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苦参碱的液相检测方法一、液相检测方法的重要性。
1.1 苦参碱是一种很重要的物质啊，在医药啊、农业等好多领域都有它的身影。
要想好好研究它、利用它，那得先有个靠谱的检测方法，液相检测就是其中很厉害的一种。
就好比你要认识一个人，得先有个好办法去看清他的真面目一样，液相检测就是看清苦参碱的好办法。
1.2 这种检测方法就像是一把精准的尺子，可以准确地量出苦参碱的各种情况。
在科学研究里，精确性那可是重中之重，就像盖房子打地基，基础不牢地动山摇，液相检测这个地基要是打得好，关于苦参碱的后续研究啊、应用啊才能稳稳当当的。
二、液相检测的具体步骤。
2.1 样品的准备。
这可是个细致活儿，就像厨师做菜前准备食材一样，得小心翼翼的。
首先要把苦参碱的样品处理好，该提取的提取，该净化的净化，可不能马马虎虎。
要是样品准备得不好，那后面检测出来的数据就可能是“歪瓜裂枣”，完全不靠谱。
2.2 仪器的选择与调试。
液相色谱仪可不是个简单的家伙，要选对合适的型号和配置。
这就好比选对象，得找个适合自己需求的。
调试的时候更得一丝不苟，各种参数都要设置得恰到好处，差一点儿都可能影响检测结果。
这时候就得拿出“精益求精”的态度，不能有丝毫的懈怠。
2.3 检测过程中的注意事项。
在检测的时候啊，环境因素可不能忽视。
温度、湿度这些就像调皮的小鬼，稍不注意就可能捣乱。
而且进样的量啊、流速啊这些参数，那都是有严格要求的。
就像行军打仗，每个士兵都得站好自己的岗，每个参数都得在规定的范围内，不然整个检测就可能“乱成一锅粥”。
三、结果的分析与解读。
3.1 当液相检测出结果了，可别以为就大功告成了。
这结果就像一团乱麻，得慢慢梳理。
要根据标准曲线啊、保留时间啊这些信息来判断检测结果的准确性。
这就像是解谜一样，得抽丝剥茧，找到关键的线索。
3.2 对于结果的解读也要全面。
不能只看表面的数据，要考虑到可能存在的误差啊、干扰因素啊。
有时候数据可能会“忽悠”人，看起来挺好，其实背后可能有问题。
发布日期20051012栏目中药药物评价>>中药质量控制标题浅谈苦参碱与氧化苦参碱的相互转化及其在中药质控中的意义作者任冬梅部门正文内容浅谈苦参碱与氧化苦参碱的相互转化及其在中药质控中的意义审评二部任冬梅苦参碱（matrine）、氧化苦参碱（oxymatrine）是豆科植物苦参、山豆根、苦豆子的主要成分，属喹诺里西啶类生物碱，二者均具有广泛的生物活性，如抗炎、抗肿瘤、镇痛、抗心率失常、镇咳、杀菌等作用。
其中氧化苦参碱氮原子以配位键与氧结合（结构见Fig.1）。
研究表明，苦参碱和氧化苦参碱存在相互转化，氧化苦参碱在某些条件下氮氧键裂开转化为苦参碱。
中国药典2005年版一部中苦参项下为测定苦参碱（C15H24N2O）和氧化苦参碱（C15H24N2O2）的总量。
本文从二者相互转化的关系出发，浅谈二种成分的相互转化对于中药及中药制剂质量控制的意义。
一、苦参碱与氧化苦参碱的相互转化1、苦参碱、氧化苦参碱的天然存在情况有资料表明，苦参、苦豆子等药材中氧化苦参碱的含量远高于苦参碱的含量，表明在植物体内氧化苦参碱应为较稳定的天然存在形式。
贾敏鸽[ 贾敏鸽，孙文基.苦参及其复方中苦参碱与氧化苦参碱的转化研究.药物分析杂志，2003，23（2）：90]等通过研究苦参药材及含苦参复方水煮后苦参碱和氧化苦参碱的转化情况，结果也表明，苦参药材中，氧化苦参碱的含量远高于苦参碱。
苦参药材水煮后，氧化苦参碱含量略高于苦参碱，随着水煮时间的延长，氧化苦参碱向苦参碱转化并趋于动态平衡。
其结论是苦参中的苦参碱与氧化苦参碱含量在药材单用与在复方中明显不同。
药材中以氧化苦参碱为主要成分，含苦参的复方则以苦参碱为主要成分，苦参药材入药后苦参碱与氧化苦参碱存在着相互转化。
2、复方制剂中的转化情况含苦参药材的复方（止痛散、苦参汤）水煮后苦参碱含量高于氧化苦参碱，随着煎煮时间的延长，比例显著加大。
陆蕴如[ 陆蕴如，杨钟柯，董育妹.苦参在复方中化学成分变化的研究.中国中药杂志，1996，21（7）：412]等研究了苦参在复方中化学成分的变化，结果表明，苦参与丹参、茵陈等配伍煎煮时，药液中检不到氧化苦参碱，而在加水室温超声提取时，TLC可以检出明显的氧化苦参碱斑点。
43二○○九年·第五期研究报告HPLC 检测苦参中苦参碱和氧化苦参碱的含量黄华树 1 叶能胜 1 郝晓丽 1 刘妮 1 谷学新 1* 范国强 2(1.首都师范大学化学系北京 100048(2.北京同仁堂股份有限公司科学研究所北京 100011摘要建立 HPLC 法测定苦参中苦参碱和氧化苦参碱含量。
色谱柱采用Aichrom NH 2 (250×4.6mm,5μm ,流动相为乙腈 -乙醇 -3%磷酸溶液 (80∶ 10∶ 10 ,流速 :1.0 mL/min,检测波长 :210nm ,进样量为10μL ,柱温 :30℃。
苦参碱在0.5~10μg/mL范围内有良好的线性关系 (r=0.9998,氧化苦参碱在0.5~10μg/mL范围内有良好的线性关系 (r=0.9997。
苦参碱平均加标回收率为 100.42%(n=5, RSD 为1.91%; 氧化苦参碱平均加标回收率为 100.26%(n=5, RSD 为 2.03%。
该方法操作简单、重现性好、检测灵敏度、准确度高, 且样品分离效果好。
本方法适用于苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定。
关键词高效液相色谱法苦参苦参碱氧化苦参碱苦参是常用中药之一,具有清热燥湿、祛风杀虫、利尿之功效,为临床常用中药,用于热痢,便血,黄疸尿闭,赤白带下,阴肿阴痒,湿疹,皮肤瘙痒疥癣麻风 ; 外治滴虫性阴道炎。
苦参植物中主要含有生物碱、挥发油、黄酮类化合物和脂肪酸。
其中生物碱类的主要药效成分苦参碱和氧化苦参碱具有抗肿瘤、抗肝纤维化、抗乙肝病毒、对异常肝细胞凋亡的阻断、平喘和抑菌作用 [1,2]。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chroma-tography , HPLC 是中药质量控制研究中的常用方法[3,4],应用 HPLC 法测定苦参中苦参碱和氧化苦参碱的含量已有报道,田娟 [5]等和汪文来 [6]等分别用高效液相色谱法测定不同产地的苦参中苦参碱和氧化苦参碱的含量,灵敏度较高,操作简单,但是杂质干扰较大。
标准号WS-10001-(HD-0047)-2002药品名称苦参碱药品英文名Matrine主要成分本品系从豆科槐属植物苦豆子（Sophora alopecuroides L.）果实或地上部分提取的一种生物碱。
按干燥品计算，含C15H24N2O不得少于98.0%。
处方性状本品为白色针状结晶或结晶性粉末；无臭，味苦；久置于空气中，有引湿性，并变为淡黄色。
本品在乙醇、氯仿、甲苯、苯中极易溶解，在丙酮中易溶，在水中溶解，在热水、石油醚中略溶。
比旋度取本品，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中含20mg的溶液，依法测定（中国药典2000年版二部附录VI E）比旋度为＋31.0°至＋36.0°鉴别（1）取本品约5mg，加稀盐酸10ml溶解后，分置两支试管中，一管中加碘化汞钾试液1滴，生成白色沉淀；另一管中加碘化铋钾试液1滴，生成橙红色沉淀。
（2）取本品与苦参碱对照品，分别加流动相制成每1ml约含0.08mg的溶液，照有关物质项下的方法试验，供试品主峰的保留时间应与对照品的保留时间一致。
检查碱度取本品0.2g，加水40ml溶解后，依法测定（中国药典2000年版二部附录VI H），pH值应为9.5～10.5。
溶液的澄清度与颜色取本品0.5g，加水25ml溶解后，溶液应澄清无色。
如浑浊，与1号浊度标准液（中国药典2000年版二部附录IX B）比较，不得更浓。
如显色，与黄色1号标准比色液（中国药典2000年版二部附录IX A）比较，不得更深。
氯化物取本品0.5g，依法测定（中国药典2000年版二部附录III），与标准氯化钠溶液5.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.01%）。
干燥失重取本品，先在60～70℃加热干燥1～2小时，再升高温度至105℃，干燥至恒重，减失重量不得过1.0%（中国药典2000年版二部附录VIII L）。
炽灼残渣取本品2.0g，依法检查（中国药典2000年版二部附录VIII N），遗留残渣不得过0.1%。
一种苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的薄层色谱鉴
别法
薄层色谱法是一种常用的中药材鉴别方法，可以用于苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的鉴别。
以下是该方法的步骤：
1. 准备样品：从苦参药材中取出适量样品，研磨成细粉。
2. 制备供试品溶液：取一定量的苦参药材粉末，加入适量的乙醇，超声提取30分钟，过滤得到供试品溶液。
3. 制备对照品溶液：取一定量的苦参碱和氧化苦参碱对照品，加入适量的乙醇，超声提取30分钟，过滤得到对照品溶液。
4. 点样：将供试品溶液和对照品溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，用展开剂展开。
5. 观察结果：取出薄层板，晾干后用碘化钾-碘液显色，观察是否有明显的色斑出现。
如果有，则说明样品中含有苦参碱和氧化苦参碱。
需要注意的是，在进行薄层色谱法鉴别时，要选择合适的展开剂和显色剂，以确保结果的准确性和可靠性。
同时，还需要注意实验条件的控制，如温度、湿度等，以避免影响实验结果。
HPLC同时测定复方石韦片和苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的含量江维克;王丽【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2005(027)001【摘要】目的:建立苦参药材及其制剂--复方石韦片(石韦、苦参、黄芪、篇蓄等)中氧化苦参碱和苦参碱的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,使用Hypersil C18 ODS2色谱柱,以甲醇-0.2%三乙胺溶液(45:55)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为220 nm.结果:氧化苦参碱在20.7～207.0μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),在苦参药材及制剂中的平均回收率分别为101.0%和100.3%,RSD 为1.5%和0.67%;苦参碱在20.7～207.2μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),在药材及制剂中的平均回收率分别为101.2%和100.6%,RSD为1.2%和0.74%.结论:本法灵敏、准确、专属性强,重现性好,可作为苦参药材及其制剂的质量控制方法.【总页数】4页(P45-48)【作者】江维克;王丽【作者单位】贵阳中医学院,药学系,贵州,贵阳,550002;麦迪科医药科技开发研究所,贵州,贵阳,550002【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.HPLC法测定心律宁片(苦参总碱片)中苦参碱和氧化苦参碱的含量 [J], 庞树和;田葳;潘淑明2.HPLC同时测定苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定方法 [J], 纪佳3.HPLC法测定复方石韦片中苦参碱和氧化苦参碱的含量 [J], 苏静州;刘明言;董海荣4.HPLC测定复方苦参注射液中苦参碱、槐定碱和氧化苦参碱的含量 [J], 田娟;王维皓;高慧敏;王智民5.HPLC测定苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的含量 [J], 田娟;王智民;王维皓因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
西安源森生物苦杏仁甙水提法最佳条件及含量测定研究苦杏仁甙是从中药苦杏仁中分离的具有止咳作用的一种芳香族氰甙，可释放少量氢氰酸而用于镇咳平喘，药用价值极高，且已被广泛应用于医药、保健品中。
西安源森生物实验室为充分开发苦杏仁提取物，严格控制苦杏仁甙的质量，将在本次实验中以水为提取溶剂，采用UV法分别测定不同料液比、浸泡时间及提取时间条件下提取的苦杏仁甙含量。
本次实验以纯度大于99%的苦杏仁甙为对照品，含量测定波长291nm.一、西安源森生物苦杏仁甙水提实验材料与方法（一）西安源森生物本次实验仪器旋转蒸发器RSE-52 AA；紫外分光光度计UV-3010；SHB-111 循环水式从用真空泵。
（二）材料与试剂新疆小白杏杏仁；苦杏仁甙标准品(纯度大于99%)；石油醚、甲醇(均为分析纯)、去离子水。
（三）方法1. 西安源森生物苦杏仁甙提取方法精密称取一定量经粉碎机粉碎并过筛的苦杏仁→加入适量石油醚在室温下震荡浸提24h →过滤→滤渣用石油醚清洗后挥干→称重→得到去油杏仁粉→将杏仁粉过100 目筛后备用。
精密称取杏仁粉1.5g，放入磨口三角瓶中，用定量的水浸泡提取→过滤→收取滤液→浓缩→定容至50ml容量瓶中→摇匀得苦杏仁甙提取液。
2.分析方法（1）苦杏仁甙的紫外吸收光谱以甲醇为溶剂配制苦杏仁甙标准溶液(0.1mg/ml)→置1cm石英小池→放在紫外分光光度计上→选择200～300nm 波长范围测定吸收A值，并以甲醇作空白记录其紫外吸收光谱。
如图1所示：苦杏仁甙于波长219nm处出现最大吸收峰，因此确定检测波长为219nm。
（2）标准曲线的绘制精密称取经1 0 5 ℃干燥至恒重的苦杏仁甙标准品5mg→甲醇溶解定容至50ml→制得0.1mg/ml苦杏仁甙标准溶液。
准确移取标准溶液1 、2 、3 、4 、5 、6 、7、8、9、10ml，用甲醇分别定容至10ml，得到浓度为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.10mg/ml的系列标准溶液。
2020年苦参药典标准
根据提供的参考信息，2020年版《中华人民共和国药典》对苦参进行了液相检测的相关规定。
苦参是一种常见的中药材，具有清热解毒、杀虫、燥湿等功效，常用于治疗湿热黄疸、泻痢、湿疹、疮毒等症状。
液相检测是一种常用的药物分析技术，它通过高效液相色谱法（HPLC）来测定药物中特定成分的含量，以确保药品的质量。
2020年版药典中对苦参的液相检测可能涉及以下内容：
1.检测方法：采用高效液相色谱法（HPLC）来测定苦参样品中的活性成分，如苦参碱、氧化苦参碱等。
2.色谱柱：根据提供的信息，建议使用的色谱柱为Zaf exSupfexHP-C18或EclipsePlusC18等，这些色谱柱具有较好的选择性和稳定性。
3.流动相：根据参考信息，流动相可能为0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用氢氧化钾调节pH至7.0）与甲醇的混合溶剂，比例为28:72（体积比）。
4.检测波长：通常使用UV光进行检测，根据参考信息，检测波长为254nm。
5.柱温：检测时的柱温设定为30℃。
6.流速：样品流过色谱柱的速度设定为1.0mL/min。
7.进样量：进样体积一般为1μL。
这些具体的检测条件和技术参数有助于确保苦参及其制剂的质量控制，从而保障患者用药的安全性和有效性。
需要注意的是，具体的检测方法和要求可能会根据药典的不同版本和更新有所变化，因此，进行苦参的质量分析时，应参照最新的药典规定进行。
苦参生物碱—苦参碱和氧化苦参碱的提取,分离...
詹原尧
【期刊名称】《天津药学》
【年(卷),期】1991(3)3
【摘要】苦参的主要成分为生物碱阳黄酮类化合物,其生物碱主要是苦参碱和氧化苦参碱。
实验用离子交换法和醇提法提取、分离,纯化苦参碱和氧化苦参碱,利用氧化苦参碱难溶于乙醚的性质,于三氯甲烷浓缩液中加入乙醚,使氧化苦参碱析出沉淀过滤而分离,乙醚层含苦参碱,沉淀层为氧化苦参碱。
又用薄层层析和纸层析与标准品对照法,判断从苦参中提取的是否为苦参碱及氧化苦参参碱。
用薄层层析测定出氧化苦参碱的极性大于苦参碱。
用纸层折分析,氧化苦参碱的Rf值为0.51,苦参碱的Rf值为0.48,苦参碱的碱性强于氧化苦参碱,苦参碱可与醋酸成盐,在弱极性溶剂中较难溶,故苦参碱的Rf值稍小于氧化苦参碱。
【总页数】4页(P7-10)
【作者】詹原尧
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.苦参碱和氧化苦参碱的转化对苦参提取工艺的影响 [J], 潘广洲;李峰;李键
2.密闭微波辅助提取-HPLC测定苦参中苦参碱和氧化苦参碱 [J], 陈浩浩;罗少健;
范华均;黄晓文;佘旭辉;马晓玲
3.超声提取苦参中的苦参碱和氧化苦参碱 [J], 陈静;杨霞卿;唐芳勇;魏要武
4.多叶越南槐中苦参碱与氧化苦参碱的分离鉴定及含量测定研究 [J], 陆国寿;叶勇;卢文杰;黄周锋;曾繁强
5.苦参生物碱成分的研究——Ⅱ、氧化苦参碱及其它生物碱成分的分离 [J], 白世泽;何继华;杨泽铨;饶尔昌
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HPLC法测定苦参片中苦参碱及氧化苦碱的含量发表时间：2012-08-24T08:56:02.187Z 来源：《心理医生》2011年12第205期供稿作者：李德鑫1郑亚玉2靳凤云2 [导读] 本试验采用HPLC法测定苦参片中苦参碱、氧化苦参碱的含量,方法简单、准确,适合作该制剂的含量测定方法。
李德鑫1郑亚玉2靳凤云2（1.贵阳中医学院2009级研究生 550002；2.贵阳中医学院 550002）【摘要】目的：建立苦参片中苦参碱、氧化苦参碱的含量测定方法。
方法:采用高效液相法,用氨基色谱柱,以乙腈-3%磷酸溶液-无水乙醇(82:9:9)为流动相,检测波长207 nm。
结果:苦参碱在(0.1102～1.102ug)、氧化苦参碱在0.1042～1.042μg范围内线性关系良好。
平均加样回收率为98.84%,RSD=0.92%。
结论:该法快速,准确实用,可用于控制苦参片的质量。
【关键词】苦参片；苦参碱；氧化苦参碱；高效液相【中图分类号】S567【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2011）12-2204-01苦参片为部颁标准，标准号WS3-B-1953-95，具有清热燥湿，杀虫的功效。
用于湿热蕴蓄下焦所致的痢疾，肠炎，热淋及阴肿阴痒，湿疹，湿疮等。
原标准中无含量测定,为了更好地控制产品质量,对本品中苦参碱、氧化苦参碱进行了含量测定方法的研究。
1仪器与试药高效液相色谱仪（岛津）：输液泵LC-Atvp；紫外检测器SPD-10Avp。
试药：苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号110805-200306), 氧化苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号0708-200004)；乙腈(色谱纯),水为重蒸水，无水乙醇、甲醇均为分析纯。
苦参片样品(批号: 040501、040601、040602)由贵州顺健制药有限公司提供。
2方法与结果2.1色谱条件氨基色谱柱(5um，4.6×200mm)，以乙腈-3%磷酸溶液-无水乙醇（82：9：9）为流动相，检测波长207nm，流速1.0ml/min。
2019年第16期广东化工第46卷总第402期·119·氧化苦参碱的药理作用研究进展张景正，严宝飞(江苏卫生健康职业学院药学院，江苏南京211800)Advances in Pharmacological Studies of OxymatrineZhang Jingzheng,Yan Baofei(Jiangsu Health Vocational College,Nanjing211800,China)Abstract:Oxymatrine is the main component of the traditional Chinese medicine Sophora flavescens.It has a variety of pharmacological effects and has received widespread attention in recent years.In addition,it has a certain foundation in clinical application and has broad application prospects.This article reviews the pharmacological effects of oxymatrine on anti-oxidation,anti-inflammatory,anti-bacterial,anti-viral,anti-fibrosis,anti-tumor and neuroprotective effects,In order to provide a theoretical basis for the prevention and treatment of related diseases and the research and clinical application of new drugs.Keywords:Oxymatrine；pharmacological effect；review氧化苦参碱来源于豆科植物苦参、山豆根和苦豆子等植物的生物碱活性成分当中，具有广泛的药理学作用，包括抗氧化、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗纤维化等[1]，除此之外，氧化苦参碱还具有镇静催眠、解热镇痛和神经保护等作用，更加令人欣喜的是，氧化苦参碱在用药过程中相对安全[2]，因此逐渐成为众多中药单体化合物的研究热点之一。
心律宁片剂中氧化苦参碱的萃取及其含量测定的研究采用超临界CO2流体法提取苦参中的氧化苦参碱，以0.1mL/L氨水作碱化
剂，在45℃、压力42MPa的条件下萃取2h，并用高效液相色谱法对萃取液中的氧化苦参碱进行定量分析，结果表明该方法可靠，精密度高，同时也为其他生物碱利用超临界CO2流体萃取法的萃取及定量建立了一种快速、简便、有效的方法。
[Abstract] Extract oxymatrine from Alkaloids Sophora Flavescen by fluid extraction CO2 beyond limit method with 0.1mL/L ammonia as alkalis at 45℃under the condition of pressure 42MPa for two hours.Carry on quantitative analysis for oxymatrine alkalis in extracting liquid by efficiently liquid chromatography. Result showed the method is credible and sophistication is high，also making use of fluid extraction CO2 beyond limit method to extract for the other alkaloids and fixed amount built up a kind of fast，simple and effective method.
[Key words] Fluid extraction CO2 beyond limit method；Sophora flavescens；Oxymatrine；Efficiently liquid chromatography
苦参为豆科植物苦参的干燥的根，具有清热燥湿、杀虫止痒，利尿等功能。
其有效成分生物碱含量较高，主要为：苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱等20余种。
大多数单碱对多种类生物（如真菌、细菌、线虫、昆虫、哺乳动物包括人类）有多方面的生物活性。
尤其近年来发现的抗癌而又增强免疫力等独特的药理作用为医药界所瞩目。
在超临界CO2流体萃取（CO2-SFE）中，由于处于超临界状态下的CO2流体兼顾液体及气体的传质特点，且超临界CO2流体萃取的特性和极性还可以通过调节萃取压力、温度、加入不同品种的夹带剂等因素方便的调节，从而使超临界CO2流体萃取显示了快速、提取效率高、选择性好等特点[1]，中药中的生物碱等极性偏大，加大压力后，CO2流体的密度和解电常数增大，极性增强：加入夹带剂也可有效地增大流体的溶解性能，促进成分的溶出[2]。
本实验用76%的乙醇作为夹带剂对苦参中的氧化苦参碱进行提取。
并用高效液相色谱法，以YWG-NH2为固定相，乙腈-无水乙醇-磷酸水溶液为流动相，测定氧化苦参碱的含量，现将实验结果介绍如下。
1 仪器和试剂
FY221-50-60型超临界萃取装置（哈尔滨市天宇科技开发有限公司）；美国WATERS高效液相色谱仪；600高压双泵；2996二极管阵列检测器；7725i定量进样阀；Millenium 32系统软件。
氧化苦参碱对照品由中国药品生物制品检定所提供；中药材由黑龙江省绥化市药品检验所提供；检定乙腈为HPLC级；水为纯化水；二氧化碳（99.99%）
由市化工厂提供；其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：YWG-NH2，250 mm×4.6 mm，10μm，流动相：乙腈∶无水乙醇∶水（80∶10∶10，磷酸调pH=2）；流速：1.0 mL/min；检测波长：220 nm；用外标法检测。
2.2 超临界CO2流体萃取的条件
2.2.1 碱化试剂的选择生物碱在植物中多数以盐的形式存在，若直接用极性较弱的溶剂提取，往往提取不完全，所以在提取前需先碱化，使之全部转化为游离碱，碱化剂可采用Ca（OH）2、三乙胺或氨水，由于Ca（OH）2不易溶于水，且易产生杂质，而三乙胺对萃取槽的腐蚀性也较大，故本实验采用氨水作为碱化剂，以投料量的二倍量浸泡过夜。
2.2.2 萃取压力的选择[3] 物质处于其临界温度（Tc）、临界压力（Pc）以上时，成为单一相态，称为超临界流体。
所以考察压力对提取率的影响，必须选择临界压力以上的压力。
在超临界流体中，压力越大，则流体的密度越大，萃取的能力越强，但对于杂质的萃取量也随之增加。
CO2的临界压力为7.534 MPa。
而在提取生物碱时，35 MPa和42 MPa样品的提取率间有非常显著的差异，但随提取压力的增加，杂质的提取率也有增加，所以选择42 MPa为本实验的萃取压力。
2.3 氧化苦参碱的提取
苦参干粉末投料300 g，加0.1 mL/L氨水600 mL浸泡过夜，次日投入萃取釜中，于45℃、CO2流量0.70 nm3/h连续萃取。
萃取过程中分3次加入夹带剂约200 mL，1.5 h后第1次收集萃取液，以后每隔0.5 h收集一次，直到无萃取液产生。
整个萃取过程约为2 h，收集萃取液约100 mL，其上层为浅黄至棕黄色透明液体，底部有少许棕黄色沉淀。
2.4 萃取液中苦参碱及氧化苦参碱的总含量测定
2.4.1 线性范围贮备液制备：精密称取氧化苦参碱对照品2 mg，置25 mL 量瓶中，用无水乙醇溶解，稀释至刻度，摇匀备用。
线性范围：精密量取上述贮备液0.25、0.50、1.50、2.50、
3.50、
4.50 mL置10 mL量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，按上述色谱条件进样10μL，记录峰面积，以对照液浓度（C）与其相应峰面积（A）A=277762.0C-10870.0，r=0.9994，线性范围为0.4～0.5μg/mL。
2.4.2 精密度实验取线性方程中1、2、4号对照品，分别进样5μL，测定其峰面积，计算RSD（n=5）分别为0.9%、1.1%、1.7%。
2.4.3 加样回收率精密量取6份萃取液1 mL，分别加入储备液0.5、1.0、1.5 mL置于10 mL量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，以滤膜过滤，分别进样5μL，测量峰面积，计算加样回收率平均为98.72%，RSD=
3.2%（n=6）。
2.4.4 样品测定精密量取萃取液1 mL，转移至10 mL量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，以滤膜过滤，即得供试液，平行制样5份。
取上述溶液各5μL 注入液相色谱仪，记录峰面积，以外标法计算氧化苦参碱含量。
样品色谱图及对照品色谱图，结果表明5份样品的氧化苦参碱含量平均值为4.82%，RSD=2.13%。
2.4.5 稳定性实验取线性方程中1、3、5号对照品，分别间隔1 h进样5μL，测定面积，计算变异系数RSD（n=5）为1.7%。
隔日再取上述样品进样，计算日间变异系数RSD（n=5）为1.2%。
上述结果表明，氧化苦参碱其日内日间均表现良好稳定性。
3 讨论
在夹带剂的选择中，常用的有乙醇、甲醇、苯等有机溶剂，考虑到生物碱易溶于有机溶剂，以及乙醇对仪器的腐蚀性最小，因此实验前拟定乙醇为夹带剂。
并根据参考文献[4]选取4种浓度的乙醇溶液（95%、80%、76%、70%）作为夹带剂分别进行实验性验证，结果表明，以76%浓度的乙醇作为夹带剂的提取率均高于其他3种浓度的乙醇作夹带剂时的提取率，与文献一致。
苦参中的生物碱主要有苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱等20余种[5]，其中苦参总碱占到全部生物碱的3%～5%。
且在苦参的冷浸出液中，以氧化苦参碱为主，而加热或煎煮可能使氧化型碱转化为相应的非氧化型碱。
由于在超临界CO2流体萃取中，提取温度不高，温度变化范围小，且提取条件稳定，因此对于提取率标识物的确定，选择了氧化苦参碱。
在本实验中，对于苦参中氧化苦参碱的提取时间为2 h，消耗有机溶剂为200 mL，氧化苦参碱提取率为4%～5%，其各项数值均优于传统的回流萃取法，充分显示了超临界CO2流体萃取的科学性。
仅对超临界CO2流体萃取的重要因素如夹带剂、萃取温度、萃取时间、萃取压力进行了考察。
而影响超临界CO2流体萃取的因素还有很多[6]，如分离压力、CO2的流量及夹带剂的流量等。
且超临界CO2流体萃取的条件决定了它特别适合于提取脂溶性成分，而利用超临界CO2流体萃取生物碱的应用并不广泛，各种条件尚在探讨之中，因此，利用超临界CO2流体萃取法提取各种生物碱有待于更进一步的研究。
[参考文献]）
[1] 庞树和，田葳，潘淑明.HPLC法测定心律宁片（苦参总碱片）中苦参碱和氧化苦参碱的含量[J].中医药信息，2002，19（1）：15-17.
[2] 向柏，孙英华，张媛，等.RP-HPLC法测定苦参总碱中苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱[J]. 中草药，2005，36（12）：16-19.
[3] 艾雄，曾三平.高效液相色谱法测定当归苦参丸中苦参碱和氧化苦参碱[J].中南药学，2007，5（2）：9-11.
[4] 章育中，张淑蓉，崔建芳，等.苦参及其制剂中生物碱的薄层分离和含量测定[J].药学学报，1981，10（4）：9-12.
[5] 张宝恒，申军.抗心律失常中药的研究进展[J].中成药，1981，9（5）：26-28.
[6] 庞树和，田葳，潘淑明.HPLC法测定心律宁片（苦参总碱片）中苦参碱和氧化苦参碱的含量[J].中医药信息，2002，5（1）：52-53.。
