄素、大黄素甲醚) 总量不得少于0.10%。
制何首乌不得过0.05%游离蒽醌(大黄素、大黄素甲醚) 总量计,不制何首乌得少于0.10%。
牛膝β-蜕皮甾酮药材和饮片不得少于0.030%。
川牛膝杯苋甾酮药材和饮片不得少于0.030%。
商陆商陆皂苷甲不得少于0.15%。
太子参太子参环肽B 不得少于0.020%。
威灵仙齐墩果酸、常春藤皂苷元药材和饮片均各不得少于0.30%川乌含乌头碱、次乌头碱、新乌头碱总量应为0.050%~0.17%。
制川乌苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰新乌头碱总量应为0.070%~0.15%。
草乌含乌头碱、次乌头碱、新乌头碱总量应为0.10%~0.50%。
制草乌苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰新乌头碱总量应为0.20%~0.70%。
附子苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱药材和饮片、淡附片总量,不得少于0.010%。
白芍芍药苷不得少于1.6%。
饮片不得少于1.2%。
赤芍芍药苷不得少于1.8%。
饮片不得少于1.5%。
黄连(味连) 小檗碱不得少于5.5%表小檗碱不得少于0.80%,黄连碱不得少于1.6%巴马汀不得少于1.5%。
黄连片、酒黄连、姜黄连、萸黄连小檗碱不得少于5.0%表小檗碱、黄连碱、巴马汀总量不得少于3.3%。
升麻异阿魏酸不得少于0.10%。
防己粉防己碱、防己诺林碱、药材含总量不得少于1.6%饮片含总量不得少于1.4%。
延胡索(元胡) 延胡索乙素药材不得少于0.050%。
HPLC法测量山豆根和开喉剑喷雾剂中氧化苦参碱含量HPLC法测量山豆根和开喉剑喷雾剂中氧化苦参碱含量(贵州师范大学化学与材料学院,贵州贵阳 550001)摘要:以超声提取法提取山豆根与开喉剑中的氧化苦参碱为研究对象,并采用高效液相色谱测定其出锋面积,通过标准曲线方程计算出山豆根和开喉剑中氧化苦参碱的含量。
甲醇-水(0.025%磷酸)(5:95)为流动相;检测波长:220nm;流速:1.0ml/min;进样量:10μl;柱温:40℃。
结果表明:氧化苦参碱的HPLC进样量在10μg/ml-0.1μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9995),标准偏差RSD=0.011,平均回收率为76.43%。
本方法简便易行、精确度高、重复性好。
适用于检测山豆根和中成药中氧化苦参碱的含量。
关键词:高效液相色谱法;山豆根;开喉剑;苦参碱Determination of Oxymatrine in Vietnamese Sophora Root and open the larynx sword with high performance liquid chromatographyLinghu Changfa(Chemistry and materials science, Guizhou Normal University, 550001 Guizhou Guiyang) Abstract: Extracted by ultrasonic extraction tonkinensis with open throat Sword oxymatrine for the study, and using high-performance liquid chromatographic determination of its front area, calculated by the standard curve equation tonkinensis and open throat sword in oxidation flavescensthe content of a base. Methanol - water (0.025% phosphoric acid), (5:95) as mobile phase; detection wavelength: 220nm; flow rate: 1.0ml/min; injec tion volume: 10 μl; column temperature: 40 ° C. : Oxymatrine The HPLC injection volu me in 10μg/ml-0.1μg/mlwithin the integral value of the peak area showed a good linear relationship (r = 0.9995), the standard deviation (RSD) = 0.011, the average recovery was 76.43 %. This method is simple, high accuracy, good repeatability. Apply to detection oxymatrine tonkinensis and proprietary Chinese medicines in the content. Keywords: HPLC;Vietnamese Sophora Root;open the larynx sword oxymatrine引言:山豆根(Vietnamese Sophora Root)为双子叶植物纲豆科植物越南槐的干燥根及根茎。